DuDu365生物天地

云南山茶花色单一，主要以红色系为主。因此，为探究云南山茶花色素成分差异对于花色调控机BAY 73-4506制，明确云南山茶(Camellia reticulata Lindl.)花色素成分和呈色机理，本研究选取红色系‘松子鳞’、‘狮子头’，红白双色‘玛瑙’，白色系‘童子面’为试验材料，测定盛花期花色素含量并分析差异。结果表明：(1)四种云南山茶花色素均含类黄酮、类胡萝卜素、花青素及叶绿素；(2)‘松子鳞’四种花色素含量均显著高于其余品种；(3)‘狮子头’类黄酮和胡萝卜素含量与芽变品种‘玛瑙’白色部分存在显著性差异；(4)‘玛瑙’红色部分与白色部分色素种类一致，其中类黄酮、类胡萝卜素、叶绿素含量均存在显著性差异，而二者花青素含量Lorlatinib分子量无显著性差异，但白色部分花青素占比低于红色部分。因此，类黄酮为主要色素；类胡萝卜素含量的增加与花色的加深趋势一致，且颜色差异越大，含量差异越显著；‘松子鳞’红色形成的主要色素为花青素，色素成分比例可能影响了花色的呈现；推测‘玛瑙’红白双色的出现与类黄酮等次生代Biotic surfaces谢产物种类及含量的差异，以及类胡萝卜素和叶绿素的降解有关。本研究探讨了不同种云南山茶花色素差异，以及双色‘玛瑙’出现的原因，为揭露云南山茶花色调控机制、筛选花色控制表达基因研究提供理论支撑。

目的 观察认知行为干预对门诊乳腺增生患者治疗依从性及疗效的影响。方法 选取2020年8月—2021年8月于广州市白云区妇幼保健院妇科门诊就诊的乳腺增生患者220例，应用随机数字表法分为观察组microfluidic biochips和对照组，每组110例。2组患者均行中药乳结散治疗，对照组治疗期间行常规健康指导，观察组治疗期间行认知行为干预，2组均干预3个月经周期。比较2组患者干预前后用药依从性评分、临床症状积分、治确认细节疗效果及生活质量评分。结果 干预3个月经周期后，2组用药依从性评分及生活质量相关维度中躯体症状及心理健康评分高于治疗前，临床症状积分低于治疗前，且观察组升高/降低幅度大于对照组(P<0.01)。观察组治疗总有效率高于对照组(98.18%vs. 89.09%,χ~2=7.628,P=0.006)。结论 认知行为干预有助于提高门诊乳腺增生患者采用中药乳结散治疗的依从性，提高患者治疗效Adezmapimod体内实验剂量果，改善患者临床症状，提高患者生活质量。

目的:通过观察针刺蝶腭神经节联合过敏性鼻炎合剂治疗常年性肺脾气虚型鼻鼽的临床疗效,并探索其作用机制,旨在为临床提供一种针药联合治疗常年性肺脾气虚型鼻鼽的中医特色方案。方法:收集来自2021年12月至2022年10月就诊于广西中医药大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科门诊且符合纳排标准的患者120例,采用随机数字表法将入组患者分为3组,每组40例患者并施以不同治法:分别予单纯针刺蝶腭神经节治疗(简称针刺组)、单用过敏性鼻炎合剂治疗(简称中药组)及针刺蝶腭神经节联合过敏性鼻炎合剂治疗(简称针药组)。3组患者均连续治疗4周,并在3个月后进行随访。观察并记录3组患者治疗前后及随访期的鼻眼部症状评分(四分法)、鼻结膜炎生活质量评分(RQLQ),记录3组治疗前后患者血清中炎症因子(IFN-γ、IL-4)水平变化情况的数据,采用SPSS26.0统计学软件进行数据的统计与分析。结果:1、基线比较:本研究共纳入120例常年性肺脾气虚型鼻鼽患者,在治疗期间共脱落8例,最终针药组38例,中药组36例,针刺组38例。治疗前三组患者性别、年龄、病程、鼻眼部症状评分(四分法)、RQLQ评分和血清中炎症因子水平(IFN-γ、IL-4)的差异均无统计学意义(P>0.05)。2、综合疗效比较:三种治疗方案均能改善常年性肺脾气虚型鼻鼽患者的鼻部症状,提高患者生活质量。3组患者治疗4周后,针药组总有效率为92.11%,针刺组总有效率为81.57%,中药组总有效率为77.78%,经秩和检验得出:χ~2=14.477,P=0.001<0.05,说明治疗4周后3组的疗效具有显著性差异。进一步组间两两比较:(1)针药组Vs针刺组:P=0.043<0.05,(2)针药组Vs中药组:P=0.001<0.05,(3)针刺组Vs中药组P=0.557>0.05;说明治疗4周后针药联合治疗常年性肺脾气虚型鼻鼽近期疗效优于单独针刺蝶腭神经节和单用过敏性鼻炎合剂,单用过敏性鼻炎合剂与单独针刺蝶腭神经节疗效相当。