DuDu365生物天地

目的：探讨尿微量白蛋白(MALB)联合肾血流动力学参数在妊娠期高血压(PIH)患者急性肾损伤(AKI)早期诊断中的价值。方法：纳入我院2020年11月—2022年11月280例PIH患者，根据是否并发AKI分为AKI组、非AKI组，比较两组患者一般资料、MALB水平及肾血流动力学参数[肾主动脉(MRA)、肾窦部段动脉(SRA)及椎体两侧叶间动脉(IRA)收缩期峰值血流速度(PSV)、舒张末期血流速度(EDV)、阻力指数(RI)],绘制受试者工作特征曲线(ROC),分析MALB与肾血流动力学参数联合诊断PIH患者AKI的诊断效能。结果：AKI组MALB水平高于非AKI组(P<0.05),AKI组MRA、SRA及IRA的EDV均小于非AKI组(P<0.05),MRA、SRA及IRA的RViral respiratory infectionI均高于非AKI组(P<0.05),两组MRA、SRA及IRA的PSImidazole ketone erastin MWV比较差异均无统计学意义(P>0.05);ROC曲线显示，点击此处MALB诊断AKI的AUC为0.806,MRA的EDV、RI诊断AKI的AUC分别为0.894、0.844,SRA的EDV、RI诊断AKI的AUC分别为0.675、0.772,IRA的EDV、RI诊断AKI的AUC分别0.794、0.777,联合诊断的AUC为0.988。结论：MALB联合MRA、SRA及IRA的EDV及RI对PIH患者AKI的诊断价值较高。

背景神经精神性红斑狼疮(neuropsychiatric systemic lupus erythematosus,NPSLE)是系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者常见严重并发症之一,临床表现复杂多样,特征性标记物缺乏,目前分类定义标准特异性很差,误诊率高。探讨NPSLE临床特征,优化NPSLE分类诊断标准,提高诊断效能,对减少误诊误治临床意义重大。目的了解NPSLE发病危险因素,建立SLE相关NP事件的诊断预测模型,优化NPSLE诊断效能。方法1.选取2009年1月至2022年4月住院患者中Dibutyryl-cAMP研究购买符合1997年美国风湿病学会(ACR)关于SLE分类标准及1999年ACR关于NPSLE定义标准的患者,收集整理SLE相关NP事件组和SLE非相关NP事件组的临床资料,分析两组间临床特征、危险因素等。2.通过临床评估小组评估所有NP事件,根据临床综合判断确立归因诊断。所有NP事件进行意大利算法模型,得出从0到10的分数,通过受试者工作特征性曲线(ROC)的曲线下面积(AUC)评价该算法的效能。3.将筛选出的SLE相关NP事件危险因素和意大利算法模型得分纳入logistic模型构建预测方程,通过ROC曲线下AUC评估模型的预测能力。选取2022年5月至2022年10月含NP事件的SLE患者为验证组,利用ROC曲线下AUC评估该模型的预测效能。结果1.收集住院SLE患者共2498例,其中有NP事件患者共计455例,SLE相关NP事件患者共280例,SLE非相关NP事件患者共175例。两组间年龄、住院时长、SLEDAI评分、是否初诊、SLE病程、住院期间发生NP事件、SLE合并血液系统损害、血红蛋白、血小板计数、淋巴细胞计数、补体C3MK-1775溶解度、类风湿因子、ANA滴度、SSA/Ro60抗体阳性、抗核小体抗体、抗心磷脂抗体IgM、抗β2-糖蛋白1 IgM、潘氏球蛋白阳性、脑脊液IgG/IgM/IgA、头颅CT异常、头颅MR异常共23个指标有统计学差异(PP<0.05)。2.当意大利算法模型截值≥6分时,该模型诊断SLE相关NP事件敏感性70.40%,特异性 55.40%,ROC 曲线下 AUC=0.67 (P<0.001)。3.纳入单因素分析中有统计学差异的指标,通过逐步回归法进入logistic回归,结果显示意大Liver biomarkers利算法模型得分高、年龄小、SLEDAI评分高、头部MRI异常是SLE相关NP事件的独立危险因素。当模型截值为0.65时,敏感性76.11%,特异性78.38%,ROC曲线下AUC为0.82 (P<0.001)。在验证组中,当模型截值为0.74时,敏感性63.41%,特异性86.36%,ROC 曲线下 AUC 为 0.75 (P<0.01)。结论本研究提示意大利算法模型得分高、年龄小、SLEDAI评分高和头部MRI异常是诊断SLE相关NP事件的独立预测因素,单中心已证实建立的引入意大利算法模型的诊断预测模型具有较好的诊断预测效能。

