瘢痕消复方是由丹参、墨旱莲、防己、芦荟、五倍子、艾叶6味药材组成的复方制剂,临床主要用于烧伤后的增生性瘢痕的治疗,能够对创伤进行修复,并且能够淡化瘢痕,临床使用多年,具有良好的疗效。目的:本研究在前期瘢痕消复方在临床上具有良好疗效的基础上,研究瘢痕消复方提取工艺,筛选成型工艺,研制出瘢痕消乳膏,制定瘢痕消乳膏质量标准。通过网络药理学方法,对瘢痕消复方治疗增生性瘢痕的机制进行预测,为瘢痕消乳膏在临床上的应用提供更加完善的理论基础。方法:(一)采用梯度洗脱的方法,液相色谱技术测定瘢痕消复方中丹参酮ⅡA、丹酚酸B、芦荟苷、没食子酸含量。以瘢痕消复方中丹参酮ⅡA、丹酚酸B、芦荟苷、没食子酸的含量进行综合评分,以乙醇体积分数、料液比、提取时间、提取次数为影响因素,进行单因素筛选,筛选出的因素进行响应面方法优选,优选出最佳提取工艺。(二)采用最佳提取工艺进行含药乳膏和含药贴剂的制备,以乳膏的色泽、涂展性、细腻度、外观、稳定性、耐热试验、耐寒试验、PH为评分标准,进行乳膏基质的单因素筛选,筛选出的因素进行正交实验,得出最佳乳膏制备工艺,并进行验证试验。以贴剂的外观,初黏力,持黏力,剥离强度为评价指标,进行贴剂的基质的单因素筛选,筛选出的因素进行正交实验,得出最佳贴剂的制备工艺,并进行验证试验。采用离体的巴马猪猪皮进行透皮吸收试验,用LC-MS进行含量测定,计算出累计渗透量,并结合实际优选出合适剂型。(三)优选出的瘢痕消乳膏进行质量标准研究,采用薄层色谱法对瘢痕消乳膏中丹参、墨旱莲、芦荟、五倍子进行鉴别。按照《中国药典》对乳膏进行检查并采用高效液相色谱法对瘢痕消乳膏含量进行测定。(四)采用网络药理学技术,使用TCMSP数据库,检索出瘢痕消复方中主要化学成分及其预测的相应靶点,并使用Cytoscape 3.9.1软件构建活性成分-靶点网络图,并在数据库中检索出增生性瘢痕的疾病靶点,并与之前筛选出的瘢痕消复方的靶点取交集,得出重复靶点,再利用STRING数据库构建PPI网络。最后通过Metascape平台进行GO富集分析和获悉更多KEGG富集分析。结果:(一)建立了测定瘢痕消复方中丹参酮ⅡA、丹酚酸B、芦荟苷、没食子酸含量测定方法,经过方法学验证,该方法的精密度、重复性、稳定性、加样回收率RSD均小于3%,表明该方法稳定、可行。筛选出瘢痕消复方最佳提取工艺为13倍的73%的乙醇,提取两次,每次提取2.1h,并且该工艺经过验证稳定、可行。(二)筛选出乳膏最佳制备工艺为:将轻质液状石蜡2g、白凡士林2g、硬脂醇0.9g、单双硬脂酸甘油酯0.8g、羊毛脂0.06g混合于烧杯中,并加热至80℃,作为油相。将十二烷基苯硫酸钠0.1g、三乙醇胺0.01g、甘油1.8g、羟苯乙酯0.02g、蒸馏水混合于另一个烧杯中并加热至80℃,作为水相。将水相缓慢倒入油相中并加入中药提取物1g,边加边搅拌均匀。搅拌15min后停止加热,并将乳膏冷却至室温。贴剂的最佳制备工艺为:取0.8g聚维酮K-90和1g中药提取物溶于蒸馏水之中,在60℃水浴上搅拌均匀,作为A相。取2g卡波姆加入蒸馏水配制成5%卡波姆进行溶胀,再称取NP-700 4g、丙二醇10g、甘羟铝0.2g、酒石酸0.5g并与5%卡波姆相混合,混合后加入到甘油中,并在60℃水浴上加热搅拌,使其充分的溶解,作为B相selleck合成。A相和B相配制好后,将A相快速加入到B相之中,快速搅拌20min,直到膏体颜色均匀并成型,趁热涂布在无纺布上,并盖上背衬,放置室温下,自然晾干后即得贴剂。并通过透皮吸收试验和实际生产便捷性,得到最佳剂型为瘢痕消乳膏。(三)在三批瘢痕消乳膏的薄层色谱bioorganic chemistry中,丹参、墨旱莲、芦荟、五倍子的对照品、中药材均显示出相同的斑点,并且阴性对照没有干扰。乳膏的检查均符合标准。(四)通过TCMSP数据库,共筛选出瘢痕消复方中潜在的有效成分36个,丹参17个,墨旱莲6个,防己2个,芦荟5个,五倍子1个,艾叶5个。去除重复靶点后得到273个作用靶点。并且得到瘢痕消复方治疗增生性瘢痕109个重复靶点。并通过Metascape数据库将54个核心靶点进行GO功能富集分析和KEGG信号通路富集分析,得到瘢痕消复方治疗增生性瘢痕的潜在靶点和通路。结论:(一)建立了瘢痕消复方的液相含量测定方法,并优选出瘢痕消复方的最佳提取工艺和成型工艺,并进行了验证试验,结果稳定可靠。(二)对瘢痕消乳膏标准进行制定,建立了瘢痕消复方定性、定量方法,为瘢痕消乳膏质控提供了依据,为医院后期瘢痕消乳膏的临床使用和含量检测提供相关基础。(三)网络药理学结果表明,瘢痕消复方治疗增生性瘢痕通过多靶点、多通路进行发挥治疗作用,为后续的机制深入研究奠定了基础。