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目的 分析弹性成像联合灰阶超声诊断乳腺癌腋窝淋巴结转GSKJ4半抑制浓度移（ALNM）的效能。方法 前瞻性选取2019年2月至2020年11月在我院就诊的乳腺癌患者120例，所有患者均进行灰阶超声、超声弹性成像及病理检查，并以病理检查结果作为金标准，讨论弹性成像与灰阶超声联合诊断乳腺癌ALNM的效能。结果 病理检查结果显示，120例乳腺癌患者中出现ALNM 71例，占比59.17%；未出现ALNM 49例，占比40.83%；发生组淋巴结厚度长于未发生组，皮髓质比值大于未发生GW-572016组，超声弹性评分高于未发生组，差异有统计学意义（P<0.05）；经Logistic回归分析，结果显示，淋巴结厚度厚、皮髓质比值大、超声弹性评分高与乳腺癌患者发生ALNM相关（OR>1,P<0.05）；绘制接受者操作特性曲线（ROC）图，淋巴结厚度、皮髓质比值以及超声弹性评分诊断乳腺癌ALNMSurveillance medicine的曲线下面积（AUC）>0.7，具有较高的价值，且以联合诊断的价值最高。结论 灰阶超声联合弹性成像诊断乳腺癌ALNM的价值较高。

背景：肝移植后的免疫排斥反应确认细节严重影响患者的生存质量，长期免疫耐受的建立仍然面临着许多问题，而库普弗细胞在抑制肝移植排斥反应及促进免疫耐受方面发挥着重要作用。目的：综述库普弗细胞在肝移植免疫耐受中的作用及其机制的研究进展，旨在为建立肝移植免疫耐受提供参考思路。方法：第一作者于2021年12月应用计算机在PubMed和中国知网数据库检索1970年1月至2021年12月相关文献，以“Kupffer cells,liver tranEnfermedad renalsplantation”为英文检索词，以“库普弗细胞、肝移植”为中文检索词，最终纳入73篇文献进行分析。结果与结论：(1)库普弗细胞是驻留在肝脏内的巨噬细胞，其表面存在包括补体受体、Toll样受体和其他病原体识别受体在内的多种特异性受体和结合位点，能够快速响应组织环境的变化，根据需要呈现不同的细胞表型，即M1型www.selleck.cn/products/smoothened-agonist-sag-hcl和M2型库普弗细胞，而肝移植免疫耐受与M2型库普弗细胞关系密切。(2)库普弗细胞通过细胞吞噬、细胞极化、抗原呈递、细胞膜蛋白和细胞因子的作用等机制在移植后免疫耐受的建立中发挥重要作用，但是目前尚缺乏高质量的基础和临床研究。(3)目前已有的库普弗细胞的研究中，研究者们已发现多种库普弗细胞中的细胞因子和非特异性因子可能与移植后免疫耐受关联，主要包括T细胞免疫球蛋白结构域和黏蛋白结构域4、F1型清道夫受体、抗原钙网蛋白、蛋白二硫键异构酶、抑制组蛋白脱乙酰酶11、热休克蛋白、X-box结合蛋白1、骨髓间充质干细胞、白细胞介素2、白细胞介素4、白细胞介素6、白细胞介素10、白细胞介素17、白细胞介素23、白细胞介素34、补体、凋亡因子Fas-FasL、Toll样受体、前列腺素、转化生长因子β和干扰素γ。(4)在基础研究方面，通过构建原位肝移植动物模型有助于深入探究库普弗细胞不同功能对肝移植后免疫耐受建立的影响。(5)在临床应用方面，通过对移植物病理分析、移植物中库普弗细胞因子表达、基因检测及供者输注骨髓间充质干细胞的方式，可预测及促进免疫耐受的建立，但未来还需要多中心大样本的临床研究来证实。