目的：基于网络药理学和动物实验，探讨利咽方治疗慢性咽炎的作用机制。方法：从TCMSP数据库中收集利咽方中的有效成分及作用靶点，从GeneCards数据库中收集慢性咽炎的相关靶点，然后通过Venny和STRING网站得到交集靶点，对交集靶点进行GDC-0068体外KEGG通路分析和Gene Orifampin-mediated haemolysisntology富集分析。并采用Tongg氨水直接喷雾法建立大鼠慢性咽炎模型对上述网络药理学的结果进行验证。结果：共收集利咽方中141个活性化合物和205个作用靶点以及1 950个疾病靶点，取交集得到112个靶点，交集靶点的PPI网络分析得到IL-6、TNF和IL-β等重要靶点。KEGG通路显示，与利咽方治疗慢性咽炎关联度较高的通路为癌症相关通路。GO富集分析结果表明，利咽方的治疗作用生物过程主要涉及无机物反应；细胞组分主要涉及膜筏、细胞器外膜、囊腔等位置；分子功能主要涉及细胞因子受体结合、DNA转录因子结合等功能。动物实验结果显示，利咽方能有效降低血清中TNF-α、IL-1β、IL-6的水平，降低大鼠咽喉黏膜组织中TLR-4、NF-κBp65及磷酸化I-κBα蛋白水平。结论：通过网络药理学预测了利咽方的有效成分及其治疗慢性咽炎的潜在selleckchem CB-839靶点，同时进行的动物实验表明利咽方可通过调节TLR-4/NF-κB信号通路，治疗氨水诱导的大鼠慢性咽炎。

研究背景:糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)是2型糖尿病中最为常见的一种微血管并发症。传统认为DN以肾小球的病变为主要特征,但越来越多的研究表明,肾小球损伤可能不是DN进展的决定性因素,而肾小管的损害在DN早期即存在,且与蛋白尿、肾功能恶化和肾脏的远期预后密切相关。因此,肾小管结构和功能的异常是DN发生和进展的关键环节,积极探索其损伤的发生机制和保护措施对于DN的防治具有重要意义。人脐带间充质干细胞(Human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)因免疫原性低、再生能力强和高旁分泌潜能等优点已被公认为移植首选的MSCs,但hUCMSCs治疗DN的研究尚处于初级阶段,具体作用机制仍有待深入探索。我们课题组前期研究发现,hUCMSCs可通过激活核因子-E2相关因子2(Nuclear factor-E2-related factor 2,Nrf2)改善肾脏的氧化应激,而氧化应激贯穿于铁死亡的始终,且铁死亡发生过程中的铁代谢、脂质代谢和谷胱甘肽的合成皆由Nrf2调控,所以靶向Nrf2来调控铁死亡可能是hUCMSCs治疗肾脏疾病的新机制。然而,hUCMSCs、Nrf2以及铁死亡的关系在DN领域仍缺乏研究。因此,本课题主要探索hUCMSCs能否通过激活Nrf2信号通路来调控2型糖尿病肾脏的铁死亡,进而改善DN,为此,我们进行了以下研究。第一部分HUCMSCs对2型糖尿病肾脏的保护作用目的:明确hUCMSCs对2型糖尿病小鼠肾脏和高糖高脂刺激的人肾小管上皮细胞的保护作用。方法:1.体内实验,雄性野生型(Wild-type,WT)C57BL/6J小鼠随机划分为4组:对照组(Ctrl)、人脐带间充质干细胞组(MSC)、糖尿病组(DM)、糖尿病+人脐带间充质干细胞组(DM/MSC)。DM组和DM/MSC组小鼠经高脂饮食联合链脲佐菌素来诱导2型糖尿病模型,模型成功后约3个月,糖尿病小鼠的尿白蛋白/肌酐(Urinary albumin-to-creatinine ratio,UACR)明显升高,根据本课题组前期的研究基础,MSC组和DM/MSC组小鼠分别给予hUCMSCs 1*10~6个细胞/只尾静脉注射治疗,7天/次,共注射3次,末次治疗7天后取材,用于各项指标的检测。首先,比较各组小鼠的血液和尿液的生理、化学指标;通过PAS、甲苯胺蓝染色和透射电子显微镜观察小鼠肾脏形态学变化;通过蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)检测肾小管损伤标志物即肾损伤分子-1(Kidney injury molecule-1,KIM-1)和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(Neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)的蛋白水平。2.体外实验,我们应用高浓度葡萄糖和棕榈酸钠(Palmitate)共同刺激人肾小管上皮细胞来构建细胞损伤的体外模型。实验分4组:对照组(Ctrl)、人脐带间充质干细胞组(MSC)、高糖高脂组(HG/P)、高糖高脂+人脐带间充质干细胞组(HG/P/MSC)。