丹皮酚抑制TLR4/NF-κB信号通路对子痫前期大鼠的治疗作用及机制研究

目的 探讨丹皮酚通过抑制TLR4/NF-κB信号通路对子痫前期大鼠的治疗作用及机制。方法 建立PE大鼠模型,分为Control组,Model组,丹皮酚低、中、高剂量组(Pae-L、Pae-M、Pae-H组)和丹皮酚高剂量+脂多糖组(Pae-H+LPS组)。尾带血压计检测大鼠收缩压;记录胚胎存活数、胎儿与胎盘质量;ELISA检测尿蛋白质(UP)、胎盘生长因子(PLGF)、可溶性酪氨酸激酶受体-1(sFlt-1)和血管内皮生长因子(VEGF)水平、炎症因子及氧化应激相关指标;H-E染色观察胎盘组织病理学变化;TUNEL检测胎盘组织细胞凋亡;Western blot检测凋亡和TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白水平。结果 与Control组相比,Model组大鼠胎盘组织细胞肿胀和空泡化增加,炎症细胞浸润Rapamycin说明书及纤维样坏死增加;SBP、UP、sFlt-1、TNF-α、IL-6、IFN-γ、ROS和MDA水平、细胞凋亡率及Bax、Caspase-3、TLR4和NF-κB p65蛋白表达显著增加(P<0.05non-immunosensing methods),胎儿质量、PLGF、VEGF和SOD水平及Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05)。与Model组相比,Pae-L组、Pae-M组和Pae-H组大鼠胎盘组织炎症浸润减轻,新生血管增多;SBP、UP、sFlt-1、TNF-α、IL-6、IFN-γ、ROS和MDA水平、细胞凋亡率及Bax、Caspase-3、TLR4和NF-κB p65蛋白表达显更多著降低(P<0.05),胎儿质量、PLGF、VEGF和SOD水平及Bcl-2蛋白表达显著增加(P<0.05)。TLR4通路抑制剂LPS逆转了丹皮酚对PE大鼠的保护作用。结论 丹皮酚对子痫前期大鼠的治疗作用可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。

四项行动法延伸护理对系统性红斑狼疮患者负性情绪及生活质量的影响

目的 分析四项行动法延伸护理对系统性红斑狼疮患者负性情绪及生活质量的影响。方法 将2020年7月至2022年12月我院Hepatic MALT lymphoma治疗的60例系统性红斑狼疮患者纳入研究对象,按数字随机分组法将患者分为观察组(3MK-2206体内0例)和参考组(30例),参考组患者实施常规护理措施干预,观察组患者在参考组的基础上实施四项行动Imidazole ketone erastin临床试验法延伸护理,对比分析两组系统性红斑狼疮患者干预前后生活质量评分、焦虑抑郁评分改善情况。结果 两组系统性红斑狼疮患者干预前生活质量评分、焦虑抑郁评分相比均无明显差异(P> 0.05),护理干预后生活质量评分、焦虑抑郁评分均显著改善(P <0.05),且观察组系统性红斑狼疮患者干预后各项生活质量评分、焦虑抑郁评分优于参考组(P <0.05)。结论 四项行动法延伸护理能有效改善对系统性红斑狼疮患者不良心理状态,提高系统性红斑狼疮患者的生活质量。

