DuDu365生物天地

目的：探讨麻芍平喘汤（MSPC）通过磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路对脂多糖（LPS）诱导的人支气管气道上皮样细胞（16HBE）自噬的影响。方法：选用人支气管上皮细胞16HBE作为研究对象，采用细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测LPS诱导的16HBE活性影响和麻芍平喘含药血清对16HBE细胞活性影响；以CCK-8法筛选出的适宜条件的LPS诱导16HBE细胞，并测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量鉴定模型成立，制备麻芍平喘汤含药血清作用于LPS诱导的16HBE，将细胞分为正常组、LPS组、LPS+MSPC组、LY294002+LPS组、LY294002+LPS+MSPC组。透射电镜观察细胞的自噬囊泡和超微结构的变化；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞PI3K、磷酸化PI3K(p-PI3K)、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR及微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)的蛋白表达水平；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测5组炎症因子白细胞介素（IL）-5、IL-6、TNF-α、IExposome biologyL-10的表达水平。结果：LPS对16HBE细胞的抑制率呈剂量依赖性；与正常组比较，模型组作用24 h能显著升高促炎因子TNF-α表达（P<0.05）；麻芍平喘汤含药血清对16HBE的促进作用呈浓度依赖性；与正常组比较，模型组自噬体形成增多，麻芍平喘汤可以一定程度抑制自噬，改善细胞状态；Western blot确认细节结果显示，与正常组比较，LPS组p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白的表达明显降低（P<0.05）,LC3B蛋白的表达显著升高（P<0.01）；与LPS组比较，含药血清组p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,LC3B表达水平明显降低（P<0.05），与LPS+LY294002组比较，LY294002+LPS+MSCP组p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,LC3B明显降低（P<0.05）。ELISA结果显示，BLZ945核磁与正常组比较，LPS组细胞炎症IL-5、IL-6、TNF-α、IL-10水平显著升高（P<0.01），用药处理后，与LPS组比较，TNF-α、IL-6、IL-8含量均显著下降（P<0.01）,IL-10升高（P<0.01）。结论：麻芍平喘汤可能通过激活PI3K/Akt/mTOR信号通路减轻LPS诱导的人气道上皮细胞16HBE自噬的发生，改善炎症反应。

伊快霉素(equisetin, EQST)是海洋来源的半萜类化合物,能有效抑制11β-羟甾体脱氢酶1 (11β-hydroxysteroid dehydrogenase 1, 11β-HSD1)的酶活性。本研究在整体动物水平考察了EMG132作用QST对肥胖ob/ob小鼠模型的抗肥胖作用和胰岛素抵抗改善作用。所有动物实验均经首都儿科研究所伦理委员会批准。EQST有效降低肥胖ob/ob小鼠的体重和脂肪重增长及血清脂质水平,改善了肥胖小鼠的脂肪细胞肥大和肝脏空泡变性,并有效控制肥胖小鼠葡萄糖负荷及胰岛素负荷后的血糖水平,表现出良好的抗肥胖和缓解胰岛素抵抗药效。EQST通过抑制11β-HSD1蛋白表达来抑制脂肪结Brain biopsy合蛋白4 (fatty acid-binding protein 4, FABP4)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ (peroxisome proliferators-activated receptor γ, PPARγ)蛋白的表达,并促进产热蛋白(uncoupling protein 1, UCP1)的表达。此外,EQST上调大量脂肪组织线粒体呼吸代谢相关蛋白,并可能通过磷酸肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)通路ATM/ATR抑制剂改善肥胖小鼠的胰岛素抵抗作用。因此, EQST通过促进脂肪组织产热和改善胰岛素抵抗来发挥抗肥胖作用,或将为改善肥胖与糖尿病等疾病提供可靠的药物资源。

