基于非特异性酶切同位素质谱探针标记糖链相对定量新方法的构建及应用

蛋白质糖基化是生物体内细胞最常见lung immune cells的翻译后修饰,不仅对蛋白质生物学功能发挥起着重要的作用,而且糖基化的结构和表达量的改变与人类免疫、肿瘤疾病、抗体药物的活性密切相关。人类蛋白质的糖基化主要分为N-糖基化和O-糖基化2种类型。基于质谱的糖链结构解析和功能为对象的糖链定性分析研究已取得了长足的技术进步。但因糖链结构复杂微不均一性、非模板特性、高度的动态性,加之标准品难以合成,高灵敏、精确的糖链定量分析是蛋白质糖基化和筛选特异性糖链生物标志物研究领域中所面临的科学瓶颈。基于液质联用技术的化学同位素标记已成为糖组学微量糖链的定性和定量分析的主流技术。已报道的糖链定量方法一般是将糖链切掉分离纯化后,并进行柱前衍生化。虽然这些方法可以在一定程度上提高糖链分析的选择性和灵敏度,但衍生化试剂的化学反应条件较难控制,易产生副产物,不同糖链结构需要摸索不同的衍生化条件,不仅容易发生去糖基化现象,而且需要多步程序其手续繁琐费时。另外,根据酶切的种类只局限于单一的N-糖链。所以亟待开发N-/O-糖链同时高灵敏、高选择性定量分析新方法。鉴于此,本研究基于非特异性链酶蛋白酶E(Pronase E)酶切反应,以N-/O-糖链为分析对象,设计并开发了一种带有同位素丙半胱氨酸结构可靶向识别氨基官能团的新型质谱探针,d0-BOTC(3-benzoyl-2-oxothiazolidine-4-carboxylic acid)和d5-BOTC(3-(2,3,4,5,6-pentadeuteriobenzoyl)-2-oxothiazolidine-4-carboxylate acid)。并建立了一种基于d0/d5-BOTC衍生化同时相对定量N-/O-糖链高灵敏、高选择性的UHPLC-HRMS新方法,并将其应用于核糖核酸酶B、西妥昔单抗的糖链定量分析及急性心梗患者血清中糖链生物标志物的筛选。(1)首先,开发了一种以丙半胱氨酸为母核结构的新型同位素质谱探针d0/d5-BOTC,使用~1HNMR、~(13)CNMR、HPLC和HRMS等对结构进行了表征。利用非特异性链酶蛋白酶E将N-/O-连接糖蛋白上结合的肽段同时一次性酶解成只带一个氨基酸的糖氨酸,因本探针结构中带有羧基基团,可靶向标记糖氨酸的氨基官能团,d0/d5-同位素标记的糖链因在质谱上m/z相差5 Da且具有相同的离子化效率,可以通过比较这一对峰的相对丰度,进行糖链相对定量。然后,利用D-葡糖胺作为单糖模型评估了d0/d5-BOTC标记效率,并对不同的反应温度及反应时间进行了考察。结果,在质谱中观测到带同位素结构的特征碎片离子m/z 77.2,当碰撞能量为70 e V时,离子强度最大,检测限(S/N=3)为10 attomole。