目的:纤维化是由于细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)过度沉积形成的,涉及肌成纤维细胞的增殖和激活,最终导致组织结构破坏和器官功能障碍,器官纤维化在世界范围内导致高发病率和死亡率,目前尚无有效的治疗措施阻断或延缓进行性纤维化进展。肠道菌群与人类的健康和疾病息息相关,三甲胺N-氧化物(Trimethylamine N-oxide,TMAO)是研究最广泛的微生物代谢产物之一,研究发现TMAO与心脏和肾脏纤维化关系密Laduviglusib采购切,机制涉及TGF-β RI/Smad2、TGF-β1/Smad3、NLRP3、NF-κB 信号通路。巨噬细胞-肌成纤维细胞转化(Macrophage-myofibroblast transition,MMT)可以加剧心脏纤维化、肾纤维化和肺纤维化等多种纤维化疾病进程。有研究表明TMAO水平升高可引起炎症,且TMAO能显著激活p65 NF-κB信号通路促进血管炎症,NF-κB信号通路可以促进炎症和纤维化,但TMAO是否能促进巨噬细胞向肌成纤维细胞转变以及其中的机制尚不明确。本研究旨在探讨TMAO通过上调NF-κB信号通路促进巨噬细胞-肌成纤维细胞转化。方法:本研究通过分离培养骨髓源性巨噬细胞,使用流式细胞术鉴定骨髓源性巨噬细胞是否分离培养成功。随后,使用不同浓度的TMAO和NF-κB抑制剂(BAY 11-7082)对骨髓源性巨噬细胞进行干预处理,将骨髓源性巨噬细胞分为5组,各组分别为空白对照组,TMAO 150 μmol/L、TMAO 300 μmol/L、TMAO 150 μmol/L+BAY 11-7082selleck化学 5 μ mol/L、TMAO 300 μ mol/L+BAY 11-7082 5 μ mol/L,干预24h后提取细胞总蛋白,进行Western blot实验,观察TMAO和BAY 11-7082干预骨髓源性巨噬细胞后对α平滑肌肌动蛋白(Alpha-smooth muscle actin,α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)表达水平的影响。结果:流式细胞术鉴定表达骨髓源性巨噬细胞标记物F4/80+CD11b+双阳性细胞群占90%以上,证明骨髓源性巨噬细胞分离培养成功。Western blot实验结果表明,与对照组相比,TMAO 150 μmol/L可明显增加Collagen Ⅰ的表达水平,差异有统计学意义(p<0.01),TMA0 150 μ mol/L处理对于α-SMA的表达无显著影响,TMA0 300 μmol/L可明显增加α-SMA和Collagen Ⅰ的表达水平,差异有统计学意义(p<0.05);与 TMAO 300 μ mol/L 组相比,TMA0 300 μ mol/L+BAY 11-7082 5 μmol/L组α-SMAAu biogeochemistry和Collagen Ⅰ的表达水平明显下调,差异有统计学意义(p<0.05)。结论:TMAO可以促进骨髓源性巨噬细胞向肌成纤维细胞转化和胶原沉积,其机制推测为NF-κ B信号通路。