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消化系统肿瘤是一类实体肿瘤,包括肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)、胆管癌(Cholangio carcinoma,CHOL)、胰腺癌(Pancreatic adenocarcinoma,PAAD)、食管癌(Esophageal carcinoma,ESCA)、胃癌(Gastric carcinoma,GC)、结肠癌(Colon adenocarcinoma,COAD)和直肠癌(Rectum adenocarcinoma,READ)。消化系统肿瘤与全球约三分之一的癌症发病率和死亡率有关此网站,是一个严重的公共卫生威胁。在消化系统肿瘤中,肝细胞肝癌,是一种恶性程度较高的原发性肝癌,它是发病率排名第六,致死率排名第四的恶性肿瘤,具有复发率高、转移率高和恶性程度高等特点。过继细胞疗法,如嵌合抗原受体 T 细胞(Chimeric antigen receptor engineered T-cell,CAR-T)疗法、CAR修饰的自然杀伤细胞(Nature killer,NK)疗法和嵌合抗原受体巨噬细胞(Chimeric Antigen Receptor Macrophage Immunotherapy,CAR-M)疗法是有希望治愈癌症的方法,但这些疗法目前面临的关键问题是免疫细胞注入人体后存在着随机运输问题,这是制约过继细胞疗法疗效的重要因素。既往研究发现,使用基因修饰后的免疫细胞在治疗消化系统肿瘤等实体瘤时,大部分免疫细胞都会在肝脏、肺脏等组织累积,但在实体瘤组织上却只有极少量甚至没有检测到免疫细胞。因此,解决免疫细胞输入人体后运输方向的问题,是提升过继疗法临床疗效的关键。幸运的是,人体中存在着许多趋化因子和趋化因子受体,它们的主要功能是控制细胞的定向运动。我们可以通过筛选合适的趋化因子和趋化因子受体来提升过继细购买GW4869胞疗法的治疗效果。但是筛选出的趋化因子和趋化因子受体需要满足两个条件:一是趋化因子在肿瘤组织中高表达;二是趋化因子和趋化因子受体的匹配具有唯一性。因此,在本课题中,首先我们采用生物信息学分析趋化因子的表达情况。对人体内6种匹配具有双向唯一性的趋化因子轴的趋化因子进行基因表达分析,发现这6种趋化因子中仅有趋化因子CCL20在消化系统肿瘤组织和其他正常组织中的表达是有差异的。我们依次分析了 CCL20在多种消化系统肿瘤组织、癌旁组织和消化系统肿瘤细胞的表达情况,结果显示,CCL20高度表达在消化系统肿瘤组织和肿瘤细胞上。我们又在肝癌皮下成瘤小鼠模型中通过RT-PCR证明了 CCL20在肿瘤组织的mRNA水平高表达,并通过ELISA实验证明皮下成瘤后小鼠的外周血含有较高水平的CCL20。这些结果表明CCL20表达在消化系统肿瘤实质细胞中,并可分泌至外周血中。其次,我们构建了CCR6过表达细胞,分析CCL20-CCR6趋化因子轴对细胞运动的导向作用。通过Transwell实验验证了CCR6-CCL20趋化因子轴可以在体外促进细胞的定向迁移;在小鼠肝癌模型中也证明CCR6-CCL20趋化因子轴可以在体内指导过继转输的免疫细胞定向迁移至肿瘤部位。最后,我们分析了CCR6的过表达对免疫细胞功能的影响。发现CCR6的过表达不仅没有削弱转输的免疫细胞的正常功能,还可以促进这些细胞的活化和功能,可能进一步增强所转输的免疫细胞的抗肿瘤作用。综上,通过本课题我们证明了 CCR6-CCL20趋化因子轴可以介导免疫细胞的定向迁移,分析了CCR6-CCL20趋化因子bioconjugate vaccine轴在消化系统肿瘤过继细胞疗法指导细胞定向运输的潜力,为提高过继免疫细胞疗法在消化系统肿瘤中的治疗效果提供了新的策略。