3、鼻眼部症状评分(四分法)比较:3组患者治疗4周后,采用配对样本t检验,显示3组组内患者TNSS总评分均低于治疗前(P<0.05),差异具有统计学意义,表明3组患者的鼻塞、鼻痒、流清涕、喷嚏、眼痒、流泪症状均得到改善。经方差分析(F检验)得出,治疗4周后P=0.000<0.05,随访3个月后P=0.004<0.05,说明治疗后各组鼻眼部症状评分差异存在显著性;通过组间两两比较LSD-t检验,均显示针药组的鼻眼部症状改善程度较其余两组更高,差异具有统计学意义(P<0.05),中药组和针刺组差异不明显(P>0.05)。4、RQLQ评分比较:3组患者治疗4周后,经配对样本t检验,显示3组患者RQLQ总评分均低于治疗前(P<0.05),差异具有统计学意义,说明3组患者的日常生活、睡眠、情感反应、实际问题、鼻眼部症状等各项生活质量均得到有效改善。经方差分析(F检验)得出:治疗4周后P=0.000<0.05,随访3个月后P=0.001<0.05,说明治疗后和随访期各组的RQLQ总评分差异具有显著性;通过组间两两比较LSD-t检验,针药组的RQLQ改善程度较其余两组更高,差异具有统计学意义(P<0.05),中药组和针刺组各项生活质量改善程度相当;随访3个月后各组虽RQLQ评分稍有回升,但仍较治疗前低,差异具有统计学意义(P<0.05)。5、血清炎症因子IFN-γ、IL-4水平比较:治疗4周后发现3组患者血清中的IFN-γ含量较治疗前明显升高,IL-4含量较治疗前明显降低,治疗前后组内比较通过配对样本t检验得出P<0.05,说明治疗前后差异性明显,具有统计学意义。进一步组间两两比较,针药组血清中IFN-γ升高程度较其余两组更明显(P<0.05),IL-4降低程度较其余组更明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。6IACS-10759说明书、安全性评价:在治疗期间医者严格按照操作规范执行,3组患者在治疗过程及随Adavosertib体内访期间均未出现不良反应和危急情况。结论:1、针刺蝶腭神经节联合过敏性鼻炎合剂治疗常年性肺脾气虚型鼻鼽临床疗效显著,能有效改善患者鼻眼部症状(鼻塞、鼻痒、流清涕、喷嚏、眼痒、流泪等),提高患者生活质量。2、针药联合治疗在降低鼻眼部症状评分(四分法)、RQLQ评分方面优于单独针刺蝶腭神经节和单用过敏性鼻炎合剂。其疗效机制可能与上biomedical optics调IFN-γ、降低IL-4有关,调节Th1/Th2平衡轴,从而恢复机体免疫功能。3、针刺蝶腭神经节联合过敏性鼻炎合剂治疗常年性肺脾气虚型鼻鼽安全性高,值得临床推广使用。

目的 通过系统评价的方法分析我国单采血小板献血者献血不良反应的总体情况和主要影响因素，为预防和控制单采血小板献血不良反应及提高献血服务质量提供重要依据。方法 检索CNKI,VIP,Wanfang Data, Pubmed、Embase数据库，收集我国单采血小板献血不良反应横断面研究，观察时间≥6个月，检索时biological validation间为selleck Ceralasertib1998年至2023年3月，通过2位评价员按照纳入和排除标准独立筛选研究，并进行数据提取和文献质量评价，通过Stata 14.0软件进行Meta分析。结果 最终纳入91篇文献，共计单采血小板献血者585 769名，其中9 102名发生献血不良反应。通过随机效应模型Meta分析显示，总献血不良反应报告发生率为2.65%[95%CI(2.04, 3.45),P<0.000 1];亚组分析显示，东部、中部、西部地区输血不良反应报告发生率分别为2.63%[95%CI(1.94, 3.58)]、2.32%[95%CI(1.29, 4.16)]、4.10%[95%CI(1.90, 8.83)],存在地域差异(P<0.000 1)。不同献血不良反应程度报告发生率为：非重度3.AZD1152-HQPA说明书62%[95%CI(2.69, 4.86)]、重度0.28%[95%CI(0.18, 0.45)]。