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短期间歇medical controversies性禁食有利于非酒精性脂肪肝病患者控制Empagliflozin分子量体重，但长期间歇性禁食的影响还不明确。本研究以C57BL/6N小鼠为模型，采用4个月隔selleck NMR日禁食方式研究长期间歇性禁食对小鼠健康及肝脏脂质代谢的影响。结果显示，与自由采食组相比，隔日禁食组小鼠的体重降低，饲料转化率增加，肝脏指数增加，病理切片分析发现肝脏甘油三酯含量显著增加；qRTPCR分析发现肝脏脂代谢标志基因Pparγ和Atgl的表达显著升高(P<0.05);Westernblot分析发现微管相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高(P <0.05)，自噬接头蛋白p62 (SQSTM1)丰度降低(P <0.05)，自噬信号正调控关键因子AMPK磷酸化升高(P <0.05)，负调控因子mTOR磷酸化降低(P <0.05)，表明肝细胞自噬活性增强。综上所述，4个月隔日禁食可引起健康小鼠肝脏中积累过多甘油三酯，同时显著降低mTOR磷酸化水平并提高自噬水平。

哺乳动物大脑皮层神经前体细胞(neural progenitor cells,NPCs)的发育是一个边特化边分化的过程,随着发育时间的推移NPCs逐步拥有了形成神经元和神经胶质细胞的特性。神经元和神经胶质形成相关基因的抑制和激活对神经细胞谱系的分化尤为重要。多梳家族(PcG)和三胸家族(TrxG)就是通过对组蛋白的表观遗传修饰来调控染色质状态而起到对基因表达的抑制和激活调控的。已有研究表明,在细胞中PcG家族能够形成抑制性染色质结构域而呈现点状分布;而后的研究通过高通量染色质构象捕获技术(HiC)观察到从胚胎干细胞向神经前体细胞及神经元分化的过程中,PcG通过调控基因表达和染色质结构而起作用。这说明PcG家族对神经细胞谱系的形成很重要,而Nspc1作为PcG家族PRC1复合体的核心成员之一,其功能及行使功能的机制尚不清楚。因此,本研究聚焦Nspc1这一基因,探索其在神经细胞发育过程中的功能及发挥功能的机制。本研究通过D6-Cre工具鼠构建了小鼠脑皮层特异性敲Nspc1基因模型。通过Pax6和Tbr2对小鼠脑皮层神经前体细胞进行特异性标记,发现从E14.5到E16.5的神经元发育时期,神经前体细胞的数量并没有明显变化,而从E18.5到P3这一神经胶质细胞形成时期,Pax6+神经前体细胞数量显著增多。研究进一步对神经元和神经胶质细胞的分化进行检测,通过Cux1标记Ⅱ/Ⅲ两个皮层,Ctip2标记V皮层,Tle4标记Ⅵ皮层的神经元,发现只有Tle4+神经元的生成数量有轻微增加。通过Aldh111,GFAP和Sox10对神经胶质的发生情况进行检测,发现神经胶质发生时期GFAP+信号减弱,AldWestern Blot Analysish111+细胞在皮质板区的数量减少;分离E18.5的NPCs进行体外培养,发现培养4d的NPCs,与野生型相比,成球能力显著增强,神经球的直径明显增大。基于这些现象,研究对神经Tezacaftor体内胶质发育时期的神经前体细胞进行了RNA-Seq,ATAC-Seq和BL-HiC实验,检测在敲除Nspc1后神经前体细胞的基因表达,染色质可及性和染色质结构变化情况,发现敲除Nspc1后,在神经胶质发育阶段神经元形成和神经胶质形成相关的基因受到干扰,在本该是神经胶质形成阶段,神经元形成相关的基因依然在高表达,而神经胶质形成相关的基因表达量较低。随后,我们在基因组中检测到一些与神经胶质形成密切相关的Motif可及性下调,下调最明显的Motif是NF1A,另外,形成染色质环的重要成员CTCF可及性也下调。而且,敲除Nspc1后,神经前体细胞的染色质局部区域变得致密,染色质接触变强。因此,本研究认为Nspc1有可能通过PcG复合体影响染色质可及性和染色质3D此网站结构,介导神经细胞谱系形成的关键基因表达,干扰神经胶质形成相关的信号通路,进而影响NPCs的特化,神经元和神经胶质细胞的分化。