抗菌型贝壳粉涂料及其性能研究

社会在进步,人们对建筑避风雨、御寒暑的需求已经逐渐演变为对高品质生活的追求。随之而来的是消费者健康意识的日益增强,对建筑产品健康功能的需求不断提高。然而,各种有害细菌甚至霉菌等微生物无孔不入,给人们的生存和健康带来了很多困扰。由于孢子在内墙涂层表面长时间存活并大量繁殖,使涂膜失去其保护功能,会影响涂料外观,有害微生物的泛滥甚至还会使致敏者产生过敏反应,引起人畜中毒,严重影响人们的生活品质。这种形势下,绿色、环保的建筑装饰材料的研发、生产成为趋势并已渐成规模,对贝壳粉涂料的研究开发也应运而生了。贝壳粉涂料具有优异的抗菌性能和超强的空气净化功能,生产原料贝壳为废弃物,取材方便,价格低廉,推广前景非常好。本课题主要开展的研究及结论如下:首先,对贝壳粉进行200~1100℃煅烧改性。对煅烧贝壳粉的CNS nanomedicine理化特征进行探究,发现在煅烧温度达到400℃时,贝壳粉中存在的少量有机质完全消失。从500℃起有Ca O出现,但达到800℃前基本物质仍为Ca CO_3。继续升温至900℃时,完全分解生成活性Ca O,失重率稳定在44.32%,表观活化能为205.99 k J·mol~(-1),明显低于石灰石的表观活化能(300 k J·mol~(-1))。试验还发现,煅烧贝壳粉的抗菌性在一定范围selleck抑制剂内随着煅烧温度的提高而增强。煅烧温度达800℃以上时的p H值超过12.43,远超出了适宜细菌生长的酸碱度,进一步取得强灭菌活性。在煅烧温度1000℃、煅烧时间2h时,抗菌优化效果基本趋于饱和状态,为制作抗菌型贝壳粉涂料的研究创造了条件。接着,采用均匀沉淀法和溶胶-凝胶法,分别制备Zn O/贝壳粉和Ti O_2/贝壳粉复合抗菌材料,对二者的抗菌活性进行了比较,以期对抗菌助剂及其制备条件进行选择。对比煅烧温度、抗菌剂浓度以及光照条件对抗菌活性的影响后,认为Zn O/贝壳粉抑菌性整体优于Ti O_2/贝壳粉。因此,选用纳米Zn O作为抗菌助剂,并以抗菌助剂与载体质量比1:1、热处理温度700℃、煅烧时间3h为最优制备条件的Zn O/贝壳粉作为抗菌型贝壳粉涂料的功能填料。最后,以Zn O/贝壳粉作为重要功能填料,制备抗菌型贝壳粉涂料。通过正交试验对抗菌型贝壳粉涂料配比进行优化设计后,进一步对比了不同含量的Zn O/贝壳粉复合材料对抗菌型贝壳粉涂料的调湿性能、甲醛吸附性及抗菌性能的影响,最终得到优化配比为Zn O/贝壳粉:重钙:钛白粉:乳液=17:11.4GSK126分子式5:13:10。按此配比,涂层24h吸放湿量达到约0.10833 kg/m~2和0.049 kg/m~2;甲醛净化率达到80.22%以上,持久净化率超过65.35%;抑菌性达到99.8%(金黄色葡萄球菌)和98.2%(大肠杆菌)。综上所述,对天然贝壳粉进行高温煅烧改性,并以煅烧贝壳粉作为载体,以纳米Zn O作为抗菌助剂对其进行负载。最后将制备的贝壳粉负载型抗菌剂添加到抗菌型贝壳粉涂料当中,通过配方设计,获得综合性能较优的抗菌型贝壳粉涂料。对抗菌型贝壳粉涂料进行各项基本性能检验后,证实了抗菌型贝壳粉涂料的各项性能指标完全符合相应国家标准的要求。

基于PI3K/Akt信号通路探讨桃红四物汤促进老年股骨粗隆间骨折患者PFNA术后骨折愈合的疗效及其机制

目的:基于磷酯酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸蛋白激PLX5622分子式酶(Akt)信号通路探讨桃红四物汤促进老年股骨粗隆间骨折患者股骨近端抗旋髓内钉(PFNA)术后骨折愈合的疗效及其机制。方法:选取2021年7月-2022年12月期间遂宁市中医院收治的90例老年股骨粗隆间骨折行PFNA术患者,按照随机数字表法将患者分为对照组和研究组,各为45例。对照组术后接受常规干预,研究组在对照组基础上接受桃红四物汤干预。对比两组中医证候积分、骨折愈合时间、Harris髋关节功能评分、血液流变学、PI3K/Akt信号通路相关指标。结果:治疗后研究组髋部疼痛、痛有定处、神疲乏力、患肢软而无力、头晕眼花、失眠健忘、自汗畏风寒、胸闷气短、肌肤甲错、面色晄白无华评分和总分低于对照组(P<0.Genetic alteration05)。研究组的骨折愈合时间短于对照组,Harris髋关节功能评分高于对照组(P<0.05)。研究组的红细胞压积、血浆比黏度、全血比黏度、红细胞电泳时间低于对照组(P<0.05)。研究组治疗后PI3K m RNA、Aktm RNA高于对照组(P<0.05)。结论:老年股骨粗隆间骨折患者PFNA术后使用桃红四物汤,可促进患者临床预后转归,降低中医证候积分,促进髋关节功能恢复,缩短骨折愈合时间,改善机体血液流变学,调节PI3K/AktNavitoclax说明书信号通路表达。

