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目的:应用肌骨超声技术观察壮医药物竹罐疗法治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的临床疗效,为壮医药物竹罐疗法治疗RA的临床应用提供进一步https://www.selleck.cn/products/MK-1775.html的临床客观依据。方法:广西国际壮医医院风湿病科符合纳入标准的RA患者,按随机数字表法简单地随机分为观察组和对照组各41例。两组均予基础抗风湿药(甲氨蝶呤10mg/W)治疗;观察组在基础治疗上应用壮医药物竹罐疗法;对照组则采用同等清水煮罐治疗。两组均治疗4周。对两组在治疗前后的中医证候积分、VAS疼痛评分、C反应蛋白、红细胞沉降率、DAS28评分进行观测记录,并对两组在治疗前后的肌骨超声下滑膜血流信号、关节滑膜增生情况进行分析。通过对采集到的资料进行统计学分析,多方面评价壮医药物竹罐疗法治疗RA的临床效果,以及DAS28评分、C反应蛋白、红细胞沉降率与肌骨超声滑膜血流信号及关节滑膜增生的相关性。结果:(1)共收集病例77例;两组受试对象基线资料性别、年龄、病程差异无统计学意义(P>0.05)。(2)两组患者VAS疼痛评分经治疗后两组均较前下降,两组间差异具有统计学意义(P<0.05),观察组治疗后较治疗前VAS疼痛评分差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)两组患者DAS28评分经治疗后两组评分较前下降,两组间差异具有统计学意义(P<0.05),观察组治疗后较治疗前DAS28评分差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)治疗后中医症候积分经治疗后与对照组比较,壮医药物竹罐疗法观察组总有效率较优,差异具有统计学意义(P<0.05)。(5)两组患者治疗后的关节滑膜血流信号较前减弱,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗后的关节滑膜增生情况差异有统计学意义(P<0.05)。(6)肌骨超声下滑膜血流信号及滑膜增生情况与DApublic biobanksS28评分、CRP、ESR相关性分析结果显示,DAS28评分、CRP值均与滑膜血流信号差异性及滑膜增生情况存在正相关(P<0.01),而ESR与滑膜增生情况不存在明显相关性(P>0.05)。(7)两组治疗后炎症指标CRP、ESR差异均存在统计学意义(P<0.05)。结论:采用壮医药物竹罐疗法治疗类风湿关节炎,可以有效地改善关节疼痛,降低炎Talazoparib小鼠症指标及疾病活动度,应用肌骨超声可以客观可靠的评价RA的疾病活动及药物治疗的疗效。

目的:分析儿童肺炎支原体坏死性肺炎(Mycoplasma pneumoniae necrotizing pneumonia,MPNP)的危险因素,以使临床及早识别及诊治MPNP,并改善MPNP的预后。方法:1.采用回顾性研究方法,收集2021年1月至2022年biotic stress12月在山西省儿童医院呼吸科住院治疗、资料完整并且诊断为重症肺炎支原体肺炎(severe mycoplasma pneumoniae pneumonia,SMPP)的患儿,分为MPNP组(50例)和非MPNP组(101例)。2.收集患儿的相关资料,包括:一般资料;实验室指标;病原学检测;胸部CT;支气管镜检查结果;治疗。3.通过单因素分析差异有统计学意义的指标Panobinostat进行多因素Logistic回归分析,从而获得MPNP的独立危险因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估研究指标诊断MPNP的效能。结果:1.MPNP组与非MPNP组的性别构成及年龄分布差异无统计学意义(P>0.05)。MPNP组入院前病程、发热时间、住院时间均长于非MPNP组,差异有统计学意义(P<0.05)。2.MPNP组白细胞计数、中性粒细胞百分比、C反应蛋白、红细胞沉降率、降钙素原、丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、D-二聚体水平大于非MPNP组,总蛋白、白蛋白、前白蛋白小于非MPNP组,差异均有统计学意义(P<0.05)。3.MPNP组出现胸腔积液、胸膜增厚、支气管肺泡灌洗液米汤样浑浊、以及使用其他抗生素、低分子量肝获悉更多素钙的人数比例大于非MPNP组,MPNP组支气管镜介入时间大于非MPNP组,差异有统计学意义(P<0.05)。4.多因素Logistic回归分析结果显示,较高水平的白细胞计数[OR(95%CI)=1.474(1.236~1.756)]、D-二聚体[OR(95%CI)=1.320(1.163~1.498)]、以及出现支气管肺泡灌洗液米汤样浑浊[OR(95%CI)=11.832(2.312~60.556)]是MPNP发生的独立危险因素(P<0.05),较高水平的前白蛋白[OR(95%CI)=0.981(0.968~0.994)]是抑制MPNP发生的的保护因素(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示,白细胞计数、D-二聚体、前白蛋白均具有诊断儿童MPNP的应用价值(P<0.05),截断值分别为10.17×109/L、2.35mg/L、94.00mg/L。