DuDu365生物天地

目的研究聚乙烯亚胺修饰的磁性纳米颗粒（PEI-SPIO）包裹小干扰RNA（siRNA）在小鼠原位肝癌中的持续时间。方法利用稳定表达荧光素酶肝癌luc-hepa1点击此处-6细胞系在C57BL/6小鼠肝脏建立小鼠原位肝癌模型，在建立肝癌模型后第21天通过小动物活体成像观察小鼠肝microbiota (microorganism)脏组织中成瘤情况及肿瘤大小。在第21天尾静脉注射PEI-SPIO包裹的siRNA（Cy5荧光标记），分别在2、8、24 h通过LuminaⅡ活体成像监测siRNA在小鼠体内的分布情况。最后灌注取材取离体的肝癌组织制备石蜡切片进行普鲁士蓝染色观察肿瘤组织中的磁性纳米颗粒的情况。结果小动物活体成像显示小鼠原位肝癌建立，PEI-SPIO与Cy5-siRNA的复Erdafitinib作用合物能够到达肿瘤并在肿瘤组织中持续聚集，并能明显延长siRNA在小鼠肿瘤中的滞留时间，肿瘤组织的普鲁士蓝染色证明PEI-SPIO包裹siRNA能够进入小鼠原位肝癌中且能在肝癌中持续存在。结论 PEI-SPIO包裹siRNA能够到达肝癌并能延长其持续时间。

基于SNP突变数据与mRNA表达谱关联分析，构建一种肝癌分子分型方法并对比不同分型预后的差异，并对不同分型肝癌的发生发展机制进一步研究。首先通过TCGA数据库收集359例肝细胞癌患者的SNP突变数据和mRNA表达数据，采用wilcoxon秩和检验，筛选突变后差异表达基因，并通过生物信息学工具String和Cytselleck HPLCoscape 构建差异表达基因的蛋白互作网络，筛选连接度最高的10个Hub基因。利用Consensus Cluster Plus软件包，基于Hub基因mRNA表达水平构建NMF分子分型模型，再结合生存数据评估各分型患者的预后。最后利用加权基因共表达网络分析(WGCNA)，识别与肝癌分子分型相关的模块，并针对关键模块的基因进行通路富集，从而对不同分型肝癌的基因表达谱进行比较。结果：NMF模型将肝癌分为高危、低危2个分型，其中CDKN2A和FOXO1基因对分型贡献度高。生存分析显示低危组患者的生存情况显著优于高危组，高危组富集多个与肿瘤细胞侵蚀、转移SAHA NMR、复发过程相关Cell Viability的信号通路，低危组则与细胞周期和胰液分泌相关。本研究在无先验性信息的前提下，基于突变后显著差异表达的Hub基因表达水平构建的肝癌分子分型对肝癌患者预后评估具有一定的指导意义，其中CDKN2A和FOXO1突变是肝癌患者的不良预后因素，针对二者的靶向药研发，可能为肝癌患者提供新的治疗策略。

目的 建立基于Label-free food biosensor术前乳腺MRI的影像组学列线图，探讨MRI影像组学模型对乳腺癌腋窝淋巴结转移(axillary lymph node metastasis,ALNM)的预测价值。材料与方法 回顾性分析宁夏医科大学总医院2016年8月至2020年12月经病理确诊的169例女性乳腺癌患者的MRI及临床病理资料(118例为训练集，51例为验证集)。在动态对比增强MRI第3期图像中，对所有患者的乳腺肿瘤原发灶进行感兴趣区(volume of interest,VOI)勾画并提取影像组学特征。采用Mann-Whitney U检验、LASSO回归进行影像组学特征筛选并建立影像组学标签，对所选特征按LASSO回归中相应系数加权后求和来计算影像组学评分。同时通过Logistic回归筛选临床危险因素建立临床预测模型，并构建基于临床危险因素和影像组学标签的联合预测模型。使用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线和校准曲线评估模型性能，使用Delong检验评价不同模型间ROC曲线下面积(area under curve,AUC)的差异，使用决策曲线分析(decision curve anSAG浓度alysis,DCA)评估GW-572016体内实验剂量预测模型的临床价值。结果 从每个VOI中提取200个影像组学特征，其中10个影像组学特征与乳腺癌发生ALNM相关。在训练集及验证集中，影像组学标签的AUC值分别为0.86及0.74；临床预测模型的AUC值分别为0.83、0.78；联合预测模型的AUC值分别为0.86及0.80。DCA显示联合模型的临床价值高于影像组学标签及临床模型，使用列线图能够可视化该联合预测模型。结论 基于术前MRI影像组学标签和临床危险因素所构建的联合模型可用于乳腺癌ALNM的预测，为术前评估乳腺癌患者发生ALNM的风险提供了一种新的方法。