聚氯乙烯(PVC)作为世界上最早被投入工业化生产的功能性塑料,因为其优良的耐腐蚀性、可塑性、绝缘性以及selleck高强度低成本等特点,在工农业生产及生活中被广泛应用。但PVC制品生产中易受高温影响出现热老化分解现象,这不AIDS-related opportunistic infections仅影响PVC的美观性,更影响了PVC产品的质量。因此,在生产过程中需要考虑添加热稳定剂来改善PVC这一缺陷,其中,铅盐、金属皂类、有机锡和稀土类等是常见的热稳定剂。这些热稳定剂大多存在各种不足,且功能单一。论文制备了一系列多元醇酯基稀土金属醇盐热稳定剂,具有良好的改善PVC热稳定性外,还具有优良的抗菌、塑化及耐紫外线等性能,因此,论文对研究稀土金属醇盐的制备及应用具有较好的参考价值。首先论文以富马酸、甘露醇、醋酸镧为原料,合成了富马酸甘露醇酯基稀土镧金属醇盐(MFE-La):以对甲苯磺酸为催化剂、环己烷为带水剂进行酯化反应,合成了富马酸甘露醇酯,然后在乙醇环境下将多元醇酯与醋酸镧进行反应,得到MFE-La。用傅里叶红外变换光谱(FTIR)、X射线光电子能谱(XPS)和热重分析(TG)表征了稀土金属醇盐的结构与物理性质,并通过烘箱热老化实验和电导率实验考察了MFE-La对PVC的热稳定性,发现MFE与La元素摩尔比例为2:1时热稳定性效果最好,且与点击此处硬脂酸锌复配的比例为Zn:La=1:3时热稳定效果最优。采用表面抗菌实验、光密度(OD)法对MFE-La的抗菌性能进行了测试,对金黄葡萄球菌和大肠杆菌的最高抗菌率均超过99.5%;用溶血性实验探究了金属醇盐的生物相容性,结果表明,MFE-La的溶血率低于5%,符合生物相容性标准。合成了对羟基苯甲酸季戊四醇酯基稀土金属醇盐(PHE-La),表征了PHE-La的结构与物理性质,探究了PHE-La对PVC的热稳定性和抗菌性能,结果表明,添加PHE-La时,PHE与La的摩尔比例为2:1时表现出最好的PVC热稳定性,并在与硬脂酸锌复配比例为Zn:La=1:3时热稳定性最优,而在抗菌方面,当PHE-La的溶血率处于标准值以内时,对金黄葡萄球菌和大肠杆菌的抗菌能力均达到99.5%以上。采用水热法制备了碳量子点负载的Ti O_2复合物(Ti O_2@CQDs),对其进行了详细表征,并从实验和DFT理论计算两方面考察了Ti O_2@CQDs对PHE-La/Zn St_2稳定的PVC耐紫外线降解性能的影响及机制。实验结果显示,Ti O_2@CQDs的使用可以明显减缓PVC光降解,且可在一定程度上改善PVC热稳定性。DFT理论计算结果表明,CQDs属于局域激发,光生电子和空穴易复合,使得CQDs可把紫外线转换为可见光,提升PVC耐紫外光降解能力;CQDs上丰富的羧羰基氧与酮羰基氧能通过形成氢键的方式固定PVC降解产生的HCl,且CQDs上的羟基可以与Zn St_2稳定PVC产生的Zn Cl_2络合,从而抑制“锌烧”。因此,Ti O_2@CQDs是PVC具有多功能的光稳定剂,可以作为PHE-La的光稳定和热稳定辅助剂。

目的观察研究防风通圣散联合30%超分子水杨酸治疗寻常痤疮(肠胃湿热型)的临床疗效,并分别与两者单独应用进行对比,统计分析比较三种治法的疗效、不良反应及复发率,为中医诊治肠胃湿热型痤疮提供更好的思路与方案。方法选取2022年1月至2022年8月期间于广元市中医医院皮肤科门诊诊断为寻常痤疮(肠胃湿热型)的患者,共收集符合条件的病例108例,采用随机数字分组法,每组36例,将患者分为治疗组、对照组1、对照组2。治疗组采用防风通圣散联合30%超分子水杨酸,对照组1防风通圣散改汤剂口服,对照组2外用30%超分子水杨酸Genetic studies。治疗前及治疗4、8周时患者保持面部清洁,明确无化妆品遮盖的情况下,记录皮损变化情况。患者于2、4、6、8周定期就诊,据实记录治疗过程中不良反应发生情况及相应处理措施。完成临床治疗后1月患者门诊复诊,评估是否复发。研究完成后对三组患者GAGS积分、中医症候评分、有效率、复发率、不良反应发生率进行统计学分析。结果1.GAGS评分:三组患者在治疗4周后、8周后GAGS评分均有所下降,经统计学分析,治疗4周后三组组间比较(P=0.045<0.05),治疗8周后三组组间比较(P=0.012<0.01),表明三组患者在治疗4周和8周后GAGS积分差异明显。治疗组在改善皮损方面明显优于两对照组,两对照组间比较未INCB018424化学结构见显著差异。2.中医症候评分:在治疗4周和8周后,三组患者中医症候评分均有显著改善;治疗4周时,三组中医症候比较(P=0.057>0.05),尚无统计学意义;治疗8周后治疗组与对照组1比较(P=0.102>0.05),治疗组与对照组2比较(P=0.003<0.05),对照组1与对照组2比较(P=0.047<0.05),表明联合用药组、口服中药组在改善中医症候评分方面明显优于单用水杨酸组。3.