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建立柱前衍生-超高效液相色谱同时测定高表达程序性死亡蛋白-1（programmed death protein-1， PD-1）抗体的细胞株培养液中17种游离氨基酸浓度的方法，根据浓度检测结果，对表达抗PD-1抗体的细胞株进行氨基酸代谢分析。使用6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯（6-aminoquinoline-N-hydroxysuccinimidyl carbamate， AQC）作为衍生剂，将不同浓度的氨基酸标准品或细胞株培养液中的游离氨基酸转化为稳定的紫外衍生物，采用ACQUITY UPLC BEH C18 (Farmed sea bass2.1 mm × 100 mm， 1.7 μm)色谱柱梯SAG体外度洗脱分离，流速为0.7 mL·min~(-1)，柱温55 ℃，进样量为1 μL，在紫外检测器检测波长为260 nm的条件下进行检测，使用外标法计算氨基酸浓度，并对高表达抗PD-1抗体的细胞株培养液中游离氨基酸浓度进行测定，根据细胞培养周期内氨基酸浓度变化进行代谢分析。结果表明，柱前衍生-超高效液相色谱法能在11 min内将17种氨基酸进行完全分离，在0.75～500 μmol·L~(-1)浓度范围内线性关系良好（相关系数R~(2) ≥ 0.9993），检测限为0.1～0.3 μmol·L~(-1)，定量限为0.3～1 μmol·L~(-1)，建立的方法具有快速、重现性高的优点，氨基酸代谢分析显示，蛋氨酸、异亮氨酸和亮氨酸可能为获悉更多细胞株生长和表达限制性成分。建立的柱前衍生-超高效液相色谱法快速、准确，可用于同时检测细胞培养液中17种游离氨基酸浓度的变化。

目的:研究Angiomotin(Amot)基因沉默后对乳腺癌干细胞特性的影响，初步评估Amot在乳腺癌中异常表达的分子机制。方法:运用免疫组化、Western blot及RT-qPCR技术在乳腺癌组织及乳腺癌细胞株中验证Amot的表达，进而运用RNA干扰技术特异性地阻断Amot在乳腺癌高表达细胞株MCF-7中的表达，以期了解Amot沉默后对乳腺癌干细胞特性的影响。结果:114例乳腺癌组织中，97例阳性表达，阳性率达85.09%;92例非癌组织中，阳性表达10例，阳性率为10.87%,两组差异具有显著统计学意义(P<0.001)。Amot在乳腺癌组织中高表达，定位在细胞核和胞浆中，主要定位于细胞核；组织芯selleck MG132片癌旁组织中低表达。MCF-7细胞系经Amot沉默后，细胞形态学上发生上皮间质表型转化。Amot基因沉默后，乳腺癌MCF-7干细胞相关分子表型标志CD24/CD44双标阳性率的变化：CON组：CD24(11.1±0.55)%、CD44<(0selleck HPLC.1±0.48)%;NC组：CD24(12.4±0.62)%、CD44<(0.08±0.7)%;KD组：CD24<(0.1±0.08)%、CD44(81.0±2.02)%。乳腺癌干细胞相关分子表型标志物CD24表达降低，CD44表达明显增强，差异有统计学意义(P<0.001)。肿瘤球形成率：CON组2.6%,NC组2.8%,KD组9.75%;乳腺癌细胞在Amot沉默后形成“肿瘤球”能力增强，差异具有统计学意义(P <0.01)。干细胞特性相关基因C-myc、Sox-2表达增加;上皮蛋白E-cadherin表达减弱，间皮蛋白N-cadherin、Vimentin、a-SMA、Snail表达明显增加，差异均有统计学意义(P <0.05)。同时发现，MCF-7细胞系经Amot沉默后，Hippo-YAP通路中YAP及YAP/TAZ表达降低，YAP上游LADNA-based medicineTS1表达降低，差异有统计学意义(P <0.01)。结论:Amot基因沉默增强乳腺癌干细胞特性，诱发乳腺癌细胞发生EMT。

