DuDu365生物天地

目的：探究骨形态发生蛋白内皮细胞前体来源调节因子（BMPER）在成骨分化中的生物学作用。方法：将MC3T3-E1细胞分为对照（control）组、成骨诱导（OM）组和成骨诱导+高糖高脂（OM+HG/PA）组。采用Western印迹法检测各组细胞Runt相关转录因子2(Runx2)、Ⅰ型胶原α1(Col1α1)、BMPER的Medicolegal autopsy表达。将空载体对照质粒及BMPER过表达质粒转染到MC3T3-E1细胞中，将细胞分为p-NC和p-BMPER组。使用Western印迹法检测各组细胞BMPER、Runx2、Col1α1、Wnt1、Wnt3a、active β-catenin表达。碱性磷酸酶（ALP）染色检测BMPER对成骨分化的影响。应用非特异性siRNA及合成的靶向沉默BMPER小干扰RNA(siRNA)转染MC3T3-E1细胞，将细胞分为si-NC组及si-BMPER组，使用Western印迹法检测各组细胞Wnt1、Wnt3a、activeβ-catenin表达。结果：与OM组相比，OM+HG/PA组中Runx2、Col1α1、BMPER蛋白表达显著减少（t=7.572、8.568、10.742，均P<0.05）。与p-NC组相比，p-BMPER组Runx2、Col1α1、Wnt1、Wnt3a、active β-catenin蛋白表达水平显著升高（t=9.816、8.331、8.413、14.343、9.Ceralasertib化学结构156，均P<0.05）,ALP染色加深。与si-NC组相比，si-BMPER组Wnt1、Wnt3a、active β-catenin的表达显著下调（t=10.807、8.678、10.167，均P<0.05）。结论：BMPER通过Wnt/https://www.selleck.cn/products/PD-0325901.htmlβ-catenin信号通路减轻高糖高脂对MC3T3-E1细胞成骨分化的抑制。

目的：探讨多学科合作延续护理在糖尿病视网膜病变患者中的应用效果。方法：选取2019年1月1日～2020年10月1日收治的103例糖尿病视网膜病selleckchem Bucladesine变患者为研究对象，按照入院顺序将患者分为对照组52例和研究组51例，对照组实施常规出院指导及院外随访，观察组给予多学科合作延续护理；比较两组干预前后血糖水平、低视力生活质量及糖尿病自我管理行为水平、糖尿infection time病视网膜病变防治知识知selleck MDV3100晓情况。结果：干预后，两组空腹血糖、餐后2 h血糖水平均低于干预前(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.01);观察组远视力、调节能力、精细动作、日常生活得分及低视力生活质量总分均高于对照组(P<0.01);观察组血糖监测、饮食控制、正确服药得分及糖尿病自我管理行为总分均高于对照组(P<0.01);观察组在相关危害、激光知识、治疗方法、护理措施方面的糖尿病视网膜病变防治知识知晓率均高于对照组(P<0.05)。结论：多学科合作延续护理可维持糖尿病视网膜病变患者血糖水平稳定，改善其低视力生活质量及糖尿病自我管理行为，有利于糖尿病视网膜病变防治知识的普及。

本文利用网络药理学和分子对接技术，探讨瓜蒌-当归-乳香-没药配伍使用治疗乳腺癌的活性成分和潜在分子机制。采用中药系统药理学分析平台（TCMSP）数据库获取瓜蒌、当归、乳香、没药的化学成分及其相关靶点。在GeneCards、OMIM、TTD、DrugBank数据库中收集乳腺癌疾病相关靶点，提炼出两者的交集靶点。运用Cytoscape 3.9.1软件和Striwww.selleck.cn/products/Bortezomibng数据库绘制药物-成分-靶点-疾病可视化网络及蛋白互作网络，并筛选出核心成分和关键靶点。借助DAVID 数据库对靶点进行GO和KEGG分析，运用Autodock软件以及Pymol软件进行分子对接验证和展示。结果发现，瓜蒌-当归-乳香-没药配伍治疗乳腺癌关键活性成分为β-谷甾醇、豆甾醇、鞣花酸、天竺葵素、牵牛花色素等，筛选出ESR1、VEGFA、PTGS2、HSP90AA1、CASP3等共38个关键靶点，GO富集分析提示主要包括药物应答、凋亡过程的正调控、基因表达双向调控等生物过程。KEGG通路主要涉及与癌症、炎症有关通路以及感染相关疾病类通路。分Compound C溶解度子对接结果提示两者间有较好的结合活性，其中豆甾醇与CASP3结合最紧密。瓜蒌-当归-乳香-没药治疗乳腺癌具有多成分、多median income靶点、多通路的作用机制，为后续进一步探讨机制提供了参考依据。

