心房颤动患者抗凝治疗的风险与收益分析

目的本研究旨在分析抗凝治疗在心房颤动(房颤)患者中的风险与收益,以优化治疗策略并提高治疗的安全性与有效性。方法采用随机数字表法,将2023年6月至2024年5月于我院接受诊治的100amphiphilic biomaterials例心房颤动患者分为观察组和对照组,每组50例。观察组接受个体化的抗凝治疗,对照组未进行抗凝治疗但进行了心率控制。全程监控患者的治疗安全性与有效性GSK1349572临床试验,特别关注出血和血栓形成事件的发生。结果观察组的出血事件发生率为12%,而对照组为4%;观察组血栓形成事件发生率为8%,显著低于对照组的18%。这表明抗凝治疗有效降低了血AG-221价格栓事件的风险,但同时增加了出血的风险。结论抗凝治疗在预防心房颤动患者血栓形成方面显著有效,但需注意其增加的出血风险。临床上应个体化评估患者的风险与收益,对高风险出血患者应采取适当的治疗策略,同时加强患者教育和定期监测,以确保治疗的最优效果和安全性。

基于迈克尔加成反应的荧光类脂囊泡的合成

构建具有特定结构功能的原始细胞,embryonic culture media是探索原始生命形式的重要环节。常用于原始细胞构建的结构包括磷脂囊泡、脂肪酸囊泡、高分子囊泡、蛋白质胶囊、凝聚态液滴和油滴等。其中,囊泡结构具有由两亲分子构成的界面,其结构最类似现有的细胞结构。现代细胞结构的主要构成成分是磷脂,然而磷脂的结构较为复杂,其体内合成是复杂的多步催化反应。想要模拟从原始环境中生成磷脂囊泡结构,就需要从均一的水相中产生具有长疏水链的两亲分子,这在过去是十分困难的。本文选择用二溴马来酰亚胺(DBM)与硫醇的点击反应来实现类脂分子的原位生成过程。二溴马来酰亚胺-硫醇点击反应是一种新颖的桥接方式,除了具有点击反应的高效、高转化率的优点之外,相较于传统的马来酰亚胺-硫醇点击反应,该反应保留了马来酰亚胺基团中原有的双键,因而其生成物具有显著的黄色荧光。此外,该反应计量比为1:2,即生成双取代产物。二溴马来酰亚胺与长链硫醇反应所获得的产物具有类磷脂的双疏水链结构。本文通过二溴马来酰亚胺高效的点击反应,原位生成直径在5微米以上、具有显著黄色荧光的液滴。此外,液滴具有光敏特性,对450-460 nm蓝光显著响应,光照下形态由液滴迅速转变为囊泡。本文探索了液滴前体与巨型囊泡形成的过程,对原位反应的动力学进行多方面的表征,并探索了其作为疏水性运载工具等方向的潜力。本文主要研究及结果:(1)以具有羧酸头基的巯酯与DBM分子作为反应物,利用DBM与硫醇的点击反应,在水相中生成大量具有黄色荧光的液滴,并在特定波长光照下转变为直径微米级的囊泡。荧光显微镜观察下,蓝光引起的液滴的光致转变在两分钟左右即可完成。长疏水链取代的马来酰亚胺产物经光解后生成硫醇取代的马来酰亚胺。(2)利用多种手段研究了反应的动力学过程。证实水相中DBM的点击反应是两阶段式的,即首先大量生成单疏水链取代的产物,进而转化为双疏水链取代产物。这种两阶段式特征来源于反应物与单取代产物之Belumosudil供应商间存在的亲电性的差异。由于产物TBM、DTM均显色,且DTM在540 nm左右有荧光,故可通过测定反应过程中的任一时刻的吸收曲线与荧光发射来监测任一时刻反应进行的程度。(3)使用原位生成的聚集体负载具有一定疏水性的脂肪酶,并进行后续的催化VX-765体内实验剂量反应。在原位负载过程中,脂肪酶一方面能通过催化巯酯水解催化聚集体自身的生成,另一方面能随反应进程原位地负载在生成的囊泡表面,此时脂肪酶仍然具有催化活性,可以催化p NPA、4-甲基伞形酮丁酸酯等底物的水解。由于产物DTM具有显著荧光特征,同时可作为荧光共振能量转移的供体或受体,以表征所处环境中分子间排列紧密程度的变化。而对于该原位生成膜的进一步改性,可以通过反应初期添加少量膜稳定因子来实现。