联合三个指标可进一步提高诊断效能[AUC(95%CI)=0.932(0.886~0.979)],灵敏度和特异度分别为0.920、0.851。结论:本研究得出白细胞计数、D-二聚体、前白蛋白、及出现支气管肺泡灌洗液米汤样浑浊是SMPP患儿并发MPNP的独立危险因素,当白细胞计数>10.17×109/L、D-二聚体>2.35mg/L、前白蛋白<94.00mg/L、支气管镜检查示肺泡灌洗液米汤样浑浊时应警惕并发MPNP,临床应进一步完善相关检查以明确病情,及早进行干预,改善患儿的预后。

目的 探讨低分子肝素治疗胎儿生长受限的效果及对胎儿窘迫发生率的影响。方法 收集2018年1月～2022年2月在本院就诊的胎儿生长受限的孕妇64例,采用随机数字表法分组,即对照组(n=32)、观察组(n=32)。对loop-mediated isothermal amplification照组孕妇采用常规治疗,观察组在常规治疗的基础上予以低分子肝素治疗,连续注射7d,7d为1个疗程,1个疗程结束后,休息1周,继续第2个疗程的治疗,共3个疗程。对比两组胎儿生长发育、临床疗效、新生SCH727965价格儿不良结局发生率。结果 观察组胎儿头围(1.74±0.46) mm、双顶径(2.42±0.31) mm、宫高(1.67±0.11) mm、腹围(1.46±0.25) mm显著高于对照组胎儿生长发育(t=8.895,P=0.000;t=9.939,P=0.000;t=23.519,P=0.000;t=14.727,P=0.000)。观察组临床有效率93.75%显著高于对照组75.00%(2=4.Erastin配制267,P=0.039)。观察组新生儿不良结局总发生率6.25%显著低于对照组34.38%(2=7.819,P=0.005)。结论 低分子肝素治疗胎儿生长受限,效果理想,可有效降低不良妊娠结局发生率,有利于胎儿生长。

【研究背景】经皮冠状动脉介入治疗术(percutaneous coronary intervention,PCI)是目前全球范围内应用最广泛的心肌再灌注疗法,可有效提高冠心病和心肌梗死患者的生存率,改善患者的生存质量。然而,PCI术后由于支架内新生的内膜逐渐增厚演变为新生动脉粥样硬化斑块,导致支架内再狭窄(in-stent restenosis,ISR),甚至可破裂进展为急性心血管不良事件,严重影响患者预后。目前临床上使用的支架涂层药物较为缺乏,仅有紫杉醇(paclitaxel)和雷帕霉素(西罗莫司,rapamycin或sirolimus)及其衍生物等,这些药物存在着内皮愈合延迟,支架内血栓形成增加等问题,严重影响治疗效果。因此,寻找疗效肯定、不良反应较少的抗ISR支架涂层药物是十分必要和迫切的项目组前期研究发现,源于云南特色药用植物灯盏花的活性成分-灯盏乙素(Scutellarin)可保护血管内皮细胞,同时在动物血栓模型中有显著的抗血栓作用和较强的抗血小板聚集作用,提示灯盏乙素具有潜在的抗ISR作用。动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是PCI术的重要的病理基础,要明确灯盏乙素对PCI术后ISR的治疗作用,就必须关注灯盏乙素对AS的疗效。本论文首先复制APOE~(-/-)小鼠实验性动脉粥样硬化模型,从整体水平评估灯盏乙素防治AS的作用。接下来,构建AS小型猪冠状动脉支架模型,从整体水平评估灯盏乙素涂层支架抑制PCI术后ISR的作用。进一步地,从与ISR密切相关的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)的角度,复制H_2O_2损伤VSMCs模型,观察灯盏乙素对VSMCs增殖、迁移、凋亡,表型转化及氧化应激的影响。为了明确灯盏乙素抗ISR的潜在作用机制,应用转录组学测序及分子对接技术探索灯盏乙素抑制PCI术后ISR的信号通路及关键靶点。在分子水平验证灯盏乙素对PI3K/AKT/m TOR及IKKs/NF-κB通路关键因子的交互调控作用,以期从整体、细胞和分子水平系统阐述灯盏乙素治疗ISR的作用机制。【目的】研究灯盏乙素抑制PCI术后支架内再狭窄的作用及分子机制。【方法】1灯盏乙素对APOE~(-/-)小鼠AS的治疗作用研究复制APOE~(-/-)小鼠实验性动脉粥样硬化模型。1.1组织病理学观察:分别使用大体油红O染色,HE染色、冰冻油红O染色、Masson染色对主动脉组织进行病理学检查,评价灯盏乙素对主动脉斑块组织病变程度、脂质沉积、胶原纤维增生程度的影响。1.2透射电镜检查:不同剂量的灯盏乙素治疗后对APOE~(-/-)小鼠主动脉微观结构改变的影响。