疗效比较:4周时:皮损疗效:治疗组与对照组1(P=0.013<0.05)提示治疗组与对照组1有差异;治疗组与对照组2(P=0.122>0.05)相比提示皮损改善未见显著差异;两对照组间比较(P=0.532>0.05)之无统计学意义,疗效无显著差异。中医症候疗效:治疗组与对照组1(P=0.487>0.05)不存在差异,治疗组与对照组2(P=0.008<0.05)、两对照组(P=0.043<0.05)之间疗效均见显著差异,即联合用药、口服中药在改善患者中医症候疗效上优于单纯用SSA组。8周时:皮损疗效:治疗组与对照组1(P=0.032<0.05)、与对照组2(P=0.010<0.05)比较存在差异,对照组1与对照组2之间(P=0.815>0.05)比较无意义。在治疗8周后,联合用药显著优于两对照组。中医症候疗效:治疗组与对照组1(P=0.277>0.05)无显著差异;治疗组与对照组2(P=0.005<0.05)、对照组1和对照组2之间(P=0.016<0.05)有统计学意义。治疗8周后,治疗组和对照组1在改善中医症候疗效上优于对照组2。4.不良反应:三组不良反应发生率统计分析得出X~2=0.36CB-839浓度9,P=0.832>0.05,三组间不良反应率无明显差异。5.复发率:三组复发率比较(X~2=3.149,P=0.207>0.05)无显著差异。结论防风通圣散联合30%超分子水杨酸治疗寻常痤疮(肠胃湿热型)的临床疗效肯定,可明显改善患者皮损及中医症候,不良反应极少,复发率低。两者联用效果明显优于单独应用,且患者依从性好,是一种安全有效的新方法,扩大了防风通圣散的临床应用。

目的:探究白杨素对溃疡性结肠炎的作用及其机制。方法:60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、美沙拉嗪(200 mg/kg)组模型Etoposide化学结构组及白杨素低(25 mg/kg)、中(50 mg/kg)、高(100 mg/kg)剂量组,每组10只。3%葡聚糖硫酸钠喂养1 w联合2%冰醋酸直肠灌注一次制备UC大鼠模型。对各组大鼠进行DAI评分,HE染色观察结肠组织病理学变化,透射电镜观察结肠线粒体超微结构。ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α及结肠组织4-HNE水平,比色法检测结肠组织MDA水平,Western Blot检测结肠组织IL-1β、IL-6、TNF-α、Bcl-2、Bax、cleaved Caspase-3、SIRT3、OGG1、p-IκBα、p-NF-κB P65蛋白表达及NF-κB P65核转移情况。体外培养结肠上皮细胞(NCM460),实验设正常对照组、白杨素(100μmol/L)对照组、模型组及白杨素1、10、100μmol/L组。DCFH-DA荧光探针检测细胞ROS水平,比色法检测细胞MDA水平,Western Blot和(或)免疫荧光法检测细胞Bcl-2、Bax、cleaved Caspase-3、SIRT3、OGG1、p-IκBα、p-NF-κB P65的蛋白表达及NF-κB P65核转移情况。结果:体内实验中,与模型组比较,各给药组大鼠体质量显著升高,DAI评分显著降低(P<0.05或P<0.01),结肠病理损伤明显缓解Bemcentinib细胞培养;血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平与结肠组织IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达显著降低,结肠组织Bcl-2蛋白表达显著升高,Bax、cleaved Caspase-3蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01);结肠线粒体损伤明显减轻,SIRT3、OGG1蛋白表达显著升高,MDA、4-HNE水平显著降低,IκBα、NF-κB P65磷酸化水平与NF-κB P65核转移程度显著降低(P<0.05或P<0.01)。体外实验中,与模型组比较,白杨素各组ROS、MDA、4-HNE、IL-1β、IL-6、TNF-α水平显著降低,SIRT3、OGG1蛋白表达显著升高,IκBα、NF-κB P65磷酸化程度及NF-κB P65核转移水平显著降低(P<0.05或P<0.01),线粒体损伤减轻。结论:白杨素对UC具有一定的缓解作用Unani medicine,其机制可能与减轻线粒体氧化应激损伤,抑制NF-κB信号通路活化,降低炎症反应和细胞凋亡有关。