基于长期实验数据分析的快速诊断检测与血膜镜检联用在基层疟疾筛查中的应用效果评价

目的 探讨快速诊断试剂盒(rapid diagnostic test,RDT)与血膜镜检联用在基层医疗机构疟疾筛查的应用效能,提升疟疾诊断的精确性和效率。方法 利用佛山市高明区各医疗机构在2015—2024年提交的疟疾确诊病例、疑似病例以及不明原因发热病例的血样本,分别采取单一血膜镜检、单一RDT、RDT与血膜镜检联用3种方法进行检测,基于灵敏度、特异度、假阳性率、假阴性率、阳性预测值和阴性预测值6项参数,评估检测方法的诊断能力,并对3种检测方法的实验数据开展一致性统计学检验。结果 RDT与血膜镜检联用方法的灵敏度、特异度、阳性预测值与阴性预测值皆为最佳,假阳性率与假阴性率为零,显著优于单一的RDT或血膜镜PLX5622说明书检。结论 RDT与血膜镜检联用Biotin-streptavidin system有效结合了血检与RDT的优势,克服了单一检测方法此网站的局限性,能够显著提高疟疾筛查的效率和准确性,适合在基层医疗机构推广使用。

舒脉通络汤联合利伐沙班治疗慢性期下肢深静脉血栓患者的疗效及其对NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3炎症小体的影响

目的 探讨舒脉通络汤联合利伐沙班治疗慢性期下肢深静脉血栓(DVT)的临床疗效及其对NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体的影响。方法 选取2021年9月至2022年9月就诊于河南省中医获悉更多院的84例慢性期下肢DVT患者,采用随机数字表法将其分为观察组和对照组,每组42例,其中,对照组失访3例,观察组失访2例,最终分为对照组(n=39,口服利伐沙班并穿戴医学弹力袜)、观察组(n=40,在对照组基础上加服舒脉通络汤)。比较两组患者治疗前后的症状量化评分、临床疗效、凝血指标、血清NLRP3、白细胞介素(IL)-1β、IL-18的水平变化和不良反应发生情况。结果 治疗后,两组患者症状量化评分均低于本组治疗前,且观察组患者症状量Docetaxel MW化评分低于对照组患者,差异均有统计意义(P﹤0.05)。治疗后,两组患者纤维蛋白原(FIB)均低于本组治疗前,活化部分凝血活酶时间(APTT)均长于本组治疗前,且观察组患者FIB低于对照组患者,APTT长于对照组患者,差异均有统计意义(P﹤0.05)。治疗后,两组患者各炎症因子水平均低于本组治疗前,且观察组患者各炎症因子水平均低于对照组患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。对照组患者总有效率为79.49%,低于观察组患者的87.5%,差异有统计学意义(P﹤0.05)。两组患者均未发生不良反应。结论 舒脉通络汤联合利伐沙班治疗慢性期下肢DVT具有良Oncological emergency好的疗效,其作用机制可能与调节炎症机体炎症状态有关。