6脂肪酸代谢产物白三烯B4 (LTB4)的受体白三烯B4受体1 (LTB4R1)属于G蛋白耦联受体(GPBI 10773小鼠CR)家族,是胰岛素抵抗、慢性炎症和2型糖尿病的潜在药物作用靶点。本文根据GPCR家族蛋白激活后可以引起细胞质内钙离子升高的原理,建立了96孔板体系LTB4R1抑制剂筛选模型。胞质内钙离子探针Fluo-8可以表征细胞质内的钙离子变化,当共转染LTB4R1和G蛋白α亚基16 (Gα16)的仓鼠卵巢癌细胞(CHO)受到LTB4刺激Entinostat核磁后,胞浆钙离子浓度升高, Fluo-8的荧光信号随之增强。LTB4R1抑制剂处理细胞后, Fluo-8的荧光信号减弱。本文以0.2%DMSO为阴性对照, LTB4R1抑制剂cp-105696为阳性对照建立筛选模型。经LTB4刺激后, 0.2%DMSO处理的细胞Fluo-8信号上升约2倍后缓慢回落,而cp-105696处理组则抑制LTB4的作用。Ltibiofibular open fractureTB4和抑制剂cp-105696浓度梯度实验表明, Fluo-8的荧光信号升高幅度和抑制剂的浓度成反比,可以作为评价待测化合物的抑制效果的指标。多次重复实验计算所得阳性与阴性对照Z’因子为0.777,证明该筛选模型稳定可靠。本文采用蛋白过表达方式在CHO细胞中构建了LTB4R1-内质网钙的信号通路,并在此基础上建立了通过检测钙信号强度来筛选化合物对LTB4R1抑制活性的体系。本方法可用于LTB4R1抑制剂先导化合物的体外初步筛选,为后续体内研究奠定基础。

目的：分析半枝莲-白花蛇舌草药配伍治疗对乳腺癌肺转移及细胞增殖的影响。方法：分别进行人高转移性乳腺癌细胞株（MDA231-LM2）及人乳腺癌细胞（MDA-MBselleck BMS-907351-231）的培养，观察1组注入半枝莲-白花蛇舌草溶液、观察2组注入半枝莲溶液、对照组注入生理盐水，以荧光PCR法检测各组细胞白介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶1(MMP1)和趋化因子CXC基序配体1(CXCL1)表AG-221溶解度达情况，并进行比较；以酶联免疫法检测滴药12h、24h及48h后细胞570 nm吸收值，进而分析细胞增殖抑制率。结果：观察组各组细胞中IL-6、CXCL1、MMP1水平均低于对照组，且观察1组低于观察2组（P <0.05）。观察1组、2组于12 h、alignment media24 h及48 h细胞各时段吸收值均小于对照组，且观察1组各时段吸收值明显小于观察2组（P <0.05）；随着滴药时间推移，观察1组抑制率逐渐升高。结论：半枝莲-白花蛇舌草药配伍后对乳腺癌肺转移有积极控制效果，对细胞增殖产生明显的抑制效果。

目的 探讨血清人胎球蛋白A(AHSG)抗体在早期乳腺癌诊断及预后评估中的临床价值。方法 收集101例早期乳腺癌患者(乳腺癌组)、50例乳PR-171溶解度腺良性疾病患者(良性疾病组)、50例体检健康女性(对照组)血清标本。采用酶联免疫吸附试验检测3组研究对象血清AHSG抗体、糖类抗原153(CA153)和癌胚抗原(CEA)水平；比较Ⅰ期、Ⅱ期乳腺癌患者血清AHSG抗体、CEA、CA153水平；采用受试者工作特征(ROC)曲线评估AHSG抗体、CEA、CA1获悉更多53单项检bone biomechanics测及联合检测对早期乳腺癌的诊断效能。结果 乳腺癌组血清AHSG抗体水平高于良性疾病组和对照组，差异有统计学意义(P<0.05);Ⅱ期乳腺癌患者血清AHSG抗体、CEA、CA153水平高于Ⅰ期乳腺癌患者，差异有统计学意义(P<0.05)。AHSG抗体单项检测的曲线下面积(AUC)、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度均高于CA153和CEA; 3项联合检测的各诊断指标均高于单项检测。乳腺癌患者手术后血清AHSG抗体、CEA、CA153水平低于术前，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 血清AHSG抗体有望成为早期乳腺癌诊断和预后监测的生物标志物。