1.3酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测灯盏乙素对APOE~(-/-)小鼠血清中TNF-α,IL-1β的影响。1.4免疫荧光检测不同剂量灯盏乙素对小鼠主动脉血管组织平滑肌细胞表型转换标志物SM22α,α-SMA和OPN蛋白表达的影响。1.5 Western blot检测灯盏乙素对小鼠主动脉血管组织平滑肌细胞表inflamed tumor型转换标志物SM22α,α-SMA和OPN蛋白表达的影响。1.6 Western Blot检测灯盏乙素对小鼠主动脉血管组织Bax,Bcl-2,Cleaved-caspase-3的蛋白表达的影响。1.7试剂盒检测各组小鼠血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,检测一氧化氮(nitric oxide,NO),还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH),谷胱甘肽过氧化酶(glutathione peroxidase,GSH-PX),过氧化氢(H_2O_2)的含量。1.8用二氢乙锭(Dihydroethidium Staining,DHE)荧光探针测定各组小鼠主动脉组织匀浆内的ROS的含量。2灯盏乙素涂层支架抑制PCI术后再狭窄作用研究2.1构建AS小型猪冠脉支架模型,将不同剂量的灯盏乙素涂层在支架表面,以雷帕霉素涂层(SES)支架为阳性对照组。实验动物全麻后于实验当天和28天均行冠状动脉定量造影(quantitative coronary angiography,QCA)和光学相干断层扫描(Optical coherence tomography,OCT),观察记录ISR相关的参数。2.2 AS小型猪支架植入术后28天处死取动物,取支架段血管标本行HE染色,在光学显微镜下评估支架植入段血管的损伤积分、炎症积分及血管内皮化积分,评估灯盏乙素涂层支架抗ISR的安全性和有效性,探讨灯盏乙素作为冠状动脉支架涂层药物的可能性。3灯盏乙素对VSMCs增殖、迁移、凋亡,表型转换及氧化应激的影响体外培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞(A7r5),复制H_2O_2损伤模型。3.1采用CCK-8法检测灯盏乙素对VSMCs增殖的影响。3.2划痕法检测灯盏乙素对VSMCs迁移的影响。3.3流式细胞术检测灯盏乙素对VSMCs细胞周期的影响。3.4免疫荧光法检测灯盏乙素对VSMCs表型转换标志物SM22α,α-SMA和OPN蛋白表达的影响。3.5 Western blot检测灯盏乙素对VSMCs表型转换标志物SM22α,α-SMA和OPN蛋白表达的影响。3.6荧光探针检测单个细胞及线粒体内ROS的荧光强度。3.7试剂盒检测Total SOD,Mn SOD,MDA,NADPH氧化酶的活性。4转录组学测序及分子对接技术预测灯盏乙素抗ISR的潜在作用靶点及通路4.1 Apo E~(-/-)小鼠主动脉血管组织的转录组学测序根据文库数据的产出及有效浓度需求合并,进行Illumina PE150测序。将clean reads比对到转录组数据,采用Hisat2软件对RNA-Seq测序数据进行比对分析。4.2使用Discovery Studio软件进行分子对接,通过对灯盏乙素抗AS的靶点、通路进行数据挖掘,为后续实验研究提供实验依据。5灯盏乙素对PI3K/AKT/m TOR及IKKs/NF-κB信号通路的调控作用研究5.1 Western blot方法检测PI3K/AKT/m TOR通路相关蛋白的表达及其磷酸化后蛋白的改变。5.2 AKT1抑制剂MK2206(20μmol/L)处理后,观察灯盏乙素对PI3K/AKT/m TOR通路的调控作用;检测灯盏乙素对平滑肌细胞的表型转换和细胞凋亡的影响。5.3 NF-κB抑制剂BAY11-7082(2μmol/L)预处理后,观察灯盏乙素对PI3K/AKT/IKKs/NF-κB信号通路的影响;检测灯盏乙素对平滑肌细胞表型转换的影响。【结果】1灯盏乙素通过抗炎、抗氧化、促进平滑肌细胞凋亡及调控其表型转换治疗AS1.1组织病理学检测结果:大体油红O染色,HE染色、油红O染色、Masson染色结果提示,灯盏乙素能明显减少主动脉斑块组织脂质沉积,减轻炎症反应,抑制斑块组织胶原增生,减轻Apo E~(-/-)小鼠AS模型主动脉血管组织病变程度和血管损伤。1.2透射电镜结果:正常组小鼠血管内膜完整,内皮间隙较小。模型组小鼠可见内皮细胞脱落,甚至消失,内皮上附着大量血浆无定形成分。灯盏乙素干预后,血管内膜损伤程度明显减轻,内皮结构趋于完整,偶有线粒体水肿与脂质泡沉积。1.3 ELISA检测结果显示:灯盏乙素能明显降低APOE~(-/-)小鼠AS模型血清TNF-α、IL-1β的含量。1.4免疫荧光结果显示:灯盏乙素能上调小鼠主动脉血管组织中平滑肌细胞收缩型标志物(α-SMA和SM22-α)表达,下调合成型标志物(osteopontin,OPN)表达。1.5 Western blot结果显示:灯盏乙素能上调小鼠主动脉血管组织平滑肌细胞收缩型标志物(α-SMA和SM22-α)的蛋白表达,下调合成型标志物(OPN)的蛋白表达。