田蓟苷通过激活AMPK/SIRT1/PGC-1α信号通路抑制LPS诱导的肺泡上皮细胞铁死亡

目的 探讨田蓟苷对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞铁死亡的影响及潜在机制。方法 将培养的人肺泡上皮细胞BEAS-2B分为对照组(正常培养)、LPS组、田蓟苷低剂量组(20μmol/L)、田蓟苷中剂量组(50μmol/L)、田蓟苷高剂量组(100μmol/L)、Compound C(ComC)抑制剂组[100μmol/L田蓟苷+10μmol/L腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)的抑制剂ComC]。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测BEAS-2B细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,DCFH-DA荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)水平,分光光度GDC-0973 IC50法检测细胞内丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、Fe~(2+)水平;Western blotting法检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、转铁蛋白Uyghur medicine(Tf)、增殖细胞核抗原selleck激酶抑制剂(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)及AMPK/沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)信号通路蛋白表达。结果 与对照组相比,LPS组BEAS-2B细胞的A_(490)值、还原型GSH、GPX4、PCNA、磷酸化AMPK(p-AMPK)/AMPK、SIRT1、PGC-1α蛋白表达显著降低(P<0.05),凋亡率、ROS、MDA、Fe~(2+)水平,以及Tf、Bax、caspase-3蛋白表达显著升高(P<0.05);与LPS组比较,田蓟苷低、中、高剂量组BEAS-2B细胞的A_(490)值、还原型GSH水平、GPX4、PCNA、p-AMPK/AMPK、SIRT1、PGC-1α蛋白表达显著升高(P<0.05),凋亡率、ROS、MDA、Fe~(2+)水平、Tf、Bax、caspase-3表达显著降低(P<0.05);与田蓟苷高剂量组比较,ComC抑制剂组BEAS-2B细胞的A_(490)值、还原型GSH水平、GPX4、PCNA、p-AMPK/AMPK、SIRT1、PGC-1α蛋白表达显著降低(P<0.05),凋亡率、ROS、MDA、Fe~(2+)水平,以及Tf、Bax、caspase-3蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论 田蓟苷通过激活AMPK/SIRT1/PGC-1α信号通路抑制LPS诱导的肺泡上皮细胞铁死亡。

基于GEO数据库分析新型冠状病毒感染患者继发心肌损伤的分子机制及中药预测

目的:借助生物信息学技术分析GEO数据库中新型冠状病毒感染心肌细胞的基因表达数据,尝试探究其分子机制,并预测治疗的潜在中药medical financial hardship。方法:在GEO数据库中获得新型冠状病毒感染心肌细胞的基因表达谱数据集GSE185602,利用Excel软件进行分析,筛选差异基因,并进行蛋白质-蛋白质相互作用网络分析,筛选核心基因。对差异基因进行富集分析,获得相关信号通路。结合核心基因和信号通路分析疾病的分子机制。将核心基因与coremine medica数据库映射,获得治疗的潜在中药。结果:研究获得差异基因共232个,其中上调基因128个、下调基因92个,富集分析获得20条信号通路,映射到潜在治疗中药65味。结论:本研究发现新型冠状病毒感染患者继发心肌损伤可能参与补体和凝血级联、细胞色素P450(CytochMRTX849临床试验rome P450,CYP)代谢异生素和磷脂酰肌醇3激酶(PhosphatidylMK-4827供应商inositol 3-kinase,PI3K)-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(RAC-alpha Serine/Threonine-protein Kinase,AKT)信号通路发生,多种中药可具有潜在治疗作用,注意随证选用。