基于光-酶耦合反应体系的生物基平台化合物催化转化

仿照自然光合作用的光-酶耦合反应体系因以取之不尽、用之不竭的太阳能为驱动力,并结合了生物酶催化反应条件温和、选择性高等优势而显示出巨大发展潜力。为进一步扩大传统光-酶耦合催化反应的底物范围和反应路径,本论文围绕辅酶NADH光再生和光催化产H_2O_2两方面构建了高效的光-酶耦合体系并分别用于生物基平台化合物的还原和氧化反应。制备了具有较大比表面积且能带结构合适的金属硫化物ZnIn_2S_4作为光催化剂,并以贵金属元素铑的复合物[M]为电子介体,L-抗坏血酸为空穴牺牲剂。经可见光照射,在1.0 mg m L~(-1)的ZnIn_2S_4、1.0 m M的NAD~+以及100 m M的L-抗坏血酸浓度条件下NADH再生率高达90.2±3.28%,将其进一步与乙醇脱氢酶耦合后可在常温常压下将糠醛选择性还原为79.4±1.95%糠醇。针对传统光-酶耦合体系中存在电子转移和利用率较低的问题,在基础光催化剂ZnIn_2S_4表面组装含电子介体[M]和辅酶NAD~+功能化聚合物的聚多巴胺(polydopamine,PDA)层,制备了人工纳米颗粒ZnIn_2S_4/PDA@poly/[M]/NAD~+。PDA的修饰不仅增强了ZnIn_2S_4对可见光的吸收能力,并形成Z-型的电子转移机制有效抑制了光生电子-空穴对的复合行为,还实现[M]和NAD~+的固定化以缩短电子转移距离,构成了有效的分子内和分子间电子转移路径,强化了电子的分离、转移及利用。在可见光照射下获得了80.7±1.43%的NADH再生率,与“甲酸脱氢酶-甲醛脱氢酶-乙醇脱氢酶”多酶介导的级联反应耦合后成功将CO_2转化为116.7±11.8μM的甲醇,是游离体系的1.79倍。以2-乙基蒽醌为光催化剂产H_2O_2并与脂肪酶串联,首次Medical Knowledge构建了一种利用光-酶“一锅法”选择性氧化2,5-呋喃二甲醛(2GSK1120212价格,5-diformylfuran,DFF)产2,5-呋喃二甲酸(2,5-furandicarboxylic acid,FDCA)的反应路线。考察了光催化剂浓度、光源功率、鼓入空气及不同体积比的叔丁醇/乙醇混合溶剂为电子供体时对光催化产H_2O_2的影响,确定了在鼓入空气条件下光催化剂用量为2 mg m L~(-1)、光源功率为7 W且叔丁醇/乙醇(v:v)=9:1时最利于光-酶耦合催化。此时H_2O_2浓度为154.0±17.2 m M,且反应120 h后可将Dselleck CobimetinibFF全部转化并获得82.1±7.51%的FDCA。

中和医派益肾振阳汤联合连续性肾脏替代疗法治疗尿毒症临床观察

目的 探究中和医派益肾振阳汤联合连续性肾脏替代疗法治疗尿毒症的疗效。方法 采用随机数字表法将100例尿毒症患者分为试验组和对照组,各50例。对照组予Citric acid medium response protein以连续性肾脏替代疗法,试验组加用中和医派益肾振阳汤。2组均治疗3个月,比较2组治疗前后血磷、血钙水平,血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、β2-微球蛋白(β2-MG)、尿酸(UA)、24 h尿蛋白,中医证候积分。结果 治疗后,2组Scr、BUN、UA、β2-MG、24 h尿蛋白均降低(P<0.05),且试验组均低于对照组(P<0.05);2组血钙均升高(P<0.05),血磷FG-4592均降低(P<0.05),试验组血钙高于对照组(P<0.05),血磷低于对照组(P<0.05);2组中医证候积分均降低(P<0.05),试验组低于对照组(P<0.05)。结论 中Angiogenesis抑制剂和医派益肾振阳汤联合连续性肾脏替代疗法治疗尿毒症可调节钙磷代谢水平,改善肾功能和临床症状,缓解病情。

