DuDu365生物天地

目的 本研究旨在探究过表达FOXO1的脂肪干细胞(adPanobinostatipose-derived stem cells, ADSCs)在高糖诱导足细胞损伤修复中的作用机制。方法 利用胶原酶消化法分离ADSCs。通过慢病毒感染ADSCs来构建过表达FOXO1的ADSCs[ADSCs(FOXO1+)]。实验分为对照组、高糖组、高糖+ADSCs组、高糖+ADSCs(FOXO1+)组和高糖+ADSCs(FOXO1+)+自噬抑制剂3-MA组。利用茜素红染色检测ADSCs成骨分化能力。应用油红O染色检测ADSCs成脂分化能力。通过CCK-8法和流式细胞术检测MPC5细胞活力和细胞凋亡。通过免疫荧光检测MPC5细胞自噬相关蛋白LC3。采用Western blot法检测FOXO1、Bax、Bcl-2、p62和LC3-Ⅱ的蛋白表达。结果 流式细胞术检测显示CD29和CD90在ADSCs中高表达，而CD34和CD45表达极低；此外，茜素红染色和油红O染色结果都证实了成功分离了ADSCs。Western blot法检测结果显示，FOXO1在ADSCs(FOXO1+)细胞中高表达，表明慢病毒转染成功；同时，ADSCs(FOXO1+)细胞与MPC5细胞间接共培养明显提高MPC5细胞的FOXO1表达水平。CCK-8和流式细胞术检测发现，FOXO1过表达能够显著增强高糖诱导的MPC5细胞活力和减弱细胞凋亡。另外，免疫荧光检测表明FOXO1过表达能够促进高糖抑制的MPC5细胞自噬。同时，加入自噬抑制剂3-MA可减弱ADSCBiofuel productions(FOXO1+)细胞对高糖Tezacaftor抑制剂诱导足细胞损伤的修复作用。结论 过表达FOXO1的ADSCs具有修复糖尿病肾病足细胞损伤的作用，其作用机制是通过促进细胞自噬有效抑制高糖诱导的MPC5细胞凋亡。

目的 探讨大叶冬青叶中三萜类活性成分27-P-香豆酰基-乌索酸（27-P-CAUA）对乳腺癌细胞增殖抑制的作用机制。方法 27-P-CAUA处理HCC-1806细胞24、48、72 h后，CCK-8法检测HCC-1806细胞存活率；集落克隆法检测27-P-CAUA对细胞的增殖抑制作用；JC-1检测线粒体膜电位改变；流式细胞术检测细胞凋亡情况；细胞免疫荧光观察C-Caspase-3、P62表达；氯喹预处理后，Western blot观察27-P-CAUA对LC3I/II、P62以及HER2信号通路蛋白的影响。结果 CCK-8和集落克隆结果显示，随着药物浓度增加和时间延长，27-P-CAUA对HCC-1806乳腺癌细胞的抑制作用逐渐增强（P<0.01）,24、48、72 h的IC50值分别为83.671、49.479、19.578μmol/L;JC-1检测结果显示，线粒体膜电位改变明显（P<0.01）；流tissue-based biomarker式细胞术结果显示，27-P-CAUA可诱导细胞发生凋亡，细胞早期调亡比率增加3.34%；免疫荧光结果显示，C-Caspase-3表达增强，促进细胞凋亡，40μmol/L 27-PCAUA能显著诱导细胞凋亡（P<0.01）。Western blot和细胞免疫荧光结果显示，27-P-CAUA降低LC3II表达，导致P62降解，诱导自噬发生。经氯喹预处理后，27-P-CAUA诱导自噬可被逆转。此外，27-P-CAUA可抑制细胞内Her2及AKT蛋白的磷酸化Immunology & Inflammation抑制剂，细胞内的Her2以及磷酸化AKT蛋白表达逐渐减少（P<0.01）。结论 27-P-CAUA可通过Laduviglusib供应商抑制HER2/PI3K/AKT信号通路，抑制HCC-1806细胞增殖，诱导细胞发生线粒体自噬和凋亡。

目的：分析达格列www.selleck.cn/products/pf-06463922净治疗糖尿病合并慢性心力衰竭的效果。方法：选取2021年9月-2022年1月菏泽市立医院收治的120例糖尿病合并慢性心力衰竭患者作为研究对象，按照治疗方法的差异分为两组，各60例。对照组给予常规药物对症支持治疗，试验组在对照组基础上联合达格列净片治疗。比较两组治疗效果。结果：试验组治疗总有效率高于对照组，不良反应发生率低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。试验组心力衰竭年发作次数、24 h室性期前收缩总次数均少于对照组，差异有统计学意义(P<0.05breathing meditation)。试验组左心室压力最大下降速率、左心室松弛时间常数、E波减速时间、快速充盈分数均高于对照组，差异有统计学意AZD2281浓度义(P<0.05)。结论：达格列净治疗糖尿病合并慢性心力衰竭的效果显著，且抗心律失常效果好，可显著改善患者心功能，值得大力推广。