(2)以唾液酸糖肽(SGP)为复合糖链模型,使用非特异性链酶蛋白酶E将SGP酶解成含有一个天冬酰胺的糖氨酸(SGA),开发了一种基于同位素d0/d5-BOTC探针标记糖链SGA相对定量高灵敏、高选择性的UHPLC-HRMS方法。并对反应条件进行了优化,通过d0/d5和d5/d0不同的理论值与实测响应强度比值绘制标准曲线,并以不同摩尔比混合后进行准确度的考察。结果,d0/d5(d5/d0)在0.03-10范围内均呈现良好的线性关系(R~2≥0.9992),重现性在0.98-10.76%之间,检测限为15 fmol。(3)以高甘露糖型糖蛋白核糖核酸酶B(RNase B)为模型,开发了基于反相色谱结合Q-Orbitrap HRMS糖链相对定量方法。对质谱采集模式,色谱柱,流动相及洗脱方法均进行了考察,并以不同摩尔比混合后(d0/d5=1:2;2:1)理论值与实测响应值进行了比较。结果d0/d5-同位素标记糖链实测丰度值与理论值基本一致。此外,使用五种色谱柱在不同洗脱条件下考察了M7N2糖链同分异构体的分离,结果,在Shield RP18色谱柱B=0-10%(0-10 min)洗脱条件下成功分离糖链异构体。(4)建立了基于链酶蛋白酶E酶解西妥昔单抗糖链相对定量HILIC-Q-Orbitrap HRMS新方法。通过对糖链释放前处理、衍生化反应条件、色谱柱、流动相、进样量及不同洗脱梯度的考察,验证了方法的有效性。此外,通过d0/d5-BOTC标记单抗中糖链以不同摩尔比混合后(d0/d5=5:1;3:1;1:1;1:3;1:5)进行检测,验证了方法的准确性。利用Tracefinder软件建立d0/d5-同位素标记单抗糖链数据库进行匹配确认糖链种LXH254化学结构类,最终成功解析出13种糖链,对单抗药物中糖链质控分析、种类解析及功能研究提供了新方法。(5)构建了基于链酶蛋白酶E酶切急性心梗(AMI)患者血清中糖链生物标志物相对定量筛选UHPLC-HRMS新方法,结果发现H4N4F3SA、H4N6F2、H4N6SA、H4N6F3和H5N4FSA五种糖链含量在健康组和AMI患者中具有显著性差异(p<0.0005),均呈现糖链含量减少趋势;ROC曲线中H4N6SA的AUC值为0.9039(敏感度=100%,特异度=76.67%),H5N4FSA的AUC值为0.9869(敏感度=96.55%,特异度=93.10%),H4N6F2的AUC值为0.9138(敏感度=96.55%,特异度=75.86购买AZD2281%),为早期预警和诊断心梗疾病提供了新的策略及临床数据支撑。综上所述,本研究开发了一种同位素标记新型质谱探针d0/d5-BOTC,基于非特异性链酶蛋白酶E酶切建立了同时相对定量N-/O-糖链高灵敏度、高选择性UHPLC-HRMS新方法。该方法准确、精准,不仅可应用于抗体药物的糖链分析,而且可筛选和鉴定人体血清中急性心梗糖链生物标志物。为抗体药物的稳定性和生物活性研究提供了一种新的方法,为临床上糖链新生理功能和差异性糖组学研究提供了新的策略。