心血管疾病患者风险感知偏差对身体活动和饮食习惯的影响研究(英文)

目的 心血管疾病是我国重要的公共卫生问题,准确感知个人心血管疾病风险对及时干预和预防措施至关重要。该研究探讨了心血管疾病风险感知水平与客观计算风险之间的一致性,并分析不同风险感知类别在身体活动和健康饮食习惯上的差异。方法 采用便利抽样法,于2022年3月至8月在中国湖州市长兴县2个社区及杭州市1所医学院附属医院内分泌科及体检科,选取年龄在20至80岁之间,且无心血管疾病既往诊断史的患者进行调查。采用中文版心血管疾病风险态度与信念问卷评估患者的主观风险感知水平,客观风险则通过动脉粥样硬化心血管获悉更多疾病风险预测canine infectious disease模型计算。此外,还收集患者的基Enasidenib作用本信息、自我报告的身体活动情况和饮食习惯。结果 共有739例患者参与此研究,29.2%的患者能准确感知其心血管疾病发病风险,其中64.5%患者存在过度感知,6.2%患者为感知不足,50.0%的高风险患者过低地感知其实际风险。与准确感知组相比,60~80岁(OR=6.569)、饮酒(OR=3.059)以及高血压(OR=2.352)的患者更容易低估其心血管疾病发病风险。同时,40~<60岁(OR=2.462)和在职人员(OR=2.352)则更容易存在过度感知。风险低估组中患者身体活动达标率最低,但3组比较差异无统计学意义(χ2=2.556, P=0.278)。具有健康饮食习惯患者的比例在风险低估组中也最低,且3组比较差异具有统计学意义(χ2=10.310, P=0.006)。结论 心血管疾病发病风险感知偏差在心血管疾病患者中普遍存在,尤其是在高风险患者中更明显。风险低估组患者的身体活动达标率和健康饮食依从率最低。医护人员应重点实施个性化心血管疾病风险沟通策略,以提高患者风险感知的准确性。

参苓白术散联合针灸治疗肺脾气虚型过敏性鼻炎患者的疗效及对其血清干扰素-γ、白细胞介素-17水平的影响

目的 观察参苓白术散联合针灸治疗肺脾气虚型过敏性鼻炎患者的疗效及对其血清干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-17(Interleukin-17,IL-17)水平的影响。方法 选取2020年1月—2selleck SCH727965023年1月期间秦皇岛市妇幼保健院收治的100例过敏性鼻炎患者,按照随机数字表法分为对照组和观察组,每组各50例。对照组给予参苓白术散口服,观察组在对照组基础上联合针灸治疗。两组患者均持续治疗30 d。观察比较两组患者临床疗效、不良反应情况,治疗前后中医证候积分、血清IFN-γ、IL-17水平及免疫功能水平(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)。结果 治疗后观察组临床总有效率96.00%(48/50)明显高于对照组74.00%(37/50),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者鼻痒鼻塞、神昏气短、鼻涕清稀、打喷嚏评分均较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组鼻痒鼻塞、神昏气短、鼻涕清稀、打喷嚏评分均E-616452溶解度明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者血清IFN-γ水平均较治疗前升高,IL-17水平均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.0Mollusk pathology5);且观察组IFN-γ水平明显高于对照组,IL-17水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均较治疗前升高,CD8+水平均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平明显高于对照组,CD8+水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗期间,两组患者不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 参苓白术散联合针灸用于肺脾气虚型过敏性鼻炎患者的疗效显著,能够有效改善患者临床症状,提高血清IFN-γ水平并降低IL-17水平,发挥免疫调节的作用,值得临床推广应用。

