目的 探究Yes相关蛋白(YAP)对高糖诱导的大鼠心脏成纤维细胞(CFs)增殖及转分化的影响和作用机制。方法 分离培养1~3日龄SD大鼠CFs细胞,用40.0mmol/L葡萄糖诱导CFs,构建糖尿病此网站心肌病(DCM)细胞clathrin-mediated endocytosis模型,24 h后检测细胞YAP、α平滑肌肌动蛋白(αSMA)、I型胶原蛋白(collagen I)、Ⅲ型胶原蛋白(collagenⅢ)、结缔组织生长因子(CTGF)蛋白表达水平。取原代大鼠CFs细胞,分别设置正常糖(5.5 mmol/L D-Glucose,NG)组、高糖(40.0mmol/L D-Glucose,HG)组、NG+维替泊芬(NG+VP)组、ICI 46474试剂HG+VP组。VP为YAP抑制剂,剂量为0.5μmol/L。处理CFs细胞24h。采用波形蛋白免疫荧光法鉴定CFs;Ki-67免疫荧光染色检测各组细胞增殖情况;Western blotting检测各组YAP、αSMA、collagen I、collagenⅢ、CTGF蛋白表达水平。结果 免疫荧光法鉴定波形蛋白阳性,提示原代培养的细胞为大鼠CFs。ki-67免疫荧光检测结果显示,与NG组比较,HG组CFs的ki-67阳性率(%)明显升高(67.33±5.14 vs. 22.94±4.88,P<0.05);YAP抑制剂VP处理后,CFs的ki-67阳性率(%)降低(46.83±3.86vs. 67.33±5.14,P<0.05)。Western blotting检测结果显示,与NG组比较,HG组高糖干预24 h后,CFs中αSMA、collagen I、collagen III的相对表达水平均明显升高(1.43±0.98 vs. 0.93±0.06,1.80±0.09 vs. 1.08±0.09,1.43±0.09 vs. 0.88±0.10,P<0.05),YAP和CTGF蛋白相对表达水平同样升高(1.93±0.15 vs. 1.17±0.09,1.80±0.18 vs. 1.23±0.16,P<0.05);与HG组比较,HG+VP组的αSMA、collagen I、collagenⅢ、CTGF蛋白相对表达水平均明显降低(1.27±0.06 vs. 1.71±0.12,2.05±0.23 vs.3.03±0.17,1.10±0.12 vs. 1.82±0.18,1.31±0.16 vs. 1.57±0.03,P<0.05);另外,与NG组比较,HG+VP组中αSMA、collagen I、CTGF蛋白相对表达水平均较高(P<0.05)。结论 高糖刺激SD大鼠乳鼠CFs增殖及活化,合成过多的胶原蛋白等细胞外基质蛋白,其作用机制可能与YAP/TEAD/CTGF传导通路有关。