目的 了解深圳市龙岗区抗病毒治疗前HIV-1感染者基因亚型和耐KPT-330抑制剂药株流行现况。方法 HIV/AIDS流行病学数据来源于全国艾滋病综合防治数据信息管理系统。采用描述性研究方法，对HIV感染者的流行特征进行统计分析，率和构成比的比较采用χ~2检验或Fisher精确检验。收集2016—2019年新报告的16～25岁的HIV感染者血清样品，扩增HIV pol区全部蛋白酶基因和部分逆转录酶基因区域，测序后进行HIV-1基因分型和耐药突变位点分析。结果173份血清样品成功获得pol序列片段，男性占93.64%(162/173)，单身占95.95%(166/173)，外省户籍者占65.32%(112/173)，同性性传播占67.63%(117/173)。HIV-1亚型以CRF07＿BC(43.35%)和CRF01＿AE(32.95%)为主，其次为CRF55＿01B(13.87%)、B(5.78%)和其他亚型(4.05%)。不同年份HIV-1亚型分布差异有统计学意义(H=9.456,P=0cylindrical perfusion bioreactor.042)。总传播耐药率为5.78%(10/173)，非核苷类反转录酶抑制剂（NNRTIs）耐药率为4.62%(8/1NSC 125973溶解度73)，核苷类反转录酶抑制剂(NRTIs)为2.31%(4/173)。同性性传播的耐药率为7.69%(9/117)，异性性传播为1.79%(1/56)。突变发生率为21.97%(38/173)，未检测出PIs突变，主要耐药突变位点中5个针对NNRTIs和4个针对NRTIs。次要突变V179D/E高达17.34%(30/173)，主要发生在CRF55＿01B亚型，不同HIV-1亚型检测出V179D/E突变差异有统计学意义(χ~2=91.733,P<0.001)。5例病例对一线治疗药物NNRTIs耐药，1例对NNRTIs和NRTIs双重耐药。结论 2016—2019年深圳市龙岗区HIV-1亚型分布表现为以CRF07＿BC和CRF01＿AE为主，多个亚型共存的特点。HIV-1感染者原发耐药率已达到中度水平，MSM人群中NNRTIs类药物的耐药需引起重视。应加强年轻的MSM人群的耐药监测。

目的 探讨采Biomass pretreatment用参麦注射液治疗气阴两虚型冠心病心绞痛的疗效，并观察其对血液流变学及心电图的影响。方法 选取2019年4月—2019年9月期间武汉市优抚医院收治的气阴两虚型冠心病心绞痛患者85例，采用随机数字法分为对照组43例，治疗组42例Roxadustat。对照组予以冠心病不稳定心绞痛常规治疗，治疗组在对照组治疗基础上加用参麦注射液进行治疗。治疗14 d后，观察比较两组患者疗效，治疗前后血液流变学、心电图变化及不良反应发生情况。结果 治疗后，治疗组总有效率88.10%(37/42)高于对照组69.77%(30/43),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后，两组患者全血黏度、血浆黏度、红细胞压积及全血还原黏度水平均较治疗前明显下降，差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组以上4项水平均低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05);治疗后，两组患者心电图PTF-V1<-0.04 mm·s例数、ST段异常例数、缺血型T波例数均较治疗前下降，差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组以上3项的例数均低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗期间，两组患者不良反应发生率比较，差异无统计学意义点击此处(P>0.05)。结论 参麦注射液可明显提高气阴两虚型冠心病心绞痛的疗效，改善血液流变学指标及心电图缺血情况，且未明显增加不良反应的发生。值得临床推广应用。

EI24(etoposide-induced gene 24)是一种由依托泊苷以依赖于p53的方式诱导的DNA损伤应答基因，可通过p53介导的凋亡途径抑制细胞生长，在多种恶性肿瘤中通过促进癌细胞凋亡发挥抑癌作用。EI24基因编码的位于内质网膜上的EI24蛋白，是一种重要的自噬蛋白，参与自噬小体的形成，促进自噬通量，从而在多种恶性肿瘤中发挥抑癌作用，但这也有利于促进依赖自噬维持生存的胰腺癌的生长。该基因定位于11q23-q24,是人类癌症中一个频繁突变的区域，其突变与肿瘤的恶性和侵袭性相关，在不同类型的肿瘤中。EI24的表达水平和所发挥的selleck激酶抑制剂功能不Microscopes and Cell Imaging Systems同，EI24在乳腺癌、非小细胞肺癌、胰腺癌等大多数肿瘤中表达水平较正常组织低，并通过诱导凋亡、激活自噬、抑制上皮间质转化等功能以及基因突变在肿瘤的发生发展中发挥抑癌基因的作用。但在皮肤癌中，EI24的表达水平较正常组织高，并能促进皮肤癌的癌变，发挥癌基因的作用，其机制可能是与EI24结合的互作蛋白不同有关。本文就EI24的生物学功R428能及其在肿瘤中的作用做一综述。