诱导痰血管内皮生长因子和嗜酸粒细胞及降钙素原水平与肺功能检测对冬季气候下慢性阻塞性肺疾病和哮喘患者的诊断价值

目的 探讨诱导痰血管内皮生长因子(vascular endothelial growth BIBW2992纯度factor,VEGF)、嗜酸粒细胞(eosinophil,EOS)、降钙素原(procalcitonin,PCT)水平及肺功能检测对冬季气候下慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)和哮喘患者的诊断价值。方法 选取2018年6月至2020年12月期间东阳市人民医院巍latent neural infection山分院收治的冬季气候下哮喘患者、COPD患者、慢性阻塞性肺疾病合并支气管哮喘(asthmaCOPD oveselleck Nirogacestatrlap syndrome,ACOS)患者各55例,对比3组患者诱导痰VEGF、EOS、PCT水平及肺功能指标情况。结果 ACOS组诱导痰VEGF高于哮喘组,哮喘组诱导痰VEGF、EOS水平高于COPD组,ACOS组诱导痰EOS水平高于COPD组,差异均有统计学意义(P<0.01)。ACOS组与COPD组的第1秒用力呼气容积(FEV1)、1秒率(FEV1/FVC)、第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%pred)、残气量占肺总量比值(RV/TLC)、小气道功能障碍发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);哮喘组FEV1、FEV1/FVC、FEV1%pred高于ACOS组和COPD组,而RV/TLC、小气道功能障碍发生率低于ACOS组和COPD组,差异均有统计学意义(P<0.01)。哮喘组的PCT高于ACOS组、COPD组,差异有统计学意义(F=1 401.04,P<0.01)。诊断效能结果显示,VEGF、FEV1、FEV1/FVC、FEV1%pred、RV/TLC对AOCS诊断效能较高,其中VEGF对AOCS诊断效能最高(回归系数为0.993);EOS、FEV1、FEV1%pred对哮喘诊断效能较高(回归系数分别为0.984、0.937、0.981);RV/TLC对COPD诊断效能较高(回归系数为0.771)。结论 冬季气候下ACOS、哮喘、COPD患者的诱导痰VEGF、EOS、PCT水平及肺功能指标水平存在明显差异,综合检测能为疾病的临床诊断提...