波拉霉素是由吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)产生的一种36环的多羟基大环内酯类Berzosertib体内实验剂量新型农用抗生素。该抗生素对酵母、丝状真菌特别是对能够引起植物病害的真菌具有较强的抑制活性。在当下有毒有害农药或熏蒸剂将强制退市的背景下,波拉霉素等一类生物药剂将具有广阔的应用前景。目前其发酵单位尚未达到工业化生产需求,因此本研究希望通过菌株改造和培养基优化探索波拉霉素产量进行提高的方法。本研究成功构建β-氧化路径表达增强载体和编码级联调控蛋白Acr R的基因敲除载体,以期获得高产菌株。通过单因素法优化培养基中所有组分含量,经实验结果发现当葡萄糖、(NH_4)_2SO_4、黄豆饼粉、Ca CO_3、KH_2PMedical adhesiveO_4、豆油的加入量为35g/selleckL、3g/L、30g/L、5g/L、5m L/L时,波拉霉素的产量最高,产量可达到764.14μg/m L。结合单因素实验通过响应面优化法(Box-Behnken)对发酵培养基组分含量进行进一步优化,采用Design Expert软件分析出波拉霉素产量最高时各发酵培养基组分含量分别为(NH_4)_2SO_4 2g/L,KH_2PO_4 3.62g/L,葡萄糖35g/L,豆油4m L/L,Ca CO_3 6g/L,黄豆饼粉25g/L,最高产量可达到约772μg/m L,约是原始发酵培养基产量的5倍。本研究通过RNA-seq对氮源优化前后发酵培养基中吸水链霉菌(S.hygroscopicus)进行转录组测序,其中低氮源培养基中TCA途径中发现若干表达上调基因,而精氨酸以及缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成途径表达下调。TCA路径的表达上调可加强大环内酯类天然产物前体物质乙酰辅酶A的合成,该现象可能是在该发酵条件下波拉霉素产量提高的主要原因之一。由于液相检测较为耗时,且后期的应用也需对波拉霉素进行农残检测。本研究期望开发针对波拉霉素产生菌发酵优化时的快速检测方法。对波拉霉素A进行了适配体筛选,通过“RNA structure”软件计算得到最稳定的波拉霉素A适配体,为后开发基于核酸适配体的波拉霉素A的检测方法奠定基础。

复杂体系的分析能够提供丰富的样本信息。在药物分析领域,复杂体系的分析主要包括了对天然产物及中草药成分,生物样本中的内源性代谢物、药物及药物代谢物,以及食品、制药行业中样品的分析。植物药或中草药中含有成千上百种化学成分,种类繁多且结构复杂,使用常规方法来分离得到足量的化学纯品不仅耗时、耗力、效率低,一些微量组分更是容易被忽视。另外,在生物样本体系中,撇开其中药物及药物代谢产物的影响,它本身所含有的内源性物质更是数量巨大,种类丰富。因此,这些复杂体系中存在的已知和/或未知的化学成分,对目标化合物的定性定量分析会造成一定的限制。所以找到一种有效的分析方法,从复杂混合物中快速发现并确证化合物组分,一直是近年的研究热点。核磁共振(NMR)是一种非常强大的分析技术,在过去的70年里,已经逐渐成为分析化学领域一个主要工具,被常规地用于化学结构鉴lipid biochemistry定与表征。NMR通常被用作非破坏性的样品分析方法,可以同时定性定量多种化学成分。在混合物分析方面,与色谱、质谱技术相比存在许多优点,目前广泛地应用于食品、化学、制药以及生物医学等领域。核磁共振在复杂体系分析中能提供丰富的化学信息,但当体系中存在的化学结构高度相似的成分时,会产生复杂且重叠的多重信号,这些信号使得难以清晰准确的对其进行分析归属和解释。针对上述问题,本课题以基质辅助的DOSY核磁技术为核心,将其应用于天然产物中的三大类成分(生物碱、黄酮和萜类)以及生物样本等常见复杂体系www.selleck.cn/products/LBH-589的分离分析,从而进一步拓宽其应用范围。