移植前供受者混合淋巴细胞反应后转录组测序预测重度急性移植物抗宿主病

研究背景:异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)是目前治疗多种恶性血液selleck抑制剂病和非恶性血液病的重要方法,而重度急性移植物抗宿主病(aGVHD)是导致移植后非复发死亡的主要原因。针对该病的有效预测对防治aGVHD,改善移植预后至关重要。混合淋巴细胞反应(MLR)是模拟移植供受者同种异体排斥反应的经典实验。有研究报道仅检测MLR细胞的增殖状态无法准确预测aGVHD。随着高通量测序的广泛应用,RNA测序结果可从转录组水平多维度展现细胞状态。机器学习算法可以非线性拟合的方式解析疾病相关的高通量结果,以识别生物和医学研究数据中的关键特征,近年来该算法已被快速地应用于aGVHD的风险预测研究中。因此,从转录组水平探究移植前的供受者MLR细胞状态与aGVHD的关系,结合机器学习算法预测aGVHD发生风险可能为预测重度aGVHD和移植前优化供者选择提供新的见解和策略。研究目的:本研究的目的是从转录组水平探究MLR细胞状态与aGVHD的关系,明确供受者MLR细胞的转录组测序结果结合机器学习算法是否可以有效预测重度aGVHD。此外,我们还想进一步评估MLR相关特征基因在aGVHD及其靶器官中的作用,筛选出具有干预潜力的治疗靶点,为aGVHD防治提供新的思路和见解。研究方法:本研究共收集了 86例供受者外周血样本及其临床资料,同时收集了 57对人类白细胞抗原(HLA)不匹配(即HLA相合程度低于5/10)的异体配对(HMAP)血液样本以模拟更为剧烈的排斥反应。我们从这些外周血样本中分离出单个核细胞,随后进行MLR实验,数天后提取RNA并测序。通过生物信息学分析与重度aGVHD相关的基因和生物学过程,使用机器学习算法识别重度aGVHD的特征基因,构建预测模型。为进一步评估MLR相关的特征基因在aGVHD及其靶器官中的作用,我们将靶向特征基因的sgRNA文库和Cas9基因导入人原代T细胞,在人源化aGVHD小鼠模型中作为供者T细胞,以评价基因在aGVHDActive infection中的作用。研究结果:1.相比于0-Ⅱ度aGVHD组MLR细胞的转录组结果,Ⅲ-Ⅳ度aGVHD组和HMAP组的结果显示抗原提呈和细胞杀伤过程上调,脂代谢和维他命反应下调。2.通过加权相关网络分析(WGCNA)和竞争性内源RNA(ceRNA)调控分析,我们发现MAPK/ERK1/2级联信号通路与重度aGVHD高度相关。3.将包含MLR测序结果和临床资料的患者数据随机分为训练集和验证集,在训练集中采用随机森林(RF)算法和支持向量机(SVM)算法计算对预测精度有贡献的特征基因并建模,验证集中预测重度aGVHD的RF模型和SVM模型的曲线下面积(AUC)分别为0.9和0.92。4.将靶向特征基因集的sgRNA慢病毒文库感染T细胞构建人源化aGVHD小鼠模型,通过分析小鼠发病时富集的各靶器官的人T细胞基因组的结果发现,aGVHD时不同靶器官中的特征基因分布不同。我们的分析也发现FOXP3、ZBTB7B、TNFRSF14和RUNX1等基因可能是防治aGVHD的潜在干预靶点。研究结论:移植前供受者MLR细胞的转录组结果结合机器学习算法可有效预测重度aGVHD,该结果为临床上重度aGVHD的预测以及移植前优化供者选择提供了一种新策略。研究背景:血液病患者是感染耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)的高危人群,且CRE血流感染(BSI)具有较高的死亡率。早期靶向CRE的经验治疗可显著降低CREBSI患者的死亡率。CRE定植患者和曾感染CRE的患者通常具有更高的继发CRE BSI的风险,但若因此对所有检测出CRE的患者进行早期预防用药会导致抗生素滥用,加重不会继发CRE BSI患者的经济负担。因此亟待开发出针对发生CRE定植和感染的血液病患者继发CRE BSI的预测工具,以识别出具有资格接受经验性抗CRE治疗的高危患者,从而改善该群患者的预后。研究目的:构建肛周皮肤拭子检测出CRE阳性的血液病患者继发CRE BSI的预测风险模型,从而识别出可以尽早接受经验性抗CRE治疗的高危人群。研究方法:本研究回顾分析了于我院2017年10月10日至2021年7月31日入院的所有肛周拭子检测到CRE的血液病患者的临床资料,并根据是否继发CRE BSI进行分组,分析了继发CREBSI的影响因素。依据影响因素开发了多变量的Logistic回归预测模型,使用增强的Bootstrap法对该模型的效能进行了内部验证。研究结果:总共有421例在肛周拭子检测出CRE阳性的血液病患者进入本研究,其中5Telaglenastat分子式9例患者继发了 CREBSI。通过对继发BSI组和未继发BSI组的患者的变量进行多因素 logistic 回归分析显示,年龄(OR=1.04,95%CI:1.01-1.06,P=0.004)、美罗培南和亚胺培南对肛周样本中CRE菌株的最低抑菌浓度(MIC)均>8ug/ml(OR=5.34,95%CI:2.63-11.5,P<0.001),观察期内出现胃肠道症状(OR=3.67,95%CI:1.82-7.58,P<0.001),最低的中性粒细胞绝对值>0.025(109/L)(OR=0.07,95%CI:(0.02-0.19,P<0.001)和发热时伴寒颤(OR=6.94,95%CI:(2.60-19.2,P<0.001)是影响血液病患者继发CREBSI的独立影响因素,并以此构建预测模型。当以该模型预测概率的临界值(21.5%)进行危险分组时,该模型的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为79.7%、85.6%、96.27%和47.47%。该模型的区分度和校准度在原始训练集上(C-统计量为0.8898;Brier分数为0.079)和增强Bootstrap内部验证集上(调整后的C统计位0.881;调整后的Brier分数为0.083)的结果较好。该风险预测模型制作为移动应用程序可通过电脑端或手机端登陆网址https://liujia1992.shinyapps.io/dynnomapp/.免费获得。研究结论:基于年龄、美罗培南和亚胺培南对肛周检出CRE菌株的MIC值、是否出现胃肠道症状、最低的中性粒细胞绝对值和发热时是否伴寒颤的预测模型可用于对肛周拭子检出CRE的血液病患者进行更好的靶向干预。