目的 探讨热塑头颈肩体膜固定技术对乳腺癌改良根治术后放疗患者重复摆位精度的影响。方法 选择2019年1月至2020年12月在福建医科大学孟超肝胆医院行乳腺癌改良根治术后放疗的120例患者为研究对象，按随机数字表法将患者分为对照组和试验组，各60例。对照组采用翼形板、真空垫固定体位，试验组采用热塑头颈肩体膜固定技术固定体位，通过X线容积成像软件对两组锥形束CT(CBCT)图像、计划CT图像进行自动骨性selleck Tezacaftor配准，比较两组摆位误差及摆位平移旋转误差。结果 两组均每周进行1次摆位测量，均测量5次，每组完成CBCT扫描300次；试验组在Z轴的摆位误差为(1.67±0.79)mm,小于对照组的(2.34±1.02)mm;在滚动方向RY(ROmicrofluidic biochipsLL)的摆位平移旋转误差为(0.83±0.36)°,小于对照组的(1.27±0.59)°,差异均有统计学意义(P<0.05);两组在X、Y轴方向上的摆位误差及在俯仰方向RXPidnarulex NMR(PITCH)、左右旋转方向RZ(YAW)上的摆位平移旋转误差比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 热塑头颈肩体膜固定技术应用于乳腺癌改良根治术后放疗患者中更有利于固定患者的体位，减小摆位误差及摆位平移旋转误差，提高摆位精度。

旨在探究副猪格拉瑟菌(Glaesserella parasuis,GPS)突破猪呼吸道上皮屏障引起系统性感染的机制。通过超速离心和密度梯度离心提取副猪格拉瑟菌外膜囊泡(outer membrane vesicles, OMVs),OMVs经SDS-PAGE显示，蛋白质条带3-MA NMR分布在55～100 ku,经透射电子显微镜(TEM)观察，OMVs的粒径在100～200 nm,纳米粒子直径分析(NTA)结果显示，样品在100～200 nm处的粒子数目最多。进而用制备的HbpA及OmpP2多克隆抗体对OMVs及不含OMVs的细菌上清进行Western blot验证，证实所提取的样品为外膜囊泡，且进一步结果证明细胞致死性膨胀毒素(CDT)在GPS培养物中主要以OMVs的形式存在。用OMVs或CdtB处理猪气管上皮细胞(swine tracheal 确认细节epithelial cells, STEC)36 h,检测STOncolytic Newcastle disease virusEC中cleaved-caspase3、ZO-1和Occludin的蛋白表达水平，并用FITC-葡聚糖(FD-4)检测STEC单层细胞的细胞旁通透性。结果发现，OMVs与CdtB处理后凋亡相关蛋白cleaved-caspase3表达水平升高，ZO-1和Occludin的表达水平降低，FD-4渗透率升高，同时，乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试验发现，当CdtB与STEC单层细胞共孵育24 h、OMVs与STEC单层细胞共孵育36 h后，STEC存活率显著降低。而Pifithrin-α预处理STEC可抑制OMVs和CdtB引起的细胞凋亡和屏障通透性的增加。另外，用免疫磁珠捕获的方法去除OMVs中的CdtB(OMVs-ΔCdtB),OMVs-ΔCdtB处理STEC 36 h后cleaved-caspase3、ZO-1、Occludin表达水平与对照组相比无显著差异。综上，成功提取并纯化GPS OMVs,且试验证明GPS可通过OMVs转运CdtB诱导STEC凋亡和屏障损伤，为副猪格拉瑟菌突破呼吸道上皮屏障的机制提供新思路。