目的探讨多巴胺对基质金属蛋白酶活性及牙本质胶原纤维降解的影响,以期为多巴胺的临床应用提供实验依据。方法以2.0g/L多巴胺与1.0 g/LⅦ型胶原酶混合液为多巴胺组,以去离子水与1.0 g/LⅦ型胶原酶混合液为阴性对照组,以2%氯己定与1.0 g/LⅦ型胶原酶混合液为阳性对照组,每组成分混合体积比均为1:9,每组重复5次,用细胞基质金属蛋白酶总活性比色法检测各组混合15 min后的酶活性。牙本质片用37%磷酸酸蚀1 min后,2个牙本质片直接观察表面形态,其余30个牙本质片根据随机数字表随机分为3组(每组10个),阴性对照组:牙本质片放人100μl去离子水+900μl 1.0 g/L胶原酶溶液中;阳性对照组:牙本质片放入100μl 2%氯己定+900μl1.0 g/L胶原酶溶液中;多巴胺组:牙本质片放入100μl2%多巴胺+900μl1.0 g/L胶原酶溶液中;3组均放入恒温孵箱(37℃)孵育7 d后,检测孵化液中羟脯氨酸含量,计算胶原降解量,扫描电镜观察各组牙本质片胶原形态。结果阴性对照组的酶活性及胶原降解量[(0Z-IETD-FMK细胞培养.089±0.011)μmol·min~(-1)·mg~(-1)和(2 837±201)μg/cm~2]均显著高于多巴胺组[(0.030±0.009)μmol·min~(-1)·mg~(-1)和(1 389±255)μg/cm~2]和阳性对照组[(0.038±0.00selleckchem ZD18396)μmol·min~(-1)·mg~(-1)和(1 288±172)μg/cm~2](P<0.05),多巴胺组和阳性对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。扫描电镜显示多巴胺组和阳性对照组胶原纤维网结构完整,而阴性对照组胶原破坏,结构不完Western Blot Analysis整。结论多巴胺可抑制基质金属蛋白酶活性以及脱矿的牙本质胶原降解。

作为全球性公共卫生问题,肿瘤是medial sphenoid wing meningiomas当今世界危害人类健康的主要疾病之一。根据2019年国家癌症中心发布的全国最新癌症数据统计,2015年我国共新发恶性肿瘤392.9万例,死亡约为233.8万例,发病率约为285.83/10万,病死率约Erastin体内实验剂量为170.05/10万。肿瘤的发生、发展是一个多因素、多基因、多阶段渐进性累积的演变过程,涉及肿瘤的转化、生存、增殖、侵袭、血管生成和转移。在这个过程中伴随着遗传基因和表观遗传的变化:致癌基因、抑癌基因、错配修复基因、细胞黏附分子等在DNA、RNA和蛋白质水平发生改变。虽然近年来肿瘤诊断与治疗技术不断取得进步,但大多数患者就诊时已处于晚期状态,总体预后较差。因此探索肿瘤的发病机制,寻找更为有效的预防治疗手段具有重要意义。现有研究表明,表观遗传学改变在肿瘤发生、发展及侵袭转移中意义重大。目前已知的表观遗传修饰主要包括组蛋白修饰、DNA甲基化、核小体重塑、非编码RNA等。在真核生物中,组蛋白修饰包括了乙酰化、甲基化、磷酸化、核糖化及泛素化等。同其它组蛋白修饰一样,组蛋白甲基化是一个动态可逆的过程。赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)能够特异性催化组蛋白H3第4位赖氨酸(H3K4)和第9位赖氨酸(H3K9)的脱一甲基、二甲基确认细节反应,并与组蛋白去乙酰化酶相互作用,起到转录阻遏物的作用。该酶对哺乳动物生长发育至关重要并参与多种生物学过程,包括细胞分化、异染色质的形成、细胞内DNA甲基化状态的合理维持以及诱导多能干细胞形成等。目前证实LSD1在多种恶性肿瘤组织中高度表达,在肿瘤的发生、发展及耐药性产生中起到重要作用。Wnt信号通路是一条在进化上高度保守的信号通路,对细胞增殖、分化、迁移及凋亡起着重要作用,Wnt信号通路关键分子的基因突变在肿瘤的发生、发展过程中具有重要作用。虽然LSD1和Wnt信号通路都与肿瘤发生、发展有关,但两者之间是否存在联系尚未阐明。近年来越来越多的研究表明,LSD1可通过调节经典Wnt信号通路的活性影响肿瘤的发生、发展。笔者就LSD1介导的经典Wnt信号通路在肿瘤领域的研究进展作一综述。