骨保护素和相关炎性因子的血清含量与冠心病及其病变程度的关系

目的 探讨骨保护素(OPG)、可溶性核转录因子-κB受体活化因子配体(sRANKL)和相关炎性因子血清含量与冠心病(CHD)及病变严重程度的关系。方法 选择2017年4月至2018年12月因胸痛入住天津市胸科医院心内科并接受冠状动脉造影(CAG)的患者,根据CAG结果将患者分为CHD组和非CHD组。收集所有入选者的性别、年龄、高血压史、吸烟史、糖尿病等一般资料以及总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白AI(apoAI)、载脂蛋白B(apoB)、脂蛋白(a)〔Lp(a)〕、肌酸激酶同工酶(CK-MB)等生化指标;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清OPG、sRANKL、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、白细胞介素-6(IL-6)水平。根据CAG结果将CHD患者分为单支、双支、三支冠状动脉(冠脉)病变组,观察CHD患者血清OPG、sRANKL及相关炎性因子的含量与冠脉病变严重程度的关系。采用多Adavosertib核磁因素Logistic回归法分析CHD的危险因素;绘制受试者工作特征曲线(ROC),分析主要危险因素对CHD的预测价值。结果 研究期间共472例患者纳入最终分析,其中CHD组264例,非CHD组208例,CHD患者中单支病变79例,双支病变75例,三支病变110例。①与非CHD组比较,CHD组男性患者更多,年龄更大,高血压史、糖尿病患者比例更高,且血Lp(a)、CK-MB水平显著升高,血HDL-C、apoAI水平显著降低;而两组血TC、LDL-C、apoB水平比较差异无统计学意义。CHD组患者血清OPG、MMP-9、MCP-1、IGF-1、IL-6水平明显高于非CHD组〔OPG(μg/L):1.79±0.50比1.50±0.30,MMP-9(μg/L):57.91(33.50,130.46)比38.33(29.43,109.78),MCP-1(μg/L):298.30(207.96,537.16)比252.73(165.22,476.01),IGF-1(μg/L):734.03±486.11比217.75±126.45,IL-6(ng/L):64.76±40.25比48.60±15.80,均P0.05〕,血清sRANKL水平明显低于非CHD组(ng/L:344.31±122.14比378.74±109.27,P0.05)。②血清OPG水平随冠脉病变支数增加呈轻微上升趋势,sRANKL水平呈轻微下降趋势〔单支、双支、三支冠脉病变组OPG(μg/L)分别为1.74±0.49、1.76±0.50、1.85±0.52,sRANKL(ng/L)分别为354.96±116.64、340.05±124.24、339.57±125.03〕,差异均无统计学意义(均P0.05);IGF-1、IL-6水平随冠脉病变支数增加而升高〔单支、双支、三支冠Belumosudil纯度脉病变组IGF-1(μg/L)分别为372.13±258.42、676.06±350.29、1033.47±468.06,IL-6(ng/L)分别为48.87±16.72、65.36±18.84、75.76±22.72〕,不同病变组间比较差异均有统计学意义(均P0.01)。相关性分析显示,IGF-1水平与冠脉病变支数呈显著正相关(r=0.612,P0.01),而IL-6与病变支数无明显相关性(r=0.185,P0.05)。③多因素Logistic回归分析显示,血清OPG、IGF-1水平升高是CHD发病的危险因素〔OPG:优势比(OR)=1.995,95%可信区间(95%CI)=1.936~2.067,P=0.012;IGF-1:OR=1.009,95%CI=1.004~1.015,P=0.001〕。④ ROC曲线分析显示,OPG和IGF-1预测CHStructured electronic medical systemD的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.716、0.867。当OPG的最佳截断值为1.13 μg/L时,敏感度为81.7%,特异度为58.1%;当IGF-1的最佳截断值为401.20 μg/L时,敏感度为69.7%,特异度为95.7%。结论 血清OPG和相关炎性因子MMP-9、MCP-1、IGF-1、IL-6水平升高以及sRANKL水平降低与CHD有关;IGF-1水平与冠脉病变严重程度呈正相关;血清OPG和IGF-1是CHD发生的危险因素,对CHD的发生具有良好的预测价值。