目的 探究芹菜素（AP）调节磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶（PI3K/Akt/mTOR）信号通路对慢性湿疹（CE）大鼠炎症反应的影响。方法 试验分为对照组（NC组）、慢性湿疹模型组（CE组）、芹菜素低剂量处理组（L-AP组）、芹菜素高剂量处理组（H-AP组）、芹菜素高剂量+Akt激活剂SC79处理组（H-AP+SC组），每组12只。对各组大鼠进行耳变应评分；计算免疫器官胸腺、脾脏指数；HE染色检测大鼠皮肤组织病理变化；ELISA试剂盒测定大鼠血清中炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平；试剂盒测定大鼠血清中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平；Western blot法检测大鼠皮肤组织匀浆中磷酸化PI3K(p-PI3K)、PI3K、磷酸化Akt(p-Akt)、Akt、磷酸化mTOR(p-mTOR)和mTOR蛋白水平。结果 与NC组比较，CE组大鼠皮肤组织表皮角化不全，颗粒层增厚且有大量炎性细胞浸润，耳变应评分（1、7、14、28 d）、脾脏指数、胸腺指数、IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mJapanese medakaTOR水平升高，GSHPx、CAT、SOD水平降低，差异均有统计学意义（t=33.418、40.639、43.453、47.331、29.230、25.804、23.839、21.00selleckchem Ipatasertib4、23.292、29.250、28.234、19.141、14.448、30.165、26.123、24.741,P均<0.05）。与CE组比较，L-AP组、H-AP组大鼠表皮角化程度改善，颗粒层变薄且炎性细胞减少，耳变应评分（7、14、28 d）、脾脏指数、胸腺指数、IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR水平降低，GSH-Px、CAT、SOD水平升高，差异均有统计学意义（tCE组vs. L-AP组=8.154、12.554、17.703、28.676、22.530、32.485、12.846、23.458、10.976、20.990、12.758、20.081、7.067、16.987、9.304,tCE组vs. H-AP组=19.706、13.812、22.883、11.728、23.022、9.390、16.974、6.192、13.416、12.189、27.622、13.885、23.308、9.213、17.344,P均<0.05），且H-AP组上述指标变化较L-AP组显著，差异均有统计学意义（P均<0.05）。与H-AP组比较，H-AP+SC组大鼠表皮角化程度加Erdafitinib溶解度重、颗粒层增厚且炎性细胞增多，耳变应评分（7、14、28 d）、脾脏指数、胸腺指数、IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR水平升高，GSH-Px、CAT、SOD水平降低，差异均有统计学意义（P均<0.05）。结论 AP可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路，减轻CE大鼠炎症反应。

目的：双歧杆菌三联活菌胶囊联合三联疗法治疗幽门螺杆菌相关性胃炎的疗效分析。方法：本次研究纳入患者80例，均为2020年9Panobinostat细胞培养月—2021年1Designer medecines2月我院收治的幽门螺杆菌相关性胃炎患者，采用随机法将患者分成对照组(n=40)和观察组(n=40),对照组采用三联疗法治疗，观察组联合双歧杆菌三联活菌胶囊治疗。对比两组胃功能指标、治疗效果和不良反应情况。结果：治疗前，两组胃功能相关指标[胃泌素-17(Gastrin, G-17)、胃蛋白酶原Ⅰ(Pepsinogen, PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(Pselleck EPZ-6438epsinogen, PGⅡ)]对比无统计学差异(P>0.05),治疗后，两组G-17、PGⅠ以及PGⅡ均有提升，观察组高于对照组(P<0.05);观察组患者的治疗效果、Hp根除率高于对照组(P<0.05);两组不良反应的发生率无统计学差异(P>0.05)。结论：双歧杆菌三联活菌胶囊联合克拉霉素缓释胶囊应有于幽门螺杆菌相关性胃炎治疗中，能够提升患者的胃功能指标、治疗效果和Hp根治率，同时具有较高安全性。