1.6氧化应激检测结果显示:灯盏乙素明显升高Apo E~(-/-)小鼠AS模型血清SOD,GSH-PX,NO水平,降低血清MDA和H_2O_2的含量。1.7 DHE染色结果显示:灯盏乙素能降低APOE~(-/-)小鼠主动脉组织匀浆内的ROS的含量。2灯盏乙素涂层支架明显抑制小型猪PCI术后的ISR2.1 QCA结果提示:灯盏乙素中、高剂量涂层支架组可有效抑制AS小型猪支架模型冠状动脉内膜增生,血管狭窄程度明显低于裸金属支架组(P<0.05)。2.2 OCT结果提示:和裸金属支架组相比,灯盏乙素中、高剂量涂层支架组冠状动脉新生内膜面积及狭窄程度均减小(P<0.05),且灯盏乙素高剂量涂层支架组和阳性药物组残余管腔面积,均明显大于其他实验组(P<0.05)。同时监测到裸金属支架组、灯盏乙素低、中剂量组均见不同程度冠状动脉内膜增生,管腔缩小。2.3 HE染色显示:在支架植入后28天,和裸金属支架组相比,灯盏乙素涂层支架以剂量依赖性的方式显著降低冠状动脉新生内膜厚度、新生内膜面积和血管再狭窄程度,具有差异(P<0.05)。和裸金属支架组相比,灯盏乙素可降低支架周围的炎症积分(P<0.05)。3灯盏乙素通过抗氧化调控VSMCs的表型转换抑制VSMCs的增殖、迁移3.1 CCK-8法结果显示:灯盏乙素能明显抑制VSMCs的异常增殖。3.2划痕法结果提示:灯盏乙素明显抑制VSMCs迁移。3.3流式细胞术结果显示:灯盏乙素能明显将VSMCs阻滞于G0/G1期。3.4氧化应激检测结果显示:灯盏乙素明显升高VSMCs中SOD,NO,降低MDA水平和NADPH氧化酶的活性。3.5细胞荧光探针结果显示:灯盏乙素明显升高VSMCs的SOD和Mn-SOD活性。4转录组学结果4.1转录组学结果显示:与正常对照组相比,模型组有1895个差异表达基因上调,2174个差异基因下调;与模型组相比,灯盏乙素组有531个差异基因上调,574个基因下调。当三组的差异基因取交集时时,总共有81个差异基因的重叠。GO生物学富集分析发现其主要涉及细胞迁移的正向调控、伤口愈合的正向调节、细胞对转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)刺激的反应等。KEGG结果分析表明,排名靠前的信号通路为:癌症通路、血小板激活通路、白细胞跨内皮的迁移通路,PI3K/AKT信号通路,TNF-α信号通路等,这些通路均参与灯盏乙素对AS的调控,其中PI3K/AKT/m TOR信号通路显著富集。4.2分子对接结果显示:灯盏乙素与AKT,SM22α,α-SMA,OPN,NF-κB具有强结合力,结合能分别为-6.72,-8.07,-8.61,-7.93,-7.72 kal/mol,可作为灯盏乙素抗ISR的潜在研究靶标。5灯盏乙素对PI3K/AKT/m TOR及IKKs/NF-κB通路的调控作用研究5.1 APOE~(-/-)小鼠主动脉血管组织PI3K/AKT/m TOR通路表达检测Western blot结果显示,与正常组比较,模型组p-PI3K,p-AKT,p-m TOR表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,灯盏乙素(14,28 mg/kg)组p-PI3K,p-AKT,p-m TOR表达降低(P<0.05)。5.2 H_2O_2损伤VSMCs模型PI3K/AKT/m TOR通路表达检测Western blot结果显示,与正常对照组相比,模型组p-PI3K,p-AKT,p-m TOR表达显著升高(P<0.01)。与模型组相比,灯盏乙素(50,100μmol/L)组p-PI3K,p-AKT,p-m TOR蛋白表达降低(P<0.05)。5.3抑制剂MK2206处理实验结果与正常对照组相比,模型组p-PI3K,p-AKT,p-m TOR,OPN,Bcl-2的表达显著升高,而SM22α,α-SMA,Bax,Cleaved Caspase-3的表达降低(P<0.05)。与模型组相比,模型+MK2206组,模型+Scutellarin(100μmol/L)组的p-PI3K,p-AKT,p-m TOR,OPN,Bcl-2的表达降低,而SM22α,α-SMA,Bax,Cleaved Caspase-3的表达升高(P<0.05)。与正常对照组相比,模型组SOD细胞活性显著降低,MDA活性升高(P<0.05)。与模型组相比,模型+MK2206组和模型+Scutellarin(100μmol/L)组的SOD细胞活性升高,MDA活性降低(P<0.05)。与模型+Scutellarin(100μmol/L)组比较,模型+MK2206+Scutellarin(100μmol/L)组的SOD细胞活性升高,MDA活性降低(P<0.05)。5.4抑制剂BAY11-7082处理实验结果与正常对照组相比,模型组p-PI3K,p-AKT,IKKα/β,p-NF-κBp65,OPN的表达显著升高,SUbiquitin抑制剂M22α,α-SMA,IKBα的表达显著降低(P<0.05)。