然后,利用Transwell小室将LEE011价格MSC组和HG/P/MSC组的肾小管上皮细胞与hUCMSCs建立共培养体系。采用CCK-8和WB法分别检测肾小管上皮细胞的细胞活力及肾小管损伤因子的蛋白水平。结果:1.体内实验,与Ctrl组比较,DM组小鼠体重下降,血糖、肾脏肥大指数、UACR、血肌酐和血尿素氮明显升高(P<0.05);hUCMSCs的治疗可改善小鼠的血糖、体重、UACR和血肌酐水平(P<0.05),但对肾脏肥大指数及血尿素氮的影响不显著(P>0.05)。2.体内实验,与Ctrl组比较,DM组小鼠的肾小球肥大、系膜基质增生、上皮细胞足突融合、肾小球和肾小管基底膜增厚、肾小管上皮细胞脱落和小管间质胶原纤维沉积,而DM/MSC组小鼠的上述病理表现较DM组明显减轻;相比于Ctrl组,DM组小鼠肾小管损伤因子KIM-1和NGAL蛋白水平明显升高(P<0.0001),而DM/MSC组较DM组明显降低(P<0.001)。3.体外实验,CCK-8和WB结果显示,30 m M的葡萄糖作用24 h联合300μM的Palmitate作用6 h,可成功构建高糖高脂刺激的人肾小管上皮细胞损伤模型,2*10~5个/ml的hUCMSCs是最适宜的共培养剂量。与Ctrl组对比,HG/P组肾小管上皮细胞KIM-1和NGAL蛋白表达增加(P<0.001),但HG/P/MSC组相比于HG/P组,KIM-1和NGAL的蛋白水平下降(P<0.001)。结论:1.HUCMSCs体内给药可减轻2型糖尿病小鼠肾脏的组织学损伤和功能异常;2.HUCMSCs体外干预可缓解高糖高脂刺激的人肾小管上皮细胞的损伤。第二部分HUCMSCs通过激活Nrf2调控2型糖尿病肾脏铁死亡的机制研究目的:明确hUCMSCs能够通过调节铁代谢、脂质过氧化和抗氧化途径来调控2型糖尿病肾脏的铁死亡,且可能是通过激活Nrf2信号通路实现的。方法:1.利用第一部分的体内和体外模型,通过透射电镜分别观察小鼠的肾小管和高糖高脂刺激的人肾小管上皮细胞的线粒体形态学变化,经WB、普鲁士蓝染色、二价铁离子荧光探针、免疫组化和免疫荧光等技术评估铁死亡途径中铁代谢、脂质过氧化和抗氧化通路上相关指标的表达变化。2.体内和体外实验,通过WB检测糖尿病小鼠肾脏和高糖高脂刺激的人肾小管上皮细胞中Nrf2及其下游因子HO1和NQO1的蛋白表达变化,探讨hUCMSCs是否通过激活Nrf2信号通路来调控铁死亡。体内实验,提取小鼠肾组织中的核蛋白和浆蛋白,通过WB测核蛋白和浆蛋白中Nrf2的表达水平;体外实验,采用激光共聚焦显微镜观察Nrf2蛋白在人肾小管上皮细胞中的表达定位。结果:1.体内实验,与Ctrl组相比,DM组小鼠肾小管的线粒体萎缩、膜密度增加和少量嵴断裂,但与DM组比较,DM/MSC组小鼠的线粒体体积、嵴结构和膜密度明显改善;评估铁代谢指标,相较于Ctrl组,DM组小鼠肾脏总铁含量增加(P<0.01),FTH1蛋白水平下降(P<0.01),TFR1蛋白水平升高(P<0.0001),而DM/MSC组对比DM组,其铁含量降低,FTH1蛋白升高,TFR1蛋白下降(P<0.05);评估脂质过氧化指标,对比Ctrl组,DM组MDA含量、4HNE和ACSL4的蛋白水平升高(P<0.05),但与DM组比较,hUCMSCs可显著降低小鼠的MDA含量、4HNE和ACSL4蛋白水平(P<0.05);检测抗氧化能力,与Ctrl组比较,DM组小鼠的GPX4和x CT的蛋白表达降低(P<0.01),而DM/MSC组相较于DM组,二者的蛋白表达升高(P<0.05),且GPX4蛋白主要表达于肾小管。2.体外实验,与Ctrl组对比,HG/P组细胞的线粒体萎缩、膜密度增加、线粒体外膜破裂,可见嵴断裂,但相比于HG/P组,HG/P/MSC组细胞的线粒体嵴和外膜结构完整,膜密度恢复;检测铁代谢指标,对比Ctrl组,HG/P组Fe~(2+)荧光强度明显增加,FTH1蛋白下降,TFR1蛋白升高(P<0.0001),而与HG/P组比较,HG/P/MSC组Fe~(2+)荧光强度减弱,FTH1蛋白水平升高,TFR1蛋白水平下降(P<0.01);评估脂质过氧化产物,HG/P组对比Ctrl组,其ROS荧光亮度明显增强,4HNE和ACSL4蛋白水平升高(P<0.01),但在HG/P/MSC组,ROS荧光强度、4HNE和ACSL4蛋白水平较HG/P组明显降低(P<0.05);评估抗氧化能力,与Ctrl组比较,HG/P组GPX4和x CT蛋白水平下降(P<0.0001),而HG/P/MSC组相比于HG/P组,GPX4和x CT蛋白水平升高(P<0.001)。3.