在不同单采仪器之间献血不良反应报告发生率也存在差异(P<0.000 1),为Amicus 2.73%[95%CI(1.23, 6.06)]、CS3000系列3.59%[95%CI(2.64, 4.89)]、MCS+系列3.42%[95%CI(2.23, 5.25)]、Trima 4.86%[95%CI(3.08, 7.66)]、其他组1.71%[95%CI(0.15, 20.02)]。另外，不同性别间单采血小板献血不良反应报告发生率为女性4.80%[95%CI(3.05, 7.55)]、男性为1.39%[(95%CI(0.90, 2.15)],女性高于男性(P<0.000 1)。≤30岁的单采血小板献血者和>30岁的单采血小板献血者之间献血不良反应分别为2.31%[95%CI(1.34, 3.98)]和1.95%[95%CI(1.19, 3.20)],无统计学差异(P>0.01)。在不同献血史的献血不良反应报告发生率中，首次为2.16%[(95%CI(1.18, 3.95)]、再次为1.12%[(95%CI(0.35, 3.58)],首次献血高于再次(P<0.0001)。不同采集治疗量之间单采献血不良反应为单份1.67%[95%CI(0.57, 4.89)]、双份3.13%[95%CI(1.11, 8.86)],2组间无统计学差异(P>0.01)。结论 有必要统一单采血小板献血不良反应的监测标准，了解和掌握影响单采血小板献血者发生献血不良反应的因素，以提高单采血小板献血服务质量和保障献血者安全。

猪细小病毒(Porcineparvovirus,PPFour medical treatisesV)是引起初孕母猪繁殖障碍性疾病的重要病原之一。PPV基因组含有两个开放阅读框ORF1和ORF2,其中ORF1编码非结构蛋白NS1和NS2,NS1的主要功能是参与转录调控和病毒复制,NS2的主要功能是参与病毒复制和出核过程。研究发现,编码NS2的基因包含于编码NS1的基因内,NS2-mRNA是NS1-mRNA经可变剪接而形成,但其具体机制尚不清楚。核不均一核糖核蛋白(Heterogenous nuclear ribonucleo proteins,hnRNPs)是一类在多种细胞内广谱表达且高度保守的多功能蛋白,能够作为剪接调控因子参与多种病毒mRNA的剪接,该家族成员可能参与PPV NS1-mRNA剪接形成PPV NS2-mRNA的过程。本研究拟从与PPV NS1-mRNA的互作宿主蛋白中筛选并鉴定hnRNPs,通过干扰、敲除和过表达,研究hnRNPs在PPV NS2-mRNA形成过程中的作用及对PPV复制的影响,进一步鉴定hnRNPs作用于PPVNS1-mRNA的剪接位点,构建突变型PPV毒株,探讨该位点突变对PPV复制的影响。研究结果旨在阐明PPVNS1-mRNA剪接形成PPVNS2-mRNA的机制,为进一步揭示PPV复制机制提供理论依据。研究取得如下结果。1.PPV NS1-mRNA与宿主蛋白hnRNPK互作根据PPV NS1-mRNA互作宿主蛋白的质谱检测结果,筛选出与PPV NS1-mRNA互作的hnRNPs家族成员hnRNPK,构建hnRNPK真核表达载体,将其转染PK-15细胞24 h后提取细胞核蛋白,与生物素标记的PPV NS1-mRNA共孵育,RNA-pulldown检测结果显示,PPVNS1-mRNA和hnRNPK存在互作。进一步利用hnRNPK抗体进行蛋白质-RNA免疫共沉淀,结果显示,PPVNS1-mRNA和hnRNPK存在互作。在PPV感染的PK-15细胞中,分别用hnRNPK抗体和原位杂交探针标记hnRNPK和PPVNS1-mRNA,激光共聚焦结果显示,PPVNS1-mRNA 和 hnRNPK 共定位于细胞质。2.hnRNPK 促进 PPV NS2-mRNA 形成及 PPV 复制分别以1 MOI PPV感染PK-15细胞,0h、12 h、24h和36h后收集细胞,western blotting和qPCR检测hnRNPK的蛋白和mRNA水平,结果显示,与MOCK组相比,PPV感染12 h后hnRNPK的蛋白水平和mRNA水平显著升高(P<0.05),感染36 h后hnRNPK的蛋白水平和mRNA水平极显著升高(P<0.01)。