与模型组相比,模型+BAY组,模型+Scutellarin(100μmol/L)组的p-PI3K,p-AKT,IKKα/β,p购买Alisertib-NF-κBp65,OPN的蛋白表达显著降低,SM22α,α-SMA,IKBα的表达升高(P<0.05)。与模型+Scutellarin(100μmol/L)组比较,模型+BAY+Scutellarin(100μmol/L)组p-PI3K,p-AKT,IKKα/β,p-NF-κBp65,OPN的表达降低,SM22α,α-SMA,IKBα的表达升高(P<0.05)。与正常对照组相比,模型组SOD细胞活性显著降低,MDA活性升高(P<0.05)。与模型组相比,模型+BAY组,模型组+Scutellarin(100μmol/L)组的SOD细胞活性显著升高,MDA活性降低(P<0.05)。与模型+Scutellarin(100μmol/L)组比较,模型+BAY+Scutellarin(100μmol/L)组的SOD细胞活性显著升高,MDA活性降低(P<0.05)。【结论】1灯盏乙素对实验性AS有明显的治疗作用。2灯盏乙素涂层支架通过抑制冠状动脉新生内膜增生和炎症反应,从而抑制PCI术后ISR。3灯盏乙素通过调控平滑肌细胞的表型转换,抑制VSMCs的增殖、迁移,并促进其凋亡;灯盏乙素还明显抑制VSMCs的氧化应激反应。4灯盏乙素分别通过靶向AKT1和NF-κBp65位点,交互调控PI3Κ/AΚT/m TOR及IΚΚs/NF-κB信号通路。

目的 探讨温通缩尿汤在前列腺电切术后尿路刺激症状或围手术期急迫性尿失禁辅助治疗中的应用。方法 选取行电切术的前列腺增生患者60例作为研究对象，术后均有尿路刺激症状或围手术期急迫性尿失禁，将其分为对照组和观察组，每组各30例，对照组采取常规西药治疗+盆底肌训练，观察组在对照组基础上加用温通缩尿汤治疗，治疗12周后，对比2组治疗效果，比较治疗前后中医症状积分、尿失禁问卷表Torin 1临床试验简表(ICI-QSF)评分、前列腺症状(IPSS)评分、睾酮(T)水平、排尿期膀胱最大容量(VMCC)、最大尿流率(Q_(max))及膀胱残余尿量(Ru)、生活质量等。结果 观察组患者总有效率为93.33%,对照组的总有效率为73.33%,观察组总有效率明显高于对照组(P<0.05);治疗后观察组滴沥不尽、面色晦暗、腰膝酸软各项评分均低于治疗前及对照组治疗后(P<0.05);点击此处治疗后观察组ICI-QSF评分、IPSS评分明显低于治Endomyocardial biopsy疗前及对照组治疗后，T水平高于治疗前及对照组治疗后(P<0.05);治疗后观察组VMCC、Q_(max)水平高于治疗前及对照组治疗后，Ru水平低于治疗前及对照组治疗后(P<0.05);治疗后观察组躯体功能、心理功能、社会功能评分均明显高于对照组及治疗前(P<0.05)。结论 温通缩尿汤用于治疗前列腺增生患者电切术后尿路刺激症状或围手术期急迫性尿失禁具有显著疗效，能降低患者中医症状评分，改善患者前列腺功能、排尿困难症状，减少残余尿量，可提高患者治疗总有效率及生活质量。

目的 研究长链非编码RNA结肠癌相关转录本1(long non-coding RNADolutegravir NMR colon cancer-associated transcript-1,LncRNA CCAT1)对CD8~+T细胞抗食管癌肿瘤活性的影响及其作用机制。方法 分离食管癌患者和健康受试者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)，用qRT-PCR法分别检测PBMC中CCAT1和miR-155的表达。分别下调CCAT1和miR-155表达，采用流式细胞术检测CD8~+T细胞凋亡率，Western blot检测Cleaved Caspase 3蛋白表达，qRT-PCR检测IL-2 mRNA和IFN-γ mRNA基因表达，分析CD8~+T细胞对食管癌细胞的杀伤作用。采用miRanda和双荧光素酶实验研究CCAT1与miR-155之间的相互作用。分析上调LncRNA CCAT1靶向miR-155对CD8~+T细胞凋亡率、杀伤作用及其Eca-109细胞增殖和迁移的影响。结果 食管癌患者PBMCs中CCAT1表达（2.58±0.28）高于健康受试者（1.35±0.34）,miR-155表达（0.53±0.09）低于健康受试者（1.54±0.29），差异具有统计学意义（t=12.04,21.05，均P <0.05）。下调CCAT1后，CD8~+T细胞凋亡率（12.05%±0.28%）明显低于si-control组（19.86±0.45）%,CD8~+T细胞的细胞杀伤活性（0.49±0.05）%明显高于si-control组（0.34%±0.02%），差异具有统计学意义（t=9.82,-17.54，均P<0.05）。si-CCAT1组细胞内Cleaved Caspase 3蛋白表达（0.32±0.09）低于si-control组（1.37±0.72）,IL-2 mRNA(2.38±0.47)和IFN-γ mRNA(3.28±0.26)表达高于si-control组（1.12±0.23,1.28±0.37），差异具有统计学意义（t=-20.05,-18.29,-19.86，均P<0.05）。