体内实验,与Ctrl组相比,DM组小鼠的Nrf2、HO1和NQO1蛋白水平明显下降,而DM/MSC组相比于DM组,三者蛋白水平显著升高(P<0.05);体外实验,HG/P组细胞相比于Ctrl组,其Nrf2、HO1和NQO1蛋白表达明显降低,而与HG/P组比较,HG/P/MSC组三者的蛋白含量显著升高(P<0.05)。体内实验,DM/MSC组肾脏确认细节核Nrf2蛋白(n Nrf2)含量相比于Ctrl组和DM组明显增多(P<0.01),而胞浆Nrf2蛋白(systems geneticsc Nrf2)在各组间差异不明显(P>0.05);体外实验,HG/P组Nrf2蛋白主要表达于细胞浆中,而HG/P/MSC组相比于HG/P组Nrf2蛋白增多,并且主要集聚在细胞核内。结论:1.HUCMSCs在体内、外可通过调控铁死亡途径来改善2型糖尿病的肾脏损伤;2.HUCMSCs可能通过调控Nrf2表达,激活Nrf2通路来调控铁死亡。第三部分Nrf2在hUCMSCs调控铁死亡改善2型糖尿病肾病中的关键作用目的:明确Nrf2在hUCMSCs调控铁死亡和改善2型糖尿病肾病中的重要作用。方法:1.体内实验,应用和上述WT小鼠同背景的Nrf2基因敲低(Nrf2-knockdown,Nrf2~(-/-))的雄鼠构建2型糖尿病动物模型,实验分5组:野生型对照组(WT Ctrl)、Nrf2~(-/-)对照组(Nrf2~(-/-)Ctrl)、人脐带间充质干细胞组(Nrf2~(-/-)MSC)、糖尿病组(Nrf2~(-/-)DM)、糖尿病+人脐带间充质干细胞组(Nrf2~(-/-)DM/MSC)。糖尿病模型的构建,hUCMSCs的治疗剂量和时间等与第一部分WT小鼠相一致。比较各组Nrf2~(-/-)小鼠的生理、生化学指标;通过PAS、甲苯胺蓝染色和透射电镜观察小鼠肾脏形态学的变化;通过WB检测肾小管损伤因子的蛋白表达;经透射电镜、WB、免疫组化技术评估铁死亡途径中相关指标的表达水平;通过WB评估Nrf2~(-/-)小鼠肾脏Nrf2通路上蛋白的表达情况。2.体外实验,对人肾小管上皮细胞进行Nrf2 siRNA的转染,实验分8组,即对照组(Ctrl)、人脐带间充质干细胞组(MSC)、高糖高脂组(HG/P)、高糖高脂+人脐带间充质干细胞组(HG/P/MSC)、对照+Nrf2 siRNA组(s-Ctrl)、人脐带间充质干细胞+Nrf2 siRNA组(s-MSC)、高糖高脂+Nrf2 siRNA组(s-HG/P)及高糖高脂+人脐带间充质干细胞+Nrf2 siRNA组(s-HG/P/MSC),经WB检测铁死亡通路上关键指标ACSL4、FTH1和GPX4蛋白的表达变化。结果:1.体内实验,WT Ctrl组与Nrf2~(-/-)Ctrl组小鼠的血糖、体重、UACR和血肌酐水平无统计学差异(P>0.05)。但Nrf2~(-/-)DM组相比于Nrf2~(-/-)Ctrl组,其小鼠体重下降,血糖、UACR和血肌酐明显升高(P均<0.05),经hUCMSCs治疗后,相比于Nrf2~(-/-)DM组,Nrf2~(-/-)DM/MSC组小鼠的上述指标明显改善(P<0.05)。但对比WT和Nrf2~(-/-)的糖尿病小鼠,hUCMSCs使前者的体重、血糖、UACR和血肌酐分别改善12%、22.8%、24.5%和36%,而使后者的体重、血糖、UACR和血肌酐分别改善11.6%、18%、14.3%和12%。观察肾脏形态学变化发现,WT Ctrl组和Nrf2~(-/-)Ctrl组小鼠的肾脏形态无明显异常,但Nrf2基因的敲低加重了糖尿病的肾脏损伤,Nrf2~(-/-)DM组小鼠可见明显的肾小球基底膜增厚、足突融合,系膜细胞和基质显著增生,肾小管上皮细胞脱落,管腔扩大及肾小管间质胶原纤维沉积;而Nrf2~(-/-)DM/MSC组与Nrf2~(-/-)DM组比较,小鼠的肾小球系膜细胞和系膜基质明显减少,肾小球基底膜的厚度有降低的趋势,但差别无统计学意义(P>0.05),仍可见肾小管上皮细胞脱落及小管间质胶原纤维沉积。检测肾小管损伤蛋白发现,相比于Nrf2~(-/-)Ctrl组,Nrf2~(-/-)DM组的KIM-1和NGAL蛋白水平明显升高(P<0.0001),而经hUCMSCs的治疗可下调KIM-1的蛋白表达(P<0.01),但对NGAL的蛋白水平无显著影响(P>0.05)。2.