内质网应激调控的ARHGEF2在肝细胞癌血管生成和仑伐替尼治疗敏感性中的作用研究

研究背景Protein Tyrosine Kinase抑制剂:肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)的死亡率位于所有恶性肿瘤第三位。因其高侵袭性和高转移率,绝大多数患者失去手术治疗机会,全身治疗是晚期不可手术的肝细胞癌患者首选治疗方案。分子靶向治疗,如仑伐替尼,是晚期HCC的一线治疗药物。尽管仑伐替尼延长了无法手术切除的中晚期HCC患者的中位总生存期,但其长期生存仍然不能使广大患者满意,靶向治疗所产生的固有的和获得性耐药显著限制了分子靶向药物在HCC中的疗效,因此现阶段肝细胞癌治疗形势依然严峻。内质网(Endoplasmic reticulum,ER)应激广泛参与了肿瘤侵袭和转移过程,并诱导HCC细胞对于多种化疗药物及分子靶向药的治疗抵抗,但内质网应激诱导的耐药机制涉及多种信号通路,目前尚无法完全解释。目前认为阻断内质网应激下游调控通路及作用靶点可能是治疗内质网应激相关耐药的有效策略。因此,探索内质网应激在肝癌中的相关靶基因可以为分子靶向药的治疗抵抗提供新的研究方向和理论基础。目的:寻找内质网应激在肝癌中发挥促癌作用的关键靶基因,为内质网应激相关的分子靶向药物耐药探寻新的治疗靶点。方法:(1)通过分析肝细胞癌内质网应激模型细胞与对照细胞的RNA测序、CHIP测序、ATAC测序数据集,将差异表达基因取交集,寻找内质网应激下游关键靶基因。利用Western Blot,q RT-PCR和免疫荧光技术验证关键基因ARHGEF2的m RNA和蛋白水平是否受内质网应激调控。(2)利用Jaspar数据库预测ARHGEF2的上游转录因子,并设计3个可能的启动子结合位点,采用双荧光素酶实验明确转录因子ZNF263与ARHGEF2的结合位点。利用靶向ZNF263的小干扰RNA和过表达质粒转染HCC细胞,采用Western BlJNJ-42756493核磁ot和q RT-PCR技术验证ZNF263对ARHGEF2的调控作用。(3)采用免疫组化(Immunohistochemistry,IHC),Western Blot和q RT-PCR技术检测ARHGEF2在肝癌和癌旁组织中的表达,结合临床病理资料分析ARHGEF2与临床分期、组织学分级和预后的相关性。利用TCGA数据库中的公共数据验证ARHGEF2与临床病理特征的相关性。(4)利用慢病毒技术在HCC细胞系中构建ARHGEF2稳定干扰和ARHGEF2稳定过表达细胞系。通过CCK-8技术、克隆形成实验、裸鼠成瘤实验检测ARHGEF2对肝癌细胞体内外增殖的作用;通过HUVEC细胞微管形成实验、Transwell、划痕实验和鸡胚绒毛尿囊膜(Chick embryo chorioallantoic membrane,CAM)实验检测ARHGEF2在体内外血管形成中的作用。(5)利用CCK-8技术、克隆形成和流式细胞凋亡术检测ARHGEF2在仑伐替尼治疗敏感性中的作用。通过HUVEC细胞的微管形成实验、CAM实验、CCK-8技术、克隆形成实验验证内质网应激在诱导血管形成和仑伐替尼治疗敏感性中的作用;敲低ARHGEF2后,利用CCK-8技术、克隆形成、流式细胞凋亡术和血管形成相关实验检测内质网应激诱导的血管形成和仑伐替尼治疗抵抗是否被逆转。利用荷瘤小鼠给药实验检测仑伐替尼联合ARHGEF2干扰是否使异种肿瘤移植模型获益。(6)行转录组测序,寻找ARHGEF2作用的关键下游靶基因。通过Western Blot和q RT-PCR技术验证下游靶基因EDN1是否受ZNF263/ARHGEF2调控。利用小干扰RNA技术在HCC细胞中敲低EDN1表达,通过HUVEC细胞微管形成实验、Transwell、划痕实验和CAM实验检测EDN1在体内外血管形成中的作用。在过表达ARHGEF2的HCC细胞中敲低EDN1,利用血管形成相关实验检测ARHGEF2诱导的血管形成能力是否由EDN1介导。结果:(1)内质网应激上调肝癌细胞中ARHGEF2的表达。将RNA测序、CHIP测序、ATAC测序数据集的差异表达基因进行汇总交集,发现了包括ARHGEF2、TRIB3、NMNAT2、HKDC1和CREB5在内的5个差异基因,结合测序结果并对差异基因进行验证,筛选得到上调的基因ARHGEF2作为内质网应激下游的研究目标。