为此我们主要进行了以下四个方面的探索。首先,开发基质辅助的DOSY方法并应用于吲哚生物碱混合体系的分析。选择有代表性的活性生物碱成分,如利血平、育亨宾、长春质碱、β-咔啉构建吲哚生物碱混合物模型,研究DOSY对其的分离效果。课题中,选取聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚乙二醇(PEG)、聚二甲基硅氧烷(PDMS)以及十二烷基硫酸钠(SDS)四种成分作为基质。实验结果表明,在四种基质中SDS表现得最好。经过方法学研究,确定最佳实验参数,空采次数(DS)值为8,扫描次数(NS)值为16,间接维采样数据点(TD)值为16。优化SDS添加量为6mg时,能够显著提高分析物组分的扩散系数,且此时的分离度最大。将溶剂改变为极性相反的CDC13并没有提高分析物的之间的扩散系数差别,反而使得图谱分辨率进一步降低。为了验证方法的有效性,将该方法应用于羊角棉总碱提取物的实际样本分析中。通过基质辅助的DOSY技术进行信号分析,经识别共得到9种化合物组分,与模型混合物的识别结果相比,证实了该方法的实用性。其次,优化基质辅助的DOSY方法并应用于黄酮混合体系的分析。课题中,选择有代表性的活性成分黄芩素、黄芩苷、槲皮素、葛根素及芦丁作为黄酮混合物模型。实验结果表明,添加SDS的DOSY实验呈现出最佳分离。方法确证结果表明DOSY实验参数分别以DS为8,NS为16,TD为32能获得最优分离效果。随着SDS的浓度的增加,分析物之间的分离度逐渐增大,到9mg时分离度达到峰值,再继续添加SDS其分离度开始下降。此外,黄芩苷与槲皮素具有相似分子量,通过将槲皮素的浓度添加到6 mg,能达到17.9%、14.4%、8.8%及13.6%的扩散系数百分比差别。在此基础上,将上述优化过后的方法应用于中药黄芩总黄酮的定性分析。通过与质谱数据分析结果进行比较,共识别确认了 9种化合物组分的存在,也进一步验证了该方法的在黄酮混合物上的实用价值,为后续研究提供一定的参考。随后,将基质辅助的DOSY技术应用到萜类混合体系的分离分析。选择有代表性的活性成分青蒿素、环黄芪LY2835219小鼠醇、齐墩果酸、穿心莲内酯作为萜类混合物模型,按照前两章的实验方法对该技术进行系统的研究。实验结果显示,以SDS作为基质能够拉大分析物之间的扩散系数百分比差异,获得33.09%、15.76%以及4.52%的最佳分离。当DS值为8,NS值为16,TD值为16能够获得最佳分辨率,将SDS的浓度提高到9 mg时,组分间的分离度最大。此外,考察溶剂极性的影响时发现,MeOD的加入降低了分析物的溶解度进而使得图谱的分辨率进一步降低。最后将基质辅助的DOSY技术应用到乳香总萜类提取物的分离中,通过虚拟分离得到了5种分析物组分,通过与质谱数据对比,确认了这些组分的存在,进一步拓宽了基质辅助的DOSY技术在天然产物中的应用范围。最后,建立用于生物样本代谢组学研究的基质辅助的DOSY方法。首先,选取了 10种代谢物的作为代谢物模型,研究发现以PVP辅助DOSY实验能够在该类混合物上获得最佳分离。此外,PVP作为高分子聚合物,浓度及分子量的增加都会提高溶液的粘度,显而易见,这不利于分析物之间的分离;另外,改变代谢物浓度对于基质辅助的DOSY的分离效果未见明显影响。在此基础上,采用基质辅助的DOSY代谢组学进一步对丙烯酰胺(ACR)染毒大鼠的血清代谢表型及机制进行研究,结合正交偏最小二乘判别分析方法对高剂量给药组大鼠血清内容物的2D DOSY图谱进行多元统计分析,共鉴定出1 1个差异代谢物。实验结果表明,高剂量ACR给药组中谷胱甘肽、2-氧戊二酸、柠檬酸、谷氨酸、谷氨酰胺、组氨酸、脯氨酸的水平显著性下调;对其进行代谢通路富集分析,实验结果显示,高剂量ACR主要对大鼠体内谷氨酸、谷胱甘肽代谢通路及三羧酸循环通路产生影响。综上所述,本文通过将基质辅助的DOSY核磁技术引入药物分析中,对常见三大类天然产物及生物样本的分离分析,通过对检测方法的研究和开发,扩大了基质辅助的DOSY核磁技术在复杂体系分析领域的应用范围,提出了可靠有效的混合物分离识别方法。在本论文研究的基础上,探讨了针对不同复杂体系VSP的选择和方法优化规律,以期为后续的研究提供参考意义。

