目的 建立艰难梭菌感染结肠类器官模型,对艰难梭菌毒素B(TcdB)损伤小鼠结肠上皮的作用及可能机制进行初步研究。方法 处死6~8周龄C57BL/6小鼠,取结肠标本,分离、收集结肠隐窝,以基质胶包埋后加入培养基,显微镜下观察记录生长情况;在巨大芽孢杆菌中表达重组艰难梭菌毒素B(rTcdB)蛋白,经镍柱纯化后加入结肠类器官体系继续培养,观察类器官生长情况并检测干host-microbiome interactions性基因表达量变化,转录组测序分析。结果 5pmol/L rTcdB作用12 h即可致结肠类器官生长缓慢及部分死亡,干性基因Lgr5、Axin2、Bmi1表达较对照组显著上调。RNA-seq测序结果显示毒素作用组较对照组差异基因有3 140个,其中上调基因有1 936个,下调基因有1 204个。Gene Ontology富集分析显示损伤组差异基因主要富集的生物过程通路分别有低氧应答和对β干扰素、γCL13900细胞培养干扰素的细胞应答。同时蛋白质互作网络(Protein-Protein Interaction Networks, PPI)筛选出9个关键基因,其中的IFIT3、IFIT1、GBP3和GBP2的编码基因也参与了α/β干扰素、γ干扰素的细胞应答通路。京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析结果表明有47条通路差异显著富集,包括花生四烯酸代谢通路和Wnt信号通路等。结论 TcdB可能通过Pidnarulex分子式调节干性基因表达,增强低氧应答通路,减弱α/β干扰素、γ干扰素的细胞应答通路,调节花生四烯酸代谢通路和Wnt信号通路等介导损伤结肠上皮细胞。
乳腺腺病及乳腺癌MRI影像表现对比研究
目的探讨乳腺腺病与乳腺癌磁共振影Medial meniscus像学特点。方法回顾性分析30例经手术病理证实为乳腺腺病的患者,20例乳腺癌患者核磁共振成像(MRI)资料,所有患者术前均行乳腺DWI、DCE-MRI扫描。分析两组患者MRI表现特点并加以鉴别。结果www.selleck.cn/products/gdc-0068 24例腺病表现为非肿块样强化;6例表现为肿块样强化。21例TIC曲线表现为Ⅰ型,8例表现为Ⅱ型,1例表现为Ⅲ型,DWI图像轻度或无扩散受限。乳腺癌MRI表现为肿块样强化共18例,均表现为类圆形或不规则形肿块,部分边缘清楚,部分边缘可见毛刺;13例TIC曲线表现为Ⅱ型曲线,3例表现为Ⅲ型。非肿块样强化病变2例,TIC曲线为Ⅱ型,DWI序列多数明显扩散受限。结论乳腺腺https://www.selleck.cn/products/smoothened-agonist-sag-hcl.html病的MRI表现具有一定的特征性,部分腺病的形态学和动态增强表现与乳腺癌存在重叠,易误诊,动态增强及DWI相结合在鉴别诊断两者时存在较高的利用价值。
MiR-326调控EphB3抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移
目的 探究miR-326通过调控EphB3的表达,抑制乳腺癌侵袭转移的分子机制。方法 RTFQ-PCR用于检测miR-326在正常乳腺上皮细胞及乳腺癌细胞中的表达情况及miR-326过表达质粒的转染效率。EdUoncology staff细胞增殖实验、Transwell实验用于检测不同分组细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。双荧光素酶实验用于验证miR-326与EphB3是否存在结合位点。Western blot法检测过表达miR-326后乳腺癌细胞中EphB3的表达AY-22989价格情况。结果 RTFQ-PCR结果显示,miR-326在乳腺癌细胞中低表达,且转染成功(P<0.05)。EdU增殖实验和Transwell实验结果表明,过表达miR-326能够抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05)。双荧光素酶实验结果显示,miR-326可以与EphB3的3′-UTR相互结合(P<0.05)。Western blot和Transwell实验结果显示,miR-326可以负向调控EphB3抑制乳腺癌细胞的侵袭转移(P<0.05)。结论 miR-326在乳腺癌的发生发展过程中起着抑癌基因的作用,并通Berzosertib使用方法过调控EphB3的表达抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移。
甘草查尔酮A通过调控PI3K/AKT信号通路诱导肺鳞癌细胞周期阻滞
