目的脂滴(LDs)是一种高度动态的细胞器,其质量控制(LDQC)失衡经由脂质代谢紊乱诱导肝脏代谢性损伤和癌变是毒理学研究的新热点。甲基转移酶3 (METTL3)是介导RNA m6A修饰的核心分子,通过调节目的基因RNA稳定性及其翻译表达的稳态,介导细胞代谢相关毒理学作用。然而,m6A修饰调控LDs动态及其环境应激通路相关靶分子的表观调控机制尚未见报道。本研究拟探讨METTL3调控纳米微塑料(NPs)暴露selleck合成诱导肝细胞脂毒性的m6A修饰机制。方法给予肝细胞HepG2不同剂量(0.025,0.05,0.1,0.2,0.4和0.8 mg/mL)的NPs暴露24 h建立细胞模型。采用MTT法检测细胞活力、LDs探针(绿色)染色和活细胞实时成像观察LDs动态、qRT-PCR检测m6A修饰分子和LDs动态分子的基因水平、斑点杂交(Dot blot)和RNA甲基化免疫共沉淀(MeRIP)实验检测m6A修饰水平、流式细胞术检测细胞周期。构建METTL3敲低细胞,评价干预m6www.selleck.cn/products/d-lin-mc3-dmaA修饰水平对NPs暴露诱导肝细胞脂质毒性的影响。结果与对照组相比,NPs暴露组细胞中:①NPs(0.2,0.4和0.8 mg/mL)暴露诱导肝细胞活力下降,选取0.4 mg/mL开展后续实验。②随着时间延长(2 min,porous biopolymers4 min和6 min),绿色荧光逐渐增多强,提示NPs暴露诱导肝细胞LDs数量增多。③肝细胞m6A修饰分子(METTL3,METTL14和WTAP)、LDs动态相关基因(PLIN2和PLIN5)等mRNA水平增加。(④Dot blot和MeRIP-qRT-PCR结果显示,肝细胞m6A修饰升高,PLIN2的m6A水平增加,且PLIN2蛋白表达水平上调。⑤细胞呈现G2/M期周期阻滞。⑥与NPs单独暴露组相比,METTL3敲低细胞中NPs暴露诱导的LDs数量减少、PLIN2的m6A水平降低,且PLIN2蛋白表达水平减少。结论 NPs暴露诱导肝细胞脂质毒性可能与METTL3介导的PLIN2 m6A修饰有关,结果可为筛选环境新污染物(例如NPs)暴露诱导的肝脏代谢性损伤相关表观毒理学标志物和干预靶点提供线索。