目的:观察艾灸督脉穴对APP/PS1双转基因小鼠自噬溶酶体功能及长链非编码RNA H19(lncRNA H19)的影响，探讨艾灸治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法:6月龄健康雄性APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、艾灸组、艾灸+抑制剂组和雷帕霉素组，每组13只，同时选取13只6月龄健康雄性C57BL/6J小鼠作为对照组。艾灸组予隔附子饼灸GNE-140试剂“百会”及悬灸“大椎”“风府”,15 min/d;艾灸+抑制剂组在艾灸组基础上给予腹腔注射3-甲基腺嘌呤1.5 mg·kg~(-1)·d~(-1);雷帕霉素组仅腹腔注射雷帕霉素2 mg·kg~(-1)·d~(-1)。以上各组均每日干预1次，共2周。以Morris水迷宫实验检测干预前后小鼠学习记忆能力；透射电镜观察小鼠海马组织自噬体形成；免疫组织化学法检测小鼠海马区β-淀粉样蛋白(Aβ)_(1-42)蛋白表达；荧光定量PCR法检测小鼠海马组织lncRNA H19、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、转录因子EB(TFEB)、溶酶体水解酶Cathepsin D、溶酶体关联膜蛋白1(LAMP1)mRNA的表达；Western bloBiosensor interfacet法检测小鼠海马组织mTOR、TFEB、Cathepsin D、LAMP1、自噬标志物微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)-Ⅱ/LC3B-Ⅰ、p62蛋白表达。结果:治疗前，与正常组比较，模型组、艾灸组、艾灸+抑制剂组和雷帕霉素组PD-0332991 NMR逃避潜伏期延长(P<0.05)。治疗后，与正常组比较，模型组小鼠逃避潜伏期延长(P<0.05);海马神经元细胞质内自噬泡减少，自噬溶酶体结构破坏；Aβ_(1-42)蛋白表达、lncRNA H19表达、mTOR mRNA和蛋白表达、p62蛋白表达均升高(P<0.05),TFEB、Cathepsin D、LAMP1 mRNA和蛋白表达及LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ均降低(P<0.05)。与模型组和艾灸+抑制剂组比较，艾灸组和雷帕霉素组逃避潜伏期缩短(P<0.05);海马神经元细胞质内自噬泡较多，自噬溶酶体结构清晰完整；Aβ_(1-42)蛋白表达、lncRNA H19表达、mTOR mRNA和蛋白表达、p62蛋白表达均降低(P<0.05),TFEB、Cathepsin D、LAMP1 mRNA和蛋白表达及LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ均升高(P<0.05)。结论:艾灸督脉可能通过下调lncRNA H19表达抑制mTOR/TFEB通路，改善AD小鼠自噬溶酶体功能，恢复自噬流，促进细胞自噬清除脑内Aβ,进而改善认知功能。