体内实验,WT Ctrl组与Nrf2~(-/-)Ctrl组线粒体形态完整,但Nrf2~(-/-)DM组相较于Nrf2~(-/-)Ctrl组,可见线粒体萎缩、线粒体膜密度增加及线粒体外膜破裂,但Nrf2~(-/-)DM/MSC组和Nrf2~(-/-)DM组比较,其线粒体膜密度略有改善,但仍可见明显的线粒体萎缩和线粒体外膜破裂;WT Ctrl组与Nrf2~(-/-)Ctrl组的总铁含量、TFR1和FTH1蛋白水平无明显差别,但相比于Nrf2~(-/-)Ctrl组,Nrf2~(-/-)DM组的铁含量和TFR1蛋白水平升高(P<0.01),FTH1蛋白水平降低(P<0.0001),但Nrf2~(-/-)DM/MSC组对比Nrf2~(-/-)DM组,上述铁代谢指标无明显改善(P>0.05);MDA含量、4HNE和ACSL4蛋白水平在WT Ctrl和Nrf2~(-/-)Ctrl组无明显差异,但在Nrf2~(-/-)DM组三者含量升高(P<0.01),且hUCMSCs治疗后,相比于Nrf2~(-/-)DM组,Nrf2~(-/-)DM/MSC组MDA含量,4HNE和ACSL4蛋白水平未见明显下降(P>0.05);与WT Ctrl组相比,Nrf2~(-/-)Ctrl组及Nrf2~(-/-)DM组的GPX4蛋白表达明显下调(P<0.0001),而Nrf2~(-/-)DM/MSC组与Nrf2~(-/-)DM组的GPX4蛋白水平无显著差异(P>0.05)。此外,Nrf2~(-/-)DM组与Nrf2~(-/-)Ctrl组比较,x CT蛋白水平下降(P<0.0001),但Nrf2~(-/-)DM/MSC组相比于Nrf2~(-/-)DM组的x CT蛋白水平无明显变化(P>0.05)。与WT Ctrl组相比,Nrf2~(-/-)Ctrl组和Nrf2~(-/-)DM组的Nrf2、HO1和NQO1蛋白表达明显被抑制,经hUCMSCs干预后,Nrf2、HO1和NQO1的蛋白仍低表达(P>0.05)。3.体外实验:Nrf2 siRNA转染后,与Ctrl组相比,s-Ctrl组的ACSL4蛋白含量升高,但差别无统计学意义(P>0.05),但相较于s-Ctrl组,s-HG/P组ACSL4蛋白表达明显升高(P<0.001),而在s-HG/P/MSC组未见明显下降(P>0.05);与s-Ctrl组对比,s-HG/P组FTH1蛋白下调(P<0.0001),而s-HG/P/MSC组与s-HG/P组FTH1蛋白含量无统计学差异(P>0.05);与Ctrl组相比,Nrf2 siRNA转染后,各组GPX4蛋白表达明显被抑制,且hUCMSCs无法上调GPX4的蛋白水平(P>0.05)。结论:1.Nrf2基因的敲低减弱了hUCMSCs对DN的保护作用,也加重了2型糖尿病的肾脏损伤;2.Nrf2基因的缺失明显减弱了hUCMSCs对铁死亡的抑制作用,Nrf2对hUCMSCs调控铁死亡具有关键作用。综上,我们得出全文结论:1.HUCMSCs可以改善2型糖尿病小鼠肾脏的组织学损伤和功能异常;2.HUCMSCs可以通过旁分泌作用减轻高糖高脂刺激的人肾小管上皮细胞的损害;3.HUCMSCs在体内、外可通过调节铁代谢、抑制脂质过氧化和改善抗氧化能力来抑制2型糖尿病肾脏的铁死亡;4.HUCMSCs可能通过调控Nrf2表达,激活Nrf2信号通路来调控铁死亡;5.Nrf2基因的敲低不仅减弱了hUCMSCs对DN的保护作用,也加重了2型糖尿病的肾脏损伤;6.Nrf2基因的敲低基本消除了hUCMSCs对铁死亡的抑制作用,Nrf2对hUCMSCs调控铁死亡具有关键作用。

禽类生长繁殖过程中易受各种应激因素的影响，其中以氧化应激最为突出。为探究氧化应激对鸡(Gallus gallus)睾丸组织结构及睾酮合成相关基因表达的影响，本研究利用敌草快(diquat)作为氧化应激诱导剂，将60只180日龄的健康康乐黄公鸡随机平均分成4组：对照组、敌草快5 mg/kg组、敌草快15 mg/kg组和敌草快20 mg/kg组。待21 d处理结束后采集鸡睾丸组织样品，利用q RT-PCR技术和抗氧化功能检测试剂盒分别检测氧化应激相关基因核因子红细胞2相关因子2 (nuclear factor erythroid 2-related factor 2, Nrf2)、半氧合酶1 (hemeoxygenase-1, HO-1)、谷胱甘肽过氧化物酶1 (glutathione peroxidase 1,Gpx1)的表达水平和过氧化氢酶(catalase, CAT)、总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase, T-SOD)的活性及丙二醛(malondialdehyde, MDA)的浓度，确定氧化应激发生情况；利用苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining, HE staining)检测氧化应激对睾丸组织结构的影响，利用Western blot技术分别检测细胞凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2 (B-cell