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目的 探讨超声与CT引导下肾穿刺活检在基层医院的应用效果。方法 搜集河南省第二人民医院2017年—2021年33例超声及CT引导下肾穿刺患者作为研究对象，记录大体标本长度并进行光镜、免疫荧光检查和电镜检查，比较肾小球数目及穿刺术后并发症。结果 超声引导下肾穿刺标本长度分为0.5～0.9 cm和1.0～2.0 cm两组，0.5～0.9 cm组时光镜肾小球为9.5(6～12.75)个，免疫荧光下肾小球为4(2～6)个；1.0～2Youth psychopathology.0 cm组时光Wnt-C59体外镜下肾小球为9(8～10.5)个，免疫荧光下肾小球为4(3～6.5)个；CT引导下穿刺标本为1.0～2.0 cm时光镜肾小球为10(8～16.5)个，免疫荧光下肾小球为5(2.5～7.5)个；穿刺标本长度为1.0～2.0 cm时，超声引导下肾周出血发生率为11.11%,CT引导下肾周出血发生率为83.33%。结论 超声及CT引导下肾穿刺活检可以明确肾脏疾病诊断点击此处，CT引导下肾穿刺获取肾小球个数较超声多，但肾周出血率较超声引导下高。

类风湿性关节炎是一种广泛存在的自身免疫性炎症性疾病，严重影响患者的生活质量。目前用LY-188011体外于治疗RA的常规剂型存在诸多局限性，例如非特异性、疗效不佳、用药剂量大、给药频繁以及全身性副作用。目前，纳米技术已经能够解决传统治疗的局限性并简化疾病的复杂PLX5622价格性，因此基于纳米技术的药物递送系统正逐渐成为一种用于RA诊断和治疗的新策略，其可使负载的抗炎药物通过主动和被动靶向至发炎区域，实现对关节的特异性、克服剂量和给药频率的增加以及与之相关的不良反应。该文旨在对近年来基于纳米载体的药immune gene物递送系统在RA领域中的最新研究进行归纳总结，并阐述如何使用纳米系统将治疗药物输送到发炎关节以控制RA进展。通过探讨目前纳米药物递送系统可能存在的问题以及亟待解决的挑战，为未来深入研究基于纳米技术的共递系统提供理论支持。

目的:AQP1在很多肿瘤细胞里面表达,例如胃癌、肾癌和结肠癌等。并且AQP1可以导致胃癌侵袭和迁移能力的增加,但其对肿瘤的增殖作用在不同的肿瘤类型里表现不同。最近,一些研究表明AQP1与肝内胆管癌(ICC)的进展之间存在联系。本研究旨在探讨AQP1对ICC患者的微血管侵犯、临床分期等临床病理资料以及预后的影响。方法:我们收集了307例行部分肝切除术的ICC患者的组织标本,然后通过对其进行免疫组化检测其组织在AQP1蛋白中的表达。然后通过回顾性的分析AQP1蛋白表达水平与临床数据之间的关系。随后用对AQP1有差异表达作用的病毒对ICC细胞进行转染,转染后用嘌呤霉素检测并筛选转染成功的细胞系。再用Western blotting实验检测稳定的AQP1差异表达的肝内胆管癌细胞系中AQP1蛋白水平评估是否转染成功。再通过Western blotting实验检测AQP1差异表达的ICC细胞系中相关蛋白的表达水平。以上Western blotting实验结果用RT-PCR来验证其转录水平。再通过体外创面愈合、Transwell实验和侵袭实验以及体内经尾静脉肺转移模型评估AQP1对ICC细胞侵袭Pidnarulex采购转移能力的影响。随后通过免疫组化验证上述相关蛋白在ICC患者的组织中的表达。结果:34.2%(105/307)的ICC标本中AQP1膜性表达阳性。生存数据Ascending infection显示AQP1阳性表达与良好的无病生存期(DFS)和总生存期(OS)显著相关(p=0.0290和p=0.003)。高表达AQP1可抑制体外ICC细胞的侵袭和迁移,并且可以抑制裸鼠的经尾静脉肺转移的数量转移。而从SAG浓度机制上来说,在ICC细胞中AQP1的高表达增加了E-cadherin的水平,但降低了转录因子Snail的水平,从而降低了ICC细胞的转移能力。结论:AQP1表达与ICC患者的良好预后相关。AQP1通过下调Snail的表达抑制ICC细胞的侵袭、转移和上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)。