背景:胃癌是世界上最常见、最具破坏性的恶性肿瘤之一,其发病率占全球癌症发病率的第5位,死亡率却高达第3位。胃癌是一组在生物学和遗传学上具有多样性的肿瘤类型,而且在其病因中有多种因素在起作用,包括环境因素和遗传因素。虽然内镜和影像技术提高了早期胃癌相关病变的检出率,但胃癌具有广泛的形态学异质性。单纯依靠形态学很容易忽视某些病例,大多数胃癌患者初诊时已处于中度或重度进展期;而生物标志物的应用可能会提高胃癌筛查的早期发现和诊断的准确性,以及包括癌症在内的各种疾病的预后和治疗。随着对胃癌发生发展的分子机制不断深入研究,到目前为止,针对少数胃癌患者的靶向治疗已经取代或补充了曲妥珠单抗和雷莫芦单抗,这两种单抗分别是HER-2或VEGFR2表达上调时治疗进展期胃癌的二线药物。PD-1抑制剂派姆单抗已被FDA批准为三线(或更高)治疗复发、局部进展期或转移性胃腺癌的药物。靶向治疗和免疫治疗为临床医生提供了一种治疗进展期胃癌患者的新方法,但多数靶向药物的临床效果仍不尽人意。因此,针对胃癌的个体化治疗迫切需要寻找在胃癌发生发展中敏感性和特异性较强的基因,并深入探索其发挥作用的分子机制,对胃癌的临床诊治及提供抗癌药物的研究靶点都具有重要的理论和实际意义。下一代测序(NeMC3临床试验xt Generation Sequencing,NGS)是阐明人类癌症发病机制和确定潜在治疗靶点的一项强大技术。根据输入材料的不同,NGS的主要应用包括DNA测序、RNA测序和染色质免疫沉淀测序。NGS最初的应用集中在对个体基因组或各种组织的转录本进行测序,最近NGS在癌症生物学研究中的应用在几个方面给癌症研究带来了革命性的变化。近年来,随着高通量核酸合成方法和下一代测序(NGS)平台的发展,利用大型慢病毒库进行功能基因组学筛选成为可能,旨在发现新的癌症治疗靶点。目的:本研究我们将利用一个最初构建的针对所有人类代谢基因组的shRNA慢病毒文库,对人类胃癌细胞系进行了基于NGS的功能基因组学筛选,旨在筛选出靶向胃癌细胞的关键基因。同时利用人胃癌细胞株实验探讨靶基因在胃癌细胞中的生物学功能及其分子机制。研究方法:1)利用一个针对所有2,096个人类代谢基因的6,399个shRNA文库,对人类胃癌细胞株MKN1和HGC-27进行了基于NGS的功能基因组学筛选,筛选出分别具有生长抑制和生长促进的shRNA表型及胃癌相关差异表达基因。通过Enriched Pathway进行功能富集分析,得到生长表型功能相同的候选基因。2)利用GEPIA和Kaplan-Meier plotter公共数据库,分析氨酰-t RNA合成酶(Aminoacyl-t RNA synthases,ARSs)家族中不同候选基因在胃癌组织样本与正常胃粘膜组织样本的表达差异,并分析不同胃癌组织分型中DARS基因表达与预后的关系。通过346例胃癌患者的内部组织微阵列分析DARS基因的组织蛋白表达水平与患者临床病理特征的相关性。并利用弥漫型胃癌的基因工程小鼠模型进行DARS蛋白表达水平的验证。3)选取人胃癌细胞株MKN1和HGC-27,利用shRNA转染技术构建敲低DARS细胞模型,通过RT-q PCR及Immunoblot对敲低后的DARS表达量进行验证分析;并通过CCK-8细胞增殖实验、克隆形成实验、Edu实验、细胞周期实验、细胞凋亡实验及细胞迁移实验,验证敲低后的DARS对胃癌细胞的影响。4)我们建立了小鼠皮下荷瘤模型,进一步检测两种DARS基因敲低的胃癌细胞株在小鼠体内成瘤情况;并利用小鼠肿瘤进行HE染色及免疫组化分析。5)利用shRNA介导的DARS敲低后的胃癌细胞进行RNA高通量测序,分析DARS敲低后发挥抑制作用的分子通路机制。并利用Immunoblot的方法验证参与信号通路的下游关键转录因子的表达,以及DARS与Ca~(2+)/MAPK/CREB/ELK-1信号转导通路的调控关系。结果:1)通过对MKN1和HGC-27细胞株进行功能基因组筛选www.selleck.cn/products/LBH-589,共分别得到137个和204个shRNA表达可重复表型的生长抑制基因,以及38个和156个shRNA表达可重复表型的生长促进基因。