冲泡条件对咸茶茶汤活性成分及其抗氧化活性的影响

目的:研究不同冲泡条件对咸茶茶汤中活性成此网站分含量的影响并研究其抗氧化活性。方法:以咸茶为原料,研究不同冲泡条件对咸茶多酚、总黄酮冲泡率的影响,并以羟自由基、超氧自由基、DPPH自由基、ABTS自由基的清除率为指标,探究咸茶茶汤的抗氧化能力,分析其抗氧化能力与茶汤中多酚、总黄酮含量之间的关系。结果:料液比、冲泡温HIV-related medical mistrust and PrEP度、冲泡时间、冲泡次数以及料液比、冲泡温度、冲泡时间分别与冲泡次数的交互作用对咸茶茶汤多酚、总黄酮冲泡率均具有极显著影响(P<0.01);冲泡次数对咸茶茶汤清除羟自由基、超氧自由基、DPPH自由基、ABTS自由基能力均具有极显著影响(P<0.01)。咸茶分别经料液比为1∶40 g/mL、冲泡温度95℃、冲泡时间7 min、第1次冲泡(多酚含量为0.009 7 mg/mL)和料RSL3细胞培养液比为1∶100 g/mL、冲泡温度100℃、冲泡时间11 min、第1次冲泡(总黄酮含量为0.027 mg/mL)制备而成的茶汤对羟自由基、超氧自由基、DPPH自由基、ABTS自由基的清除率均极显著高于0.25 mg/mL茶多酚(P<0.01);与茶多酚阳性对照相比较,咸茶茶汤具有良好的抗氧化活性。结论:本研究可为咸茶的科学冲泡、推广及其功能研究提供科学依据。

