多肽-金纳米酶的构建及其在有害残留物双信号快检中的应用

仿生无机纳米酶是一类具有类酶催化活性的无机纳米材料,与天然生物酶相比,纳米酶具有制备简单、成本低廉、稳定性好、易于长期存储等优点。金纳米酶由于其特殊的壳核结构、尺寸效应和表面效应,不仅表现出优异的类酶活性,还具有独特的光物理化学性质,如离散量子化能级所导致的荧光发射的电子跃迁过程,从而表现出较强的光致发光(PL)。因此,不同粒径大小和表面配体的金纳米酶,其荧光发射光谱在可见光至近红外光区范围内可进行调谐。其中,通过合理的配体设计,是调控金纳米酶结构和性能的有效途径之一。多肽由于其氨基酸序列、结构以及生物性质的多样性,所制备的金纳米酶极具设计灵活性,并且在整体构象、组成和化学微环境上与天然酶高度相似,因而呈现出优异的催化与光学性质,常常被用于各类实际检测,包括:重金属、生物物质、农药和药物检测等。基于此,本论文通过绿色合成方法,以自主设计的Phage enzyme-linked immunosorbent assay多肽为配体模板,成功制备了具有荧光-酶学双重性质的金纳米酶,简称CK-Au NE。通过建立多酶级联水凝胶体系,并结合酶抑制剂法对CK-Au NE双重性质的影响,实现对有害残留物“有机磷农药(OPs)”和“非甾体类抗炎药(NSAIDs)”的双信号检测,以满足实物样品现场快速、定量、可视化、精确检测的需求。主要包括以下三部分内容:1、以自主设计的多肽(序列:CCYGGYRFKYRFK)为配体保护剂,通过其半胱氨酸以及酪氨酸的稳定与还原作用,绿色合成了具有高效荧光和酶活双重性质的金纳米酶(CK-Au NE)。首先,运用透射电子显微镜、纳米粒度仪、X射线光电子能谱对CK-Au NE的粒径大小、形貌、价态组成进行了详细表征;其次,荧光光谱仪和稳瞬态荧光光谱仪测试了其最佳激发和发射波长,以及荧光寿命;最后,利用3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)-H_2O_2显色法对CK-Au NE的类过氧化物酶活性进行评估,并计算了其酶学参数V_(max)和K_m值。同时,也研究了Fe~(2+)参与的芬顿反应,证实了其催化H_2O_2产生·OH对CK-Au NE的荧光淬灭作用。2、建立乙酰胆碱酯酶(ACh E)/胆碱氧化酶(Ch Ox)的级联反应,通过OPs对ACh E的抑制作用,影响ACh E/Ch Ox级联反应终产物H_2O_2,进而调节CK-Au NE催化的TMBZD1839配制显色反应,以及Fe~(2+)催化的芬顿反应淬灭CK-Au NE荧光,构建了基于CK-Au NE的荧光-比色双信号检测方法,并测试了该方法对不同种类的OPs,如:毒死蜱、乐果、甲基对氧磷的线性检测范围、最低检测限和抗干扰能力。进一步将CK-Au NE在海藻酸钠水凝胶块中固定化,依据上述检测原理,构建了多酶级联双信号传感器,通过智能手机辅助的数字化比色,测定了其“裸眼”检测范围及最低检测限,并将其应用于果蔬实物样品中OPs的痕量快速检测,液质联用仪验证其检测的准确性。3、建立乳酸脱氢酶/谷胱甘肽还原酶/谷胱甘肽过氧化物酶(LDH/GR/GPx)的级联反应,通过NSAIDs对LDH的抑制作用,影响LDH/GR/GPx级联反应终产物H_2O_2,进而调节CK-Au NE的酶学和荧光双重性质,构建基于CK-Au NE的双信号检测方法,实现了对NSAIDs如:阿司匹林、布洛芬、尼美舒利、吲哚美辛的痕量检测,分别测定了其线性检测范围、最低检测限、选择性和抗干扰能力。进一步以海藻酸钠水凝胶为固相载体,CK-Au NE为催化元件,通过酶固定化构建双信Naporafenib号传感器,结合智能手机以及Image J软件对水凝胶块的颜色和荧光图片的灰度值进行分析,实现了阿司匹林的“裸眼”高灵敏、双信号、快速检测,并完成了牛奶实物样品中NSAIDs的痕量检测分析。