CCAT1和miR-155之间存在互补碱基对，双荧光素酶实验结果显示CCAT1野生型和mi R-155模拟物共转染后miR-155 mimics组细胞荧光素酶活性（0.41±0.08）显著低于对照组（1.24±0.18），差异具有统计学意义（t=17.92,P<0.01）。下调miR-155后CD8~+T细胞凋亡率（24.87%±0.95%）明显高于inhibitor control组（18.24%±1.25%）,CD8~+T细胞的细胞杀伤活性（0.26%±0.06%）明显低于inhibitor conMLN4924小鼠trol组（0.43%±0.05%），差异具有统计学意义（t=10.03,20.06，均P<0.05）。miR-155 inhibitor组细胞内Cleaved Caspase 3蛋白表达（1.07±0.23）高于inhibitor control组（0.42±0.02）,IL-2 mRNA(0.73±0.26)和IFN-γ mRNA(0.54±0.18)表达低于inhibitor control组（1.39±0.08,1.16±0.24），差异具有统计学意义（t=18.75,19.27,18.35，均P<0.01）。上调CCAT1通过miR-155促进CD8~+T细胞凋亡并降低细胞杀伤活性，且促进了Eca-109细胞增殖和迁移。结论 LncRNA CCAT1在食管癌患者中表达显著上调，敲低CCAT1通ephrin biology过调节miR-155表达可抑制CD8~+T细胞凋亡，增强细胞的抗肿瘤活性。

硒是生命体必需的微量元素,在工农业、医药等领域应用广泛,摄入过量会引起人体、动物和植物中毒。硒具有可变价态(-II、0、+IV和+VI),硒(IV)和硒(VI)毒性最强,会破坏细胞结构,引起DNA的氧化损伤,导致基因突变和肿瘤发生。工业生产、农业活动、矿产开采、煤炭燃烧和玻璃制造等废弃物的排放会导致环境中的硒含量超标,加剧环境危害。“生态环境没有替代品,用之不觉,失之难存”。在控制和消除污染源头的同时,研究和开发具有高效、绿色、廉价的环境污染修复技术,对于以节约资源和保护环境为基本国策,把可持续发展确立为国家战略的我国来说,意义尤为重大。微生物修复环境污染具有环境友好、经济节约、循环持久的优点,是污染修复领域的研究热点。已发现多种能够还原硒化合物的微生物,且还原产物生物纳米单质硒应用领域广泛,潜力巨大。河底是独特的生态环境,也是复合污染物沉淀、吸附和聚集区,有望筛选出具有特殊代谢和适应能力的潜在新种。本课题以从河北滏阳河河底淤泥筛选出的一株具有亚硒酸钠[硒(IV)]抗性和还原能力的溶杆菌潜在新种菌株13A~T为研究对象,主要从硒(IV)抗性/还原新种多相分类学鉴定、Torin 1化学结构还原硒(IV)产生生物纳米单质硒的表型机理表征,以及比较基因组学分析硒(IV)抗性和还原相关功能基因和潜在机制三个方面开展工作,同时还综述了硒抗性/还原微生物资源、微生物对硒的抗性/还原机制和微生物源单质纳米硒的应用现状。主要研究结果如下:1.硒还原溶杆菌多相分类学研究:从河北滏阳河的样品中分离并筛选了18个属的80个菌株。编号为13A~T菌株与已知的标准菌株的16S r RNA相似性与Lysobacter spongiicola DSM 21749~T(97.8%)最高,低于新种判定标准阈值98.7%,推测菌株13A~T可能为溶杆菌属的潜在新种。对菌株13A~T进行了多相分类学鉴定,最终确定菌株13A~T为Lysobacter属的新种,在国际上提出了一个新种名Lysobacter selenitireducens 13A~T。2.菌株13A~T还原硒(IV)产生生物纳米单质硒的表型机理:测定了菌株13A~T在不同浓度硒(IV)胁迫条件的情况下的生长特性;确定了硒(IV)的MIC值约为160 m M,测定selleck NMR了菌株13A~T的硒还原率,在2 m M硒(IV)浓度条件下培养2 d后的还原率为34.5%。硒(IV)诱导条件下,进行SEM-EDS,TEM和FT-IR表征,表明硒还原溶杆菌13A~T还原生成的生物纳米单质硒为大小均匀的球形颗粒(140–300 nm),在胞内胞外均有分布;细胞表面生物分子中的-NH_2、-COOH和-OH等官能团在还原生成纳米硒的过程中可能起到吸附和集聚的作用。3.硒(IV)抗性/还原相关功能基因和潜在机制研究:对菌株13A~T基因组进行了测序和注释,通过KEGG对菌株13A~T的硒还原蛋白通路进行预测,其编码的与硒相关的代谢酶包括γ-谷氨酰转肽酶等10种蛋白酶。通过基因组Venn图分析,推测菌株13A~T中可能具有区别于参考菌的亚硝酸盐还原酶或谷胱甘肽GSH介导的两条硒(IV)还原途径。本研究丰富了硒(IV)抗性/还原菌种新种资源,有助于为硒(IV)抗性medical intensive care unit/还原相关功能基因和分子机制研究提供理论支撑和方法基础。此外,微生物还原转化剧毒硒(IV)化物为多功能生物纳米单质硒材料,在硒(IV)污染生物修复领域具有广阔的应用潜力和开发前景。