为了探究外源硒对不同品种紫花苜蓿种子萌发阶段糖、氮物质转化，发芽指标Liproxstatin-1抑制剂和形态建成的影响，以甘农3号、DS310FY及中苜5号紫花苜蓿为对象，设置5个亚硒酸钠浓度（0、0.3、0.6、1.2、2.4 mg·L-1），培养10 d后测定苜蓿种子的发芽率，表型及生理指标和硒含量，并运用综合分析和相关性分析探究各生理指标与表型的关系，以筛选出最适宜的硒浓度和潜在的硒营养强化材料。结果表明：施硒处理4 d,DS310FY和甘农3号苜蓿幼苗的还原糖含量、可溶性糖含量及发芽势均在0.6 mg·L-1硒处理下显著高于对照（P<0.05）；施硒处理10 d,0.3、0.6 mg·L-1硒处理下DS310FY和甘农3号苜蓿幼苗的还原糖含量、硝酸还原酶活性、发芽率及发芽指数都显著高于对照（P<0.05）；而甘农3号苜蓿幼苗的胚芽长及DS310FY苜蓿幼苗的总氨基酸含量、活力指数、胚芽长、胚根长及单株鲜重，施硒后的最大值PCI-32765试剂相比对照均显著提高（P<0.05）；另外，0.3 mg·L-1硒处理下相比对照也显著提高了中苜5号苜蓿幼苗的蔗糖含量、发芽率及胚根直径（P<0.05）emergent infectious diseases。相关性分析和各指标的变化趋势表明，苜蓿幼苗糖的积累和转化主要促进胚根的发育，而氮的积累和转化主要促进胚芽的伸长和单株鲜重的增加。因此，施硒后糖转化效率的提高主要促进苜蓿种子的萌发，而氮转化效率的提高主要促进苜蓿幼苗的形态建成。综上，以0.6 mg·L-1硒处理下DS310FY紫花苜蓿发芽阶段的物质转化和形态建成综合表现最佳，更适宜进行硒的营养强化。

目的 探讨不同比例新月体IgA肾病（IgA nephropathy,IgAN）患者的临床病理特征以及新月体对预测肾脏结局的价值。方法 收集2019年1月1日至2020年12月31日期间在武汉大学人民医院经肾活检确诊为原发性IgAN且符合纳排标准的237例患者的临床、病理以及随访资料。将患者按有无新月体形成分为新月体组和无新月体组，其中新月体组根据病变累及肾小球的比例进一步分为新月体比例<10%、10%≤新月体比例<25%、新月体比例≥25%三个亚组，比较各组间患者临床、病理特征及预后的差异。终点事件为患者基线血肌酐翻倍或进入终末期肾病或死亡。采用Kaplan-Meier生存曲线评估患者肾脏累INCB28060采购积存活率的差异，构建Cox风险回归模型分析不同比例的新月体在预测IgAN疾病进展及预后中的价值。结果 237例IgAN患者中新月体组134例（56.54%），其中新月体比例<10%组有48例，10%≤新月体比例<25%有56例，新月体比例≥25%有30例。（1）临床特征：对于具有新月体的患者，随着新月体比例的增大，患者的收缩压、舒张压、血肌酐、尿素氮、总胆固醇、24 h尿蛋白定量、使用激素、免疫抑制剂的比例逐渐升高，尿隐血程度逐渐加重，而血红蛋白、白蛋白、估算肾小球滤过率（estimated glomerular filtration rate,e GFR）、血清IgG水平则逐渐降低（P<0.05）。（2）病理特征：与无新月体组相比，新月体组患者肾脏病理改变程度较严重，表现为系膜细胞增生（M1）、内皮细胞增生（EBelumosudil体内实验剂量1）、节段性硬化（S1）、肾小管萎缩/间质纤维化（T1/2）的比例更高，间质炎细胞浸润程度、肾组织中补体C3沉积程度更严重，而且新月体比例越高的组出现细胞性新月体、纤维细胞性新月体、纤维性新月体、大新月体的比例也随之增大（P<0.05）。（3）影响新月体形成的相关因素：通过多因素Logistic回归分析发现，肾脏C3沉积和24 h尿蛋白定量是IgAN新月体形成的独立危险因素，而血红蛋白是其保护因素（P<0.05）。