GLP-1RAs通过调控LINC01180/miR-30b/CPT1A通路改善脂毒性氧化应激

目的 探讨胰高血糖素样肽-1受体激动剂(glucagon-like peptide-1 receptor agonists, GE7080小鼠LP-1RAs)改善胰岛细胞脂毒性氧化应激,分析其机制是否与调控LINC01180/miR-30b/CPT1A通路表达有关。方法 通过基因芯片和生物信息学分析方法预测LINC01180可能调控microRNA及相关蛋白。在体内和体外建模,分为对照组、高脂组、GLP-1RAs组。检测丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量和总抗氧化能力(total antioxidant capacity, T-AOC)活性。苏木精-伊红染色及免疫组化Reg3r分析。实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)检测LINC01180、miR-30b和CPT1A表达量。Western blot法检测CPT1A的蛋白表达水平。通过瞬时转染技术分别抑制和过表达LINC0Biomechanics Level of evidence1180,RT-qPCR检测转染后miR-30b和CPT1A表达水平。结果 生物信息学分析结果表明,LINC01180/miR-30b/CPT1A形成ceRNA调控网络。GLP-1RAs模型中脂毒性氧化应激明显改善,LINC01180表达量下降,miR-30b和CPT1A表达量上升。转染LINC01180表达显著影响miR-30b和CPT1A的表达量。结论 GLP-1RAs通过下调LINC01180的表达,上调miR-3selleck抑制剂0b和CPT1A表达,改善脂毒性氧化应激。

三黄煎剂治疗三阴性乳腺癌气虚血瘀证的临床观察

目的:观察三黄煎剂对三阴性乳腺癌气虚血瘀证的临床疗效。方法:收集10selleck diABZI STING agonist0例三阴性乳腺癌患者,治疗予以三黄煎剂口服,服用半年,观察两年。观察患者两年无病生存率以及应激症状积分、生活质量积分、炎症因子(IL-6、IL-8)水平、血管新生因子(VEGF)水平、血清氧化应激指标(NO、GST、SOD)。根据两年无病生存率结果继续选取符合标准的三阴性乳腺癌患者40例进行随机、平行、对照研究,分为对照组和治疗组,每组20例。治疗组予三黄煎剂口服,服用半年,对照组定期观察。观察患者的气虚证、血瘀证积分情况,生活质量积分情况,肿瘤标志物(CEA、CA-153)水平、炎症因子(IL-4、IL-8、IL-2、IFN-γ)水平、免疫因子(CD3、CD4、CD8)水平、血清氧化应激指标(SOD、GSH-Px)。结果:100例三阴性乳腺癌SV2A immunofluorescence患者脱落13例,87例患者进行分析。两年无病生存率为100%。IL-6、IL-8及NO、GST、SOD治疗后得到显著改善(P<0.01,P<0.05),患者症状积分、生活质量积分均较治疗前显著改善(P<0.01),安全性指标均在合理范围内,未见异常。随机、平行、对照研究中治疗组脱落4例,对照组脱落5例。与对照组比较,治疗组气虚证、血瘀证积分显著改善(P<0.01),生命质量在疲倦、疼痛、气促、食欲丧失、腹泻方面得到显著改善(P<0.05),总体积分情况也得到显著改善(P<0.05),CEA、CA-153治疗后均下降,CA-153显著改善(P<0.05),IL-2、IL-4、IL-8、IFN-γ、GSH-Px、SOD治疗后得到显著改善(P<0PF-02341066.05),安全性指标均在合理范围内,未见异常。结论:三黄煎剂可以改善患者炎症因子水平、慢性氧化应激状态,提高患者免疫功能,改善患者的气虚血瘀症状,提高患者生命质量,具有良好疗效。

