目的探讨CRL4 E3泛素连接酶复合体(Cullin4-Ring E3 ligases)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)衰老的影响,以及CRL4 E3泛素连接酶复合体底物识别蛋白DCAF13(DDB1-CUL4 associated factors,DCAF13)对人脐静脉内皮细胞衰老、增殖、迁移和管型形成的影响。方法通过β-半乳糖苷酶染色(βbiomolecular condensate-gal染色)检测CRL4 E3泛素连接酶复合体以及DCAF13对HUVEC衰老的影响;CCK-8法测定DCAF13对HUVEC活力的影响;细胞划痕、transwell试验观察DCAF13对HUVEC迁移能力的影响;管型形成试验测定DCAF13对HUVEC管型形成能力的影响;Western blot检测CRL4 E3泛素连接酶复合体的关键组分以及DCAF13对衰老相关蛋白Lamin B1、FOXO4、PAI-1、IGFBP7以及周期相关蛋白p21、p53表达的影响。结果我们通过β-半乳糖苷酶染色发现在HUVEC中敲低CRL4泛素连接酶复合物关键蛋白DDB1、ROC1、CULAG-221配制4B以及DCAF13后,与NC组相比,si DDB1、si ROC1、si CUL4B以及si DCAF13组被染成蓝色的细胞数目比例明显增加(P<0.01);Western blMK-2206 MWot结果显示si DDB1、si ROC1、si CUL4B以及si DCAF13组衰老相关蛋白PAI-1、IGFBP7表达显著升高;同时Western blot、q-PCR、免疫荧光结果显示si DCAF13组周期相关的蛋白如p21、p53、cyclin B1表达增加,流式细胞术结果显示敲低DCAF13后细胞周期阻滞在G1期。此外,通过CCK-8、transwell以及管型形成等实验发现DCAF13敲除后HUVEC细胞的增殖、迁移以及管型形成能力下降。同时,机制研究发现DCAF13敲低后PI3K和AKT的表达也降低。结论CRL4泛素连接酶复合物通过影响DCAF13促进HUVEC细胞衰老;敲低DCAF13影响HUVEC细胞周期,促进HUVEC的衰老;敲低DCAF13抑制HUVEC的增殖和迁移以及管型形成能力,且DCAF13敲低后可能通过PI3K-AKT信号通路来促进HUVEC细胞衰老,抑制HUVEC增殖、迁移和管型形成。