目的 探究甘草查尔酮A(LCA)对肺鳞癌细胞增殖和周期的影响及相关分子机制。方法 通过MTT实验检测不同浓度LCA处理48 h对H226细胞增殖的影响并计算半数抑制浓度(IC50);不同浓度LCA(0、10、20及40μmol/L)处理H226细胞48 h,通过流式细胞术检测LCA对细胞周期的影响,通过Western blot检测LCA对细胞周期相关蛋白CyclinD1,以及细胞周期蛋白依赖性激酶CDK2和CDK4表达的影响,并探究PI3K/点击此处Akt信号通路相关蛋白的表达情况;选取雄性BALB/c-nu裸鼠构建皮下移植瘤模型,随机分为两组(对照组和LCA处理组),腹腔注射LCA 24 d后取肿瘤测量瘤体体积及质量,从体内水平探究LCA的抗肿瘤作用。结果 MTT实验结果表明,与空白组比较,随着LCA浓度的增加,细胞存活率明显降低,48 h的IC50为28.3μmol/L;流式细胞术的结果表明LCA处理可以使细胞周期阻滞在G1期(P<0.05),Western blot的结果显示,LCA处理后,CyclinD1、CDK2和CDK4的表达均降低(P<0.05);PI3K和Akt的表达无明显变化,但是它们的磷酸化水平(p-PI3K和p-Akt的表达)显著降低(P<0.05);裸鼠荷瘤实验表trait-mediated effects明,LCA可使肿瘤体积和质量明显减小GW4869纯度(P<0.05)。结论 LCA可以抑制肺鳞癌的增殖并诱导细胞周期阻滞,其作用机制可能与调控PI3K/AKT信号通路有关。
针对性护理在乳腺癌PICC置管化疗患者中的应用效果
目的:观察针对性护理在乳腺癌经外周静脉置入中心静脉导管(PICpatient-centered medical homeC)置管化疗患者中的应用效果。方法:选取68例乳腺癌患者作为研究对象,按随机数字表https://www.selleck.cn/products/fg-4592.html法分为对照组和观察组各34例。对照组实施常规护理,观察组实施针对性护理,比较两组遵医依从性、护理前后自护能力[自我护理能力量表(ESCA)]评分和并发症发生率。结果:观察组遵医依从性为97.06%(33/34),高于对照组的73.53%(25/34),差异有统计学意义(P<0.05);护理后,观察组健康知识、自护技能、自我责任感和自护概念等ESCA评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组并发症发生率为2.94%(1/34),低于对照组的23.53%(8/34),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:针对性护理应用于乳腺癌PICC置管化疗患者护理中,可提高其遵医依从性和ESCA评分,降低并发BI 10773临床试验症发生率,效果优于单纯常规护理。
不同方法提取血培养瓶培养的抗凝血中布鲁氏菌核酸的比较
目的 比较不同提取方法对血培养瓶培养的抗凝血中布鲁氏菌检出率的影响。方法 将定量检测的灭活菌液/基因组DNA梯度添加至含抗凝血的血培养瓶中,选择不同的方法提取核酸,利用荧光定量检测其含量。结果 磁珠法和裂解法最低能检测添加10~2Sulfonamide antibiotic CFU/mL的灭活菌液以及10-3 ng/μL的基因组DNA;离心柱法无法检测未经红细胞裂解液处理的添加10~6GSKJ4半抑制浓度 CFU/mL的灭活菌液以及10 ng/μL的基因组DNA,经红细胞裂解液处理后也只能检测到添加10~4 CFU/mL的灭活菌液以及1 ng/μL的基因组DNA的模拟样品。结论 红细胞裂解液处理模拟样品能够增加核酸的提取量,裂解法提取效果最好,其次是磁珠法,再次是离心柱法。本研究为疑似布鲁氏菌病样品血培养物的核酸检测提供Entinostat临床试验了方法参考,为提高布鲁氏菌病的诊断率提供了新的思路。
灰阶超声联合弹性成像在乳腺癌腋窝淋巴结转移中的诊断效能分析
目的 分析弹性成像联合灰阶超声诊断乳腺癌腋窝淋巴结转GSKJ4半抑制浓度移(ALNM)的效能。方法 前瞻性选取2019年2月至2020年11月在我院就诊的乳腺癌患者120例,所有患者均进行灰阶超声、超声弹性成像及病理检查,并以病理检查结果作为金标准,讨论弹性成像与灰阶超声联合诊断乳腺癌ALNM的效能。结果 病理检查结果显示,120例乳腺癌患者中出现ALNM 71例,占比59.17%;未出现ALNM 49例,占比40.83%;发生组淋巴结厚度长于未发生组,皮髓质比值大于未发生GW-572016组,超声弹性评分高于未发生组,差异有统计学意义(P<0.05);经Logistic回归分析,结果显示,淋巴结厚度厚、皮髓质比值大、超声弹性评分高与乳腺癌患者发生ALNM相关(OR>1,P<0.05);绘制接受者操作特性曲线(ROC)图,淋巴结厚度、皮髓质比值以及超声弹性评分诊断乳腺癌ALNMSurveillance medicine的曲线下面积(AUC)>0.7,具有较高的价值,且以联合诊断的价值最高。结论 灰阶超声联合弹性成像诊断乳腺癌ALNM的价值较高。
库普弗细胞在肝移植免疫耐受中的机制