透明质酸交联的泊洛沙姆407口腔用抑菌抗炎温敏凝胶的设计及评价

目的:牙髓炎、牙周炎、口腔溃疡等口腔疾病发病率高、发病人群广,严重困扰着人类健康。醋酸氯己定(CHX)为国内外公认的口腔抑菌制剂金标准,将其与透明质酸(HA)联合使用,抑菌的同时可起到促进黏膜修复和组织再生的效果,但是CHX与HA一旦相遇会形成沉淀。本文以泊洛沙姆407(P407)为凝胶骨架设计一种能同时载入CHX与HA的温敏型水凝胶,在解决配伍问题的同时,克服贴膜、漱口水、凝胶等常用制剂药物停留时间短、不能定位给药的缺陷,为口腔疾病的治疗提供一种新产品。方法:制备一系列浓度的P407溶液通过测定胶凝温度考察P407溶液的浓antibiotic-bacteriophage combination度对胶凝温度的影响规律;在不同浓度P407溶液中加入不同浓度HA溶液考察HA的加入对P407溶液胶凝温度、胶凝时间、黏度和强度的影响;筛选可以降低HA-P407凝胶黏度和强度的助剂并探讨其原理,选择合适的浓度和比例制备温敏凝胶基质溶液;通过工艺的优化考察CHX和栀子苷(GE)的载入方法从而确定温敏凝胶水溶液的最优处方比例和制备方法。按照最优处方制备温敏凝胶水溶液,通过外观性状、胶凝温度、胶凝时间、黏度、PH值等指标,考察温敏凝胶水溶液的理化性质。通过扫描电镜(SEM)对其进行表征。采用高效液相色谱(HPLC)建立测定GE含量的体外分析方法,并进行方法学验证。以外观性状、胶凝温度Pexidartinib体外、胶凝时间、黏度和强度等指标作为考察项目,在加速条件下对其进行初步稳定性研究。进一步通过无膜溶出法对体外凝胶溶蚀和药物释放进行考察。以细菌生长曲线法考察最优处方制备的温敏凝胶水溶液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、绿脓杆菌、肺炎链球菌、化脓性链球菌的抑菌效果。对Wister白化大鼠建立口腔溃疡模型,评估温敏凝胶的生物相容性以及对口腔溃疡的治疗作用。结果:当P407溶液浓度从14.00%增加到15.00%,P407溶液的凝胶化温度从34.60℃逐渐降低到28.10℃,均低于并接近于体温。随着HA的加入,不同浓度的P407水凝胶的凝胶温度和凝胶时间都有所下降,黏度和强度有所增加。在使P407溶液保持温敏凝胶性能的HA浓度范围内,这些性能的变化程度随着HA浓度的增加而增大。为了充分发挥HA对口腔溃疡治疗的有益作用,并与科研制剂和商业制剂中用量分别为0.62%和0.20%相结合,且保持制剂应用前后适当的流变性能,选择0.50%作为HA的添加量进行后续研究。0.50%HA溶液本身黏度就很高,加入它会显著提高P407溶胶和凝胶的黏度。基于中性电解质可以屏蔽大分子电解质的电黏效应的原理,本研究在HA-P407水凝胶中加入少量氯化钠(Na Cl),调整其黏度和强度,使其更适合于口腔溃疡的治疗。P407溶液在14.00%~15.00%浓度范围内,当Na Cl的添加量为0.10%~0.40%时,可以保持凝胶的温敏性能。随着Na Cl浓度的增加,P407凝胶的成胶温度逐渐降低。而在HA-P407溶液体系中,Na Cl对HA存在的影响大于P407胶束。在0.05%~0.20%范围内,HA-P407水凝胶的黏度和强度随Na Cl浓度的增加而显著降低,但凝胶温度和凝胶时间均有所增加。当Na Cl浓度超过0.20%时,所有HA-P407溶液均失去温敏凝胶特性,且P407浓度越小,HA-P407溶液维持温敏凝胶特性所能承受的Na Cl浓度越低。综上所述,高Na Cl浓度会破坏HA-P407溶液的温度敏感凝胶性质,但少量Na Cl的加入会降低凝胶的强度和黏度。P5N4(P407/Na Cl/HA=15.00:0.20:0.50,w/w/w)配方成胶温度适宜,凝胶强度和黏度较低,涂胶方便,能在涂胶部位迅速形成一层凝胶膜。因此,我们选择这种配方作为凝胶基质进行后续制剂研究。HA和CHX在水溶液中直接接触由于成盐反应会析出白色絮状沉淀,且Na Cl与CHX直接混合由于盐析效应会析出沉淀。首先在溶解有CHX的水中加入P407,使CHX被包裹在P407胶束的疏水内核中,然后与溶解有Na Cl和GE的HA溶液混合,制备出最终处方为15.00%P407、0.50%HA、0.20%Na Cl、0.10%CHX、0.50%GE的澄清透明的温敏水凝胶(HPN_(C-G))溶液。表征结果显示:HPN_(C-G)温敏凝胶溶液外观澄清、透明,胶凝温度为27.10℃,低于口腔温度,可在生理温度(通常在37.00℃)下从溶液可逆地转变为凝胶状态,使其便于通过注射方式应用于口腔黏膜溃疡部位。37.00℃时的胶凝时间为30.00 s,能够快速胶凝。黏度为440.40 Pa·s,符合临床口腔用药需求。p H值为6.68,处于唾液p H值范围(6.00-7.50)。SEM图像显示纯P407凝胶的结构为多孔状和海绵状。然而,HA的加入显著降低了水凝胶的孔径,使其具有更加致密的多孔结构。0.20%Na Cl的加入使凝胶孔径更加疏松和不规则。所建立的GE的HPLC分析方法:色谱柱为Inertsustain?C18柱(4.6 mm×250mm,5μm),检测波长为238 nm,流动相为甲醇-0.05%磷酸水溶液(46:54,v/v),流速为1.0 m L/min,柱温为35℃,进样量为10μL。所建立的标准曲线方程为A=20341 c+21654(R~2=0.9999),表明GE在0.01~0.32 mg/m L浓度范围线性关系良好,该方法专属性良好,稳定性、日内和日间精密度RSD均小于2%,回收率在96.44%~103.01%之间,符合方法学要求。初步稳定性考察结果显示,HPN_(C-G)温敏凝胶经过加速实验,各项指标均未出现明显改变,表明制剂稳定性良好。制备温敏凝胶溶液,进行体外凝胶溶蚀和药物释放研究。随着P407的浓度从14.20%增大到15.00%,凝胶溶蚀速率逐渐降低。Na Cl加入提高凝胶溶蚀速率,同时也提高了GE从凝胶中释放的速率。HPN_(C-G)温敏凝胶溶液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌和绿脓杆菌的抑菌效果显著高于同样含有CHX(0.05%~0.10%)的市售漱口水,且含0.10%CHX的凝胶溶液对绿脓杆菌的抑菌效果优于0.05%CHX获悉更多凝胶。治疗一周后,各组溃疡均有明显好转,HPN_(C-G)温敏凝胶组口腔黏膜外观最接近正常,且溃疡面积恢复率最高,为86%左右。HPN_(C-G)温敏凝胶给药7天后,舌黏膜组织的组织学图像与未与水凝胶接触的正常舌黏膜组织图像非常相似。与HPN_(C-G)温敏凝胶接触的组织显示出健康的骨骼肌纤维,没有明显的炎症、坏死或化生,从而证明HPN_(C-G)水凝胶组具有高度的生物相容性。结论:本研究将HA和CHX两种混溶会产生白色絮状沉淀的药物同时载入到P407凝胶骨架中,解决了配伍禁忌问题,研制出一种药物释放恒定且起效快、凝胶降解速率快、胶凝时间短、黏度和强度适宜、生物相容性良好、制备工艺简单且兼具抗菌和抗炎作用的HPN_(C-G)温敏性水凝胶。该HPN_(C-G)温敏凝胶能够抑制以革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和酵母菌为代表的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌的生长,在大鼠舌黏膜溃疡模型中也表现出显著的治疗效果,作为一种口腔黏膜给药制剂具有较为广阔的临床应用前景。