（4）Kaplan-Meier曲线分析结果显示，无新月体组和新月体组患者肾脏累积存活率组间比较差异有统计学意义（P=0.032）；而且新月体比例≥2Inflammation and immune dysfunction5%组的肾脏累积存活率显著低于新月体比例<10%组和10%≤新月体比例<25%组，组间比较差异有统计学意义（P<0.001）。（5）单因素COX回归模型结果显示，血红蛋白、24 h尿蛋白定量、血肌酐、血尿酸、eGFR、新月体比例、E1、T1/2与发生肾脏终点事件有关（P<0.05），但经多因素校正后，仅24 h尿蛋白定量、血肌酐、T1/2、新月体比例≥25%是影响IgAN疾病进展和预后的独立危险因素（P<0.05）。结论 IgAN患者随着新月体比例的升高，临床表现及肾脏病理改变更为严重，肾脏预后也更差。新月体比例≥25%是肾脏不良结局的一个独立预测因子，对于少量新月体形成患者，早期进行干预可以增加临床获益。

多发性硬化症(Multiplesclerosis,MS)是一种中枢神经系统慢性炎症性疾病,以血管周围炎症、脱髓鞘、轴突损伤和神经元丢失为特征。MS的发病机制尚不明确,目前认为与遗传和环境因素有关。在脱髓鞘损伤的早期阶段,少突胶质前体细胞(Oligodendrocyteprecursorcells,OPCs)被募集至脱髓鞘区域诱导分化为少突胶质细胞(Myelinatingoligodendrocytes,OLs)。随着疾病的进展,成熟OLs的生成效率下降导致髓鞘再生能力降低。因此,诱导Alpelisib说明书OPCs分化和成熟是促进髓鞘再生和改善中枢神经系统脱髓鞘的重要治疗策略。CXC趋化因子受体2(CXC chemokine receptor2,CXCR2)是一种在外周中性粒细胞和中枢神经系统少突胶质细胞高表达的G蛋白偶联受体,参与调控OPCs的迁移、增殖和分化过程,但其调控机制尚未完全阐明,本实验旨在进一步研究CXCR2在OPCs分化成熟及促进髓鞘再生中的作用和机制。本研究首先采用原代培养的少突胶质细胞和溴化乙锭(Ethidium bromide,EB)侧脑室注射诱发脱髓鞘大鼠模型观察抑制CXCR2对少突胶质细胞标志蛋白表达水平的影响。结果表明当用SB225002抑制CXCR2表达后,OPCs未分化标志物血小板衍生生长因子受体 α(Platelet derived growth factor receptor alpha,PDGFRα)蛋白水平明显降低,成熟标志蛋白脂蛋白(Proteolipid protein 1,PLP1)、髓鞘碱性蛋白(Myelin basic protein,MBP)、髓鞘相关糖蛋白(Myelin-associated glycoprotein,MAG)、髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(Myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG)和接触蛋白相关蛋白(Contactin associated Protein,Caspr)的表达明显增加,提示抑制CXCR2可促进OPCs分化为OLs。劳克坚牢蓝(Luxolfastblue,LFB)染色可用于评价大鼠脑内髓鞘缺失程度,染色结果显示抑制CXCR2能明显改善EB大鼠胼胝体髓鞘断裂和缺失,提高髓鞘相关蛋白MBP、MAG、MOG、髓鞘相关少突胶质细胞碱性蛋白(Myelin-associated oligodendrocyte basic protein,MOBP)和 Caspr 的表达,促进OPCs的分化成熟,进而提高大鼠脑内髓鞘再生功能,减轻脱髓鞘大鼠运动障碍。实验室前期转录组学结果表明磷酸二酯酶(Phosphodiesterase 10A,PdeLiraglutide10a)可能是CXCR2参与双环己酮草酰二腙(Cuprizone,CPZ)诱导脱髓鞘小鼠的重要基因,我们进一步在原代培养的OPCs和EB脱髓鞘大鼠模型中进行蛋白免疫印迹实验,结果证实拮抗CXCR2可显著抑制PDE10A蛋白的表达。为进一步阐明CXCR2与PDE10A的调控作用,采用免疫共沉淀和免疫荧光方法检测发现CXCR2可与PDE10A共定位并相互作用。此外,使用TAK-063抑制PDE10A的表达以及转染pcDNA-PDE1OA质粒过表达PDE10A蛋白,发现抑制或过表达PDE10A均不影响CXCR2表达水平,但PDE10A蛋白表达随CXCR2表达水平减少而降低,表明PDE10A是CXCR2重要的下游蛋白,抑制CXCR2可通过调控PDE10A发挥促进髓鞘再生和修复的作用。