矽肺是我国发病率较高的常见职业病之一,目selleck合成前无有效的治疗手段。作为人体必须的重要营养物质之一,脂质的代谢失衡与多种疾病的发生发展密切相关。脂质代谢异常在肺纤维化疾病发生发展中的作用方面的研究较少,因此,纠正脂质代谢异常可能为矽肺的防治提供新的思路。通过SiO_2刺激MLE-12细胞,观察细胞脂质沉积,胆固醇成分及PI3K-AKT-mTOR通路蛋白表达的变化,探讨矽肺肺上皮细胞脂质沉积相关机制。1.采用质量浓度为50m/L SiO_2混悬液刺激MLE-12细胞0h,12 h,24 h和48 h。酶法检测细胞内总胆固醇,游离胆固醇,胆固醇酯,甘油三脂含量;油红very important pharmacogenetic“O”染色法观察细胞内脂质沉积状况,免疫印迹法检测细胞中p-PI3K,p-AKT,p-mTOR蛋白表达水平。2.MTS法检测不同浓度LY294002对细胞增殖的影响,并选择5μM的LY294002作用于SiO_2刺激的MLE-12细胞BMN 673说明书48h,观察总胆固醇,游离胆固醇,胆固醇酯,甘油三脂含量,细胞脂质沉积及PI3K通路蛋白的表达水平。结果显示:1.体外SiO_2诱导MLE-12细胞内总胆固醇、游离胆固醇增加成时间依赖性(p<0.05或p<0.01),细胞内脂质沉积增加,同时p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达上调(p<0.05orp<0.01)。2.MTS确定PI3K抑制剂LY294002的最适浓度为5μM;LY294002能够抑制SiO_2诱导的细胞内胆固醇成份增加(p<0.05)、脂质沉积和p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达的增加(p<0.01)。研究表明:SiO_2通过PI3K-AKt-mTOR信号通路诱导MLE-12细胞内胆固醇成份增加促进细胞内脂质沉积。