lymphoma-2, Bcl-genetic phenomena2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein, Bax)和半胱氨酸蛋白酶3 (Caspase3)的表达量变化，通过qRT-PCR和Western blot技术分别检测睾酮合成相关基因类固醇激素合成急性调节蛋Berzosertib白(steroidogenic acute regulatory protein, StAR)、细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(cytochrome P450 family 11 subfamily A member 1, Cyp11a1)和3β-羟基类固醇脱氢酶1 (3β-hydroxysteroid dehydrogenase 1, Hsd3b1)的mRNA和蛋白表达量变化。结果显示，与对照组相比，不同剂量敌草快组睾丸中氧化应激相关分子HO-1、Nrf2和Gpx1的mRNA水平显著下调(P<0.05),CAT和T-SOD酶活性显著降低(P<0.05),MDA浓度显著升高(P<0.05);HE染色结果表明，睾丸经敌草快诱导作用后结构受到损伤，曲精小管中的精子发生受到明显抑制，随着敌草快处理浓度的升高，曲精小管中的生殖细胞发生严重凋亡；Bax和Caspase3的蛋白表达量显著上调(P<0.05),Bcl-2显著下调Navitoclax分子量(P<0.05)；睾酮合成相关基因StAR、Cyp11a1和Hsd3b1的mRNA及蛋白表达量均发生显著下调(P<0.05)。以上结果表明，氧化应激对鸡睾丸组织结构造成一定程度的损伤，促进睾丸生殖细胞的凋亡，对睾酮合成相关基因的表达具有显著抑制作用。本研究可为探讨氧化应激损伤鸡繁殖性能的机制提供基础资料。

目的：研究结构式nano-bio interactions团体心理治AZD9291作用疗对抑郁障碍患者巩固维持期社会功能的影响。方法：选取2022年2月至2023年2月云南省精神病医院临床心理科出院患者97例作为研究对象，按照出院先后随机分为对照组(n=49)和观察组(n=48)。对照组仅开展药物治疗，观察组在药物治疗的基础上加入结构式团体心理治疗，应用HAMD、SDSS及PSQI量表对患者的抑郁症状、社会功能及睡眠状况进行评估，量表调查结果进行统计、对照分析，得出结构式团体心理治疗的结论。结果：2组患者在出院时HAMD、SDSS、PSQI评分比较，差异均无统计学意义(均P>0.05),实施结构式团体心理治疗6周、12周后观察组的评分明显低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05);观察组临床疗效显效率显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：抑郁障碍患者在巩固维持期开展结构式团体心理治疗可改善患者抑郁症状及睡眠selleckchem Belnacasan质量，提高其生命质量和社会功能，降低复发率，对抑郁障碍的治疗及康复具有重要意义。

目的 研究川楝素通过调节Notch信号通路对甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 体外培养人甲状腺癌细胞8505C,CCK-8法检测不同剂量川楝素对8505C此网站细胞存活率的影响；将8505C细胞分为对照组、川楝素-L、M、H组、川楝素+DAPT(Notch信号通路抑制剂)组；EDU法检测8505C细胞增殖；Transwell检测8505C细胞迁移与侵袭能力；RT-PCR检测不同850selleck激酶抑制剂5C细胞组Notch1、HES1、HEY1、Ki67、MMP-2的mRNA水平；western blot检测不同8505C细胞组Notch1、HES1、HEY1、Ki67、MMP-2的蛋白水平。结果 与对照组相比，川楝素-L、M、H组8505C细胞EDU阳性细胞率、迁移与侵袭细胞数、Ki67、MMP-2的mRNA以及蛋白水平均显著性降低，Notch1、HES1、HEY1的mRNA以及蛋白水平显著性升高，且呈剂量依赖性(P<0.05);与川楝素-H组相比，川楝素Mind-body medicine+DAPT组EDU阳性细胞率、迁移与侵袭细胞数、Ki67、MMP-2的mRNA以及蛋白水平均显著性升高，Notch1、HES1、HEY1的mRNA以及蛋白水平显著性降低(P<0.05)。结论 川楝素可能通过激活Notch信号通路，抑制甲状腺癌细胞8505C增殖、迁移和侵袭。