目的 对茂名地区育龄妇女进行脊髓性肌萎缩症(SMA)运动神经元存活基因1(SMN1)突变携带者筛查，掌握SMA流行病学数据，为SMA家系进行遗传咨询、基因筛查和产前诊断提供依据。方法 收集2020年5月-2021年8月在茂名市妇幼保健院进行孕检的1 898名妇女临床资料和肘静脉外周血样本。采用MGB探针实时多重荧光定量PCR法，分别对SMN1第7外显子和第8外显子的拷贝数进行相对定量检测，PUN30119 MW并分析目的基因的缺失情况及携带频率，为男女双方均为阳性携带者的夫妇进行产前诊断。结果 在1 898名育龄妇女中，共检测出脊髓性肌萎缩症SMN1突变携带者49例，携带率为2.58%；其中SMN1-7杂合缺失/SMN1-8杂合缺失最多33例(1.74%)，其次为SMN1-7未见缺失/SMN1-8杂合缺失12例(0.63%)和SMN1-7杂合缺失/SMN1-8未见缺失4例(0.21%)。2对双方均为阳性携带者夫妻的3例胎儿羊水标本中2例为SMN1-7杂合缺失/SMN1-8杂合缺失和SMN1-7杂合缺失/SMN1-8未见缺失PF-02341066采购，建议继续妊娠；1例为SMN1-7纯合缺失/SMN1-8纯合缺失，建议对胎儿进行终止妊娠。结论 茂名地区育龄妇女脊髓性肌萎缩症SMN1突变携带率高于中国南部其他地区，建议采用实时多重荧光定量PCR法对该地区育龄妇女进行SMN1突变筛查及产前诊断Cometabolic biodegradation，有效减少SMA胎儿的出生。

目的 研究固本增骨颗粒防治骨质疏松症的作用机制，揭示固本增骨颗粒通过Wnt/β-catenin信号通路抑制骨质疏松的分子机制。方法 随机将66只大鼠分为假手术组13只和造模组53只，造模组采取背部双侧卵巢切除法制备模型，假手术组不摘除卵巢，造膜8周后将每组进行称重，并随机选取3只进行骨密度检测，待模型鉴定成功后，将造模组随机分为模型组、固本增骨颗粒高、中、低剂量组和阳性药物组，每组10只，固本增骨颗粒高、中、低剂量组分别按24.4、12.2、6.1 g/kg不同浓度进行灌胃，阳性药物组给予0.09 mg/kg浓度的雌二醇进行灌胃，假手术确认细节组及模型组给予生理盐水灌胃，各组大鼠的每日灌胃体积均为2 mL。每周记录各组大鼠的行为，给药干预12周后将大鼠处死股骨取材，进行骨组织形态学HE染色，通过IHC检测股骨组织中Wnt7b、TCF3、GSK3β蛋白含量。运用RT-PCR和WB测定股骨组织中Wnt7b、TCF3、GSK3βmRNA及其蛋白含量的表达。结果 HE染色显示假手术组骨结构正常，小梁骨厚度均匀，结构完整，小梁连接良好，脂肪细胞和骨细胞形态清晰；模型组股骨骨小梁变细不规则、网状结构Specialized Imaging Systems杂乱无章，部分骨小梁明显细长或断裂，两者连接不完全，固本增骨颗粒干预后，固本增骨颗粒治疗组大鼠骨小梁结构逐渐趋向成熟，厚度有所增加，逐渐均匀化，骨MC3细胞增多，骨小梁与周围组织连接紧密，连续性逐渐变好，整体结构逐渐转好。与假手术组相比，模型组大鼠股骨组织中Wnt7b、TCF3表达量显著降低(P<0.01),GSK3β表达量显著升高(P<0.01);与模型组比较，阳性药物组、固本增骨颗粒高、中剂量组Wnt7b、TCF3表达量均升高(P<0.05),GSK3β表达量均下降(P<0.05)。结论 固本增骨颗粒可通过调控Wnt/β-catenin信号通路，上调Wnt7b、TCF3的表达以促进骨形成，下调GSK3β的表达防止骨过度吸收。

目的 研究肝门部胆管癌根治术后临床相关胆瘘的影响因素。方法 回顾性选取87例HCCA患者，患者均接受肝门部胆管癌根治术治疗。收集患者一般资料，将B级、C级胆瘘患者纳入胆瘘组，A级及未发生胆瘘患者纳入无胆瘘组。结果 87例HCCA患者术后发生胆瘘25例，胆瘘发生率28.74%(25/87);其中A级、B级、C级胆瘘各有7例、11例LY294002、7例。胆瘘组术前胆管炎发生率、年龄、胆肠吻合口数量高于无胆瘘组，有统计学差异(P<0.05);2组在性别、Bismuth分型、ASA评分、胆管引流、血管重建、胰十二指肠切除、术中出血量、手术时间、PLT、AST、ALT等方面对比，无统计学差异(P>0.05);采用Logistic回归分析显示，术前胆管炎、年龄、胆肠吻合口数量为影响肝门部胆管癌根治术后临床相关胆瘘的独立危险因素(P<0.05且ORBelumosudil≥1)。结论 肝门部胆管癌根治术后临床相关胆瘘的影响因素主要包括术前胆管炎、年龄、胆肠吻合口数量，临床需重视，选择合适的术式，并加强对患者围手术期的管理，以降Neuroimmune communication低胆瘘发生风险。