YAP对高糖培养大鼠心脏成纤维细胞活化作用的影响与机制

目的 探究Yes相关蛋白(YAP)对高糖诱导的大鼠心脏成纤维细胞(CFs)增殖及转分化的影响和作用机制。方法 分离培养1~3日龄SD大鼠CFs细胞,用40.0mmol/L葡萄糖诱导CFs,构建糖尿病此网站心肌病(DCM)细胞clathrin-mediated endocytosis模型,24 h后检测细胞YAP、α平滑肌肌动蛋白(αSMA)、I型胶原蛋白(collagen I)、Ⅲ型胶原蛋白(collagenⅢ)、结缔组织生长因子(CTGF)蛋白表达水平。取原代大鼠CFs细胞,分别设置正常糖(5.5 mmol/L D-Glucose,NG)组、高糖(40.0mmol/L D-Glucose,HG)组、NG+维替泊芬(NG+VP)组、ICI 46474试剂HG+VP组。VP为YAP抑制剂,剂量为0.5μmol/L。处理CFs细胞24h。采用波形蛋白免疫荧光法鉴定CFs;Ki-67免疫荧光染色检测各组细胞增殖情况;Western blotting检测各组YAP、αSMA、collagen I、collagenⅢ、CTGF蛋白表达水平。结果 免疫荧光法鉴定波形蛋白阳性,提示原代培养的细胞为大鼠CFs。ki-67免疫荧光检测结果显示,与NG组比较,HG组CFs的ki-67阳性率(%)明显升高(67.33±5.14 vs. 22.94±4.88,P<0.05);YAP抑制剂VP处理后,CFs的ki-67阳性率(%)降低(46.83±3.86vs. 67.33±5.14,P<0.05)。Western blotting检测结果显示,与NG组比较,HG组高糖干预24 h后,CFs中αSMA、collagen I、collagen III的相对表达水平均明显升高(1.43±0.98 vs. 0.93±0.06,1.80±0.09 vs. 1.08±0.09,1.43±0.09 vs. 0.88±0.10,P<0.05),YAP和CTGF蛋白相对表达水平同样升高(1.93±0.15 vs. 1.17±0.09,1.80±0.18 vs. 1.23±0.16,P<0.05);与HG组比较,HG+VP组的αSMA、collagen I、collagenⅢ、CTGF蛋白相对表达水平均明显降低(1.27±0.06 vs. 1.71±0.12,2.05±0.23 vs.3.03±0.17,1.10±0.12 vs. 1.82±0.18,1.31±0.16 vs. 1.57±0.03,P<0.05);另外,与NG组比较,HG+VP组中αSMA、collagen I、CTGF蛋白相对表达水平均较高(P<0.05)。结论 高糖刺激SD大鼠乳鼠CFs增殖及活化,合成过多的胶原蛋白等细胞外基质蛋白,其作用机制可能与YAP/TEAD/CTGF传导通路有关。

宫颈癌患者外周血BAFF、PD-L1、IL-10表达水平及其与预后的关系

目的 探究B淋巴细胞活化因子(BAFF)、程序性死亡配体-1(PD-L1)、白细胞介素-10(IL-10)在宫颈癌(CCA)患者外周血中的表达水平及其与预后的关系。方法 选取2018年6月至2019年6月我院收治的98例CCA患者作为研究对象,根据随访digital pathology3年内CCA有无进展将患者分为无进展组(n=79)与有进展组(n=19)。比较两组外周血BAFF、PD-L1、IL-10表达情况,并分析其与CCA患者临床病理特征及预后的关系。结果 有进展组低分化和有淋巴结转移的患者占比均高于无进展组(P<0.05)。有进展组的外周血BAFF阳性表达率低于无进展组,PD-L1阳性表达率及IL-10表达高于无进展组(P<0.05)。相较于中、高分化、无淋巴结转移的CCA患者,低分化、有淋巴结转移的CCA患者的外周血BAABT-199 NMRFF阳性表达率降低,PD-L1阳性表达率及IL-10表达均升高(P<0.05)。Cox回归分析显示,低分化、有淋巴结转移、BAFF低表达、PD-L1高表达、IL-10高表达是影响CCA患者预后的危险因素(P<0.05)。Dinaciclib采购受试者工作特征(ROC)曲线显示,外周血BAFF、PD-L1及IL-10预测CCA患者预后的曲线下面积(AUC)分别为0.823、0.803、0.787,三者联合检测对CCA患者预后的预测价值最高,AUC为0.837,灵敏度为94.74%,特异度为65.82%。结论 外周血BAFF、PD-L1、IL-10异常表达是影响CCA患者预后的危险因素,早期进行三者联合检测对患者预后有较高的预测价值。