【目的】本研究旨在通过同位素标记相对和绝对定量（iTRAQ）技术，探索茶园中抗性种群（常规用药管理）与敏感种群（荒废未作管理）茶小绿叶蝉Empoasca flavescens之间的蛋白质组学差异，为后续茶小绿叶蝉的抗药性治理奠定理论基础。【方法】采用随机多点的方式采集茶小绿叶蝉，利用蛋白纯化试剂盒对总蛋白进行提取与定量。通过iTRAQ标记试剂盒对总蛋白进行酶解与标记。通过高pH-RPLC与RPLC-MS技术对多肽进行分离与鉴定。通过GO分析（Gene ontology）方法，对差异蛋白的分子功能、生物过程和细胞位置进行分析。通过KEGG Pathway网站，对差异蛋白代谢通路进行注释。Medicina defensiva通过STRING-DB数据库，对差异蛋白的互作网络进行分析。最后，对差异显著的抗性相关蛋白酶Trichostatin A IC50进行了分析整理。【结果】总蛋白提取结果显示，敏感与抗性种群的总蛋白含量分别为728.23μg和1 261.17μg。抗性与敏感种群之间，共有1 399个蛋白发生了明显变化。其中，上调与下调达到1.5倍以上的分别为101个和218个。GO分析结果显示，这319个差异蛋白具有离子结合蛋白、组成核糖体和氧化还原酶等功能，主要参与蛋白翻译、物质运输和小分子代谢过程，主要分布于细胞内膜、细胞质、核糖体和细胞核。KEGG分析结果显示，319个差异蛋白主要参与碳代谢、核糖体代谢和吞噬作用通路。STRING分析结果显示，319个差异蛋白通过多种路径相互调控。抗性相关蛋白酶整理结果显示，共有3个谷胱甘肽-S-转移酶（获悉更多GSTs）、2个细胞色素P450氧化酶（P450）、2个超氧化物歧化酶（SOD）和2个过氧化物酶（POD）发生了明显变化。【结论】抗性与敏感种群茶小绿叶蝉蛋白组差异明显，差异蛋白具有多种分子功能，分布于细胞各个位置，抗性种群对药剂的解毒酶活性多数强于敏感种群。

目的 探讨宫颈癌患者血液炎性标志物水平变化及其临床意义。方法 回顾性分析2017年1月至2020年12月广西壮族自治区妇幼保健院收治的94名宫颈癌患者(宫颈癌组)的临床资料，另选择同期来该院接受检查的94名健康体检者作为对照组。根据宫颈癌患者的临床特征进一步分为不同亚组:鳞癌组(74例)和腺癌组(20Health-care associated infection例);肿瘤直径<4 cm组(70例)和≥4 cm组(24例);术后病理分期ⅠA～ⅠB_2期组(63例)和ⅠB_3～ⅢC_2期组(31例)。比较各组C-反应蛋白(CRP)、白蛋白(ALB)、中性粒细胞(NEUT)、淋巴细胞(LY)、血小板(PLT)、白细胞(WBC)、C-反应EPZ-6438化学结构蛋白与白蛋白比值(CAR)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)以及预后营养指数(PNI)。结果 与对照组相比，宫颈癌组的ALB、PNI水平更BYL719小鼠低，CAR、NLR和PLR水平更高，差异有统计学意义(P <0.05)。Pearson相关分析结果显示，PLR与NLR呈正相关(r=0.654,P=0.000),PNI与PLR和NLR呈负相关(r=-0.352,P=0.000; r=-0.250,P=0.000)。腺癌组PLR水平显著高于鳞癌组(P <0.05)。与肿瘤直径<4 cm组相比，≥4 cm组PLT水平更高，差异有统计学意义(P <0.05)。与ⅠA～ⅠB_2期组相比，ⅠB_3～ⅢC_2期组的PLR、PLT更高，差异有统计学意义(P <0.05)。结论 宫颈癌患者CAR、NLR和PLR水平上升，这可能有助于宫颈癌的鉴别诊断。PLR对评估宫颈癌病理分期有一定的指导意义。