磷是植物生长发育所必需的养分之一。植酸是磷在植物种子中的主要存储形式。尽管植酸对植物种子萌发和发育比较重要,但由于它不能被单胃动物有效利用,因此植酸对单胃动物来说是一种抗营养因子(对营养物质的消化、吸收和利用产生不利影响的物质)。此外,大量排泄的植酸会导致环境污染。油菜是我国第一大油料作物,Aeromonas hydrophila infection种子中的植酸浓度很高。为了降低植酸的负面影响,培育低植酸油菜十分重要。在植物体内,植酸经过不依赖脂类和依赖脂类两个途径生成。种子中植酸的合成以不依赖脂类途径为主。肌醇激酶(myo-inositol kinase,MIK)参与不依赖脂类途径的第一步磷酸化反应,它促进肌醇磷酸化为肌醇-3-磷酸。本研究以MIK基因为研究对象,鉴定出甘蓝型油菜中BnaMIKs的所有成员,分析了BnaMIKs的组织表达模式和蛋白定位,利用CRISPR-Cas9技术创制bnac09.mik和bnaa10.mik突变体,测定了BnaMIKs的突变对种子植酸合成和重要农艺性状的影响。此外,本研究还通过全转录组关联分析(Transcriptome-wide association study,TWAS)和候选基因的关联分析,筛选出3种低植酸单倍型,并鉴定到1个可能影响种子植酸合成的基因BnaA06g08470D,这将为甘蓝型油菜的低植酸育种提供基因和种质资源。主要研究结果如下:(1)甘蓝型油菜BnaMIKs的基因结构特征及其突变对种子植酸浓度的影响甘蓝型油菜中MIK基因有2个拷贝,分别是Bna C09.MIK和BnaA10.MIK。进化分析结果表明,Bna C09.MIK和BnaA10.MIK的氨基酸序列相似性高达96%,它们与拟南芥At MIK的氨基酸序列相似性都达到80%。在嗜热链球菌、拟南芥、水稻、玉米和油菜中,维持MIK激酶活性的3个氨基酸位点都十分保守。荧光定量PCR、转录组和GUS染色等试验的结果共同表明,种子中Bna C09.MIK和BnaA10.MIK的表达量在开花后15-30 d(15-30 Days After Flowering,15-30 DAF)逐渐升高,30-40 DAF逐渐降低,这与植酸合成的趋势是一致的。在相同时间点,Bna C09.MIK的表达量总是略高于BnaA10.MIK。亚细胞定位的结果显示,Bna C09.MIK和BnaA10.MIK都定位在细胞质。Bna C09.MIK和BnaA10.MIK的突变都导致种子中的植酸浓度显著降低15%左右,但不影响种子的总磷浓度、种子直径大小和千粒重。(2)甘蓝型油菜种子植酸浓度的全转录组关联分析基于油菜自然群体中开花后20天(20 DAF)的309份种子样品和开花后40天(40 DAF)的274份种子样品的转录组测序结果,进行全转录组关联分析(TWAS)。在20 DAF种子的转录组数据中鉴定到181个与植酸浓度显著关联的基因,在40 DAF种子的转录组数据中鉴定到9个与植酸浓度显著关联的基因。GO富集分析显示这些基因主要参与光合作用、葡萄糖-6-磷酸代谢、脂质生物合成等过程。TWAS结果显示有3个基因在20 DAF和40 DAF种子中被共同鉴定到,分别是BnaA06g08470D、BnaA06g09130D和BnaA09g40530D。候选基因的关联分析结果显示,这3个基因分别含有6、7和3个与种子植酸浓度显著关联的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点。其中,BPLX3397naA06g08470D基因的6个SNP共分成2种单倍型,Hap1(CACCGA)和Hap2(TTTGAG);BnaA06g09130D基因的7个SNP共分成2种单倍型,Hap1(CCTTGAG)和Hap2(TTCCCGA);BnaA09g40530D基因的3个SNP共分成2种单倍型,Hap确认细节1(CAA)和Hap2(GGT)。这3个基因的Hap2单倍型都属于低植酸单倍型。田间试验结果表明,含有3种低植酸单倍型的油菜品种与含有3种高植酸单倍型的油菜品种在株高、分枝数和千粒重方面没有显著差异。此外,拟南芥中BnaA06g08470D的同源基因AtRPF5的突变,导致种子中植酸浓度与野生型相比显著降低20%,总磷浓度也显著降低,但不影响植株的长势。在atrpf5突变体中,植酸合成通路相关基因At MIPS1、At MIK、At ITPK4、At IPK1和At MRP5的表达量显著降低,表明AtRPF5能够正调控种子中植酸的合成。因此,我们推测BnaA06g08470D也能够正调控油菜种子中植酸的合成。综上所述,本研究从甘蓝型油菜中鉴定到2个参与植酸合成的MIK基因Bna C09.MIK和BnaA10.MIK,它们的突变使种子中的植酸浓度显著降低15%,但是突变体种子的直径大小和千粒重没有受到显著的影响。此外,本研究通过TWAS和候选基因的关联分析,在甘蓝型油菜自然群体中鉴定到3种低植酸单倍型和1个可能影响种子植酸合成的基因BnaA06g08470D。这些结果为甘蓝型油菜的低植酸育种提供了优异种质和基因资源。