目的 探究丹参酮ⅡA治疗野百合碱所致大鼠肺动脉高压（PAH）的作用机制。方法 选取100只SD雄性大鼠，按随机数字表法分为5组（20只/组）：模型组（MCT）、丹参酮ⅡA组（TⅡA）、丹参酮ⅡA+PI3K抑制剂组（TP）、PI3K抑制剂组（PI）、对照组。除对照组颈背部注射等体积生理盐水外，剩余大鼠均颈背部注射野百合碱（MCT）诱导肺动脉高压模型。2周后，丹参酮ⅡA组腹腔注射丹参酮ⅡA10 mg/kg进行治疗，丹参酮ⅡA+PI3K抑制剂组注射丹参酮ⅡA10 mg/kg+PI3K抑制剂1 mg/kg,PI3K抑制剂组注射PI3K抑制剂1 mg/kg，对照组和模型组均腹腔注射等体积生理盐水。治疗2周后，采用苏木精-伊红（HE）染色实验和α-SMA免疫荧光染色实验评估大鼠肺血管形态；Western blot实验评估大鼠肺组织中磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、蛋白激酶B(PKB/AWnt-C59 molecular weightkt)、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的磷酸化水平；ELISA法测定eNOS、NO水平。结果 HE染色实验和α-SMA免疫荧光染色证实丹参酮ⅡA能有效抑制PAH大鼠肺血管中膜厚度和血管肌化水平（P<0.01）;Western blot实验结果显示丹参酮ⅡA能够显著提高PAH大鼠肺组织中PI3K、Akt和eNOS蛋白的磷酸化水平；ELISA实验prognosis biomarker结果显示模型组eNOS、NO水平降低（P<0.01）。结论 丹参酮ⅡA能够通过介导PI3K/Akt-eINCB28060核磁NOS信号通路改善野百合碱所致大鼠肺动脉高压。

目的：利用生物信息学及分子对接技术探究羌活胜湿汤治疗强直性脊柱炎的作用机制。方法：通过美国国家生物技术信息中心数据库（national center for biotechnology information,NCBI）、高通量基因表达数据库（gene expression omnibus,GEO）等数据库检索强直性脊柱炎相关芯片，利用R语言分析得到差异表达基因。借助人类基因数据库（GeneCards）、疾病基因数据库（DisGeNET）、孟德尔遗传综CP-456773合数据库（online Mendelian inheritance in man,OMIM）、疾病数据库（MalaCards）、遗传药理学和药物基因组学数据库（pharmacogenetics and pharmacogenomics knowledge base,PharmGKB）等数据库对强直性脊柱炎已知靶基因进行检索与筛选，与差异表达基因去重取并集，对强直性脊柱炎的疾病靶基因进行预测。运用中药药理学平台（traditional chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP）数据库对羌活胜湿汤七味中药的主要有效成分及作用靶基因进行筛选和挖掘，构建药物与疾病映射靶基因的蛋白质互作（protein-proPorphyrin biosynthesistein interaction,PPI）网络，通过基因注释（database for annotation,visualization and integrated discovery,David）数据库对药物-疾病关键靶基因进行生物通路及富集分析。最终将羌活胜湿汤中主要有效成分与关键靶基因进行分子对接。结果：羌活胜湿汤有效成分-靶基因网络图包含176个有效成分，相对应靶点137个；GEO数据库获得差异表达基因704个，通过疾病数据库检索与强直性脊柱炎发生发展相关的已知疾病靶标1323个，合并去重后共获得1950个已知疾病靶基因；最终获得映射靶基因46个，关键靶基因13个。羌活胜湿汤主要通过肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、氯霉素乙酰转移酶基因（chloramphnicol acetyltransferase,CAT）、雌激素受体1(estrogen receptor 1,ESR1)、环加氧酶2(prostaglandin-endoperoxide synthase 2,PTGS2)等作用于脂多糖介导的信号通路、一氧化氮生物合成过程的正调控、血管生成等生物过程及FoxO信号通路、炎症性肠病、各促炎因子相关信号通路等多个信号通路。分子对接结果显示：羌活胜湿汤中主要有效成分在与关键靶基因对接过程中均进入了活性位点，具有Gefitinib配制很强的结合能力。结论：应用生物信息学和分子对接技术方法可揭示羌活胜湿汤治疗强直性脊柱炎的潜在作用机制，具有较高的置信度和参考价值，为中药组方在治疗强直性脊柱炎方面提供了新的方向与思路。