放疗应用于骨与软组织肉瘤及传统与案例交互教学法的应用研究

目的 探讨不同模式放疗应用于骨与软组织肉瘤患者的疗效及安全性并交流推广传统与案例交互教学法(LBL-CBL)的经验。方法 收集2019年10月至2021年12月南京大学医学院附属鼓楼医院肿瘤中心接受放疗的99例骨与软组织肉瘤患者资料。3例患者行术前新辅助放疗(45~50 Gy);25例患者行术后放疗,包括22例术后辅助放疗(45~60 Gy),3例术后残留病灶放疗(45~60 Gy);37例患者行免疫放疗(6~40 Gy);33例患者行常规剂量姑息放疗(25~75 Gy);1例患者行根治剂量放疗(54 Gy)。选择其中18例患者,采用LBL-CBL,对规培医生进行基础知识、模拟定位、靶区勾画、放疗计划评估、疗效评价、患者随访等方面的教学,并采用出科考试及调查表的方法评估教学效果和满意度。结果 共81例患者进行疗效评价。3例(3/3,100%)术前新辅助放疗患者术后病理均提示肿瘤发生坏死。术后辅助放疗组平均随访时间10.5个月,3例(3/19,15.8%)疾病进展,包括1例全身转移,2例原位复发,16例(16/19,84.2%)未复发。术后残留病灶放疗组平均随访时间10.8个月,1例(1/3,33.3%)保持疾病稳定状态,1例(1/3,33.3%)部分缓解,1例(1/3,33.3%)疾病进展。免疫放疗组平均随访时间4.4个月,8例(8/31,25.8%)进展,20例(20/31,64.5%)疾病稳定,3例(3/31,9.7%)部分缓解。姑息放疗组平均随访时间7.1个月,4例(4Y-27632小鼠/24,16.7%)进展,16例(16/24,66.7%)疾病稳定,4例(4/24,16.7%)部分缓解。免疫放疗组和常规剂量姑息放疗组3个月局部控制率分别为80.1%(17/21)、100.0%(18/18),6个月局部控制率分别为63.6%(7/11)、85.7%(12/14)。1例根治剂量放疗的患者随访时间为11.0个月,疗效评价为部分缓解。3~4级不良反应发生率较低。LBL-CJQ1体内实验剂量BL的授课方式受到放疗规培学生认可程度较高,出科考试成绩优良。结论 放疗是骨与软组织肉瘤患者综合治疗的重要组成部分,大多数不良反应可耐受,且可提高疗效,改善患者的生活质量。对于放疗规培的研究生,采用LBL-CBL更有利于其掌握骨与软组织肉streptococcus intermedius瘤的特点和临床放疗技能。

老年T2DM合并高血压患者血清25(OH)D水平与抑郁情绪关系

目的 通过对老年2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)合并高血压患者25-羟维生素D[25-hydroxyvitamin D,25(OH)D]水平的测定,探讨其与老年T2DM合并高血压患者抑郁情绪的关系。方法 收集172例老年T2DM合并高血压患者的临床资料,包括基本情况、既往史、健康相关行为、25(OH)D、甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、糖化血selleckchem CP-690550红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)。运用汉密顿抑郁量表(Hamilton depression scale,HAMD),依据HAMD-24项评分将受试者分成T2DM合并高血压及抑郁症组(A组)和单纯T2DM合并高血压组(B组),运用Pear_son相关分析评价抑郁症与血清25(OH)D水平及其他临床资料的相关性,应用二元logistic回归分析老年T2DM合并高血压患者抑郁情绪多因素间的相关性。结果 172例T2DM合并高血压患者Ayurvedic medicine中25(OH)D严重缺乏者为28例(16.3%),缺乏者为84例(48.8%),不足者为40例(23.2%),充足者仅为20例(11.5%)。A组日光浴、体育锻炼、25(OH)D、HDL-C水平低于B组,HbA1水平高于B组,差异均有统计学意义(P <0.05)。25(OH)D、日光浴、体育锻炼、HDL-C与抑郁情绪呈负相关(r_s=-0.532,r_s=-0.228,r_s=-0.315,r_s=-0.213,P <0.05);HbA1c与抑点击此处郁情绪呈正相关(r_s=0.338,P <0.05)。结论 老年T2DM合并高血压患者体内的25(OH)D普遍缺乏;低25(OH)D、高HbA1c、体育锻炼时间少及减少日光浴是老年T2DM合并高血压患者易产生抑郁情绪的独立危险因素。