目的：观察复方皂角刺膏外敷治疗肝癌重度癌性疼痛的临床疗效。方法：将肝癌重度癌性疼痛患者56例随机分为治疗组和对照组，每组各28例。对照组予以盐酸羟考酮缓释片治疗，治疗组在对照组基础上加用复方皂角刺膏外敷治疗，疗程均为7 d。观察2组的疼痛强度、使用阿片类止痛药剂量、爆发痛次数及健Laduviglusib康状况。结果：总有效率治疗组为92.86%(26/28),对照组为71.43%(20/28),2组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较，2组治疗后数字分级PR-171 IC50法(NRS)评分、Karnartificial bio synapsesofsky功能状态(KPS)评分均改善，且治疗组改善程度优于对照组(P<0.05或P<0.01)。2组治疗第1天止痛药剂量比较，差异无统计学意义(P>0.05);治疗后治疗组止痛药剂量较对照组减少(P<0.05)。治疗组爆发痛次数少于对照组(P<0.05)。结论：复方皂角刺膏外敷治疗肝癌重度癌性疼痛的镇痛效果明显，能减少阿片类止痛药剂量与爆发痛次数，提高患者生活质量。

研究背景胶质瘤(Glioma)是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,传统治疗方式的治愈率低,患者预后差。近年来,肿瘤免疫疗法在多种肿瘤的治疗中显示出较好的效果,但对胶质瘤的疗效仍不如人意,这是由于胶质瘤在发生发展过程中形成了复杂的免疫抑制性微环境。髓源性抑制细胞(Myeloid-derivedsuppressorcells,MDSCs)是胶质瘤微环境的重要组成成分,能够通过分泌细胞因子以及表达胞外酶CD73等途径抑制T细胞的功能,增强胶质瘤对免疫治疗的抗性,促进胶质瘤的恶性进展。MDSCs作为来源于骨髓的细胞,其分化过程在外周循环中已经开始,因此胶质瘤必定能通过某些途径远距离调控MDSCs的分化,促进胶质瘤免疫抑制性微环境的形成。间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)也是胶质瘤微环境的重要成分,能够调控肿瘤免疫,促进肿瘤的恶性进展。骨髓来源的MSCs(Bone marrow-derived MSCs,BM-MSCs)本身具有一定的免疫调节作用,能够抑制树突状细胞成熟、促进巨噬细胞M2极化等,但胶质瘤微环境中的胶质瘤相关MSCs(Glioma-associated MSCs,GA-MSCs)对MDSCs的调控作用以及GA-MSCs的形成机制尚不清楚。外泌体(Exosomes)是由细胞分泌的、在脑脊液以及血液等多种体液中广泛存在的、直径约50-150nm的囊泡。胶质瘤细胞可以通过分泌外泌体,将核酸及蛋白质等物质传递给受体细胞,如MDSCs以及MSCs等,对其进行改造以促进免疫抑制性微环境的形成。本文以探究胶质瘤免疫抑制性微环境的形成机制为目的,发现胶质瘤外泌体一方面可以直接诱导MDSCs的分化与活化,另一方面还可以改造MSCs,通过MSCs间接增强MDSCs的免疫抑制能力,共同促进MDSCs相关免疫抑制性肿瘤微环境的形成以及胶质瘤的恶性进展。第一部分胶质瘤外泌体直接促进MDSCs相关免疫抑制性肿瘤微环境形成的机制研究目的探究胶质瘤患者脑脊液、血浆以及胶质瘤细胞上清中分离的外泌体对MDSCs的调控作用及机制,寻找新的免疫治疗靶点。方法1、使用胶质瘤患者脑脊液、血浆以及胶质瘤细胞上清中分离的外泌体处理人外周血单个核细胞,流式细胞术检测MDSCs的比例及其对T细胞的抑制能力。2、对胶质瘤患者脑脊液以及常氧、低氧胶质瘤细胞上清中分离的外泌体进行miRNA测序,并将高表达的miRNA在单核细胞中过表达,筛选出能够促进MDSCs分化和活化的miRNA。