目的 肝细胞癌（hepatocellular carCP-456773分子量cinoma, HCC）是一种具有高侵袭性、诊断延迟和不良预后的肿瘤。本研究旨在构建一个基于氧化应激基因的HCC预后模型，并探索与该模型相关的中药成分。方法 研究使用癌症基因组图谱（the cancer genome atlas,TCGA）和基因表达集（gene expression omnibus, GEO）中的数据集，鉴定与氧化应激相关的差异表达基因。通过单变量和多变量Cox回归以及Lasso回归分析，构建一个用于预测HCC患者预后的模型。利用Coremine Medicine数据库预测模型基因潜在的相关中药成分，并进行归经和性味聚类以及分子对接分析。验证试验：采用MTT法检测预测中药马钱子和龙葵水提液对Hep3B细胞增殖的影响；使用Western blot检测马钱子和龙葵水提液对细胞中SCL7A11蛋白水平的调控。结果 在氧化应激相关基因中，EZH2和SLC7A11基因可用于构建预后模型。预测模型模型基因相关的中药主要归肝经、味苦和性寒。分子对接分析表明，龙葵中的5′-甲氧基松脂素和马钱子中的马钱子碱N-氧化物分别与SLC7A11的247号丙氨酸（Affinity=-11.0）和198号赖氨酸（cytotoxicity immunologicAffinity=-10.2）具有较强的结合能力。实验证实，马钱子和龙葵水Canagliflozin体内提取物对Hep3B细胞增殖呈浓度和时间依赖性抑制作用，并减少了Hep3B细胞中SLC7A11蛋白的表达。结论 本研究成功构建了一个基于氧化应激基因的个体化HCC预后模型，并预测了与模型基因相关的潜在中药成分。

东京奥运会承载着重要的时代使命,做好奥运备战工作对推进我国体育强国建设具有重要现实意义。女子皮艇作为我国皮划艇奥运备战的重点项目,至今还未获得过奥运会金牌。训练负荷对竞技成绩会产生较大影响,准确认识女子皮艇运动员训练负荷特征是提高项目竞技水平的关键所在。在此背景下,本研究采用专家访谈法、跟踪记录法、数理统计法等研究方法,从训练外负荷(教练员给予运动员的外部刺激)和训练内负荷(运动员生理应激反应)两个维度对东京奥运年中国优秀女子皮艇运动员训练负荷特征展开研究,全面分Cobimetinib小鼠析和掌握其训练负荷安排的一般规律和关键问题,进而提高中国女子皮艇项目的运动训练水平和丰富理论研究基础。研究结论如下:1.东京奥运年中国优秀女子皮艇运动员训练外负荷的整体特征基本符合周immune system期训练理论单周期安排的一般规律。其中各要素的主要特征表现为,负荷强度分布符合耐力类项群的两极化训练模式;负荷量总量安排合理,但水陆比例明显偏低;负荷频率符合同期效应发展规律,是提高“速度-耐力”型项目竞技水平的有效手段。2.冬冠赛阶段,东京奥运年中国优秀女子皮艇运动员训练外负荷阶段特征符合周期训练理论中一般准备期的安排特点,负荷量较大,负荷强度较低,但陆上有氧训练比重过低;训练内负荷特征表现为,有氧训练刺激不足,运动员的有氧能力并未得到有效提高。3.春冠赛阶段selleck CCRG 81045,东京奥运年中国优秀女子皮艇运动员训练外负荷阶段特征符合周期训练理论中专项准备期的安排特点,负荷量略有下降,负荷强度明显提升;训练内负荷特征表现为,此阶段主要发展有氧能力,有氧能力保持在较高水平,但负荷刺激强度较小,整体机能水平并未迅速提高。4.夏季大奖赛阶段,东京奥运年中国优秀女子皮艇运动员训练外负荷阶段特征与周期训练理论中比赛前期的安排特点有所不同,负荷量和负荷强度都同时提升;训练内负荷特征表现为,有氧训练痕迹效应逐渐消失,难以维持运动员原有准备水平。5.奥运会阶段,东京奥运年中国优秀女子皮艇运动员训练外负荷阶段特征与周期训练理论中赛前训练期的安排特点有所不同,负荷量和负荷强度均下滑,特别是负荷强度仅为前期训练的一半,水上训练占比明显偏低,高强度专项训练较少;训练内负荷特征表现为,赛前阶段的训练安排欠佳,运动员过早出现竞技状态高峰,影响运动员在目标比赛中竞技能力的发挥水平。