60岁以上2型糖尿病患者下肢深静脉血栓形成的影响因素

目的 探讨≥60岁2型糖尿病患者下肢深静脉血栓形成的影响因素。方法 选取2019年3月至2020年5月本院收治的≥60岁2型糖尿病患者1E708060例。采用彩色多普勒超声检查诊断下肢深静脉血栓形成情况,按检查结果将患者分为血栓组70例和非血栓组90例。收集患者性别、年龄、吸烟史、既往病史(冠心病、高血压)、糖尿病病程、服用阿司匹林情况及他汀类药物情况。检biopsy site identification测两组总胆固醇、低密度脂蛋白、空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血红蛋白、血小板计数水平。分析影响患者下肢深静脉血栓形成的因素。结果 血栓组患者中高血压比例、糖尿病病程以及总胆固醇、低密度脂蛋白、空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血红蛋白、血小板计数水平均明显高于非血栓组,服用阿司匹林、他汀类药物的比例均明显低于非血栓组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,糖尿病病程、餐后2 h血糖、血小板计数偏高是老年2型糖尿病患者下肢深静脉血栓形成的独立危险因素(均P<0.05),服用阿司匹林是老年2型糖尿病患者下肢深静脉血栓形成的保护因素(P<0.05)。结论 ≥60岁2型糖尿病患者下肢深静脉血栓形成受糖尿病病程、血糖控制Talazoparib水平、抗血小板治疗影响,在临床诊治中应加以重视。

2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病患者血清白脂素和脂联素水平的变化及意义

目的 观察2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)患者血清中白脂素及脂联素水平变化,探讨白脂素及脂联素在T2DM合并非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)中的作用。方法 收集2020年4月至2020年10月就诊于山西医科大学第二医院内分泌科的T2DM患者86例,分为两组:单纯T2DM组40例(男26例,女14例),T2DM合并NAFLD组46例(男28例,女18例),另选健康体检人群20名(男12名,女8名)作为对照组。测定受试者空腹血糖(fasting plasma glucose, FPG)、空腹胰岛素(fasting insulin, FIN)、C肽、糖化血红蛋白A1c型(glycosylated hemoglobin A1c, HbA1c)、mycobacteria pathology总胆固醇(total cholesterol, TC)、甘油三酯(triglyceride, TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol, HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol, LDL-C)等一般生化指标,ELISA法测定血清白脂素及脂联素水平。结果 与对照组比较,T2DM组患者FPG、收缩压、HbA1c、血清白脂素水平显著升高,HLD-C、血清脂联素水平显著降低(P<0.05)。与单纯T2DM组比较,T2DM合并NAFLD组患者年龄、FPG、BMI、LDL-C、收缩压、FIN、HOMA-IR、C肽、血清白脂素水平显著升高,病程更长,血清脂联素水平显著降低(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,T2DM组血清白脂素水平Nirmatrelvir核磁与年龄、收缩压、FPG、HOMA-IR、病程呈显著正相关(P<0.05),与血清脂联素水平呈显著负相关(P<0.05);血清脂联素水平与C肽、血清白脂素呈显著负相关(P<0.05);T2DM合并NAFLD组血清白脂素水平与病程呈显著正相关(P<0.05),与血清脂联素呈显著负相关(P<0.05);血清脂联素水平与血清白脂素呈显著负相关(P<0.05https://www.selleck.cn/products/AZD1152-HQPA.html)。Logistic回归分析结果显示,LDL-C、HOMA-IR、血清白脂素是发生T2DM合并NAFLD的独立危险因素。结论 T2DM合并NAFLD患者血清白脂素水平升高,血清脂联素水平降低;血清白脂素与血清脂联素及HOMA-IR相关;LDL-C、HOMA-IR、血清白脂素是发生T2DM合并NAFLD的独立危险因素。