宰后贮藏期间滩羊肉线粒体氧化磷酸化与色泽稳定性的关系

为阐明滩羊肉贮藏期间氧化磷酸化(oxidative phosphorylation OXPHOS)与色泽稳定性的关系,以6月龄滩羊背最长肌(M longissimus dorsi)为研究对象,测定其4℃贮藏0、1、2、3、4、6、8 d时色泽稳定性与氧化磷酸化各指标的变化。主要研究结果如下:贮藏0-8 d,L*、a*、b*值均呈先上升后下降趋势(P < 0.05);R630/580显著下降(P < 0.05);高铁肌红蛋白(MetMb)相对含量呈显著下降后上升趋势(P < 0.05);氧合肌红蛋白(OxyMb)相对含量显著上升后下降(P < 0.0inappropriate antibiotic therapy5);脱氧肌红蛋白(DeoMb)相对含量变化整体呈下降趋势(P < 0.05);线粒体膜通透性显著增大(P < 0.05);线粒体膜电位显著降低(P < 0.05);线粒体复SCH727965 IC50合物I、II、III、IV活性显著下降(P < 0.05),复合物Ⅴ活性显著升高(P < 0.05);活性氧(ROS)含量显著上升(P < 0.05);超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘SAG配制肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著下降(P < 0.05);过氧化氢酶(CAT)活性呈先上升后下降趋势(P < 0.05);ATP、ADP、AMP含量显著下降(P < 0.05)。Mb衍生态相对含量、肉色指标与氧化磷酸化各指标互有显著相关性。以上结果表明,宰后贮藏期间滩羊肉中内源抗氧化酶系的失效导致肌细胞内产生过多的ROS,致使线粒体完整性受到破坏,对线粒体氧化磷酸化相关酶活性产生影响,进而影响肌细胞中MetMb还原酶系统的活力,致使MetMb无法被还原,最终导致滩羊肉色泽稳定性变差。