两个细胞株中有38个共同的生长抑制表型基因,其中包含ARSs家Wang’s internal medicine族中的DARS、KARS、VARS三个基因。2)通过GEPIA和Kaplan-Meier plotter数据库对ARSs家族的三个基因进行验证,可见DARS和VARS基因在胃癌中的表达水平均明显高于正常胃组织,而KARS的表达水平无显著差异。高表达的DARS和KARS基因表现出较差的总体生存期,而VARS的表达量高低与胃癌患者总体生存期无关。346例胃癌患者的内部组织微阵列分析DARS基因的组织蛋白表达水平,蛋白表达水平较强的有243例,表达相对较弱的有103例。临床病理特征分析得出DARS的蛋白高表达与T分期和淋巴结转移有关,且这种差异性体现在胃癌组织病理分型的肠型和弥漫型中。在基因工程小鼠的免疫组化分析中,相对于早期黏膜内癌,DARS在弥漫型的浸润癌中蛋白表达水平更强。3)通过RT-q PCR及Immunoblot实验发现DARS敲低后的mRNA水平及蛋白质表达水平均明显降低。两个胃癌细胞株中敲低的DARS基因抑制胃癌细胞的增殖能力、抑制胃癌细胞的克隆形成能力和迁移能力,导致胃癌细胞的G0/G1期阻滞,促进胃癌细胞的凋亡。4)小鼠异种移植模型中,DARS敲低的胃癌细胞在小鼠体内的生长能力受到抑制,相较于对照组,敲低组的小鼠肿瘤体积和重量均明显下降。小鼠肿瘤切片的HE染色提示DARS敲低后,胃癌细胞的有丝分裂能力明显降低。5)根据RNA高通量测序结果得出在MKN1细胞株中下调基因有340个,HGC-27细胞株中下调基因有277个,两者共有的下调基因有90个,两者共有的上调基因有38个。通过Immunoblot实验结果提示敲低DARS基因可抑制p-ERK1/2、p-CREB及p-ELK-1的表达,提示DARS基因可能通过调控Ca~(2+)/MAPK/CREB/ELK-1信号通路影响胃癌的发生发展。小鼠肿瘤切片的免疫组化结果提示DARS和p-ERK1/2蛋白阳性表达水平在DARS基因敲低组细胞中明显降低。结论:1)DARS、KARS、VARS是本研究筛选出的治疗胃癌的候选靶基因。2)DARS在临床胃癌组织样本中的蛋白高表达水平与胃癌的T分期和淋巴结转移显著相关,且预后更差,尤其在弥漫型胃癌中。3)DARS基因敲低可抑制胃癌细胞的增殖、抑制胃癌细胞的克隆形成能力和迁移能力、阻滞胃癌细胞周期的G0/G1期、促进胃癌细胞的凋亡,并在异种移植肿瘤中抑制胃癌的生长和胃癌细胞的有丝分裂过程。4)DARS基因可能通过调控Ca~(2+)/MAPK/CREB/ELK-1信号通路影响胃癌的发生发展。

目的 探讨吡咯替尼联合维生素B_6对HER-2阳性乳腺癌患者疗效及手足综合征的影响。方法 选取2018年5月～2021年4月收治的HE购买LGK-974R-2阳性乳腺癌患者，随机将其分为观察组（n=35）和对照组（n=35）。对照组采用常规化疗，观察组采用吡咯替尼联合维生素B_6进行治疗，观察两组患者3个月后的治疗效果和血清肿瘤标志物[血清癌胚抗原（CEA）、糖类抗原（CA153）、组织多肽特异抗原（TPS）]指标以及手足综合征发生率。结果 观察组的客观缓解率和疾病控制率明显高于对照组（P <health resort medical rehabilitation0.05）。治疗前两组患者血清癌胚抗原、糖类抗原以及组织多肽特异抗原水平对比无明显差异（P> 0.05），治疗后观察组患者的血清癌胚抗原、糖类抗原以及组织多肽特异抗原水平明显低于对照组（P <0.05）。治疗后观察组的手足综合征发生率明显低于对照组（P <0.05）。结论 吡咯替尼联合维生素B_6能够提高对HER-2阳性乳腺癌患者的治疗效果，降低HER-2阳性乳腺癌患者的血清癌胚抗原、糖类抗原以及组织多肽特异抗原水平，还MG132临床试验可以减少HER-2阳性乳腺癌患者手足综合征的发病率。