目的 了解新疆地区食品periodontal infection中金黄色葡葡萄球菌（金葡菌）肠毒素特征及耐药情况。方法 对2010—2021年从全疆各地13 079份食品中分离的133株金葡菌，用实时荧光PCR方法检测金葡菌肠毒素A-E基因，用微量肉汤稀释法检测菌株对12种常用抗生素的敏感性。结果 133株金葡菌中有63株检出肠毒素基因，阳性率为47.37%，其中SEA的阳性率最高，为53.97%;19.05%菌株检出多种肠毒素基因。有120株菌株对测试的12种抗生素呈现出不同程度的耐药，耐药率达90.23%，耐药率最高的是青霉素（76.69%），有36株菌株为多重耐药，分成19个耐药谱；在生肉制品中检出的耐药菌株最多，但在熟肉制品和凉拌菜中分离的金葡菌100.00%是耐药菌。检此网站出2株耐甲氧西林金葡菌（MRSA），阳性率1.50%。结论 2010—2021年新疆食源性金葡菌近一半产肠毒素，以SEA为主；抗生素耐药情况严重，有MRSA菌株的检出。应加强对食源性金葡菌的监测，加大对食品安全风险的监管Compound 3力度。

目的 探讨奥美拉唑(OME)对幽门螺杆菌(Hp)感染的胃黏膜上皮细胞增殖、凋亡、自噬、炎症的影响及其机制。方法 人胃黏膜上皮细胞GES-1用Hp感染，不同浓度的OME处理或用si-NC、si-GAS5、si-GAS5与anti-miR-NC、si-GAS5与anti-miR-221-3p转染。采用MTT检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡率，ELISA检测IL-1β、IL-6、TNF-α水平，qRT-PCR检测GAS5、miR-221-3p表达量，双荧光素酶报告实验与RIP实验检测GAS5与miR-221-3p的靶向关系，Western blot检测LC3Ⅰ、LC3Ⅱ和Beclin1蛋白表达。结果 与对照组比selleck较，Hp组细胞活GSK2118436作用力、GAS5水平降低(P<0.05),凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin1蛋白、IL-1β、IL-6、TNF-α水平、miR-221-3p水平升高(P<0.05),与Hp组比较，OME不同剂量组细胞活力、GAS5水平升高(P<0.05),凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin1蛋白、IL-1β、IL-6、TNF-α水平、miR-221-3p水平降低(P<0.05),与Hp+OME+si-NC组比较，Hp+OME+si-GAS5组细胞活力降低(P<0.05),凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin1蛋白、IL-1β、IL-6、TNF-α水平升高(P<0.05),与Hp+OME+si-GAS5+anti-miR-Nandrogenetic alopeciaC组比较，Hp+OME+si-GAS5+anti-miR-221-3p组细胞活力升高(P<0.05),凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin1蛋白、IL-1β、IL-6和TNF-α水平降低(P<0.05),双荧光素酶报告实验与RIP实验证实GAS5可靶向结合miR-221-3p。结论 OME通过调控GAS5/miR-221-3p轴促进Hp感染的胃黏膜上皮细胞增殖，抑制细胞凋亡、自噬及炎症反应。

目的 观察双歧杆菌活菌、酵母片及乳酸菌素片对抗生素相关性腹泻（ADD）小鼠肠道乳酸杆菌数的影响。方法 40只1月龄小鼠用抗生素灌胃制作ADD模型，随机分为模型组、双歧杆菌活菌组、酵母片组、乳酸菌素片组，另取10只小鼠作为空白组；空白组与模型组给予蒸馏水灌胃，双歧杆菌活菌组、酵母片组、乳酸菌素片组分别给予0.175 g/kg双歧杆菌活菌胶囊、0.6 g/kg酵母片、0.9 g/kg乳酸菌素片灌胃，连用9 d；采用实时荧光定量PCR检测小鼠盲肠内乳酸杆菌含量。结果 与空白组比较，模型组盲肠内乳酸杆菌群含量明显减少(P<0.01)Captisol配制；经过selleckchem Tamoxifen2～8 d治疗，双歧杆菌活菌组、酵母片组及乳酸菌素片组盲肠内乳酸杆菌群含量明显高于模型组(P<0.01)，以乳酸菌素片组更为显著(P<0.01)。结论 双歧杆菌活菌、酵母片及乳酸菌素片对ADD小鼠肠道乳酸杆菌数具有调理作用CSF AD biomarkers，其中乳酸菌素片效果更好。