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的高度接触性疾病,该病RAD001分子量主要引起妊娠中后期母猪流产、断奶仔猪体温升高、呼吸困难等症状,其中断奶仔猪死亡率较高,严重者能够达到100%。自从PRRSV传入我国以来,对养猪业造成了巨大的经济损失。PRRSV感染后能够激活先天性免疫反应,诱导模式识别受体及其下游信号分子的表达,进而引起IL-1β、IL-6、TNF-α等炎性细胞因子的大量分泌,甚至可能造成“细胞因子风暴”,引起强烈的间质性肺炎及病毒血症。板蓝根多糖(Radix Isatidis Polysaccharide,IRPS)是板蓝根中含量最多的活性物质,具有抗炎、抗菌、抗病毒、免疫增强及抗氧化等功效。实验室前期研究发现,IRPS在体外能够抑制PRRSV的增殖,同时发现IRPS能够降低PRRSV感染3D4/21/CD163细胞后炎性细胞因子的分泌。目前发现的多糖受体主要有TLR2和TLR4,并且TLR4是分布在细胞膜表面的模式识别受体,能够诱导炎性细胞因子的分泌。因此,我们推测IRPS能够通过TLR4信号通路影响炎性细胞因子的分泌,发挥间接抗病毒的作用。1.IRPS与3D4/21/CD163细胞的结合根据试验需求利用水提醇沉法对IRPS进行提取,并对提取物进行多糖含量以及蛋白含量的测定。利用酪胺还原法对IRPS进行荧光标记,得到标记产物IRPS-FITC。根据MTT法检测其最大安全浓度,发现标记后的最大安全浓度与标记前一致,均为0.0625 mg/m L。将IRPS-FITC与3D4/PKA抑制剂21/CD163细胞共同作用后发现IRPS能够与3D4/21/CD163细胞结合并且能够与表面的TLR4受体相互作用,为后续试验提供了理论依据。2.IRPS对PRRSV感染3D4/21/CD163细胞的TLR4及其下游信号分子的影响为了探究IRPS对PRRSV感染的3D4/21/CD163细胞TLR4及其下游信号分子的影响,我们采用荧光定量PCR与Western blot试验方法对TLR4、My D88、NF-κB、TRIF、IRF3等信号分子的转录和蛋白表达水平进行检测。结果显示,IRPS能够降低PRRSV感染3D4/21/CD163细胞后TLR4转录和蛋白水平升高的现象。对下游My D88、TRIF、TRAF6、NF-κB、IRF3等信号分子的转录和蛋白表达水平检测发现,在6 h和12 h时IRPS能够降低PRRSV感染3D4/21/CD163细胞后My D88、TRIF、TRAF6、NF-κB、P38 MAPK、IRF3等信号分子的蛋白表达水平升高的现象,与TLR4蛋白表达相似。说明在6 h和12 h时,IRPS能够通过抑制TLR4的分泌间接影响My D88依赖型信号通路和TRIF依赖型信号通路的激活,抑制其下游信号分子的表达。3.IRPS在TLR4信号通路被阻断时对PRRSV体外感染炎症细胞因子分泌及病毒增殖的影响试验二中我们对引起细胞因子分泌的TLR4及其下游信号分子的转录和蛋白表达情况进行了检测,发现IRPS能够降低PRRSV感染后TLR4及其下游信号分子的分泌。因此,我们推断IRPS能够通过TLR4信号通路影响PRRSV感染3D4/21/CD163细胞分泌细胞因子,从而间接影响病毒在细胞内的增殖。为了验证以上结果,我们用特异性TAK-242(TLR4抑制剂)对TLR4进行抑制/封闭,用ELISA和荧光定量PCR方法检测,IRPS在TLR4信号通路被阻断时对PRRSV体外感染时炎症细胞因子分泌及病毒增殖的影响。结果显示当TLR4信号通路被阻断时,IRPS对PRRSV感染3D4/21/CD163细胞炎性细胞因子分泌的调节作用被抑制,说明IRPS能够通过TLR4及其下游信号通路影响PRRSV感染3D4/21/CD163细胞炎性细胞因子的分泌;当TLR4信号通路被阻断后,IRPS抑制PRRSV增殖的作用有所降低,但是仍有一定程度的抑制作用;并且当TLR4信号通路被阻断后,病毒对照组的拷贝数与正常的病毒对照组病毒拷贝数之间没有显著的差异,说明TLR4信号通路并不直接影响PRRSV在细胞内的增殖,结合细胞因子分泌情况分析IRPS能够通过TLR4信号通路降低PRRintermedia performanceSV感染3D4/21/CD163细胞炎性细胞因子的分泌,增强细胞的稳定性,从而降低PRRSV在细胞内的增殖。