目的：探讨前哨淋巴结活检在乳腺癌手术中的应用效果及安全性。方法：回顾性分析2019年5月至2021年5月收治的乳腺癌患者82例的临床资料，将接受传统乳腺癌根治术+腋窝淋巴结清扫术治疗的41例设为对照组，接受前哨淋巴结活检+保乳手术治疗的41例设为观察组。随访6个月，比较两组手术情况、肿瘤标志物[糖类抗原125(CA125)、癌胚抗原（CEA）及糖类抗原153(CA153)]水平、肩关节活动度及并发症情况。结果：观察组术中出血量（65.83±8.34） ml、总引流量（115.86±10.37） ml，分别少于对照组的（148.52±12.39） ml、（218.33±24.35） ml，差异有统计学意义（P<0.05）。观察组手术用时（75.83±8.12） min、住院时间（10.12±2.15） d，分别短于对照组的（90.18±9.36） min、（14.38±2.29） d，差异有统计学意义（P<0.05）。两组术后CA125、CEA、CA153水平相比，差异无统计学意义（P>0.05）。观察组术后肩关节外旋（75.24±5.73）°、内旋（74.14±selleck HPLC5.82）°、屈曲（150.32±9.82）°、外展（137.96±9.43）°，分别高于对照组的（67.82±5.AY-22989小鼠39）°、（66.96±5.45）°、（138.97±9.37）°、（120.84±9hepatic adenoma.26）°，差异有统计学意义（P<0.05）。观察组并发症少于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：前哨淋巴结活检辅助乳腺癌手术能取得理想手术效果，减轻机体损伤，减少术后肩关节活动限制，且并发症少。

目的探讨乳腺癌临床病理特征和临床预后与血清Leptin、蛋白激酶Cε(PKCε)的相关性。方法选取河北大学附属医院2Integrase抑制剂017年11月至2018年2月乳腺癌患者40例作为观察组,50例体检健康女性作为对照组;对患者进行随访2年,详细记录患者预后质量;采集受试者空腹静脉血检测血清Leptin、PKCε水平;采用Spearman分析Leptin、PKCε水平与患者临床病理特征的相关性;绘制卡米尔systemic autoimmune diseases生存曲线分析不同Leptin、PKCε水平情况患者预后质量;采用Logistics回归模型分析血清Leptin、PKCε水平对乳腺癌患者预后的影响。结果观察组血清Leptin、PKCε水平均明显高于对照组(P<0.05);不同TNM分期、病灶区最大径和腋窝淋巴结转移患者血清Leptin、PKCε水平比较差异有统计学意义(P<0.05),随着TNM分期升高、病灶区最大径增大及腋窝淋巴结转移出现,患者血清Leptin、PKCε水平呈明显升高状态(P<0.05);患者血清Leptin、PKCε水平与TNM分期、病灶区直径、腋窝淋巴结转移呈正相关(r=0.675～0.743,P<0.05);死亡组患者血清Leptin、PKCε水平均高于存活组(P<0.05),高水平Leptin和高水平PKCε患者生存率明显低于低水平Leptin和低水平PKCε患者(P<0.05);血清高水平Leptin和高水平PKCTofacitinib采购ε是影响乳腺癌患者预后质量的独立危险因素(P<0.05)。结论乳腺癌患者血清Leptin、PKCε水平与TNM分期、病灶区直径、腋窝淋巴结转移呈正相关,且高水平Leptin和高水平PKCε是影响患者预后质量的独立危险因素。