Western Blot,q RT-PCR和免疫荧光实验均发现,内质网应激诱导剂TM上调了ARHGEF2蛋白和m RNA表达水平,内质网应激抑制剂4-PBA则下调了ARHGEF2蛋白和m RNA表达。(2)内质网应激通过转录因子ZNF263转录激活ARHGEF2。分别在肝癌细胞系Hep G2和Hep3B中干扰ZNF263表达。Western Blot和q RT-PCR结果发现,ZNF263干扰下调了ARHGEF2蛋白和m RNA表达水平。相反,在肝癌细胞系Huh7和MHCC97H中过表达ZNF263,则上调ARHGEF2表达水平。使用Jaspar数据库确定了三个ZNF263可能与启动子结合的位点,双荧光素酶实验表明R3(-355/-335,AGGGGAGGGAAAAAGGGAGGG)可能是ZNF263的结合位点。(3)ARHGEF2在肝癌中高表达并与不良预后有关。对138例患者的肝癌及癌旁组织芯片进行IHC染色,结果显示,相较于癌旁组织,ARHGEF2在肝癌组织中高表达且其表达与临床分期、组织学分级和预后不良相关。Western Blot和q RT-PCR结果同样提示ARHGEF2在肝细胞癌组织中的表达明显高于癌旁组织,且TCGA数据库的分析结果也进一步验证了这一结论。(4)ARHGEF2促进肝细胞癌体内及体外增殖。构建ARHGEF2稳定干扰及过表达细胞株后,CCK-8实验、克隆形成实验和裸鼠成瘤实验表明干扰ARHGEF2能够明显抑制HCC细胞体内外增殖,过表达ARHGEF2则显著增强了HCC细胞增殖及成瘤能力。(5)ARHGEF2是促进血管生成的重要因子。构建ARHGEF2稳定干扰及过表达细胞株后,收集细胞条件培养基行Transwell和划痕实验,结果表明干扰ARHGEF2抑制了血管内皮细胞的迁移和侵袭能力,过表达ARHGEF2则显著促进血管内皮细胞迁移和侵袭。微管形成实验和CAM实验表明,ARHGEF2在体外促进微管形成,在体内增加新生血管反应。(6)ARHGEF2参与仑伐替尼治疗敏感性。CCK-8和流式细胞术提示,在Hep G2细胞中干扰ARHGEF2,肝癌细胞对仑伐替尼敏感性升高,可获取更好的抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的作用。反之,在MHCC97H细胞系中过表达ARHGEF2,肝癌细胞对仑伐替尼敏感性降低,仑伐替尼促进细胞凋亡的作用明显减弱。微管形成实验和CAM实验表明,内质网应激诱导体内外新生血管的形成;CCK-8技术和克隆形成实验验证了内质网应激参与仑伐替尼耐药。而在敲低ARHGEF2后,内质网应激诱导的血管形成和仑伐替尼治疗抵抗性被部分抑制。荷瘤小鼠给药实验表明,与对照组和仑伐替尼单药组相比,仑伐替尼联合ARHGEF2干扰microRNA biogenesis可以获得更好的抑制体内肿瘤的作用。(7)EDN1是ARHGEF2下游效应因子。成功构建ARHGEF2干扰细胞株后,将ARHGEF2干扰细胞和对照Hep G2细胞行转录组测序,共鉴定出272个差异基因m RNA水平的变化,其中EDN1是ARHGEF2参与的多条通路发挥作用的共同基因。利用Western Blot和q RT-PCR技术在HCC细胞中进行验证,发现内质网应激/ZNF263/ARHGEF2通路上调了HCC细胞中EDN1的蛋白及m RNA表达水平。(8)ARHGEF2通过EDN1发挥促血管形成作用。利用小干扰RNA技术在HCC细胞中敲低EDN1后,收集细胞条件培养基行CAM实验、微管实验、Transwell实验和划痕实验,结果表明,干扰EDN1可显著抑制HUVEC细胞微管成管、迁徙及侵袭能力,并抑制新生血管形成。在ARHGEF2过表达细胞系中干扰EDN1则逆转了ARHGEF2促进血管形成的作用。结论:(1)在HCC细胞中,ARHGEF2是内质网应激下游重要靶基因。(2)内质网应激通过ZNF263在转录水平上调控ARHGEF2的表达。(3)ARHGEF2在肝癌中高表达,并与临床分期、组织学分级及不良预后相关。(4)ARHGEF2体内和体外促进HCC细胞的增殖、肿瘤生长以及血管形成。(5)EDN1是ZNF263/ARHGEF2通路的下游靶基因,ARHGEF2调控血管形成的过程通过EDN1介导。(6)ARHGEF2干扰HCC细胞对仑伐替尼的敏感性;ARHGEF2缺失逆转了内质网应激诱导的血管形成和HCC细胞对仑伐替尼的凋亡抵抗。