目的:通过全面检索相关文献,对过敏性紫癜性肾炎的危险因素进行Meta分析,得出与过敏性紫癜性肾炎有相关性的危险因素,为早期预判过敏性紫癜性肾炎的发生提供依据,尽早干预疾病进一步发展。方法:计算机检索Pubmed、Embase、Cochrane Library、中国期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库、维普数据库及万方数据库里发表的有关过敏性紫癜性肾炎危险因素的中英文文献,检索时间为2016年1月1日至2022年10月31日。英文检索主题词为:IgA Vasculitis、Henoch-Schonlein purpura、Nephritis、Kidney DisRemediation agenteases、Risk Factors及其自由词,中文检索词为:过敏性紫癜、肾炎、肾损害、危险因素、相关因素及相应的近义词,检索与过敏性紫癜性肾炎危险因素相关的病例对照研究,研究对象为儿童(年龄<=16岁),文献包括年龄、皮疹持续时间、皮疹反复发作次数、消化道出血、腹痛、链球菌感染、肥胖、血浆Fib、IgA、总胆固醇、甘油三酯、血小板等因素。通过NoteExpress管理文献,根据纳入及排除标准,纳入最终符合要求的文献,运用纽卡斯尔-沃太华量表(NOS)对文献进行质量评价,提取最终纳入研究的相关数据或者经换算能得出效应量的数据。通过Cochrane网站提供的Revman软件5.4版本对本次纳入研究的计数与计量资料进行Meta分析,以比值比(OR)或均值差(MD)及其相对应的95%置信区间(CI)作为合并效应量,且利用Revman软件自带的漏斗图评估发表偏倚。结果:本次Meta分析共计纳入21篇文献,均为回顾性病例对照研究(RCT),研究累计4279例诊断为过敏性紫癜的患儿,其中依据有BAY 73-4506使用方法无并发紫癜性肾炎将其分为过敏性紫癜性肾炎组(HSPN组)1651例、过敏性紫癜组(HSP组)2628例,21项研究质量评价均无明显偏倚风险,NOS量表评分均≥6分。分析数据后提示与过敏性紫癜性肾炎相关的危险因素主要包括:年龄≥6岁、皮疹持续时间≥1个月、皮疹反复发作次数≥3次、消化道出血、腹痛、链球菌感染、肥胖、血浆Fib升高、IgA升高、总胆固醇升高、甘油三酯升高、血小板升高,各因素效应量结果如下:1.年龄≥6岁,OR=3.25,95%CI(2.49,4.24),紫癜性肾炎组(HSPN组)中年龄≥6岁的患儿明显多于过敏性紫癜组(HSP组),差异有统计学意义(Z=8.63,P<0.00001);2.皮疹持续时间≥1个月,OR=3.92,95%CI(3.14,4.90),紫癜性肾炎组(HSPN组)中皮疹持续时间≥1个月的患儿高于过敏性紫癜组(HSP组),差异有统计学意义(Z=12.06,P<0.00001);3.皮疹反复发作次数≥3次,OR=2.98,95%CI(2.41,3.69),紫癜性肾炎组(HSPN组)中皮疹反复发作次数≥3次的患儿高于过敏性紫癜组(HSP组),差异有统计学意义(Z=9.99,P<0.00001);4.消化道出血:OR=3.13,95%CI(2.50,3.90),紫癜性肾炎组(HSPN组)中消化道出血的患儿高于过敏性紫癜组(HSP组),差异有统计学意义(Z=10.07,P<0.00001);5.腹痛,OR=2.78,95%CI(2.20,3.50),紫癜性肾炎组(HSPN组)中腹痛的患儿高于过敏性紫癜组(HSP组),差异有统计学意义(Z=8.62,P<0.00001);6.链球菌感染,OR=4.81,95%CI(2.27,10.19),紫癜性肾炎组(HSPN组)中链球菌感染的患儿高于过敏性紫癜组(HSP组),差异有统计学意义(Z=4.11,P<0.0001);7.肥胖:OR=3.09,95%CI(2.12,4.49),紫癜性肾炎组(HSPN组)中肥胖的患儿高于过敏性紫癜组(HSP组),差异有统计学意义(Z=5.88,P<0.00001);8.血浆Fib升高,MD=0.61,95%CI(0.47,0.75),紫癜性肾炎组(HSPN组)患儿的血浆Fib高于过敏性紫癜组(HSP组),差异有统计学意义(Z=8.60,P<0.00001);9.IgA升高,MD=0.53,95%CI(0.44,0.62),紫癜性肾炎组(HSPN组)患儿的IgA高于过敏性紫癜组(HSP组),差异有统计学意义(Z=11.71,P<0.00001);10.总胆固醇(TC)升高,MD=0.88,95%CI(0.7确认细节7,1.00),紫癜性肾炎组(HSPN组)患儿的TC高于过敏性紫癜组(HSP组),差异有统计学意义(Z=14.69,P<0.00001);11.甘油三酯(TG)升高,MD=0.53,95%CI(0.42,0.64),紫癜性肾炎组(HSPN组)患儿的TG高于过敏性紫癜组(HSP组),差异有统计学意义(Z=9.52,P<0.00001);12.血小板(PLT)升高,MD=77.95,95%CI(39.67,116.24),紫癜性肾炎组(HSPN组)患儿的PLT高于过敏性紫癜组(HSP组),差异有统计学意义(Z=3.99,P<0.0001)。结论:过敏性紫癜性肾炎的危险因素为年龄≥6岁、皮疹持续时间≥1个月、皮疹反复发作次数≥3次、消化道出血、腹痛、链球菌感染、肥胖、血浆Fib升高、IgA升高、总胆固醇升高、甘油三酯升高、血小板升高。