设计并合成3个针对hnrnpk的特异性 siRNA,命名为 si-hnrnpk-270、si-hnrnpk-600和si-hnrnpk-1090,分别转染PK-15细胞36 h后,qPCR和western blotting检测发现,与对照si-NC组相比,si-hnrnpk-600能极显著抑制hnRNPK的mRNA和蛋白表达(P<0.01)。将si-hnrnpk-600转染PK-15细胞36h后,以1 MOI PPV感染细胞24h,PCR检测发现,PPVNS2-mRNA水平相比si-N点击此处C组极显著降低(P<0.01),qPCR检测发现,PPV DNA拷贝数显著降低(P<0.05)。进一步利用CRISPER/Cas9系统构建hnrnpk敲除细胞系PK-15hnrnpk-/-,细胞活性检测结果显示,hnrnpk敲除对PK-15细胞生长活性影响不显著(P>0.05)。以 1 MOI PPV 感染 PK-15hnrnpk-/-细胞 24 h,检测PPVNS2-mRNA 的形成、PPV DNA拷贝数及TCID50,结果显示,与野生型细胞及未敲除细胞相比,PK-15hnrnpk-/-细胞内PPVNS2-mRNA水平极显著降低(P<0.01),PPVDNA拷贝数和TCID50极显著降低(P<0.01)。在PK-15细胞中共转染NS1和hnRNPK的表达载体,western blotting和qPCR检测NS1的蛋白表达和mRNA水平,以及NS2的mRNA水平,结果显示,共转染hnRNPK后,PPV NS1的蛋白和mRNA水平极显著降低(P<0.01),而PPV NS2的mRNA水平显著升高(P<0.05),且呈浓度依赖性。3.hnRNPK作用于PPVNS1-mRNA 3'末端剪接位点调控PPVNS2-mRNA的形成构建3'末端和5'末端剪接位点突变的PPV NS1表达载体NS1(pC-Mut)和NS1(pN-Mut)。分别将野生型 NS1、NS1(pC-Mut)和 NS1(pN-Mut)与 hnRNPK 共转染PK-15细胞24 h后,检测NS1的表达及NS2-mRNA的形成,结果显示,与野生型NS1组及NS1(pN-Mut)组相比,过表达hnRNPK对NS1(pC-Mut)组细胞中NS1的表达影响差异不显著(P>0.05),但NS2-mRNA形成显著减少(P<0.05)。构建PPV NS点击此处1 3’末端剪接位点突变的PPV感染性克隆质粒,转染PK-15细胞并连续盲传5代进行病毒拯救,PCR和测序鉴定病毒拯救成功,命名为PPVpCmut。分别用1 MOI的PPVpCmut和野生型PPV感染PK-15细胞24 h后,检测PPVNS2-mRNA的形成、PPVDNA拷贝数和TCID50,结果显示,与野生型PPV感染细胞相比,PPVpCmut感染细胞中NS2 mRNA水平、DNA拷贝数和TCID50均极显著降低(P<0.01)。本研究筛选并鉴定得到PPVNS1-mRNA的互作宿主蛋白hnRNPK。通过干扰和敲除hnrnpk,以及在PK-15细胞中共转染NS1和hnRNPK的表达载体研究发现,hnRNPK通过是促进PPVNS2-mRNA的形成从而促进了 PPV的复制。进一步研究发现,hnRNPK作用于PPV NS1-mRNA的3'末端剪接位点进而调控PPV NS2-mRNA的形成。构建剪接位点突变毒株PPVpCmut研究发现,剪接位点突变后PPVNS2-mRNA形成和病毒复制水平均极显著降低。研究结果阐明PPV通过与宿主蛋白hnRNPK互作进而促进NS1-mRNA 剪接形成 NS2-mRNA 的机制,为进一步揭示 PPV 复制机制提供理论依据。

目的：探讨腹部局灶型Castlman病的CT与MR影像特征与病理基础，提高对这种罕见疾病的认识和了解，减少误诊。方法：回顾性分析本院经手genetic heterogeneity术病理证实的10例腹盆腔局灶型Castlman病患者的CT和MR表现及相应临床NN2211资料。结果：术后病理2例为浆细胞型，8例为透明血管型。4例位于腹膜后（其中1例位于肾周脂肪裳），4例位于小肠系膜，1例位于大网膜，1例位于右肾下极髓质。4例病灶中央可见树枝状、结节状钙化（包含MR双低信号无强化钙化影），4例较大肿块（直径>5cm）中央出现裂隙及放射状CT低密度区及MR T1WI低信selleckchem GSK1349572号区，9例病灶周围可见渗出。8例周围可见增粗迂曲血管影。5例周边可见卫星结节子灶。动态增强扫描所有病灶均可见明显强化，其中3例呈渐进性持续强化，7例呈动脉期明显强化，强化程度接近于邻近动脉，延长期强化缓慢消退，4例可见包膜样边缘延迟强化。结论：腹部局灶型Castlman病少见，其影像表现与病理类型密切相关，以透明管型为主。且具有一定影像学特征。腹盆腔孤立性肿块，周边可见卫星结节灶，增粗迂曲管影及不同程度渗出，增强扫描病灶高强化、缓慢消退是腹盆腔局灶型透明血管Castlman的特征表现。较大肿块中心纤维化区域及树枝样钙化出现有助于本病诊断。MR对于显于周边卫星灶及包膜样强化优于CT。