目的 探索TAP光敏剂[2,4,6-三(二甲氨甲基)苯酚酞菁锌][ZnPc(TAP)]与乳腺癌细胞DNA的结Gluten immunogenic peptides合及其降解作用。方法 探针法检测TAP单线态氧的产量及其类型；紫外光谱法研究TAP光敏剂与乳腺癌细胞DNA的相互作用并计算其结合常数；通过凝胶电泳，成像和核酸检测等方法在细胞内、外探GSK126索并分析TAP光敏剂对乳腺癌细胞DNA的降解作用。结果 TAP光敏剂具有良好的紫外吸收和荧光光谱性能，其单线态氧产量丰富，能够产生显著的氢氧自由基实现光动力作用。还证明TAP光敏剂与乳腺癌肿瘤细胞DNA存在强相互作用，其结合常数(Kdu)为3.72×106。细胞内、外光动力试验均证明TAP光敏剂能够降解乳腺癌肿瘤细胞DNA，其降解作用与光敏剂浓度RP56976细胞培养呈正相关。结论 TAP光敏剂对乳腺癌细胞DNA结合并产生显著的光动力降解作用，有助于推动TAP光敏剂在肿瘤DNA方面的应用，为乳腺癌的转移和复发治疗提供参考价值。

天然产物是创新药物和生物农药研发的重要源泉。阐明天然产物生物合成关键基因的功能、解析其生物合成通路和酶催化机制对于促进功能天然产物的应用和开发至关重要。异源表达是研究天然产物生物合成和合成生物学的重要手段之一。近年来，米曲霉异源宿主得到了广泛的应用。通过基因工程技术，将目的天然产物生物合成基因和基因簇在米曲霉中异源表达，不仅能够有效地激活沉默的生物合成基因和基因簇，挖掘全新活性天然产物，而且可以快速高效地鉴定天然产物生物合成基因功能，解析和重构其生物合成途径。米曲霉异源表达宿主已经成为天然产物合成生物学研究的强有力工具。本文对米曲霉遗传转化系统在天然产物研究中的应用进行了系统综述。首先，概述了异源表达的应用和意义，介绍了米曲霉遗传转化系统的发展过程、应用基础和优势以及遗传转化方法的实践和优化。其次，根据不同天然产物的结构类型和与之相对应的合CL 318952溶解度成酶特点，着重介绍了该体系表达各类天然产物的成寻找更多功案例。最后，对米曲霉异源表达宿主在天然产物化学领域的研究和应用前景进行了总结和展望。随着基因编辑、定向进化、合成生物学、生物信息学技术以及人工智能技术的发展和应用，米曲霉异源表达宿主的发展和完善将会极大地促进更多天然产物化学研究技术Cleaning symbiosis的发展和革新，以期为天然产物合成生物学的研究和创新药物研发提供借鉴。

猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)引发断奶后多系统衰竭综合征(Post weaning multisystemic wasting syndrome,PMWS)、呼吸道疾病综合征(Pocine respiratory disease complex,PRDC)、猪皮炎肾病综合征(Porcine dermatitis and nephrotic syndrome,PDNS)等多种疾病,给全球养猪业造成极大的经济损失。开发可快速检测PCV2抗体或抗原的诊断产品对于该病的防控具有重要的意义。基于此,本研究首先采用原核表达的方法获得重组PCV2 Cap蛋白,并通过免疫新西兰大白兔的方法制备多克隆抗体,在此基础上开发了PCV2 ELISA抗体检测试剂盒、乳胶免疫层析抗原检测试纸和磁珠化学发光抗原检测试剂盒,主要研究内容及结果如下:1、ELISA抗体检测试剂盒:以纯化的重组Cap蛋白为包被抗原,建立了定性分析的ELISA抗体检测方法。工艺参数的优化结果表明,最佳抗原包被浓度为4μselleck合成g/m L;最佳封闭体系为2%的BSA;最佳封闭条件为4℃下16 h;最佳血清稀释度为100倍;最佳酶标抗体稀释度为1万倍;最佳血清孵育时间为30 min;最佳酶标抗体孵育时间为30 min;最佳TMB显色时间为10 min。性能验证的实验结果表明,在样本1600倍稀释情况下依旧具有良好的敏感性;仅在PCV2抗体阳性血清的检测中呈现阳性结果,其他病毒抗体阳性血清的检测结果均呈现阴性结果,与PCV1、PRRS、PRV、PPV、PEDV、CSF抗体阳性血清无交叉反应,具备良好的特异性;批内变异系数为1.4%,批间变异系数为2.46%,具备较高的精密度;临床样本的检出率为98%;在4℃环境下储存可保存12个月,具备良好稳定性。2此网站、乳胶免疫层析抗原检测试纸:以抗Cap蛋白的多克隆抗体和乳胶微球制备免疫探针,用抗Cap蛋白的单克隆抗体和羊抗兔Ig G二抗分别包被T线和C线,建立定性分析的乳胶免疫层析抗原检测方法。工艺参数的优化结果表明,乳胶微球最佳直径为300 nm;最佳多克隆抗体结合量为80μg;最佳免疫探针喷涂量为1.5μL/cm;最佳T线点膜浓度和最佳C线点膜浓度均为1.0 mg/m L。性能验证的实验结果显示,该试纸的检出限为0.5 ng/m L,仅在PCV2抗原阳性血清的检测中呈现阳性结果,与其他猪病毒的抗原阳性血清样本无交叉反应,具备良好的灵敏度和特异性;临床样本的综合检出率为为93.33%;在常温环境下可保存12个月。3、磁珠化学发光抗原检测试剂盒:用多克隆抗体与磁珠微球结合后制备免疫探针,用吖啶酯标记单克隆抗体制备成为发光探针,建立定量分析磁珠化学发光抗原检测方法。工艺参数的优化结果表明,最佳单克隆抗体与吖啶酯的投料比为1:10;最佳多克隆抗体的结合量为68μg;最佳结合时间为120 min;最佳免疫探针封闭体系为2%的BSA;最佳免疫探针用量100μL;最佳样本稀释度为100倍;最佳二抗稀释度为4000倍;最佳样本孵育时间为25 min。性能验证的结果表明,该试剂盒在0.25 ng/m patient-centered medical homeL至250 ng/m L的抗原浓度范围内具有良好线性;其检出限为51 pg/m L,定量限为68 pg/m L,具备较高的灵敏度;批间批内变异系数均小于5%,具备较高的精密度;临床样本的综合检出率为97.14%;在4℃环境下可保存至少12个月。本研究构建的三种试剂盒具备高灵敏度、高特异性、良好稳定性的特点,对猪圆环病毒2型的检测和预防具有重要意义。

目的 对导尿管相关尿路感染的病原菌分布以及耐药性状况加以探讨和分析。方法 选取医院2018年1月至2020年12月收治的571例导尿管相关PS-341抑制剂尿路感染患者，取患者中段Ceralasertib核磁尿进行病原菌培养，分析总结病原菌分布特点及主要病原菌耐药性状况。结果571例患者中革兰阳性菌检出率为22.60%，革兰Bioglass nanoparticles阴性菌检出率为51.31%，真菌检出率为26.09%。屎肠球菌对万古霉素、利奈唑胺、奎奴普汀/达福普汀、替加环素耐药性较低。粪肠球菌对万古霉素、利奈唑胺、呋喃妥因、替加环素、氨苄西林、青霉素耐药性较低。金黄色葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺、四环素、左氧氟沙星、替加环素、红霉素耐药性较低。表皮葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺、呋喃妥因、四环素、替加环素、红霉素耐药性较低。大肠埃希菌对亚胺培南、呋喃妥因、哌拉西林、复方新诺明、头孢呋辛、头孢替坦、替加环素、米诺环素、美罗培南、阿米卡星耐药性较低。肺炎克雷伯菌对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、复方新诺明、头孢吡肟、头孢替坦、妥布霉素、替加环素、米诺环素、美罗培南、阿米卡星耐药性较低。铜绿假单胞菌对哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、妥布霉素、左氧氟沙星、庆大霉素、环丙沙星、粘菌素、阿米卡星耐药性较低。鲍曼不动杆菌对哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、替加环素、粘菌素、阿米卡星耐药性较低。结论 导尿管相关尿路感染的病原菌以革兰阴性菌为主，且不同病原菌耐药性存在差异，需根据实际病原菌类型及耐药性状况针对性用药。