目的 考查丹参和甘草提取物样品体外抗菌、体内抗炎作用。方法 (1)采用肉汤连续二倍微孔稀释法测定丹参和甘草提取物样品对痤疮丙酸杆菌ATCC11827最小抑菌浓度(MIC);(2)采用内耳廓皮内注射丙酸杆菌建立大鼠痤疮模型，测定丹参和甘草提取物样品对丙酸杆菌致炎大pathologic Q wave鼠耳廓肿胀度的影响；(3)采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法，测定丹参和甘草提取物样品对二甲苯致炎小鼠耳廓肿胀度的影响。结果 (1)体外抗菌实验结果显示，丹参和甘草提取物体外对痤疮丙酸杆菌MIC值分别为16 mg/mL、12.5 mg/mL。(2)丙酸杆菌致炎大鼠痤疮模型实验结果显示，丹参和甘草提D-Lin-MC3-DMA取物可明显降低丙酸杆菌致炎大鼠耳廓肿胀度(P<0.05)。(3)二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验结果显示，与溶媒组比较，丹参和甘草提取物连续涂药7 d,均可明显降低二甲苯致炎小鼠耳廓肿胀度(P<0.05)。结论 丹参和甘草提取物具有抗菌、抗炎及抗痤疮感染作用，能被广泛用GSI-IX试剂作化妆品原料药。

目的 探讨心肺运动试验(CPET)相关指标对不同肾功能状态冠心病(CAD)患者预后的预测价值。方法 选取北部战区总医院心血管内科自2016年2月至2021年12月收治且在出院前完成CPET的5 087例CAD患者为研究对象。根据入院时估计肾小球滤过率(eGFR),将患者分为肾功能正常组(eGFR≥60 ml/min,n=4 969)与肾功能MDV3100分子量异常组(eGFR<60 ml/min,n=118)。收集两组患者的人口学特点、既往病史、实验室检查结果、用药史及CPET结果等。记录两组患者主要不良心血管事件(MACE)的发生情况。采用多因素COX回归分析评估S63845细胞培养不同肾功能状态CAD患者心肺功能及与预后的相关性。结果 匹配后，肾功能异常组患者的峰值心率、峰值摄氧量、峰值代谢当量均低于肾功能正常组，氧通气当量、心率储备均高于肾功能正常组，差异均有统计学意义(P<0.05)。两组患者匹配后的临床结局事件发生率比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。多因素COX回归分析结果显示：在总体研究人群中，吸烟史、高血压分级、既往经皮冠状动脉介入术(PCI)、肌酸激酶同工酶、N端B型钠尿肽原、峰值摄氧量、氧通气当量均为MACE的影响因素(P<0.05);在肾功能正常患者中，吸烟史、高血压分级、既往PCI、肌酸激酶同工酶、峰值摄氧量、氧通气当量均为MACE的影响因素(P<0.05);在肾功能异常患者中，吸烟史、高血压分级、射血分数、峰值摄氧量均为MACE的影响因素(P<0.Gel Imaging05)。结论 对于肾功能正常的患者，峰值摄氧量和氧通气当量对CAD患者预后存在预测价值；对于肾功能异常的患者，峰值摄氧量对CAD患者预后存在预测价值。