背景：有研究发现成骨细胞铁死亡可作为重要的发病机制诱导激素性股骨KPT-330细胞培养头坏死的发生与发展。随着祖国医学的发展，有学者发现某些中药单体、中药复方及中成药等可通过多种通路机制调控成骨细胞铁死亡，最终起到治疗激素性股骨头坏死的作用。目的：探讨成骨细胞铁死亡与激素性股骨头坏死的关系及中草药调控成骨细胞铁死亡治疗激素性股骨头坏死的作用机制，为激素性股骨头坏死的诊治提供新的思路。方法：以“铁死亡，激素性股骨头坏死，成骨细胞，中草药，糖皮质激素，铁代谢，活性氧，谷胱甘肽过氧化物酶”为中文检索词，以“ferroptosis,Hormonal necrosis of the femoral head,osteoblast,Chinese herbal medicine,glucocorticoid,iron metabolism,ROS,GPX4”为英文检索词，检索中国知网、PubMed、万方及维普数SB431542 molecular weight据库，phosphatidic acid biosynthesis筛选各数据库建库至2023年成骨细胞铁死亡与激素性股骨头坏死及中草药干预调控研究相关的文章，最终纳入76篇文献进行综述分析。结果与结论：(1)成骨细胞铁死亡在激素性股骨头坏死发病中起重要作用。(2)成骨细胞铁死亡的发生受到多种机制通路调控，如细胞内铁超载引起铁死亡；细胞发生脂质过氧化损伤细胞膜引起铁死亡；细胞膜上胱氨酸/谷氨酸逆向转运蛋白通过影响谷胱甘肽水平和谷胱甘肽过氧化物酶4活性，从而诱导铁死亡；细胞内发生芬顿反应产生大量活性氧引起铁死亡等。(3)中药单体淫羊藿苷等、中药复方青娥丸等及中成药补肾活血颗粒等均可通过调控成骨细胞铁死亡的发生，有助于防治激素性股骨头坏死。(4)目前关于成骨细胞铁死亡相关机制尚不明确，继续深入探明两者的作用机制，有望为临床治疗激素性股骨头坏死提供新选择。

鳗鱼是一种具有高营养价值的资源型鱼类,但是鳗鱼在加工过程中会产生大量具有较高营养价值的下脚料,而现阶段鳗鱼加工企业对这些鳗鱼下脚料的利用较少,如何高效的开发这些加工下脚料成为提高鳗鱼资源利用率的关键点。受生活条件的改善、饮食习惯和遗传等因素影响,Ⅱ型糖尿病患者人数逐年攀升,已经成为对人类健康带来严重威胁的慢性疾病之一。研究人员在对降血糖药物的开发过程中,发现以肠促胰岛素为靶点的二肽酶基肽酶Ⅳ(DPP-Ⅳ)抑制剂能够发挥AMG510配制较好的降糖作用。但是研究人员在对这些药物的临床应用监测中发现一些化学合成的DPP-Ⅳ抑制剂在服用过程中会出现不良反应,因此食物蛋白来源的DPP-Ⅳ抑制肽的发现成为解决这类药物副作用的一个重要突破口。因此本论文以鳗鱼下脚料为原料,论证了鳗鱼蛋白质作为制备DPP-Ⅳ抑制肽前体蛋白的潜力,优化了鳗鱼蛋白源DPP-Ⅳ抑制肽的酶解制备工艺,然后以DPP-Ⅳ抑制率为评价指标对酶解产物进行分离纯化和DPP-Ⅳ抑制肽序列鉴定,在此基础上,应用分子对接和酶促动力学分析探究DPP-Ⅳ抑制肽的抑制机理和特性,最后对鳗鱼源DPP-Ⅳ抑制肽的胃肠消化稳定性、热稳定性、p H、金属离子作用和细胞毒性进行性质鉴定。主要研究内容和结果如下:(1)首先对鳗鱼营养成分和鳗鱼蛋白质氨基酸组成进行分析,并从鳗鱼加工下脚料中提取鳗鱼粗蛋白质。然后以DPP-Ⅳ抑制率和水解度为指标,采用四种食品级蛋白酶分别对鳗鱼粗蛋白质进行水解,最终筛选出最佳蛋白酶为复合蛋白酶。ventral intermediate nucleus然后调整复合蛋白酶的最适温度和p H,以酶添加量、水解时间和底物浓度三个影响因素分别进行单因素试验,并以单因素试验的数据为基础,采用响应面法对鳗鱼蛋白质的酶解工艺进行条件优化。确定最佳的酶解工艺为:温度为50℃,p H为7.0,底物浓度为2%(w/v),酶添加量为1%(w/w),反应时间为2 h。经过验证,在最佳酶解工艺条件下制备的鳗鱼蛋白质酶解产物的DPP-Ⅳ抑制率为49.41±1.07%(2.5 mg/m L)。(2)首先采用超滤分离方法对酶解产物进行分离,鳗鱼蛋白质酶解产物先通过10k Da超滤膜,然后收集透过液通过3 k Da超滤膜,共得到的三个超滤组分:MU1(<3k Da)、MU2(3 k Da～10 k Da)和MU3(>10 k Da)均具有一定的DPP-Ⅳ抑制活性,其中MU1的活性最高,其DPP-Ⅳ抑制率为32.17±0.21%(1 mg/m L),半数抑制浓度(IC_(50))为1.19±0.17 mg/m L,且超滤产物收率为46.17±1.52%。然后采用Superdex ~(TM)G-15凝胶色谱柱对MU1组分进行分离。共获得6个组分(P1、P2、P3、P4、P5、P6),经检测,P4组分的抑制率最高为54.75±1.02%(0.5 mg/m L),IC_(50)为0.4151±0.09mg/m L,最后采用制备级反相高效液相色谱分离(RP-HPLC)对P4组分进行分离,共收集到12个组分,依次命名为F1～F12。