目的：检测S100A13、FGF-1在胃癌组织及癌旁正常胃组织中的表达情况，探讨二者GNE-140作用之间的相关性、与临床病理参数、细胞增殖指数Ki67值之间的关系。方法：采用单纯随机抽样的方法自2018年8～2020年4月入住佳木斯大学附属第一医院的胃癌患者中抽样60例。搜集这60位患者临床病理资料，重新判读病理科中对应胃癌组织免疫组化切片Ki67值，用免疫immediate genes组化（PV6000，vison）法检测胃癌及癌旁正常胃组织中S100A13和FGF-1的表达，用spss20.0处理分析。结果：① S100A13、FGF-Rapamycin价格1在胃癌中高表达率分别为73.3%（44/60）、76.7%（46/60）明显高于癌旁正常胃组织10.0%（6/60）、15.0%（9/60）（P<0.05）。② 胃癌中S100A13的高表达与淋巴结转移、TNM分期有关；胃癌中FGF-1的高表达与脉管侵犯、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关；胃癌中S100A13与FGF-1表达之间具有相关性。③ 胃癌中S100A13、FGF-1的表达与ki67值无相关性。结论：S100A13、FGF-1的高表达与胃癌的侵袭转移有关，且在胃癌的生长中二者之间可能存在协同作用。

目的 探讨放疗联合吉非替尼综合治疗老年晚期非小细胞肺癌（NSCLC）的效果。方法 选取2016年11月至2019年12月南通大学附属如皋医院收治的82例老年晚期NSCLC患BMS-354825溶解度者，按随机数字表法将其分为对照组（三维适形放疗，41例）和观察组（三维适形放疗+RepSox吉非替尼，41例）。连续治疗3个月后，比较两组近期疗效及治疗前后肿瘤标志物水平的差异。记录两组不良反应发生情况。随访1年，采用生存分析比较两组预后情况。结果 观察组近期疗效优于对照组，差异有统计学意义（P <0.05）。两组血清癌抗原12-5、癌抗原15-3及癌胚抗原水平均低于治疗前，且观察组低于对照组，差异有统计学意义（P <0.05）。两组不良反应总发生率比较，差异无统计学意义（P> 0.05）。观察组生behaviour genetics存情况优于对照组，差异有统计学意义（P <0.05）。结论 放疗联合吉非替尼可提高老年晚期NSCLC患者的近期疗效及1年内生存情况，降低肿瘤标志物水平，值得临床推广。

目的 探讨体外缺氧微环境对c-Raf/MAPK/NF-κB通路的影响，并观察不同浓度氯化钴(CoCl_2)及作用不同时间对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、侵袭及迁移的影响。方法 采用CoCl_2建立人NSCLC细胞系NCI-H1650和A549细胞体外化学乏氧模型，以作用浓度0μmol/L为对照组，作用不同浓度为实验组。通过不同浓度(10selleck MG1320、200、300、400和500μmol/L)的CoCl_2分别作用NCI-H1650和A549细胞12 h, CCK-8法检测其存活率。根据medical training半数抑制浓度(IC_(50))值选择对缺氧环境适应能力较强的A549细胞，用同样方法进一步检测CoCl_2浓度为50、100、150和200μmol/L作用于细胞6、8、12、24和48 h的存活率。不同浓度CoCl_2作用同一时间，蛋白质印迹法检测细胞HIF-1α、c-Raf、MAPK和NF-κB的蛋白水平。Transwell小室检测CoCl_2对细胞迁移和侵袭能力的影响。结果 当CoCl_2作用于A549细胞时，IC_(50)值为927.5μmol/L,作用于NCI-H1650细胞时，IC_(50)值为890.4μmol/L,成功建立缺氧NCI-H1650与A549细胞模型。当不同浓度CoCl_2(0～500μmol/L)作用于H1650细胞时，CoCl_2作用浓度对细胞存活率无影响，差异无统计学selleckchem AMG510意义，F=2.942,P=0.058;作用于A549细胞时，细胞存活率分别为(1.05±0.04)%、(1.01±0.11)%、(0.81±0.05)%、(0.80±0.01)%、(0.77±0.02)%和(0.51±0.05)%,差异有统计学意义，F=30.930,P<0.001。其中，当浓度>100μmol/L时，各浓度组存活率均高于对照组，差异有统计学意义，均P<0.05。当CoCl_2作用时间为6～48 h,作用浓度一定时，A549细胞存活率无明显改变，差异无统计学意义；当CoCl_2作用时间不变，存活率随着浓度的增加而下降，并呈浓度依赖性，差异有统计学意义。与CoCl_2作用浓度0μmol/L[(38.33±7.64)个]相比，作用浓度分别为50、100、150、200μmol/L时A549细胞迁移数分别为(60.67±7.02)、(83.33±5.03)、(131.67±12.58)和(161.34±47.37)个，差异有统计学意义，F=127.671,P<0.001;其中，当CoCl_2浓度≥50μmol/L时迁移能力均高于对照组，差异有统计学意义，t值分别为-3.728、-8.521、-10.983和-22.115,P值分别为0.020、0.001、<0.001和<0.001。各组蛋白表达水平均高于对照组，差异均有统计学意义，均P<0.05。结论 CoCl_2模拟的缺氧可以使NSCLC细胞增殖、侵袭和转移增加，其机制与c-Raf/MAPK/NF-κB信号通路相关。