野山参超微粉的抗疲劳作用及其机制

疲劳是人们日常生活中经常发生的一种生理现象,通常经过休息后可恢复。然而随着人们工作时间和工作强度不断增大,疲劳现象经常得不到及时有效缓解,可能诱发高血压、心绞痛、神经衰弱等病症,损害人们健康。目前抗疲劳药物品类较多,但疗效并不理想且作用有限,开发一种新的药物对于缓解人体疲劳,保护人体健康有重要意义。人参(Panax ginseng C.A.Meyer)是五加科、人参属多年生草本植物,具有调整血压、恢复心脏功能、抗神经衰弱及抗疲劳等功效。中华人民共和国国家标准《野山参鉴定及分等质量》(GB/T 18765-2015)中,将人工播种在野生山林,自然生长15年以上的人参称为“野山参”。本论文研究对象为在山林下自然生长16年的林下山参(下称野山参),其在总皂苷及某些单体皂苷上与园参有所差别。超微粉具有免煎煮、易服用、原生态等多种优势。将生晒野山参粉碎成直径小于45μm的超微粉,即野山参超微粉(Wild ginseng superfine powder,WGSP)。研究目的:本实验研究目的为观察野山参超微粉对小鼠的抗体力疲劳的作用及其机制。研究方法:1.野山参超微粉抗小鼠体力疲劳作用的研究1.1爬杆实验将40只小鼠按体重随机分为空白对照(Control)组和WGSP 100、200、400 mg/kg组,每组10只。Control组小鼠灌胃(ig)给予0.5%CMC-Na 20m L/kg,其余各组小鼠分别ig给予相应剂量药物20 m L/kg,1次/天,连续给药30天。每天给药前记录小鼠体重及摄食量;第28-29天开始进行爬杆训练,第30天药后1 h,进行小鼠爬杆测试,记录小鼠10 min内在杆上的时间记为爬杆时间。爬杆结束后取心、肺、肝及双后肢小腿骨骼肌,称重并计算脏器系Appropriate antibiotic use数。1.2游泳力竭实验分组及给药方法同1.1。第29天药后1 h进行游泳预适应,将小鼠分别单独放入水深25 cm,水温为25-30℃的游泳缸(长′宽′高=23′8′28 cm)中,无负重游泳10 min;第30天药后1 h,将小鼠尾部负重为自身体重6%的铅块,进行游泳力竭实验,判断小鼠力竭以小鼠头部沉入水中10 s未浮出水面为标准,记录游泳力竭时间。1.3跑步机实验分组及给药方法同1.1。第27-29天药后1 h,开始对小鼠进行跑步训练。第30天给药1 h后,对小鼠进行跑步测试,跑步速度以14 m/min开始,跑步速度以2 m/min增加,当速度达到34 m/min时不再增加,当小鼠在距电击网一个身体长度的“疲劳区”停留5 s以上,判断为小鼠疲劳,记录小鼠开始跑步到力竭的时间和跑步距离。1.4血乳酸含量、肌糖原及肝糖原含量测定分组及给药方法同1.1。第30天药后1 h,将小鼠尾部负重自身体重5%的铅块,游泳10 min,游泳结束后擦干水分,将小鼠放回原饲养笼中休息20 min,分别于游泳前、游泳10min后及休息20 min后取静脉血,检测小鼠乳酸(Lactic acid,LA)含量并计算乳酸变化曲线下面积;采集肝及左后肢小腿骨骼肌,生化试剂盒检测肌糖原及肝糖原含量。1.5血清尿素氮含量测定分组及给药方法同1.1。第30天药后1 h,将小鼠分别单独放入水深25 cm,水温为25-30℃的游泳桶(r=12 cm)中,无负重游泳90 min,游泳结束后擦干水分,将小鼠放回原饲养笼中休息60 min后,眼球取血,生化试剂盒检测血清中血清尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)含量。2.野山参超微粉抗体力疲劳的作用机制研究2.1氧化应激损伤相关指标检测分组及给药方法同1.1。第30天药后1 h,进行小鼠负重游泳实验,将小鼠放入水深25 cm,水温为25-30℃的游泳缸(长′宽′高=23′8′28 cm)中,尾部负重自身体重5%的铅块,游泳10 min,游泳结束后眼球取血及小鼠左后肢骨骼肌。