背景:肝移植后的免疫排斥反应确认细节严重影响患者的生存质量,长期免疫耐受的建立仍然面临着许多问题,而库普弗细胞在抑制肝移植排斥反应及促进免疫耐受方面发挥着重要作用。目的:综述库普弗细胞在肝移植免疫耐受中的作用及其机制的研究进展,旨在为建立肝移植免疫耐受提供参考思路。方法:第一作者于2021年12月应用计算机在PubMed和中国知网数据库检索1970年1月至2021年12月相关文献,以“Kupffer cells,liver tranEnfermedad renalsplantation”为英文检索词,以“库普弗细胞、肝移植”为中文检索词,最终纳入73篇文献进行分析。结果与结论:(1)库普弗细胞是驻留在肝脏内的巨噬细胞,其表面存在包括补体受体、Toll样受体和其他病原体识别受体在内的多种特异性受体和结合位点,能够快速响应组织环境的变化,根据需要呈现不同的细胞表型,即M1型www.selleck.cn/products/smoothened-agonist-sag-hcl和M2型库普弗细胞,而肝移植免疫耐受与M2型库普弗细胞关系密切。(2)库普弗细胞通过细胞吞噬、细胞极化、抗原呈递、细胞膜蛋白和细胞因子的作用等机制在移植后免疫耐受的建立中发挥重要作用,但是目前尚缺乏高质量的基础和临床研究。(3)目前已有的库普弗细胞的研究中,研究者们已发现多种库普弗细胞中的细胞因子和非特异性因子可能与移植后免疫耐受关联,主要包括T细胞免疫球蛋白结构域和黏蛋白结构域4、F1型清道夫受体、抗原钙网蛋白、蛋白二硫键异构酶、抑制组蛋白脱乙酰酶11、热休克蛋白、X-box结合蛋白1、骨髓间充质干细胞、白细胞介素2、白细胞介素4、白细胞介素6、白细胞介素10、白细胞介素17、白细胞介素23、白细胞介素34、补体、凋亡因子Fas-FasL、Toll样受体、前列腺素、转化生长因子β和干扰素γ。(4)在基础研究方面,通过构建原位肝移植动物模型有助于深入探究库普弗细胞不同功能对肝移植后免疫耐受建立的影响。(5)在临床应用方面,通过对移植物病理分析、移植物中库普弗细胞因子表达、基因检测及供者输注骨髓间充质干细胞的方式,可预测及促进免疫耐受的建立,但未来还需要多中心大样本的临床研究来证实。
LTB4R1抑制剂筛选方法的建立及评价
6脂肪酸代谢产物白三烯B4 (LTB4)的受体白三烯B4受体1 (LTB4R1)属于G蛋白耦联受体(GPBI 10773小鼠CR)家族,是胰岛素抵抗、慢性炎症和2型糖尿病的潜在药物作用靶点。本文根据GPCR家族蛋白激活后可以引起细胞质内钙离子升高的原理,建立了96孔板体系LTB4R1抑制剂筛选模型。胞质内钙离子探针Fluo-8可以表征细胞质内的钙离子变化,当共转染LTB4R1和G蛋白α亚基16 (Gα16)的仓鼠卵巢癌细胞(CHO)受到LTB4刺激Entinostat核磁后,胞浆钙离子浓度升高, Fluo-8的荧光信号随之增强。LTB4R1抑制剂处理细胞后, Fluo-8的荧光信号减弱。本文以0.2%DMSO为阴性对照, LTB4R1抑制剂cp-105696为阳性对照建立筛选模型。经LTB4刺激后, 0.2%DMSO处理的细胞Fluo-8信号上升约2倍后缓慢回落,而cp-105696处理组则抑制LTB4的作用。Ltibiofibular open fractureTB4和抑制剂cp-105696浓度梯度实验表明, Fluo-8的荧光信号升高幅度和抑制剂的浓度成反比,可以作为评价待测化合物的抑制效果的指标。多次重复实验计算所得阳性与阴性对照Z’因子为0.777,证明该筛选模型稳定可靠。本文采用蛋白过表达方式在CHO细胞中构建了LTB4R1-内质网钙的信号通路,并在此基础上建立了通过检测钙信号强度来筛选化合物对LTB4R1抑制活性的体系。本方法可用于LTB4R1抑制剂先导化合物的体外初步筛选,为后续体内研究奠定基础。
半枝莲-白花蛇舌草药配伍对乳腺癌肺转移及细胞增殖的影响研究
目的:分析半枝莲-白花蛇舌草药配伍治疗对乳腺癌肺转移及细胞增殖的影响。方法:分别进行人高转移性乳腺癌细胞株(MDA231-LM2)及人乳腺癌细胞(MDA-MBselleck BMS-907351-231)的培养,观察1组注入半枝莲-白花蛇舌草溶液、观察2组注入半枝莲溶液、对照组注入生理盐水,以荧光PCR法检测各组细胞白介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶1(MMP1)和趋化因子CXC基序配体1(CXCL1)表AG-221溶解度达情况,并进行比较;以酶联免疫法检测滴药12h、24h及48h后细胞570 nm吸收值,进而分析细胞增殖抑制率。结果:观察组各组细胞中IL-6、CXCL1、MMP1水平均低于对照组,且观察1组低于观察2组(P <0.05)。观察1组、2组于12 h、alignment media24 h及48 h细胞各时段吸收值均小于对照组,且观察1组各时段吸收值明显小于观察2组(P <0.05);随着滴药时间推移,观察1组抑制率逐渐升高。结论:半枝莲-白花蛇舌草药配伍后对乳腺癌肺转移有积极控制效果,对细胞增殖产生明显的抑制效果。