Dermal punch biopsy目的：研究基于热休克蛋白90靶点的苦参碱衍生物C4对非小细胞肺癌细胞迁移、侵袭以及凋亡的影响。方法：采用分子对接和蛋白免疫印迹实验（Western blselleckot）检测苦参碱衍生物C4（0、1、2、4、8 μmol·L~(-1)）对热休克蛋白90（Hsp90）的调控作用；采用噻唑蓝检测（MTT）法检测衍生物C4（0、0.25、0.5、1、2、4、8、16 μmol·L~(-1)）对非小细胞肺癌A549细胞活力的影响；采用克隆形成实验检测不同浓度（0、2、4、8 μmoNSC125066 IC50l·L~(-1)）衍生物C4对A549细胞增殖能力的影响；采用细胞划痕实验检测衍生物C4（0、2、4、8 μmol·L~(-1)）对A549细胞迁移能力的影响；采用Transwell实验检测衍生物C4（0、2、4、8 μmol·L~(-1)）对A549细胞侵袭能力的影响；采用流式细胞术检测衍生物C4（0、2、4、8 μmol·L~(-1)）对A549细胞凋亡能力的影响；采用Western blot检测衍生物C4（0、1、2、4、8 μmol·L~(-1)）对A549细胞内丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（Akt）、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（p-Akt）、表皮生长因子受体（EGFR）、磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、p-PI3K、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9（Caspase-9）、Bcl-2相关X基因（Bax）、B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、B细胞淋巴瘤2相关的细胞死亡激动剂（Bad）蛋白表达量的影响。结果：衍生物C4能有效的与Hsp90蛋白通过水介导的氢键网络与天冬氨酸-51（ASN-51）、甘氨酸-135（GLY-135）、苯丙氨酸-138 （PHE-138）的残基相互作用，此外和PHE-138苯环之间的π-π堆积相互作用有助于增强其亲和力，并且与空白组相比，衍生物C4可以显著的下调A549细胞内Hsp90蛋白的表达（P<0.05，P<0.01）；与空白组相比，衍生物C4可以显著的降低细胞活力（P<0.05，P<0.01）；给药24、48、72 h，衍生物C4对A549细胞的半数抑制浓度（IC_(50)）分别为（12.32±0.14）、（7.79±0.16）、（3.26±0.09）μmol·L~(-1)；与空白组比较，衍生物C4(2、4、8 μmol·L~(-1)）使A549细胞克隆形成能力显著下降（P<0.05，P<0.01），且呈浓度依赖性；与空白组相比，衍生物C4可以显著的抑制A549细胞的迁移、侵袭能力（P<0.05，P<0.01），其中浓度在8 μmol·L~(-1)时效果最为显著（P<0.01）；与空白组相比，衍生物C4可以显著的诱导A549细胞发生凋亡反应（P<0.01），在0、2、4、8 μmol·L~(-1)时细胞的凋亡率分别为（2.28±0.35）%、（4.97±0.36）%、（8.86±0.50）%、（20.67±0.99）%；与空白组相比，衍生物C4可以显著的增加Caspase-9、Bax、Bad蛋白的表达量（P<0.05，P<0.01），使PI3K、p-PI3K、p-Akt、EGFR、Bcl-2蛋白表达量发生不同程度降低（P<0.05，P<0.01），Akt蛋白的表达量没有发生明显的变化（P>0.05）。结论：衍生物C4发挥抗肿瘤的作用是通过抑制细胞活力、增殖能力、迁移和侵袭能力，并且促进细胞的凋亡反应，其发挥作用的机制可能是通过抑制Hsp90/PI3K/Akt信号通路来实现的。