目的 观察翁沥通胶囊联合针刺运动疗法治疗良性前列腺增生（BPH）临床疗效。方法 将我院BPH患者64例随机分为对照组与治疗组各32例。对照组患者口服非那雄胺治疗，治疗组在对照组治疗基础上加以翁沥通胶囊联合针刺运动疗法。比较两组临床疗效，对比治疗前后前列腺体积、最Pollutant remediation大尿流率（Qmax）、残余尿量、前列腺症状评分（IPSS）、生活质量评估量表（QOL）、雌二醇（E_2）、睾酮（T）、前列腺特异性抗原（PSA）、全血高切黏度和低切黏度、纤维蛋白原水平的数值。结果 治疗后，治疗组总有效率优于对照组（P<0.05）；两组T水平、Qmax高于治疗前，前列腺体积、残余尿量、IPSSIACS-10759生产商、QOL评分、E_2、PSA、全血高切黏度和低切黏度、纤维蛋白原低于治疗前；治疗组T水平、Qmax高于对照组，前列腺体积、残余尿量、IPSS、QOL评分、E_2、PSA、全血高切黏度和低切黏度、纤维蛋白原低于对照组（ <0.05）。结论翁沥通胶囊联合针刺运动疗法治疗BPH疗效确切，可促BYL719作用进排尿，减轻前列腺症状，提高生活质量，调节性激素，改善血液流变学。

右旋糖酐酶(Dextranase;E.C.3.2.1.11)可特异性降解右旋糖酐中的α-1,6糖苷键,是一种广泛应用于食品及医药领域中的重要生物酶材料。右旋糖酐酶法具有绿色环保、操作简单、高度专一性等优点,在蔗糖的生产过程中可解决大分子量右immune efficacy旋糖酐的污染,提高蔗糖的质量;在食品及医药领域中,可用于可控化生产特定分子量的右旋糖酐,是蔗糖全产业链优化升级的有效手段之一;在医疗领域中,可用于预防及治疗龋齿。课题组前期筛选了产右旋糖酐酶(PC-Edex)的Penicillium cyclopium CICC-4022,本论文进一步优化了产酶条件,对筛选得到的P.cyclopium CICC-4022所产的PC-Edex结构和活性位点等功能进一步研究,探索PC-Edex与右旋糖酐分子的相互作用机制,为解析酶降解右旋糖酐过程机理及酶解调控获得一定分子量右旋糖酐有效技术手段提供理论和实践。主要内容如下:优化P.cyclopium CICC-Taurine4022在2.5 L发酵罐中发酵产PC-Edex条件,酶活由14.67 U/m L提高至144.89 U/m L,提高了9.88倍。P.cyclopium CICC-4022发酵过程为生长偶联型。采用二级切向膜过滤法纯化PC-Edex酶液,纯化倍数为3.68,回收率为62.52%,比活力达11479.66 U/mg。基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪分析表明PC-Edex的分子量为66.83 k Da。PC-Edex的最适温度为60℃,最适p H为5.0,PC-Edex在45-50℃、p H 3.0-7.0时稳定性较好。PC-Edex可特异性降解α-1,6糖苷键,对β-1,2和β-1,4糖苷键无催化作用,最适底物为右旋糖酐-T70,亲和性最强的底物为右旋糖酐-T2000。K~+、Na~+、NH_4~+、Tris、Urea等都有助于促进PC-Edex活性,Ni~(2+)、Zn~(2+)、Co~(2+)、Fe~(2+)、EDTA等抑制效果随着浓度的增加而增加,Cu~(2+)抑制作用最强。采用第三代测序技术首次对P.cyclopium CICC-4022进行了全基因组测序,并对其蛋白CP-690550编码基因进行功能注释,结果表明,P.cyclopium CICC-4022的生命活动较强,具有丰富的碳水化合物的运输和代谢功能,其中大多数蛋白酶以糖酐水解酶为主。本研究成功注释得到了一个GH49族的右旋糖酐酶(PC-scaffold4.t4),可作用于糖苷键,水解O-糖基化合物。