糖络宁对高糖环境下大鼠背根神经节细胞IRE1α-CHOP通路的影响观察

目的 探讨糖络宁对高糖环境下大鼠背根神经元(DRGn)细胞肌醇酶1α(IRE1α)-转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)通路的影响。方法 将60只清洁级雄性SD大鼠随机分为糖络宁组25只、正常对照组35只,分别以糖络宁组方生药2.5 g/(kg·d)和蒸馏水灌胃,用于制备糖络宁含药血清及正常对照血清。取新生SD胎鼠DRGn制备细胞悬液,将DRGn细胞在6孔板进行接种,随机分为正常(A)组(予空白血清培养)、模型(B)组(予75 mmol/L葡萄糖+空白血清培养)、中药(C)组(予75 mmol/L葡萄糖+糖络宁含药血清培养)、miR-211抑制剂(D)组(予75 mmol/L葡萄糖+空白血清培养+miR-211抑制剂)、miR-211抑制剂对照(d)组(予75 mmol/L葡萄糖+空白血清培养+miR-211抑制剂阴性对照)、激动剂中药(E)组(予75 mmol/L葡萄糖+糖络宁含药血清培养+miR-211激动剂)、激动剂中Hydro-biogeochemical model药对照(e)组(予75mmol/L葡萄糖+糖络宁含药血清培养+miR-211激动剂阴性对照)。培养24 h后,q-PCR检测miR-211、IRE1α、p-IRE1α、XBP1、CHOP基因表达;MK-4827采购荧光探针法测定DRGn细胞ROS水平,黄嘌呤氧化酶技术检测SOD活性,硫代巴比妥法测定MDA含量。结果 各组ROS、SOD、MDA、miR-211 mRNA、IRE1α、XBP1、CHOP比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。与A比较,B组ROS、MDA及miR-211、IRE1α、XBP1、CHOP mRNA表达高,SOD水平低(P<0.01)。与B组比较,C组和D组ROS、MDA及miR-211、IRE1α、XBP1、CHOP mRNA表达低,C组SOD水平高于B组(P<0.01);d组ROCompound C研究购买S、SOD、MDA、miR-211、IRE1α、XBP1、CHOP mRNA与B组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。与C组比较,E组ROS、MDA及miR-211、IRE1α、XBP1、CHOP mRNA表达高,SOD水平低(P<0.01);e组ROS、SOD、MDA、miR-211、IRE1α、XBP1、CHOP mRNA与C组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 糖络宁通过下调miR-211表达降低IRE1α-CHOP通路活性。

不同情况淋巴瘤患者血清LDH、β_2-MG、IL-2R及IL-10水平变化及临床意义

目的 探讨不同情况淋巴瘤患者血清乳酸脱氢酶(LDH)、β_2微球蛋白(β_2-MG)、白细胞介素(IL)-2R、IL-10水平变化及临床意义。方法 选取2018-2021年于该院确诊的50例淋巴瘤患者作为淋巴瘤组,收集其血清标本及年龄、性别、淋巴瘤组织、组织免疫学类型、临床分期、骨髓浸润、EB病毒(EBV)感染等资料。同期收集20例体检健康者(对照组)血清标本及资料,比较淋巴瘤组与对照组血清LDH、β_2-MG、FUT-175分子式IL-2R、IL-10水平;分析各指标在淋巴瘤组织、组织免疫学类型,临床分期、骨髓浸润、EBV感染及有效治疗后水平变化Transmission of infection情况。结果 淋巴瘤组血清LDH、β_2-MG、IL-2R、IL-10水平高于对照组(P<0.05);EBV+患者血清LDH、β_2-MG、IL-2R水平高于EBV-患者(P<0.Nirogacestat IC5005);随着病情进展,临床分期Ⅲ~Ⅳ期和有骨髓浸润患者血清LDH、β_2-MG、IL-2R水平高于临床分期Ⅰ~Ⅱ期及无骨髓浸润患者(P<0.05);治疗后淋巴瘤患者血清LDH、β_2-MG、IL-2R、IL-10水平较治疗前降低。结论 监测血清LDH、β_2-MG、IL-2R、IL-10水平变化对淋巴瘤患者的辅助诊断、EBV感染、临床分期、疗效及预后评估具有重要的临床价值。