目的 探讨超级增强子(super enhancers,SE)-HOXC13-AS对胰腺癌生物学行为的影响及临床意义。方法 采3-MA说明书用qRTPCR法检测HOXC13-AS在胰腺癌组织和细胞中的表达,分析HOXC13-AS表达与胰腺癌临床病理特征的关系。选择siRNA转染HOXC13-AS表达量最高的PANC-1细胞,应用CCK-8法、细胞周期实验、划痕实验、Transwell实验及细胞凋亡实验检测敲低HOXC13-AS对胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。应用生物数据库分析和JQ1抑制剂验证SE与HOXC13-AS之间调控关系,并通过CCK-8法、划痕实验、Transwell实验及细胞凋亡实验检测抑制SE-HOXC13-AS对胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。结果 胰腺癌组织中HOXC13-AS平均表达量(4.40±6.21)显著高于癌旁组织(1.01±0.02,P <0.05),HOXC13-AS表达与胰腺癌分化程度和临床分期密切相关。与正常胰腺导管上皮细胞(0.93±0.11)相比,胰腺癌细胞株BXPC-3(2.55±0JNJ-42756493价格.19)、SW1990(5.49±0.92)、CF-PAC1(12.27±0.60)及PANC-1(70.39±6.40)中HOXC13-AS的表达升高(P<0.05)。敲低PANC-1细胞中HOXC13-AS表达可明显抑制胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力,促进细胞凋亡。抑制PANC-1细胞中SE可显著下调HOXC13-AS的表达(0.65±0.02 vs 0.41±0.02,P <0.05),并可能进一步抑制胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力,促进细Immunoinformatics approach胞凋亡。结论 HOXC13-AS在胰腺癌中高表达,敲低HOXC13-AS可抑制胰腺癌的进展。SE调控HOXC13-AS的表达,并可能进一步影响胰腺癌的生物学行为。

目的：分析miR-33b、miR-3195在喉鳞状细胞癌组织中的表达及与临床病理特征的相关性。方法：选取长垣市中医医院2018年10月—2020年10月68例喉鳞状细胞癌患者进行回顾性分析，手术后取其癌组织与对应的癌旁正常组织，分别测定其组织中miR-33b、miR-3195表达量，比较两组织中miR-33b、miR-3195表达情况，并分析与临床病理参数关系，采用Spearman相关CH-223191细胞培养性分析两者相关性。结果：喉鳞状细胞癌组织中miR-33b、miR-3195表达量低于癌旁组织(P<0.05)。喉鳞状细胞癌组织中miR-33b、miR-3195表达量与Peptide Synthesis性别、年龄无关(P>0.05),与组织分化程度、TNM分期、肿瘤部位及淋巴转移有关(P<0.05)。经Speaselleck抑制剂rman相关性分析结果显示，喉鳞状细胞癌患者miR-33b、miR-3195表达与TNM分期、淋巴结转移呈负相关(P<0.05)。结论：miR-33b、miR-3195在喉鳞状细胞癌组织中呈低表达状态，且与患者临床TNM分期、淋巴结转移呈负相关，可作为评估患者病情严重程度与预后的标志物。

目的：研究胃癌诊断中肿瘤标志物CEA、CA72-4、CA199、CA125联合检测的应用价值。方法：选取2018年1～2020年5月期间的住院患者，分为胃癌患者（胃癌组）、胃良性疾病患者（胃良性病组）、同期健康体检者（对照组）各100例Infection rate，进行CEA、CA72-4、CA199、CA125检测，比较三组之间的差异。结果：胃癌组CEA、CA72-4、CA199、CA125高于胃良性病组和对照组，差异有统计学意义P<0.05。胃良性病组CEA、CA72-4、CA199高于对照组，差异有统计学意义P<0.05。胃良性病组和对照组CA125比较差异无统计学意义（P>0.05），胃癌组CEA、CA72-4、CA199、CA125阳性率高于胃良性疾病组、对照组（P<0.05），差异有统计学意义。胃selleck良性疾病组CEA、CA72-4、CA199阳性率高于健康体检组（P<0.05），差异有统计学意义，CA125胃良性疾病组与对照组差异无统计学意义（P>0.05），CEA、CA72-4、CA199、CA125联合检测的阳性率为92.0%，显著高于任一单项检测（P<0.05），差异有统计学意义。结论：胃癌患者CEA、CA72-4、CA199、CA125联合检测的阳性点击此处率高于胃良性病组和对照组，联合检测阳性率显著高于任一单项检测，肿瘤标志物联合检测对在胃癌诊断中具有重要的应用价值。