超声引导下3种阻滞技术对行电视辅助胸腔镜手术患者早期恢复影响比较

目的 探讨超声引导下竖脊肌平面阻滞(ESPB)、前锯肌平面阻滞(SAPB)、胸椎旁神经阻滞(TPVB)3种阻滞法对行电视辅助胸腔镜手术(VATS)患者术后早期恢复的影响。方法 选取年龄18~65岁、美国麻醉医师协会(ASA)分级Ⅰ~Ⅱ级,2020年7月至2021年12月于该院择期行VATS的患者90例,随机分为3组,分别行ESPB(E组)、SAPB(S组)和TPVB(T组),每组30例。观察比较3组患者术中阿片类药物、血管CDK抑制剂活性药物使用情况,术后第1天术后恢复质量(QoR-40)评分,以及术后2、4、8、12、24 hporous media疼痛[视觉模拟评分法(VAS)]评分,镇痛泵首次按压时间,曲马朵镇痛补救率,患者满意度,神经阻滞穿刺时间,穿刺并发症发生情况,术中低血压发生率,首次下床活动时间,术后住院时间等。结果 3组患者术中舒芬太尼用量相近,术后第1天的QoR-40评分及术后2、4、12、24 h静息和咳嗽时疼痛VAS评分、患者满意度比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。E、S组患者术中血管活性药物使用率较T组明显降低,E、S组患者神经阻滞Nirogacestat生产商穿刺时间明显短于T组,而T组患者低血压发生率显著高于E、S组,差异均有统计学意义(P<0.05)。3组患者术后镇痛泵首次按压时间、有效按压次数、曲马朵镇痛补救率、首次下床活动时间、术后住院时间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。3组患者穿刺均无气胸、误注入血管、血肿等并发症发生。结论 超声引导下ESPB和SAPB均能加快VATS患者术后康复和提供有效镇痛,且超声引导下ESPB和SAPB较TPVB操作更简单快捷,术中低血压发生率更低。