采用同源性建模得到了PC-Edex的空间结构,通过分子对接及分子动力学的方法得到PC-Edex与右旋糖酐的结合位点及结合自由能,其中范德华力与静电相互作用能为主要驱动力,极性溶剂自由能不利于右旋糖酐与PC-Edex的结合。PHE402具有疏水相互作用,ASP447为亲核试剂,二者均为关键部位的活性位点。通过优化后的实验条件可实现对高分子量右旋糖酐的重均分子量(Mw)及分子量分布(Mw/Mn)的调控。基于Malhotra模型可实现PC-Edex降解大分子量右旋糖酐至系列低分子量右旋糖酐的调控,得到分子量低于10 k Da的右旋糖酐,并且分子量分布均匀,小于10k Da分子量片段质量分数可达到94.56%以上,降解率可达到98.96%以上。酶解过程中右旋糖酐的外观形貌未产生变化,基于Mark-Houwink方程及Einstein方程说明右旋糖酐的在水溶液中的链构象处于偏球形构象。SEM及AFM也表明酶解后右旋糖酐仍为近球形结构,由于氢键的作用,大分子量的右旋糖酐的聚集形态更强。酶解后右旋糖酐的分子结构未发生变化,TG表明酶解后右旋糖酐的热稳定性没有变化,NMR(~1H及~(13)C)与FI-TR表明酶解后右旋糖酐依旧以α-1,6糖苷键为主链。本研究提供了酶法生产低分子量右旋糖酐的技术手段,并在分子水平上探究了PC-Edex与右旋糖酐的作用模式,为后续的工业生产及研究提供数据支撑。

茄子果皮的颜色通常表现为绿色、紫色和白色,是影响茄子商品价值的重要性状之一,但茄子果皮颜色相关基因的克隆和功能研究还十分有限。本研究以绿色果皮茄子‘启董’和紫色果皮茄子‘8果’为试验材料,分析了茄子果实生长发育过程中(15d-35d)果皮主要色素含量及相关基因表达的变化。并以‘启董’和‘8果’为亲本构建双亲群体,分析茄子果皮紫色和绿色的遗传规律。利用BSA-seq初步定位候选区间,通过KASP、In Del和d CAPs标记精细定位候选基因。主要研究结果如下:1.‘启董’的花青素相对含量、叶绿素和类胡萝卜素含量均呈先升高后降低的趋势,分别在授粉后20 d、25 d和20 d达到峰值;‘8果’的花青素相对含量呈先升高再降低的变化趋势,在25 d时达到峰值,叶绿素和类胡萝卜素在15-35 d内含量一直升高。与‘启董’相比,‘8果’的花青素相对含量较高,叶绿素含量在15-25 d较低,类胡萝卜素含量在30-35 d较高。‘启董’中花青素合成结构基因和转录因子在不同时期的表达相较于‘8果’偏低且变化趋势相对稳定。‘8果’中花青素合成相关结构基因的表达均在20 d达到顶峰,随后开始降低,转录因子MYB75、WD40表达呈现先升高后降低的趋势,与花青素相对含量的变化趋势一致。2.以‘启董’作为母本P_1,‘8果’作为父本P_2,构建遗传群体F_1、F_2、BC_1P_1和BC_1P_2。F_1和BC_1P_2群体的果皮颜色全部表现为紫色。F_2和BC_1P_1群体均出现性状分离现象,F_2群体中紫色果皮茄子300株,绿色果皮茄子104株,紫色:绿色=2.88(X~2=0.059,P>0.05),接近3:1的理论比例;BC_1P_1群体中紫色果皮茄子20株,绿色果皮茄子16株,紫色:绿色=1.25(X~2=0.223,P>0.05),接近1:1的理论比例。表明茄子果皮紫色对绿色为显性,且由一对等位基因控制。3.从双亲中各自随机选择3株分别构建亲本混池,F_2群体中随机选择25株绿色果皮茄子和25株紫色果皮茄子分别构建极端混池。利用ED~4、G-value、LOD和SNP-Ratio四种关联分析算法分析BSA-seq结果,将候选区间初步定位在4号染色体上的0.88Mb区域(2.91Mb-3.79Mb),10号染色体上的0.8Mb区域(6.61Mb-7.41Mb)和1.2Mb区域(19.11Mb-20.31Mb)。设计开发KASP、In Del和d CAPs标记共92对,在F_(23)群体的359个植株中筛选交换单株,进行基因型和表型的联合分析。将候选基因定位到10号染色体KA2381和CA8828标记之间0.35Mb的区域内(19.20Mb-19.55Mb),该区间内有16个基因。4.对候选基因进行注释,发现一个类黄酮合成途径基因EGP22363,编码2-oxoglutarate-dependent dioxygenase(2-OGD)。