为进一步探究PDE10A对少突胶质细胞分化成熟以及对髓鞘再生的作用,使用TAK-063抑制PDE10A的表达观察对少突细胞谱系标记物的影响。结果表明抑制PDE10A可明显降低OPCs未分化标志蛋白A2B5的表达,促进成熟标志物PLP1、MBP、MOG和MOBP的表达;而转染Pde10a质粒过表达PDE10A蛋白后,OPCs的分化成熟能力减弱。此外,在EB诱导脱髓鞘大鼠模型中,抑制PDE10A可促进髓鞘分化成熟标志蛋白的表达,促进MS模型大鼠脑内的髓鞘再生。我们进一步使用qPCR检测髓鞘相关转录因子含量,ELISA和蛋白免疫印迹检测信号通路分子和蛋白磷酸化水平。结果显示抑制CXCR2/PDE10A后可激活cAMP/ERK1/2信号通路,促进髓鞘相关转录因子SRY-box转录因子10(SRY-box transcription factor 10,Sox10)、少突胶质细胞转录因子 2(Oligodendrocyte Lineage Transcription Factor 2,Olig2)、髓鞘调节因子(Myelin regulatory factor,Myrf)、锌指蛋白 24(Zinc finger protein 24,Zfp24)的表达,最终促进髓鞘蛋白的生物合成和髓鞘再生功能。综上所述,抑制CXCR2能够促进OPCs的成熟与分化,减轻髓鞘缺失和断裂,促进髓鞘再生。机制研究表明PDE1OA/cAMP/ERK1/2是CXCR2调节髓鞘再生的下游关键信号通路。本研究阐明了 CXCR2是治疗脱髓鞘疾病的重要分子靶点,并为以CXCR2为靶点研发治疗脱髓鞘疾病的药物提供理论依据。帕金森氏病(Parkinson’s diseases,PD)是人类第二大中枢神经系统退行性疾病,以黑质致密部多巴胺能神经元变性和路易小体形成为主要病理特征。PD的发病机制尚未完全阐明,目前认为与遗传因素、年龄、性别、环境因素和行为习惯等多种因素均有关。越来越多的证据显示,PD具有明显的神经炎症和免疫功能异常,与抑郁、睡眠障碍和胃肠功能紊乱等非运动症状有关。此外研究表明在PD患者血清和脑脊液中促炎因子含量显著升高,脑内炎性细胞浸润以及小胶质细胞活化水平明显增强。组织学和影像学检查同样证实患者脑内存在持续的神经炎症反应,介导多巴胺能神经元受损,在PD疾病进展中发挥着重要作用。因此抑制脑内过度激活的神经炎症反应,缓解或阻止多巴胺能神经元变性过程是目前PD治疗的重要Urban biometeorology策略。酪氨酸磷酸化调节激酶 1A(Dual specificity tyrosine-phosphorylation-regulated kinase 1A,DYRK1A)是一种双底物特异性的蛋白激酶。研究发现,DYRK1A除了介导神经元发育和细胞周期调节等生物学过程,还可通过调控神经炎症反应在多种神经退行性疾病发病中起着重要作用。在PD疾病进展中,DYRK1A通过磷酸化α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)和PARKIN蛋白介导神经毒性作用,但其通过调控神经炎症参与PD发病的作用和机制尚未阐明,因此本实验将在脂多糖(Lipopolysacchride,LPS)刺激的小胶质细胞神经炎症模型和鱼藤酮诱导的小鼠PD模型中,对DYRK1A介导神经炎症及多巴胺能神经元损伤的作用和机制进行研究和探讨。首先采用LPS诱导BV2小胶质细胞构建神经炎症细胞模型观察DYRK1A激酶的变化。结果显示DYRK1A的含量和激酶活性在神经炎症中显著上调,表明DYRK1A参与炎症过程。当用Harmine抑制DYRK1A后可显著抑制小胶质细胞激活标志物离子钙结合蛋白受体分子1(Ionized calcium binding adaptor molecule 1,Iba1)的表达,降低炎症蛋白环氧化酶2(Cyclooxygenase 2,COX2)和白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)的表达水平,进而抑制炎症反应。为了探讨DYRK1A是否可通过调控小胶质细胞极化而抑制神经炎症,本实验进一步在LPS诱导的神经炎症模型中对小胶质细胞M1型和M2型标志蛋白进行检测,发现LPS可明显刺激BV2细胞中一氧化氮合酶(Nitric oxide synthase,iNOS)和CD86蛋白的表达,下调精氨酸酶 1(Arginase 1,Arg1)和甘露糖受体1(Macrophagemannose receptor 1,CD206)水平。