目的 探讨κ阿片受体激动剂(U50488H)对缺血性脑卒中大鼠神经元自噬、迟发性神经元损伤及NOTCH表达水平的影响。方法 选取40只清洁级(Specific pathogen free, Sselleckchem PidnarulexPF)级Sprague Dawley(SD)雄性大鼠，随机分为正常(N)组、模型(M)组、丁苯酞(B)组、U50488H(U)组，每组各10只，对M,B,U组采用线栓法建立缺血性脑卒中模型，N组不建立该模型，建模成功后对B组给予灌胃4.5 mg/kg的丁苯酞，对U组给予脑内注射1.5 mg/kg的U50488H,N,M组同期给予灌胃同体积生理盐水，生物机能实验系统检测大鼠脑血流动力学，Zea longa评分及神经症状评分(Neurosymptom score, NSS)评分检测大鼠迟发性神经损伤，HE染色法检测脑组织病理形态，免疫印迹法检测脑组织中自噬相关蛋白表达水平，免疫组化法检测NOTCH表达水平。结果 与N组比较，M组心率(Heart rate, HR)、收缩压(Systolic blood pressure, SBP)、舒张压(Diastolic blood pressure, DBP)均显著升高(P<0.05);与M组比较，B,U组大鼠HR,SBP,DBP均显著降低(P<0epigenetic factors.05),且U组比B组降低显著(P<0.05)。与N组比较，M组Zea longa评分、NSS评分均显著升高(P<0.05);与M组比较，B,U组大鼠Zea longa评分、NSS评分均显著降低(P<0.05),且U组比B组降低显著(P<0.05)。N组大鼠脑组织及皮质结构完整且致密均匀，神经细胞核形态正常完整，核仁清晰，神经细胞排列整齐，未见细胞周围间隙水肿；M组脑组织结构遭到破坏，细胞排列紊乱且着色变浅，核仁及结构消STM2457化学结构失，出现蹄网状结构，并可见大量空泡；与M组比较，B,U组病理状态明显，细胞体积明显缩小，细胞排列少且散乱。与N组比较，M组脑组织中LC3,Beclin1蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与M组比较，B,U组脑组织中LC3,Beclin1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),且U组比B组降低显著(P<0.05)。与N组比较，M组脑组织NOTCH蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与M组比较，B,U组脑组织NOTCH蛋白表达水平显著降低(P<0.05),且U组比B组降低显著(P<0.05)。结论 κ阿片受体激动剂可显著降低缺血性脑卒中大鼠神经元自噬及NOTCH表达水平，并有效改善迟发性神经元损伤。

为探究荆selleckchem ZD1839防颗粒浸膏对巨噬细胞活化的增强作用及机制，该研究在RAW264.7细胞培养体系中，加入荆防颗粒浸膏，然后再加入不同刺激剂处理细胞，提取RNA后使用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法测定多种细胞因子mRNA的转录，使用酶联免疫吸附（ELISA）法测定细胞上清液中细胞因子分泌量，另外提取细胞内蛋白使用免疫印迹法测定信号通路活化状态。研究发现荆防颗粒浸膏单独处理细胞不增加或轻度增加RAW264.7细胞中TNF-α、IL-6、IL-1β、MIP-1α、MCP-1、CCL5、IP-10和IFN-β的mRNA转录，但是呈剂量依赖性显著增强R848和CpG诱导RAW264.7细胞中这些细胞因子的mRNA转录；同时荆防颗粒浸膏能够显著增强R848和CpG诱导RAW264.7细胞分泌TNF-α、IL-6、MCP-1和IFN-β。机制研究显示荆防颗粒浸膏对CpG诱导RAW264.7细胞中p38、ERK1/2、IRF3、STApostoperative immunosuppressionT1和STAT3磷酸化具有显著增强作用。结果表明，荆防颗粒浸膏对R848和CpG诱导巨噬细胞活化具有选择性增强作用，其机制可能与增强MAPKsAZD9291、IRF3和STAT1/3信号通路活化有关。