3、利用转录因子预测数据库TransmiR筛选出关键miRNA的转录因子,并通过染色质免疫沉淀等实验进行验证。4、利用miRNA的pull-down质谱测序数据筛选出关键miRNA的外泌体分选蛋白。5、寻找能够抑制关键miRNA的药物,小鼠体内实验检测其对胶质瘤的治疗作用。结果1、胶质瘤患者脑脊液、血浆中分离的外泌体能够促进MDSCs的分化并增强其对T细胞的抑制能力;胶质瘤细胞来源的外泌体具有相同的作用,且低氧胶质瘤外泌体的MDSCs诱导作用强于常氧胶质瘤外泌体。2、miR-1246在胶质瘤患者脑脊液分离的外泌体中高表达,且能促进MDSCs的分化和活化。胶质瘤细胞外泌体中miR-1246的含量最高,且低氧能够上调外泌体miR-1246的含量。3、POU5F1是miR-1246的转录因子,且低氧通过HIF-1α通路上调其表达。4、hnRNPA1能够介导miR-1246分选至外泌体中,且低氧通过HIF-1α通路上调其表达。5、二甲氧基雌二醇(2-ME2)能够通过抑制HIF-1α通路抑制胶质瘤细胞外泌体miR-1246 的表达,进而抑制 MDSCs 的分化与活化,抑制胶质瘤的恶性进展。结论1、胶质瘤患者脑脊液和胶质瘤细胞上清中分离的外泌体miR-1246可以促进MDSCs的分化与活化。2、低氧通过上调转录因子POU5F1和外泌体分选蛋白hnRNPA1,促进胶质瘤外泌体miR-1246表达。3、二甲氧基雌二醇2-ME2能够通过减少胶质瘤外泌体miR-1246的表达等途径抑制MDSCs,起到治疗胶质瘤的作用。第二部分胶质瘤外泌体通过改造MSCs促进MDSCs相关免疫抑制性肿瘤微环境形成的机制研究目的探究胶质瘤相关MSCs(GA-MSCs)来源的外泌体对MDSCs的调控作用以Telaglenastat化学结构及胶质瘤外泌体对GA-MSCs的调控作用。方法1、使用骨髓MSCs(BM-MSCs)和GA-MSCs来源的外泌体处理人外周血单个核细胞,流式细胞术检测MDSCs的比例及其表面CD73的表达。2、对BM-MSCs和GA-MSCs来源的外泌体进行miRNA测序,将GA-MSCs外泌体Rat hepatocarcinogen中表达量前十且上调的miRNA在MDSCs中过表达,筛选出能够促进CD73表达的关键miRNA。3、通过转录组测序筛选出GA-MSCs相比于BM-MSCs上调的基因,并与转录因子预测数据库TransmiR和mirTrans取交集,筛选出导致关键miRNA上调的转录因子。4、通过转录组测序比较BM-MSCs和GA-MSCs的DNA甲基化水平,并使用DNA甲基化抑制剂处理BM-MSCs,检测关键miRNA的表达。5、将胶质瘤外泌体中高表达的miRNA转染进BM-MSCs中,筛选出降低MSCs DNA甲基化水平的分子。结果1、GA-MSCs来源的外泌体能够促进MDSCs的分化并上调其表面CD7寻找更多3的表达,且作用强于BM-MSCs来源的外泌体。2、GA-MSCs通过外泌体传递miR-21,上调MDSCs表面CD73的表达。3、GA-MSCs中高表达的XBP1s是miR-21的转录因子。4、与BM-MSCs相比,GA-MSCs的DNA甲基化水平降低,且DNA甲基化抑制剂能够促进miR-21的表达。5、胶质瘤外泌体可以通过传递miR-21,抑制MSCs的SP1表达,进而抑制DNA甲基转移酶1(DNMT1)表达,降低DNA甲基化水平。结论1、胶质瘤相关MSCs来源的外泌体miR-21可以上调MDSCs表面CD73的表达,增强MDSCs的免疫抑制能力。2、胶质瘤外泌体传递蛋白质至MSCs,促进miR-21的转录因子XBP1s表达量上调,促进MSCs细胞及外泌体中miR-21含量升高。3、胶质瘤外泌体传递miR-21至MSCs,通过miR-21/SP1/DNMT1正反馈环路促进MSCs细胞及外泌体中miR-21含量升高。