生化试剂盒检测血清中乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)和肌酸激酶(AY-22989 IC50Creatine kinase,CK)活性,肌肉组织中总超氧化物歧化酶(Total superoxide dismutase,T-SOD)活性及丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量。2.2肝脏、骨骼肌ATP酶活性及ATP含量检测取2.1实验小鼠的肝组织及右后肢小腿骨骼肌,生化试剂盒检测肌肉和肝组织中Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶、Na~+-K~+-ATP酶活性及肌肉组织ATP含量。2.3骨骼肌线粒体氧化呼吸链相关蛋白m RNA表达水平取1.2实验小鼠的右后肢小腿骨骼肌,q RT-PCR检测线粒体氧化呼吸链复合体I-V表达水平。2.4骨骼肌线粒体mt DNA拷贝数检测取1.2实验小鼠的右后肢小腿骨骼肌,q RT-PCR检测线粒体mt DNA拷贝数。2.5骨骼肌AMPK/PGC-1α信号通路相关蛋白检测取1.2实验小鼠的右后肢小腿骨骼肌,Western Blot检测骨骼肌组织AMPK/PGC-1α信号通路相关蛋白表达水平。研究结果:1.野山参超微粉抗小鼠体力疲劳的作用研究1.1与Control组比较,WGSP 100、200和400 mg/kg组小鼠每天摄食量、每周平均体重及心、肺、肝、骨骼肌脏器系数均无明显改变(P>0.05),WGSP200和400 mg/kg可使小鼠爬杆时间明显延长(P<0.05);1.2与ConLGX818价格trol组比较,WGSP 200和400 mg/kg可使小鼠游泳力竭时间明显延长(P<0.05或P<0.01);1.3与Control组比较,WGSP 200和400 mg/kg可使小鼠跑步时间及跑步距离明显增加(P<0.05或P<0.01);1.4与Control组比较,WGSP 100、200和400 mg/kg组小鼠乳酸变化曲线下面积明显缩小,肌糖原含量明显减少,肝糖原含量明显增加(P<0.05或P<0.01);1.5与Control组比较,WGSP 100、200和400 mg/kg组小鼠BUN含量明显降低(P<0.01)。2.野山参超微粉抗体力疲劳的作用机制研究2.1与Control组比较,WGSP 200和400 mg/kg组小鼠骨骼肌T-SOD活性明显增加,MDA含量明显减少(P<0.05或P<0.01);与Control组比较,WGSP100、200和400 mg/kg组小鼠血清LDH活性明显降低(P<0.05或P<0.01),WGSP 200和400 mg/kg组小鼠血清CK活性明显降低(P<0.05或P<0.01);2.2与Control组比较,WGSP 100、200和400 mg/kg组小鼠肝脏组织中Na~+-K~+-ATP酶和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活性无明显改变(P>0.05),肌肉组织中Na~+-K~+-ATP酶和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活性明显升高(P<0.05或P<0.01),WGSP 200和400mg/kg组小鼠骨骼肌ATP含量明显增加(P<0.01);2.3与Control组比较,WGSP 100、200和400 mg/kg组小鼠骨骼肌中MT-CO1、MT-CO2和MT-CO3 m RNA水平明显增加(P<0.01),WGSP 200和400mg/kg组小鼠骨骼肌中COX4il、ATP5a1 m RNA水平明显增加(P<0.01);2.4与Control组比较,WGSP 200和400 mg/kg组小鼠骨骼肌中线粒体DNA标志基因D-loop表达明显增加(P<0.01);2.5与Control组比较,WGSP 100、200和400 mg/kg组小鼠骨骼肌p-AMPK、PGC-1α、NRF1和TFAM蛋白表达明显增加(P<0.05或P<0.01)。研究结论:本研究结果显示,WGSP能明显增加小鼠游泳力竭时间、爬杆时间、跑步时间和跑步距离,减少LA和BUN含量,增加线粒体数量并增强骨骼肌线粒体功能,减轻运动损伤,其作用可能与活化AMPK/PGC-1α信号通路有关。