基于Citespace软件可视化分析高原训练营养策略研究进展

研究目的:近年来,关于高原训练的研究不仅集中于运动员和登山爱好者,也不断受到高海拔地区作战和训练部队官兵的关注。高原训练通过增强机体运输和利用氧的能力、增强骨骼肌代谢能力及心肺功能,为提高运动能力打下生物学基础,进而被广泛使用。但高原训练也有其不利的影响,如:高原缺氧导致高原训练人群VO2max降低,骨骼肌蛋白质合成受抑制,肌肉质量下降,同时免疫抑制和环境改变增加急性高山病、高原肺水肿和高原脑水肿等急性高原疾病的风险,使得高原训练人群难以保持与平原同样的强度或运动量训练。高原训练时运动员最佳训练效果与营养补充之间的关系密不可分,适宜的营养策略对提高高原训练人群的运动表现,增强高原适应能力,促进机体恢复意义重大。因此,本文通过对Web of Science数据库和CNKI数据库中所收录的近30年相关文献进行检索收集,利用CiteSpace软件生成可视化科学知识图谱,分析并总结现阶段国内外研究热点、现状及发展趋势,探索其中差异,以期为该领域的研究发展贡献力量。研究方法:本研究采用文献资料法,结合CiteSpace可视化软件,对近30年国内外高原训练营养领域相关研究文献绘制知识图谱。为确保文献的高度相关以及权威性,文献分别选取于web of science核心biomarkers tumor集与CNKI收录的核心期刊,时间跨度为1990年至2021年。检索过程分三步进行。首先,在检索栏输入主Enasidenib生产商题词TS=(“altitude training”or”hypoxia exercise”)共计得到7171条相关文献,记录为#1。其次,在检索栏继续输入主题词TS=(“dietary”or”nutrition”or”supplementation”),共计得到644489条相关文献,记录为#2。利用编辑检索式对#1和#2组配,组配检索式选”AND”,最终得到440条文献题录。通过对国内外该领域发文量、国家地区分布、高频关键词、关键词聚类及文献共被引等相关数据进行分析,为科学地选择营养补剂、促进高原环境健康提供依据。研究结果:1.发文量。该领域最早于1991年在荷兰开始进行相关研究。近30年该领域的发文量总体呈上升趋势,1991年至2010年期间发展较为平稳,2011年至2017年呈快速发展的趋势,近三年相对趋于平稳。2.发文国家/区域分布。美国(133)位于第一,且超过了发文总量的25%。我国位于第13名,从2008年至今发文量为17篇,我国对于相关领域的研究较少。以中介中心性≥0.1为标准,结合突发性探测值可以看出,美国(7.20)和法国(4.82)突发性探测值较高,表示在此阶段内这两个国家在高原营养研究领域发表文章数量有激增现象。3.发文机构。通过对该研究领域的发文机构进行分析,发现该领域排名前10的机构均为国外机构,通过中介中心性来看,机构间合作较少。中国在此方面的研究论文数量较少且影响力较弱,还需要加强跨地区、跨国家的合作。4.研究热点。研究热点主要集中在能量代谢系统、微量元素、骨骼肌系统、免疫系统、功能因子等方面。研究目的主要是研究氧化应激、骨骼肌、新陈代谢、适应、急性高山病、疲劳和运动表现等。研究对象以大鼠、运动员和士兵为主。实验环境包括低压低氧、常压低氧和模拟海拔。干预营养包括谷胱甘肽、抗氧化剂、硝酸盐、维生素、左旋肉碱、碳水化合物、铁、氨基酸和谷氨酰Panobinostat使用方法胺等。研究指标主要集中在身体成分、脂质过氧化物、缺氧诱导因子、耗氧量、计时赛运动表现、白介素-6、氧吸收动力学、红细胞和一氧化氮等。5.研究趋势。研究趋势主要包括应用人群逐渐精细,应用条件逐渐明晰,应用功能不断拓展,干预手段从单一营养补剂向组合营养补剂转化。应用人群逐渐精细主要表现在该领域的研究对象从最初的运动员逐渐发展为军事领域和普通高山运动者。应用人群的细化更利于形成适合于不同人群的运动处方,提高不同人群的作用效果。应用条件逐渐明晰主要表现在现有高原营养补剂的应用和研究随着暴露时间和暴露海拔趋于精细化。根据运动员、部队官兵、高原旅游爱好者等几类运动人群的暴露海拔和暴露时间的不同制定不同的营养策略。应用功能不断拓展主要表现在研究不断由减少能量缺乏、肌肉流失、减少氧化应激向减少由缺氧引起的中枢疲劳、外周疲劳方面发展。干预手段从单一营养补剂向组合营养补剂转化主要表现在单一氧化剂的作用已经相对明晰,但受试者在高原训练中情况的发生往往比不是单一的,现在国外已有研究发现组合营养剂干预效果更为明显。研究结论:1.近30年来,该领域的研究稳步缓慢上升,美国、英国等国家在该领域的研究较早,发文量较多,我国与其他国家/机构的合作较少,我国还需要加强跨地区、跨国家的合作。2.高原训练营养领域的研究热点紧密围绕身体机能和运动能力展开,主要包含能量代谢系统、微量元素、骨骼肌系统、免疫系统、功能因子等方面。3.该领域的发展趋势为:应用人群的精细化,应用条件逐渐明晰,应用功能不断拓展,干预手段从单一营养补剂向组合营养补剂转化。4.立足我国在该领域的研究现状,未来我国高原营养策略研究应把握产业发展前景,加强科技创新,发展应用于军人、运动员、普通大众的个性化营养处方。通过对近三十年国内外高原训练营养领域研究的知识图谱可视化分析,不仅对当下高原训练营养策略的研究现状及热点问题有进一步掌握,同时还为我国接下来的高原训练营养策略研究提供思路和借鉴,并结合我国的具体情况开展具有我国特色的高原训练营养策略研究。