SAHA对EGP22363进行序列和表达分析,发现在第三外显子的1435bp位置上存在一个SNP,该碱基变异使翻译过程中亮氨酸变为丝氨酸,导致蛋白质的结构发生变化。EGP22363在紫色茄子中的表达量显著高于绿色茄子。EGP22363可能为控制茄子果皮紫色的候选基因。5.根据候选基因序列中的Probe based lateral flow biosensor差异位点,开发了4个In Del(ID2670,ID0591,ID5881,ID1299)NVP-TNKS656半抑制浓度和1个d CAPs(CA8828)分子标记,用于鉴别紫色果皮茄子和绿色果皮茄子。随机选取了42份高代自交系材料(31份紫色果皮茄子+11份绿色果皮茄子)对标记进行有效性的验证。其中In Del标记ID2670准确率达到95.24%,ID0591准确率达到100%,ID5881准确率达到97.62%,ID1299准确率达到100%。d CAPs标记CA8828准确率达到92.86%。这些标记可有效鉴别茄子果皮紫色和绿色性状。本研究结果为花青素积累分子机制的解析以及高花青素含量品种的育种选择提供理论依据。

目的:本文章通过分析患有子宫内膜非典型增生及癌症的青年女性特征,明确更多子宫内膜癌前病变风险因素,为青年女性子宫内膜恶性病变的早期预防、早期筛查、早期诊断及规范化、个体化治疗提供临床依据。方法:按照2001年WHO对年龄的划分标准,将≤45岁的女性划分为青年女性。收集2013年1月至2022年12月在我院经不同子宫内膜取材方式(诊刮/宫腔镜/全子宫切除术)明确诊断的共196例子宫内膜非典型增生及子宫内膜癌青年女性住院患者的临床资料,其中子宫内膜非典型增生145例,设为AH组,子宫内膜癌51例,设为EC组,两组均作为研究组。同时收集2018年1月至2022年12月于我院明确诊断的170例子宫内膜单纯性增生青年女性住院患者的临床资料,设为EH组,作为对照组。采用回顾性的方法,应用SPSS 25.0软件进行统计分析。结果:1.青年女性患者子宫内膜非典型增生及子宫内膜癌的年份分布2015年-2021年子宫内膜非典型增生青年患者总量呈上升趋势,2016年、2021年出现两次高峰(17例、35例),2021年-2022年患者总量呈急剧下降趋势。青年女性子宫内膜癌患者量以2019年最多,其次为2014年,十年间青年女性子宫内膜癌总量呈波动趋势,总体变化不明显,2019年至2021年患者就诊量明显减少,考虑受新冠疫情影响。2.青年女性患者子宫内膜病变的相关因素分析(1)EH组170例,平均年龄37.6±6.5岁,发病中位年龄40岁。AH组145例,平均35.6±6.7岁,发病中位年龄36岁,EC组51例,平均年龄36.9±6.2岁,发病中位年龄38岁。经统计学分析,此三种类型子宫内膜病变患病年龄存在差异(P<0.05)。两两比较显示,EHvs EC,AHvs EC,P均>0.05,没有统计学差异;EHvs AH,P<0.0MRTX1133说明书5,存在统计学差异。表明青年女性子宫内膜非典型增生患者平均发病年龄要早于子宫内膜单纯性增生者。(2)三组子宫内膜病变中,<18岁0例(0.0%),18～21岁2例(0.5%),22～25岁19例(5.2%),26～29岁44例(12.0%),30～33岁56例(15.3%),34～37岁51例(13.9%);38～41岁76例(20.8%);42～45岁118例(32.2%);经统计学分析,发现三种子宫内膜病变类型在各年龄段的构成比不存在统计学差异(P>0.05)。(3)EH组患者的初潮年龄分布于11～19岁,平均年龄为14.17岁;AH组患者的初潮年龄分布于10～17岁,平均年龄为13.92岁;EC组患者的初潮年龄分布于9～16岁,平均年龄为13.14岁,三组中位年龄均为14岁。经方差分析,P<0.05,存在统计学差异。两两比较显示,EHvs EC,AHvs EC,P均<0.05,存在统计学差异;EHvs AH,P>0.05,无统计学差异。说明青年女性子宫内膜癌患者平均初潮年龄均早于子宫内膜非典型增生及单纯性增生者。(4)三组子宫内膜病变的城乡分布分布无统计学差异(P>0.05)。