目的 探讨复合活性多肽(compound active peptides, CAP)对皮肤鳞癌细胞A431增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法 选用人皮肤鳞癌A431细胞为研究对象，采用细胞增殖检测法(CCK8)检测不同浓度的CAP(0、50、100、150、200和250μg/mL)分别作用12、24、36和48 h后对A431细胞增殖的影响；选择50、100和150μg/mL CAP作用24selleck抑制剂 h进行后续实验。采用集落形成实验检测不同浓度的CAP对A431细胞的增殖能力，细胞划痕实验和流式细胞术检测对A431细胞迁移和凋亡的影响，Western blot法检测对细胞凋亡及PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白的表达。结果 与对照组相比，CAP显著抑制细胞增殖(P<0.05),且呈时间和浓度依赖性；CAP处理后A431细胞的克隆形成率显著降低，呈现剂量依赖性(P<0.05),且A431细胞的迁移能力随浓度增高而显著降低(P<0.05)。与对照组相比，经过CAP处理A431细胞24 h后，细胞凋亡率随浓度升高而增加，凋亡相关蛋白Bax和Cleaved-PARP的表达量显著增加(P<0.05),Bcl-2和MSC necrobiologycyclin-D1蛋白表达量随浓度升高显著AZD9291研究购买降低(P<0.05)。此外，与对照组相比，CAP显著下调PI3K、磷酸化p70-S6K、S6、mTOR和Akt蛋白的表达(P<0.05)。结论 CAP可以抑制皮肤鳞癌A431细胞的增殖，并通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路诱导A431细胞的凋亡。

目的：探究SAHA IC50组蛋白去乙酰化酶抑制剂LBH589对基底样乳腺癌（BLBC）生长和转移的抑制作用。方法：通过MTT法和平板克隆实验检测LBH589对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231和小鼠乳腺癌细胞系4T1增殖能力的影响；Transwell实验检测LBH589对细胞迁移和侵袭能力的影响；实时荧光定量PCR和免疫印迹实验检测LBH589对细胞上皮-间质转化的作用；构建4T1乳腺癌细胞Balb/c小selleck激酶抑制剂鼠脂肪垫成瘤模型，腹腔注射LBH589，观察4T1细胞成瘤和转移能力。结果：体外实验结果显示，与对照组相比，LBH589显著抑制MDA-MB-231和4T1细胞的增殖能力（t=11.37,P<0.05;t=18.18,P<0.05）、克隆形成能力（t=7.76,P<0.05;t=15.22,P<0.05）、迁移（t=8.8,P<0.05;t=18.0,P<0.05）和侵袭能力（t=8.24,P<0.05;t=15.99,P<0.05）；与对照组相比，LBH589上调细胞的上皮标志物CDH1的mRNA(t=7.33,P<0.05)表达水平，抑制细胞的间充质标志物VIM和FN1的mRNA(t=5.57,P<0.05;t=6.3,P<0.05)和蛋白（t=8.37,P<0.05;t=11.3,P<0.05）表达水平；体内实验结果表明，给予LBH589治疗显著抑制肿瘤的生长（t=6.3,P<0.05），并抑制其肺转移（P<0.05）。结论：LBinhaled nanomedicinesH589能够抑制BLBC细胞增殖和转移，具有潜在的临床应用价值。

目的 总结肺炎克雷伯菌肺部感染临床特点。方法 对2019年—2021年某三甲中医院肺炎克雷伯菌肺部感染患者(KP,Klebsiella pneumoniae)进行回顾性研究，根据药敏结果分为耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌组(CRKP,Carbapenem-resist确认细节ant Klebsiella pneumoniae)和碳青霉烯类敏感肺炎克雷伯菌组(CSKP, Carbapenem-sensitive Klebsiella pneumoniae),比较两组之间的临床感染特点和药敏Taurine抑制剂情况。结果 CRKP组和CSKP组肺炎克雷伯菌肺部感染患者均Opportunistic infection以男性、老年、脑血管疾病为主，CRKP组发生肺部以外侵袭性感染的比例高于CSKP组(χ~2=5.235,P=0.022),统计显示CRKP组使用有创机械通气(χ~2=4.424,P=0.035)、留置导尿管(χ~2=4.151,P=0.042)及碳青霉烯酶类药物(χ~2=6.742,P=0.009)的比例高于CSKP组。CRKP组对除替加环素、阿米卡星、复方新诺明等以外的绝大部分临床常用抗生素有较高的耐药率。结论 CRKP肺部感染患者需要警惕其它部位的侵袭性肺炎克雷伯菌感染，尤其需要注意高龄男性，有脑血管基础疾病的人群，CRKP肺部感染对于常用β-内酰胺类抗生素几乎全部耐药，治疗难度较CSKP组高。