α-硫辛酸在微囊藻毒素-LR诱导草鱼卵巢细胞损伤中的作用

为研究α-硫辛酸(Alpha lipoic acid,α-LA)在微囊藻毒素-LR(Microcystin-LR,MC-LR)诱导水生动物毒性效应中的保护作用,本研究以草鱼卵巢(Grass carp ovary,GCO)细胞为研究对象,检测分析了不同浓度α-LA以及α-LA与MC-LR共同暴露对GCO细胞的活力,随后根据测定的结果设置对照组(0 μmol·L~(-1) MC-LR+0 μmol·L~(-1) α-LA)、125 μmol·L~(-1) α-LA组、24 μmol·L~(-1) MC-LR组及125 μmol·L~(-1) α-LA+24 μmol·L~(-1) MC-LR组,检测分析了α-LA在缓解MC-LR诱导GCO细胞活性、氧化应激以及炎症方面的作用。结果表明:与对照组相比,24 μmol·L~(-1) MC-LR可显著诱导LDH活性和MDA含量显著上升,同时显著抑制GSH活性(P<0.05),当MC-LR处理组中加入125 μmol·L~(-1) α-LA后,与MC-LR单独暴露组相比,LDH活性和MDA含量均显著下降(P<0.05),但GSH活性却显著上升了(P<0.05)。对氧化相关基因分析发现,与对照组相比,24 μmol·L~(-1) MC-LR可显著降低SOD1、CAT和GST基因的表达量(P<0.05),当125 μmol·L~(-1) α-LA与24 μmol·L~(-1) MC-LR共同作用E-616452抑制剂于GCO细胞后,与MC-LR单独暴露组相比,联合暴露组的GST基因显著上升(P<0.05),但SOD1和CAT两个基因的表达变化不显著(P<0.05)。此外,对炎症因子进行分析发现,MC-LR单独暴露组TNFα和IL11基因的相对表达水平更多显著高于对照组(P<0.05),但联合暴露组中的TNFα和IL11基因的相对表达水平却显著低于MC-LR单独暴露组(P<0.05)。研究结果表示,α-LAHigh-Throughput可缓解MC-LR诱导的氧化应激,提高细胞活力,抑制GCO细胞炎症的发生,从而减弱MC-LR对GCO细胞的损伤。

龙胆泻肝汤辅助治疗幽门螺杆菌感染慢性胃炎临床研究

目的 探究龙胆Specific immunoglobulin E泻肝汤联合四联疗法治疗幽门螺杆菌(helicobacter pylori, Hp)感染慢性胃炎的临床效果。方法 选取2021Fer-1年3月—2022年8月本院收治的Hp感染慢性胃炎患者114例,根据随机数字表法将其分为对照组和试验组,每组57例。对照组采取四联疗法,试验组采取龙胆泻肝汤联合四联疗法。治疗2周后,对比2组患者临床疗效、不良反应发生率及治疗前后血清学相关指标水平。结果 治疗2周后,试验组临床治疗总有效率显著高于对照组(P<0.05)。试验组胃蛋白酶原Ⅱ(pepsinogenⅡ,PGⅡ)、白细胞介素-8(interleukiMDV3100体外n-8,IL-8)水平显著低于对照组(P<0.05);试验组胃蛋白酶原Ⅰ(pepsinogenⅠ,PGⅠ)水平、胃蛋白酶原比值(pepsinogen ratio, PGR)显著高于对照组(P<0.05)。治疗期间,试验组患者不良反应发生率显著低于对照组(P<0.05)。结论 龙胆泻肝汤联合四联疗法治疗Hp感染慢性胃炎有助于促进胃酸分泌,改善胃黏膜萎缩,降低炎性反应,提高临床疗效,降低不良反应发生风险。