目的 探讨环状RNA TLK1(CircRNA TLK1,CircTLK1)对氧糖剥夺/复氧(Oxygen glucose deprivation/Reoxygenation, OGD/R)诱导的神经元HT22损伤的影响以及对微小RNA(microProanthocyanidins biosynthesisRNA,miR)-424-5p/F-box蛋白3(F-box protein 3,FBXO3)的调控作用。方法 将HT22细胞分为对照组、OGD/R组、sh-NC组、沉默环状RNA TLK1(Silencing circular RNA tlk1,sh-circTLK1)组、sh-circTLK1+抑制剂NC组、sh-circTLK1+miR-424-5p抑制剂组、sh-circTLK1+miR-424-5p抑制剂+sh NC组、sh-circTLK1+miR-424-5p抑制剂+sh FBXO3组，除对照组外其余各组细胞均行OGD/R操作，细胞计数试剂盒8(Cell counting Kit 8,CCK-8)法测定HT22细胞活力；脂连蛋白V-异硫氰酸荧光素(Adiponectin V-fluorescein isothiocyanate, Annexin V-FITC)细胞凋亡试剂盒测定HT22细胞凋亡；测定HT22细胞乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase, LDH)漏出率；实时荧光定量聚合酶链反应(Real time fluorescent quantitative polymerase chain reaction, RT-qRCR)法测定HT22细胞miR-424-5p, FBXO3 mRNABYL719分子量水平；蛋白免疫印记法(Western Blot)检测B淋巴细胞瘤-2关联基因X(B lymphoma-2 gene association X,Bax)、活化半胱天冬酶-3(Cleaved caspase-3)、FBXO3水平；双荧光素酶测定CircTLK1与miR-424-5p以及miR-424-5p与FBXO3靶向关系，并使用RNA下拉实验验证CircTLK1与miR-424-5p关系。结果 与对照组比较，OGD/R组miR-424-5p, HT22细胞活力降低(P<0.05),circTLK1,FBXO3 mRNA水平，HT22细胞凋亡率、Bax, Cleaved caspase-3水平、LDH漏出率升高(P<0.05);与OGD/R组比较，sh-circTLK1组HT22细胞活力增加(P<0.05),HT22细胞凋亡率、Bax, Cle确认细节aved caspase-3水平，LDH漏出率降低(P<0.05);与sh-circTLK1组比较，sh-circTLK1+miR-424-5p抑制剂组细胞活力降低(P<0.05),HT22细胞凋亡率、Bax, Cleaved caspase-3水平、LDH漏出率升高(P<0.05);与sh-circTLK1+miR-424-5p抑制剂组比较，sh-circTLK1+miR-424-5p抑制剂+sh FBXO3组细胞活力升高(P<0.05),HT22细胞凋亡率、Bax, Cleaved caspase-3水平、LDH漏出率降低(P<0.05);CircTLK1与miR-424-5p以及miR-424-5p与FBXO3均存在靶向关系。结论 CircTLK1沉默可能通过调控miR-424-5p/FBXO3对OGD/R诱导的HT22细胞损伤来发挥保护作用。

目的:探究腹股沟疝无张力修补术后血清白介素IgG Immunoglobulin G17(IL-17)、AZD9291白介素8(IL-8)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)及组织金属蛋白酶抑制剂(TIMP-2)水平与预后关系。方法:选取2019年6月至2020年6月我院收治的135例行无张力修补术的腹股沟疝患者，所有患者术后随访12个月，根据术后并发症和复发情况分为预后良好组(111例)和预后不良组(24例)。比较两组血清IL-17、IL-8、hsCRP及TIMP-2水平，并采用受试者工作曲线(ROC)分析其与预后的关系。结果:预后不良组血清IL-17、IL-8、hs-CRP水平高于预后良好组，TIMP-2水平低于预后良好组，差异均有统计学意义(P <0.05)。ROC曲线分析显示，IL-17、IL-8、hs-CRP、TIMP-2对腹股沟疝无张力修补术后预后不良预测价值的AUC分别为0.967(0.924～1.000)、0.792(0.690～0.895)、0.827(0.739～0.915)、0.960(0.925～0.996)，且Z检验AUC差异显示，IL-17的AUC显著较IL-8、hs-CRP高(Z=3.099、2.795,P <0.05),TIMP-2的AUC显著较IL-8、hs-CRP高(Z=3.053、2.744,P <0.05)，根据最佳临界值，IL-17 (42此网站.41ng/L)、IL-8(25.43ng/L)、hs-CRP(40.14mg/L)、TIMP-2(70.72μg/L)的敏感度分别为95.8%、91.7%、95.8%、91.9%，特异度为90.1%、54.1%、64.9%、91.7%。结论:腹股沟疝无张力修补术后血清IL-17、IL-8、hs-CRP与预后不良呈正相关，TIMP-2水平与预后不良呈负相关，且均对预后不良有一定预测价值，其中IL-17、TIMP-2预测价值较高。