2014年,中国医学科学院北京协和医学院药物研究所庾石山课题组首次从杜鹃花科植物羊踯躅的果实中分离出一种新型的木藜芦烷毒素天然产物mollanol A。该天然产物是具有新型C-nor-D-homograyanane骨架的二萜类化合物,它具有[5,6,5,6,5]五环骨架及8个手性中心,并且其中含有一个全碳[3.2.1]桥环和一个氧杂[3.2.1]桥环,所以其化学合成具有较高的难度。本论文以mollanol A为研究对象,主要包括以下三个章节:第一章节:系统的介绍了mollanol A的分离、结构鉴定、生物活性和生物合成假说。第二章节:详细地介绍了木藜芦烷毒素天然产物的全合成工作。第三章节:主要selleck CP-690550介绍了本课题组对于mollanol A的全合成研究进展,这是本medial rotating knee论文的核心内容。根据天然产物mollanol A独特的结构,我们设计了汇聚式的策略对其进行合成研究。我们认为天然产物mollanol A可由左边的五元环片段和右边的双环[3.2.1]片段通过Stille偶联反应得到,而五元环片段可以由2-甲基-1,3-环戊二酮为起始原料经过CBS还原等一系列反应转化得到,双环[3.2.1]片段可以由环戊酮为起始原料经过BIBW2992使用方法以Conia-ene反应为关键步骤得到。通过对路线的不断探索和优化,我们最终得到了关键中间体3-170。

目的：探究二维彩色多普勒超声+实时剪切波弹性成像技术对乳腺癌的诊断效能。方法：选取2018年8月至2020年8月收治的152例疑似乳腺癌患者为研究对象，均行二维彩色多普勒超声（2D-CDFI）、实时剪切波弹性成像（SWE）检查，以手术病理检查为“金标准”，统计分析2D-CDFI、SWE检查及联合检查的诊MC3半抑制浓度断结果及诊断效能。结果：2D-CDFI+SWE联合检查灵敏度、准确度、阴性预测值高于2D-CDFI检查、SWE检查，漏Liver biomarkers诊率低于2D-CDFI检查、SWE检查（P<0.05）;2D-CDFI检查、SWE检查及联合检查特异度、误诊率、阳性预测值比较，无显著性差异（P>0PLX4032.05）。结论：2D-CDFI+SWE技术应用于乳腺癌的诊断中具有较高诊断价值，可显著提高灵敏度、准确度、阴性预测值，降低漏诊率，为判断乳腺良恶性病变提供可靠依据，对临床早期进行干预治疗具有积极意义。

目的 探Carotid intima media thickness讨新疆乳腺癌患者抑郁症和焦虑症患病现状及其影响因素。方法 选取2018年1—12月在新疆医科大学第三附属医院住院的所有乳腺癌患者为研究对象，采用抑郁自评量表和焦虑自评量表开展横断面调查，评价乳腺癌患者合并抑郁症和焦虑症现状，并采用二元logAdezmapimod体外istic回归模型分析乳腺癌患者合并抑郁症或焦虑症的影响因素。结果 461例乳腺癌患者中抑郁症患者为197例(42.73%),其中轻度、中度和重度抑郁症患者分别为146例(31.67%)、44例(9.54%)、7例(1.52%);焦虑症患者为240例(52.06%),其中轻度、中度和重度焦虑症患者分别为146例(31.67%)、64selleckchem例(13.88%)、30例(6.51%)。多因素结果显示：未做过化疗(OR=0.355,95%CI:0.165～0.761)、低收入(OR=9.211,95%CI:3.303～25.685)、病程短(OR=7.716,95%CI:1.773～33.577)和每周锻炼≤150 min(OR=2.718,95%CI:1.777～4.155)为乳腺癌合并抑郁症影响因素；农村户籍(OR=1.835,95%CI:1.142～2.957)、病程短(OR=2.208,95%CI:1.377～3.541)和每周锻炼≤150 min(OR=1.939,95%CI:1.303～2.886)为乳腺癌合并焦虑症影响因素。结论 新疆地区女性乳腺癌患者中抑郁症和焦虑症的患病率较高，应积极采取干预措施，降低患者抑郁、焦虑等负性情绪的发生，提高患者生活质量，改善其预后。