miR-139-5p、miR-27a-3p和SLC7A11表达与胶质瘤临床病理因素间的相关性研究

目的:探讨miR-139-5p、miR-27a-3p和SLC7A11表达与胶质瘤临床病理因素间的相关性,评价其在脑胶质瘤诊断、疗效预测及预后判断中的价值。方法:基于CGGA数据库探讨不同级别(2、3、4级)胶质瘤miR-139-5p、miR-27a-3p和SLC7A11的表达水平,评估其对胶质瘤生存的影响;采用蛋白免疫印迹法(Western Blot,WB)和定量实时聚合酶链式反应(Quantitative real-time polymerase chain reaction,q-PCR)分别检测胶质瘤组织、正常对照脑组织SLC7A11和miR-139-5p、miR-27a-3p、SLC7A11 mRNA的表达水平,评价miR-139-5p、miR-27a-3p和SLC7A11 mRNA与脑胶质瘤临床病理因素和预后间的相关性,并验证生物信息学结果。数据统计分析采用SPSS 22.0、image J和Graph Pad Prism 9.0软件。结果:1.生物信息学分析显示SLC7A11在低级别胶质瘤和胶质母细胞瘤中的表达显著高于正常对照脑组织(P<0.001);miR-139-5p在2级、3级及4级胶质瘤中的表达差异显著(P<0.001),且随胶质瘤分级的增加依次递减;miR-27a-3p在低级别胶质瘤中的表达低于高级别胶质瘤(P<0.001);miR-139-5p高表达胶质瘤的生存期显著高于低表达胶质瘤(P<0.001),而miR-27a-3p低表达胶质瘤的生存期显著高于高表达胶质瘤(P<0.001);SLC7A11 mRNA高表达胶质瘤的生存期显著高于低表达胶质瘤(P<0.01)。2.胶质瘤SLC7A11 mRNA的表达显著高于正常对照脑组织(P<0.05),且低级别胶质瘤中SLC7A11 mRNA表达低于高级别胶质瘤(P<0.05);2级与4级胶质瘤间SLC7A11 mRNA表达差异显著(P<0.05),而2级与3级、3级与4级胶质瘤间SLC7A11 mRNA表达无统计学差异(P>0.05);SLC7A11蛋白在正常脑组织表达低于胶质瘤,且高级别胶质瘤的表达更高。3.高VX-765试剂级别胶质瘤(3级胶质瘤+4级胶质瘤)miR-139-5p表达显著低于非高级别胶质瘤(正常对照脑组织+2级胶质瘤)(P<0.05);miR-27a-3p在正常对照脑组织和胶质瘤组织中的表达无统计学差异(P>0.05),且miR-27a-3p表达与胶质瘤分级间无相关性(P>0.05)。4.胶质瘤miR-139-5p表达与MGMT甲基化状态和WHO分级间具有相关性(P<0.05),且MGMT甲基化阳性、低分级胶质瘤表达升高;SLC7A11 mRNA表达与Ki67、P53突变状态、MGMT甲基化状态及WHO分级显著相关(P<0.05),且高Ki-67(>20%)、P53突变型、MGMT甲基化阴性、及高分级胶质瘤表达升高;miR-27a-3p表达与Ki67、P53突变状态、MGMT甲基化状态及WHO分级间无相关性(P>0.05)。5.miR-139-5p高表达胶质瘤的生存期显Imidazole ketone erastin研究购买著高于低表达胶质瘤(P<0.05),而miR-27a-3p表达水平与脑胶质瘤生存期间无统计学差异(P>0.05);SLC7A11mRNA低表达胶质瘤生存期显著高于高表达胶质瘤(P<0.05);Cox单因素分析显示miR-139-5p、SLC7A11 mRNA表达水平、肿瘤部位、WHO分级及Ki-67与胶质瘤预后相关(P<0.05),且miR-139-5p低表达,SLC7A11 mRNA高表达,颞部,高级别与高Ki-67(>20%)的胶genetic risk质瘤患者预后较差。而Cox多因素分析未发现胶质瘤患者预后的独立预后危险因素(P>0.05)。6.胶质瘤miR-139-5p与SLC7A11 mRNA表达间呈显著呈负相关(r_s=-0.407,P<0.05),而miR-27a-3p与SLC7A11 mRNA表达间无相关性(rs=0.196,P>0.05);ROC曲线分析显示miR-139-5p和SLC7A11 mRNA对高级别胶质瘤具有较高的诊断效能(AUC=0.8429,P<0.05;AUC=0.8786,P<0.05),而miR-27a-3p的诊断效能低(AUC=0.5607,P>0.05)。结论:1.高级别胶质瘤SLC7A11 mRNA表达高于低级别胶质瘤、miR-139-5p表达低于低级别胶质瘤,而miR-27a-3p表达与胶质瘤分级间无相关性,因此miR-139-5p、SLC7A11 mRNA表达对胶质瘤WHO分级有一定的预测价值;2.胶质瘤miR-139-5p和SLC7A11mRNA表达与WHO分级、MGMT甲基化状态间存在相关性,而SLC7A11 mRNA表达与Ki67增殖指数、P53突变状态间亦具有相关性,提示miR-139-5p、SLC7A11 mRNA表达与胶质瘤预后间存在相关性;3.胶质瘤miR-139-5p与SLC7A11 mRNA表达间呈显著呈负相关,且miR-139-5p高表达、SLC7A11 mRNA低表达胶质瘤的生存期显著延长,而miR-27a-3p与SLC7A11 mRNA表达间无相关性,miR-139-5p和SLC7A11 mRNA有望成为胶质瘤治疗的潜在靶点。