其中F4组分的抑制率最高为74.51±1.57%(0.25 mg/m L),IC_(50)为0.0923±0.06 mg/m L。对F4组分进行质谱分析后共鉴定出41条多肽序列,筛选出3条DPP-Ⅳ抑制肽序列:Phe-Pro-Arg(FPR),Tyr-Pro-Pro-Ser-Phe-Ser(YPPSFS),Tyr-Pro-Tyr-Pro-Ala-Ser(YPYPAS),其IC_(50)分别为62.14±1.47μmol/L、102.65±4.57μmol/L和68.30±3.85μmol/L。(3)使用分子对接分别探究FPR,YPPSFS,YPYPAS与DPP-Ⅳ酶的结合机制,确定了抑制肽主要通过氢键与DPP-Ⅳ酶此网站结合,其自由结合能分别为-8.30 kcal/mol、-9.20 kcal/mol和-8.60 kcal/mol。采用米氏方程和Lineweaver-Burk双倒数作图对FPR,YPPSFS,YPYPAS的抑制模式进行分析,发现FPR和YPPSFS为竞争性DPP-Ⅳ酶抑制剂,而YPYPAS则属于竞争性和反竞争性相结合的抑制剂。(4)利用体外模拟消化实验研究DPP-Ⅳ抑制肽在胃蛋白酶和胰蛋白酶的消化作用下的稳定性,FPR,YPYPAS在胃蛋白酶和胰蛋白酶的作用下均能保持结构的稳定性,其抑制率也几乎未出现减小的现象,证明它们抗消化能力较好。而YPPSFS在胃蛋白酶的作用下出现降解的现象,DPP-Ⅳ抑制率也与空白组之间存在显著性差异,但是在后续胰蛋白酶的作用下,其保留率和DPP-Ⅳ抑制率均未出现降低的现象。然后考察了活性肽的热稳定性,YPYPAS的热稳定性较好,在95℃下加热4 h,其保留率和DPP-Ⅳ抑制率出现较小幅度的降低,而FPR和YPPSFS的热稳定较差,在70℃以上就开始出现结构降解的现象。考察了p H对考察了抑制肽稳定性的影响,FPR、YPYPAS在酸性碱性环境中均能保持较好的稳定性,而YPPSFS在酸性环境下稳定性较差,在碱性环境下稳定性较好。考察了金属离子对FPR、YPYPAS和YPPSFS稳定性的影响,在不同金属离子的作用下,YPYPAS均具有较好的稳定性,而FPR和YPPSFS的稳定性较差。使用Caco-2细胞考察FPR、YPYPAS和YPPSFS的细胞毒性,与空白组相比,不同浓度(0.05 mg/m L、0.1 mg/m L、0.25 mg/m L、0.5 mg/m L、1 mg/m L)的FPR、YPYPAS均表现出促进细胞生长作用,细胞存活率均超过100%,而YPPSFS虽然表现出抑制细胞生长的作用,但其细胞存活率也在85%以上。

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者并发医院肺部感染的影响因素,并据此构建预测列线图模型。方法 回顾性分析商丘市第一人民医院2020年9月至2022年9月收治的279例NSCLC患者的临床资料,按照2∶1的比例将其分为建模组(186例)和验证组(93例),并根据患者是否并发医院肺部感染将建模组患者分为感染组和未感染组。对比感染组、未感染组临床资料;采用多因素Logistic回归性分析法分析NSCLC患者并发医院肺部感染的影响因素,并构建预测列线图模型;采用Bootstrap法进行内部验证,绘制校准曲线;采用受试者工作特征(ROC)曲线以评估列线图模型的预测效能;采用决策曲线(DCA)验证模型的临床净获益率。结果 279例NSCLC患者并发医院肺部感染的有67例,其中建模组186例患者有47例并发医院肺部感染,感染率为25.27%;验证组93例患者有20例并发医院肺部感染,感染率为21.51%。感染组中年龄≥75岁、吸烟史、临床分期Ⅲ～Ⅳ期、化疗周期≥4个、化疗药物联合、住院时间>21 d、化疗前体力状况评分<80分、糖尿病、白细胞计数<4×10~9/L、中PF-02341066生产商性粒细胞计数<1×10~9/L、白蛋白<30 g/L占比均高于未感染组(P<0.05);经多因素Logistic回归性分析,年龄≥75岁、吸烟史、临床分期Ⅲ～Ⅳ期、化疗周期≥4个、化疗药物联合、住院时间>21 d、化Emricasan半抑制浓度疗前体力状况评分<80分、糖尿病、中性粒细胞计数<1×10~9/L、白蛋白<30 g/L均是NSCLC患者并发医院肺部感染的独立危险因素(P<0.05);将上述影响因素作为预测指标,构建NSCLC患者并发医院肺部感染的Radiation oncology风险预测列线图模型,建模组和验证组列线图模型预测校准曲线均接近标准曲线;ROC曲线分析结果显示,建模组列线图预测模型的曲线下面积(AUC)为0.839,灵敏度为82.61%,特异度为88.00%;验证组列线图预测模型AUC为0.822,灵敏度为80.43%,特异度为85.33%;建模组和验证组DCA结果均显示列线图模型具有良好的临床效益。结论 年龄≥75岁、吸烟史、临床分期Ⅲ～Ⅳ期、化疗周期≥4个、化疗药物联合、住院时间>21 d、化疗前体力状况评分<80分、糖尿病、中性粒细胞计数<1×10~9/L、白蛋白<30 g/L均是NSCLC患者并发医院肺部感染的影响因素,据此构建的列线图预测模型可帮助临床早期识别高风险人群,临床实用性高。