河南华溪蟹ShJIP4蛋白的表达特性及镉胁迫效应研究

JIP(JNK-interacting protein)蛋白作为JNK MAPK(应激活化蛋白激酶-丝裂原活化蛋白激酶)信号通路中的支架蛋白,可以通过与JNK MAPK信号通路中的其他成员相互作用,从而激活JNK等下游因子,继而参与生物体细胞分裂、凋亡等生理过程。在哺乳动物中,JIP4可在睾丸中高表达并定位在生殖细胞中,可参与雄性动物的生殖过程。镉(Cadmium,Cd)作为一种有毒重金属,可以通过多种途径进入水体中,造成水体污染。镉进入水生动物体内在器官中积累引起功能紊乱。研究表明,镉暴露会使睾丸萎缩,形态结构发生改变,引起生精细胞凋亡、精子发生障碍,精子数量减少,活力下降,影响生殖能力,甚至引起不育。本课题对河南华溪蟹(Sinopotamon henanense)中JIP4蛋白的表达特性以及镉胁迫效应进行了研究。内容包括三个方面:(1)河南华溪蟹Shjip4基因全长获selleck PD-0332991得、生物信息学分析和组织表达模式分析采用RACE-PCR技术,克隆获得Shjip4基因c DNA全长,分析核酸和氨基酸序列,通过对河南华溪蟹Shjip4基因蛋白结构域序列进行预测并推测其功能。同时,构建河南华溪蟹与其他物种JIP4蛋白系统发育进化树,分析其进化地位。此外,取副性腺、血淋巴、肝胰腺、心肌、精巢、鳃、卵巢、中肠8种器官组织,提取各组织总RNA并将其反转录成为c DNA,利用q PCR定量检测Shjip4在各组织中的分布情况。(2)ShJIP4蛋白在河南华溪蟹精巢及精子顶体反应中定位研究取河南华溪蟹精巢,经固定、脱水、透明、浸蜡包埋,并利用A23187诱导精子的顶体反应,采用免疫荧光技术,观察ShJIP4蛋白在精子发生和顶体反应过程中的定位情况。(3)镉暴露对河南华溪蟹精巢中ShJIP4的影响实验设置了14.5 mg/L(1/16 LC_(50))、29 mg/L(1/8 LC_(50))、58 mg/L(1/4 LC_(50))Cd Cl_2三个实验组和一个空白对照组(control),在镉暴露1 d、3 d、5 d取精巢提取总RNA,并反转录成c DNA,检测Shjip4、cdc42、mkk、jnk基因m RNA的表达量。同时,用免疫荧光probiotic persistence法分析镉暴露后ShJIP4在精巢中的分布情况。利用Western blot技术,检测镉暴露后精巢中ShJIP4蛋白的表达。研究结果如下:(1)河南华溪蟹Shjip4基因克隆与生物信息学分析及组织表达。河南华溪蟹Shjip4基因全长共3355 bp,包含62 bp的5’非编码区(5’UTR),2628 bp的开放阅读框(ORF)和665 bp的3’非编码区(3’UTR)。其中,开放阅读框编码875个氨基酸。ShJIP4氨基端有一个保守的JNK-Sap K_ap_N结构域。氨基酸全长序列同一性结果显示,河南华溪蟹ShJIP4与甲壳纲三疣梭子蟹(Portunus trituberKPT-330culatus)Pt JIP4相似度最高。河南华溪蟹ShJIP4先与甲壳纲JIP4聚为一支,再与脊椎动物鱼纲、鸟纲、哺乳纲聚为一支,与传统分类学一致。河南华溪蟹Shjip4在各个组织中均有不同程度的表达,且在精巢中表达最高。(2)ShJIP4蛋白参与河南华溪蟹精子发生和顶体反应过程。ShJIP4蛋白在精子发生过程中的定位分布:精原细胞期,主要定位在细胞质中;初级精母细胞期,主要定位在细胞质,在细胞核中略有分布;次级精母细胞期,主要在细胞核中分布;精细胞期,主要分布在细胞核以及顶体结构中。ShJIP4蛋白在精子未发生顶体反应阶段主要定位于细胞核和顶体帽中;在头帽凸起阶段,主要定位于顶体帽和顶体囊中;顶体囊外翻阶段,主要定位于顶体帽和顶体管中;在顶体管延伸阶段,主要定位顶体帽中;在顶体反应完成阶段,定位于顶体帽中。(3)镉暴露对河南华溪蟹精巢ShJIP4的影响。镉暴露后,精巢中Shjip4、cdc42、mkk和jnk基因m RNA表达量较对照组相比均有显著升高(P<0.05),在同一时间不同镉浓度,Shjip4、cdc42、mkk和jnk基因m RNA表达量呈现先升高后降低的趋势。镉暴露后精巢中ShJIP4蛋白表达量的变化升高,并随着镉处理浓度的升高呈现先升高后降低的趋势,这与Shjip4 m RNA的表达的变化趋势基本一致。结果表明,河南华溪蟹ShJIP4参与了精子发生和顶体反应过程,镉暴露激活了JNK MAPK信号转导通路,上调了ShJIP4的表达。研究结果为十足目甲壳动物JIP4蛋白的功能、生殖调控机制提供了理论基础,为镉对甲壳类动物生殖毒性的毒性效应及作用机制,提供了数据支撑。