本研究拟建立检测CK19基因表达的数字PCR(digital PCR,dPCR)方法并测试其性能，以期利用该方法的超高敏感性和绝对定量优势进行循环肿瘤细胞（circulating tumor cells, CTC）的定量分析。首先，根据CK19基因的mRNA序列进行引物探针设计，以看家基因ABL1作为内参，采用人乳腺癌MCF7细胞和健康人白细胞从13套引物探针之中筛选出了最佳的引物探针，测序结果证实扩增序列无误。其次，针对选定的引物探针进行反应条件的优化，以不同浓度的健康人白细胞cDNA为模板进行空白检测限（limit of blank,LOB）的分析，证实当ABL1基因拷贝数为20,000、15,000、10,000、5000、2500时，CK19的LOB分别为9.surgical site infection24、8.93、3.12、3.17和2.53拷贝。再次，采用MCF7细胞和健康人白细胞的cDNA模板进行不同浓度预混的检测限（limit of detection,LOD）分析，证实50%、10%、5%、1%、0.5%和0.1%的浓度配比下均可以有效检出CK19基因，线性R2值为0.9998。最终，临床样本的数字PCR检测结果发现晚期乳腺癌患者的CEtoposide使用方法K19拷selleckchem贝数高于健康人对照。上述结果说明本研究所建立的检测CK19基因的数字PCR方法具有敏感、特异和定量准确等优势，未来经过进一步验证之后有望用于乳腺癌的CTC定量分析，具有良好的应用前景。

目的：探索12周跑台运动对db/db小鼠心肌代谢和胰岛素抵抗的作用，并分析PPARα和MG53在其中的作用。方法：db/db小鼠和m/m小鼠随机分配到DC(db/db对照)、DE(db/db运动)、MC(m/m对照)或ME(m/m运动)组，每组10只。MC和ME组小鼠维持安静的生活方式；ME和DEEtoposide IC50组小鼠进行为期12周的跑台运动。第1、2周，小鼠的运动速度、时间、频率分别为7.0～13.3 m/min、15～20 min、4次/周；13.3 m/min、30～45 min、6次/周。第3～12周，上述参数维持在13.3 m/min、1 h、6次/周。结果：1)4个实验组间心脏质量无显著差异。DC组ANF、BNF和α-MHC的mRNA表达显著低于MC组，β-MHC表达高于MC组；DE组ANF和α-MHC的mRNA表达显著高于DC组；2)DC组小鼠血清总胆固醇和甘油三脂含量显著高于MC组，DE组血清总胆固醇和甘油三酯含量显著低于DC组；3)DC组Cpt1b,Acadm,Acadvl,Acaa2和Pdk1的mRNA表达显著高于MC组，且在12周跑台运动immunoaffinity clean-up后降低；4)DC组PPARα的蛋白表达及CD36、PGC-1β和Fabp3的mRNA表达显著高于MC组；DE组PPARα的蛋白表达及CD36的mRNA表达显著低于DC组；5）与MC组相比，DC组MG53的mRNA表达显著增加；与DC组相比，DE组MG53的mRNA表达显著降低。4个实验组间MAMG510作用G53的蛋白表达未见显著不同；6)DC组p-β-IR(Tyr1146)及p-AKT(Ser473)的蛋白表达显著低于MC组，p-IRS1(Ser1101)蛋白表达高于MC组；DE组p-β-IR(Tyr1146)及p-AKT(Ser473)的蛋白表达显著高于DC组，p-IRS1(Ser1101)的蛋白表达低于DC组。结论：12周跑台训练显著改善db/db小鼠胰岛素抵抗状态和心肌代谢紊乱，且PPARα信号通路参与上述过程。

目的 研究雷公藤红素诱导人肝内胆管癌细胞RBE凋亡的作用。方法 将细胞分为对照组和低、中、高剂量实验组。对照组常规培养，低、中、高3个剂量实验组分别给予0.75,1.5,3μmol·L~(-1)雷公藤红素。用流式细胞术检测雷公藤红素对细胞凋亡的影响；Hoechst33342实验观察雷公藤红素诱导细胞凋亡的形态变化；以蛋白质印迹法检测雷公藤红素对降解的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved PARP)、胱天蛋白酶3(caspase3)、裂解的胱天Erastin蛋白酶3(cleaved caspase3)、胱天蛋白酶9(caspase9)、裂解的胱天蛋白酶9(cleaved caspase9)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和存活蛋白(Survivin)表达影响。结果 对照组和低、中、高剂量实验组的总凋亡率分别为(14.29±0.68)%,(17.11±0.75)%,(19.27±1.02)%,(27.28±1.64)%Fungus bioimaging,细胞凋亡率随着雷公藤红素浓度的增加而升高。与对照组相比，中、高剂量实验组凋亡相关蛋白caspase3、caspase9的表达水平降低(P<0.05或P<0.01),cleaved PAGalunisertib研究购买RP、cleaved caspase3、cleaved caspase9的表达水平升高(P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2和Survivin表达水平降低(P<0.01)。结论 雷公藤红素能诱导肝内胆管癌细胞的凋亡，其作用机制可能与抑制Bcl-2和Survivin表达，促进caspase3和caspase9的活化有关。