当用Harmine抑制DYRK1A后可促进M1型BV2细胞转化为M2型,调控小胶质细胞的极化水平,抑制神经炎症反应。随后采用BV2细胞条件培养基研究DYRK1A介导神经炎症对神经元的影响。结果表明LPS可诱导BV2细胞条件培养基中产生大量炎症因子,最终导致SH-SY5Y细胞形态异常和死亡。而抑制DYRK1A的BV2条件培养基通过降低小胶质细胞中促炎蛋白和提高抗炎蛋白表达而缓解神经元损伤,提高SH-SY5Y细胞的存活率。在鱼藤酮诱导PD小鼠模型中,行为学实验结果进一步表明抑制DYRK1A可提高小鼠运动和协调能力。蛋白免疫印迹结果显示Harmine可促进小鼠中脑内小胶质细胞从M1型向M2型的转化,减轻脑内促炎蛋白产生,增加抗炎蛋白的表达。酪氨酸羟化酶(Tyrosinehydroxylase,TH)染色结果显示,Harmine可明显改善鱼藤酮诱导小鼠黑质多巴胺能神经元的丢失和死亡,提高多巴胺能神经元存活率。为进一步证实DYRK1A在PD中的调控作用,我们将DYRK1A shRNA腺病毒载体注射至α-syn(A53T)转基因PD模型小鼠的黑质区域,通过蛋白免疫印迹和免疫组织化学染色检测小鼠脑内神经炎症蛋白和TH阳性神经元数量。结果显示,A53T转基因模型小鼠中脑内DYRK1A表达显著升高。沉默DYRK1A可抑制模型组小鼠炎症蛋白iNOS和COX2的表达,抑制小胶质细胞激活,减轻黑质TH阳性神经元损伤。进一步机制研究表明,细胞凋亡信号激酶(Apoptosis signal regulating kinase-1,ASK1)是 DYRK1A 蛋白的底物,抑制DYRK1A可通过降低ASK1/JNK/P38蛋白磷酸化水平调控体内外小胶质细胞极化进而减轻神经炎症反应,保护PD模型中多巴胺能神经元。此外单独抑制ASK1也可通过减轻JNK/P38蛋白激活调控M1/M2表型,证实ASK1/JNK/P38信号通路通过影响小胶质细胞极化过程参与DYRK1A介导的神经炎症反应。综上所述,抑制DYRK1A能够通过调控小胶质细胞从M1型向M2型转化,减轻神经炎症反应,提高黑质多巴胺能神经元数量,进而改善PD模型小鼠运动功能障碍。机制研究表明ASK1/JNK/P38是DYRK1A调节小胶质细胞极化和神经炎症反应的关键信号通路。本研究不仅阐明了 DYRK1A在PD模型中调控神经炎症反应的重要作用和机制,也为以DYRK1A为靶点治疗PD疾病的相关药物研发提供理论依据。

目的：探究2019年—2021年都昌县人民医院住院患者的抗菌药物使用强度，分析其合理用药状况。方法：选取2019年1月—2021年12CH-223191月都昌县人民医院住院部收治的3 980例患者作为研究对象，调查住院患者的抗菌药物使用频度（defined daily doses,DDDS）和使用强度（antibiotics use density,AUD），统计并分析临床抗菌药物使用合理性。结果：2019年—2021年住院患者抗菌药物的AUD分别是48.20、39.90、35.10,3年BIBW2992临床试验间抗菌药物AUD呈逐年降低趋势，到2020年、2021年已满足国家卫健委提出的AUD<40标准；2019年—2020年第2代头孢菌素类抗菌药物、氟喹诺酮类抗菌药物和第3代头孢菌素类抗菌药物的AUD位居前3[2019年AUD分别是10.41、8.20、7.16,2020年AUD分别是8.97、7Medical masks.22、4.77,2021年以氟喹诺酮类和第3代头孢菌素类、第2代头孢菌素类抗菌药物的AUD位居前3(AUD值分别是6.60、5.65、5.37);3 980例住院患者中发现不合理使用抗菌药物治疗者有451例，不合理使用率是11.33%，其中以用药疗程不合理、用药时机不合理、药品遴选不合理和用法用量不合理多见，不合理使用率分别是23.73%(107/451)、21.51%(97/451)、17.07%(77/451)和13.08%(59/451)。结论：2019年—2021年医院对住院患者的抗菌药物使用监管具有一定成效，抗菌药物使用强度呈下降趋势，基本满足卫生部门提出的有关要求，但仍存在使用不合理状况，应引起临床重视，加强规范化管理。