(5)EH组病程<1年的有154例(90.60%),病程≥1年的有16例(9.40%);AH组病程<1年的有120例(82.76%),病程≥1年的有25例(17.24%);EC组病程<1年的有24例(47.06%),病程≥1年的有27例(52.94%)。对其行χ~2检验,P<0.05,同时行χ~2趋势渐近检验结果说明不同子宫内膜病变的病程长短存在差异且病程越长,子宫内膜恶性程度越高。(6)366例不同类型子宫内膜病变患者的孕次分布在0～9次,产次分布在0～4次,其中已生育患者223例,未生育患者143例;根据是否生育对其进行分组,对其进行统计学分析,P<0.05,说明患者是否生育与子宫内膜病变构成比之间存在差异性。随着患者分娩次数的增加,子宫内膜非良性病变在子宫内膜病变患者中的构成比例也逐步下降。(7)366例青年女性患者中,BMI正常组159例,占比43.4%,肥胖组79例,占比21.6%,对三组进行χ~2检验,P<0.05,显示不同体重指数对子宫内膜病变的发病构成比存在统计学差异。同时行卡方趋势渐近检验,P<0.05。说明在样本人群中,随着患者BMI程度的增加,子宫内膜非良性病变在子宫内膜病变患者中的构成比例也逐步上升。(8)对三组子宫内膜病变中患有高血压、高血糖患者的百分比进行比较,差异均存在统计学意义(P<0.05)。说明高血压、糖尿病与子宫内膜恶性病变具有相关性。(9)不同子宫内膜病变的甲状腺功能分布具有统计学意义(P<0.05)。在子宫内膜非良性病变中以亚临床甲减居多。(10)对三组的雌激素(E2)平均水平进行方差分析,发现P<0.05。同时进行两两比较显示,EHvs EC,AHvs EC,P均<0.05,存在统计学差异;EHvs AH,P>0.05,无统计学差异。说明样本人群中不同子宫内膜病变的E2的分布具有统计学意义且子宫内膜癌患者体内E2水平明显高于子宫内膜非典型增生及单纯性增生者。(11)将三组中患有多囊卵巢综合征例数进行统计分析,发现P<0.05,同时行χ~2趋势渐近检验,P<0.05,均存在统计学差异,表明多囊卵巢综合征与子宫内膜病变有相关性,子宫内膜非典型增生及子宫内膜癌患者中患有多囊卵巢综合征的数量明显多于子宫内膜单纯性增生者。(12)不同子宫内膜病变的CA125表达量具有统计学意义(P<0.05),子宫内膜癌血清CA125异常患者量均显著高于子宫内膜非典型增生及子宫内膜单纯性增生血清CA125异常者数量。(13)子宫内膜良性、癌前病变及癌变在子宫内膜厚度的分布中有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜癌、子宫内膜非典型增生患者的内膜厚度均明显厚于子宫内膜单纯性增生者。(14)子宫内膜良恶性病变在宫腔回声分布上具有差异(χ~2=82.279,P<0.001),彩超更易提示:子宫内膜非典型增生:回声不均,见细小暗区;子宫内膜癌:宫腔内可见偏强回声。3.子宫内膜非典型增生及子宫内膜癌未生育女性患者的治疗及生育情况(1)子宫内膜非典型增生未生育女性患者的治疗及生育情况60例子宫内膜非典型增生患者要求保留生育功能者为56例,保守治疗期间,均每3个月至半年进行1次超声检查,并通过诊刮或宫腔镜联合诊刮进Puromycin作用行子宫内膜活检来评估治疗效果。可见保留生育功能治疗方式中单独口服高效孕激素的患者数量最多为34例(60.7%),且完全缓解率(91.2%)及活产率(30.0%)均为最高。(2)子宫内膜癌未生育女性患者的治疗及生育情况25例子宫内膜癌未生育患者病理分级中20例为子宫内膜癌IA期,1例为子宫内膜癌II期,4例为子宫内膜癌IIIC1期。仅有4例要求保留生育功能,4例均给予高效孕激素治疗,其中2例分别经治疗9个月、12个月达到完全缓解后均接受辅助生殖技术分娩一活婴。结论:1.青年女性子宫内膜非典型增生发病年龄早于子宫内膜良性病变。初潮越早子宫内膜恶变概率越高。2.子宫内膜病变的严重程度受分娩、病程及BMI的影响,妊娠对子宫内膜具有保护作用且产次与整体子宫内膜恶性病变风险降低相关。而BMI值越高、病程越长,子宫内膜恶性程度越高。3.子宫内膜癌患者术前血清CA125异常升高者均多于子宫内膜非典型增生及子宫内膜单纯性增生者。4.子宫内膜非典型增生及早期子宫内膜癌患者在选择保留生育功能治疗上,口服高效孕激素仍是首psychobiological measures要选择,但宫腔镜联合LNG-LUS治疗的重要性正在进一步提高。