本论文基于氧化去芳化串联Diels-Alder反应、醋酸铅氧化切断邻二醇(CrigSB431542使用方法ee反应)以及大环化等关键反应,对石松生物碱Lycoplanine A进行了合成研究。综述简单介绍了大环的构建策略,归纳总结了各种环化策略在天然产物全合成工作中的运用。从碳碳键的构建和碳杂键的构建两个方面分别详细阐述了七类反应(例如,闭环复分解、Suzuki偶联、Horner-Wadsworth-Emmons烯烃化、Diels-Alder反应)及其在天然产物全合成中的应用。实验研究部分介绍了石松生物碱Lycoplanine A的分离、生理活性、合成进展,及其与石松生物碱Lycopladine H的可能生源关系等。根据可能的生源关系设计仿生路线,以酚的氧化去芳化串联Diels-Alder反应构建Lycopladine H的[2.2.2]桥环核心骨架,后续通过氧化切断实现向Lycoplanine A骨架的转化的合成策略。成功通过氧化去芳化串联分子间Diels-Alder反应构建了[2.2.2]桥环结构,但在大环内酰胺反应时Plant stress biology,未能成功实现12元大环的构建。考虑由于两支链位于六元环两侧,距离较远不易靠近,因此设计以氧化去芳化串联分子内Diels-Alder反应成功构建了[2.2.2]桥环结构,进而得到烯烃在同侧的大环化底物。完成关环烯烃复分解的底物的构建后,尝试了一系列的反应条件,未能实现12元环骨架的构建,目前仅得到二聚产物。基于以上路线,为了解决关环烯烃复分解Others抑制剂环化底物异构体数目较多且难分离,部分底物反应位点不易靠近的问题,设计了新的关环烯烃复分解底物,后续对石松生物碱Lycoplanine A合成仍在进行中。

氧化损伤和神经炎症与许多神经系统疾病相关。近年来,研究发现中药补骨脂能够改善中枢神经系统损伤。本研究旨在评价两个来自补骨脂的化合物:补骨脂宁和补骨脂定的神biopsy naïve经保护作用,并揭示其作用机制。实验结果表明,补骨脂宁和补骨脂定能够抑制过氧化氢(H_2O_2)诱导的小鼠海马神经原代细胞(HT22)活性氧(ROS)的生成,抑制脂多糖(LPS)诱导的小鼠神经小胶质细胞(BV2)一氧化氮(NO)的生成。由于补骨脂宁在低剂量即表现出活性,且在高剂量时未表现出细胞毒,因此进一步研究其潜在的神经保护作用机制。在H_2O_2诱导的HT22细胞中,补骨脂宁显著增加过氧化氢酶(CAT)、超氧化物selleckchem CX-5461歧化酶(SOD)活性,促进谷胱甘肽(GSH)分泌,抑制线粒体膜电位(MMP)降低。同时上调Nrf2和HO-1蛋白在HT22细胞中的表达。在LPS诱导的BV2细胞中,补骨脂宁显著抑制炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌,并IACS-010759能够特异性抑制NF-κBp65转移入核。分子对接结果显示:补骨脂宁能够进入Keap1和NF-κB蛋白的疏水口袋,结合良好。本研究证实,补骨脂宁能够改善H_2O_2诱导的氧化损伤和LPS诱导的神经炎症,其作用机制可能与Nrf2/HO-1和NF-κB信号通路有关。

目的：探讨全屏数字化乳腺摄影（FFDM）在不典型乳腺癌中的应用价值。方法：收集2014年12月—2020年1月在江苏省南通市中医院就诊的经手术病理证实为乳腺癌但术前FFDM影像表现不典型的31例患者。均行双Alpelisib采购侧乳腺头尾位、内外斜位双体位投照。结果：31例不典型乳腺癌，致密型乳腺21例，占Temple medicine67.7%(21/31)，误诊病例17例，总误诊率54.8%(17/31)。各型乳腺的误诊率，A型乳腺0 (0/3),B型乳腺42.9%(3/7),C型乳腺62.5%(5/8),D型乳腺69.2%(9/13)，致密型乳腺误诊率66.7%(14/21)。影像表现中，局限性结构紊乱和非对称密度增高多见于致密型乳腺，局限性结构紊乱、非对称密度增高、星芒征误诊率分别为37.5%(3/8)、66.7%(14/21)、0 (0/2)。结论：不典型乳腺癌FFDM检查误诊率较高，主要与多见于致密型乳腺及诊断医生认识Berzosertib分子量程度不高有关，DBT是有效的补充检查技术，尤其对致密型乳腺，能明显提高诊断的准确率。