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目的:(1)运用Meta分析对缺血性脑卒中(IS)复发危险因素进行分析、归纳及总结;(2)在Meta分析的基础上构建IS复发风险预测模型并绘制风险评分表,进行临床验证;(3)将已构建好的IS复发风险预测模型结合健康信念模式(HBM)应用在IS患者的个体化健康教育中,探讨其提高患者生活方式改变和遵医服药的依从性和预后的影响。方法:(1)通过MetImidazole ketone erastin试剂a分析的数据,提取21个队列研究的缺血性脑卒中患者复发危险因素及其相应的RR值,然后根据合并的RR及其对应的95%CI计算各危险因素的β回归系数;(2)利用logistic回归构建缺血性脑卒中复发风险预测模型,根据β回归系数制作评分表;然后回顾性收集2020年1月-2021年12月南宁市某三甲医院住院的首次缺血性脑卒中患者进行模型验证,采用ROC曲线下面积、灵敏度、特异度、约登指数(youden index,YI)及Hosmer-Lemeshow检验模型的判别效度(区分度)和符合程度(校准度);(3)采用非同期对照试验,FUT-175选取2022年1月Topical antibiotics-2022年6月在南宁市第二人民医院神经内科住院的171例首发缺血性脑卒中患者为对象,试验组85例,对照组86例。对照组开展常规健康教育,试验组在常规健康教育的基础上,进行基于风险预测模型结合HBM的个体化健康教育。比较两组患者出院后6个月的行为改变问卷(SBCI)评分、m Rs评分以及复发率。结果:(1)包括30 202例缺血性脑卒中患者在内的21个队列纳入了我们的Meta分析。其中年龄、吸烟、饮酒、高血压、糖尿病、房颤、冠心病、TIA、Hhcy、规律运动、抗血栓治疗均有统计学意义。(2)Meta分析所合并有意义的因子均纳入模型,各因子按权重进行评分,总分为20分,模型在临床得到验证,选择的截断值为7。模型的ROC曲线下面积为0.909,95%CI(0.838–0.980)。YI 0.68,敏感度0.826,特异度0.854。Hosmer-Lemeshow检验结果得出P=0.195;(3)出院6个月后干预组的生活方式总体指标改变依从性显著高于对照组(P<0.001)。除压力控制外,干预组的抽烟戒除、饮酒戒除、控制脂肪摄入、定期监测血压、定期监测血糖及适当锻炼身体依从性均高于对照组(P<0.05);干预组遵医服药依从性评分均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者m Rs评分差异无统计学意义(P<0.05),复发率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)通过Meta分析,筛选出11个缺血性脑卒中复发的影响因素,其中包括2个保护性因素:规律运动和抗血栓治疗;以及7个危险因素年龄、吸烟、饮酒、糖尿病、高血压、房颤、冠心病、TIA、Hhcy。(2)建立了缺血性脑卒中复发风险预测模型及评分表,模型经临床验证,预测效果良好。可作为缺血性脑卒中患者筛查复发高危人群的简易工具,帮助临床医护人员早期识别高危人群;(3)风险预测模型结合HBM的个体化健康教育可有效提高缺血性脑卒中患者的6个月的生活方式改变依从性和遵医服药依从性,但对改善患者6个月的预后效果不明显,需进一步随访观察。

目的：探讨膀胱癌细胞内在程序性死亡受体-1(PD-1)受体功能对肿瘤的影响。方法：选取2019年1月—2023年1月膀胱癌患者80例，采用免疫组织化学染色法检测膀胱癌患者癌组织以及距离肿瘤边缘3 cm的膀胱癌旁组织是否有PD-1表达；使用逆转录聚合酶链式反应技术对膀胱癌患者的癌组织以及距离肿瘤边缘3 cm的膀胱癌旁组织中PD-1 mRNA表达情况进行统计。并对其表达水平与临床病理学参数(年龄、性别、TNM分期、肿瘤分级等)进行相关性分析。结果：PD-1阳性表达率为63.75%(51/80),PD-1 mINCB28060浓度RNA阳性表达率luciferase immunoprecipitation systems为68.75%(55/80),而距离肿瘤边缘3 cm的膀胱癌旁组织均未见明显的PD-1和PD-1 mRNA的表达。通过临床相关性分析发现，PD-1的表达与膀胱癌临床TNM分期密切相关(P<0.05),但是其表达情况与膀胱癌患者的年龄、性别、肿瘤分级等无明显的相关性(P<0.0Telaglenastat价格5)。结论：膀胱癌患者癌组织中PD-1高度表达，在膀胱癌肿瘤发生发展的过程中具有一定的作用，可用来评估膀胱癌进展程度。

目的：分析丹参酮ⅡA(TIIA）结合有氧运动（AE）对高血压大鼠血管功能的影响及作用机制。方法：选择30只自发性高血压大鼠（SHR），随机分为模型组、TⅡA组、TⅡA+AE组，每组10只，另选取10只健康大鼠作为对照组。TⅡA组大鼠给予20 mg/kg的TⅡA,TⅡA+AE组在此基础上进行中等强度的有氧运动，模型组和健康对照组大鼠均灌胃给予等体积的生理盐水溶液。观察各组大鼠收缩压（SBP）和舒张压（DBP）的变化，HE染色观察胸主动脉组织形态学变化，测定血管舒缩功能，检测血清血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、内皮素-1(ET-1）和一氧化氮（NO）的表达水平，测定胸主动脉中腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）、核因子E2相关因子（Nrf2）、血红素加氧酶1(HO-1）、醌氧化还原酶1(NQO-1）蛋白的相对表达。结果：TⅡA组和TⅡA+AE组大鼠的SBP和DBP均低于同期的模型组大鼠；TⅡA+AE组大鼠的SBP和DBP在第8周时均低于同期TⅡA组大鼠（P<0.05）；与模型组相比，在1×10~(-7)、1×10~(-6)和1×10~(-5)mol/L的PE浓度下TⅡA组和TⅡA+AE组大鼠胸主动脉血管环的收缩率均降低，且TⅡA+AE组大鼠低于同浓度下的TⅡA组（P<0.05）；在1×10~(-8)、1×10~(-7)和1×10此网站~(-6)的Ach浓度下TⅡA组和TⅡA+AE组大鼠胸主动脉血管环的舒张率高于模型组，且ⅡA+AE组大鼠高于同浓度下的TⅡA组（P<0.05);TⅡA组和TⅡA+AE组大鼠血清AngⅡ和ET-1的表达水平低Rapamycin分子式于模型组、NO的表达水平高于模型组（P<0.05）；与TⅡA组相比，TⅡA+AE组大鼠血清AngⅡ和ET-1的表达水平较低、NO的表达水平较高（P<0.05);TⅡA组和TⅡA+AE组大鼠胸主动脉中AMPK、Nrf2、HO-1、和NQO-1蛋白的相对表达medicine review显于模型组，且TⅡA+AE组高于TⅡA组（P<0.05）。结论：TⅡA联合有氧运动可降低SHR的血压，改善血管舒缩功能和内皮功能，其机制可能与AMPK/Nrf2信号通路有关。

目的:探讨miR-100-5p对甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化(EMT)进程的Compound 3临床试验影响。方法:通过GEO数据库下的miRNA微阵列数据集(GSE104006、GSE73182、GSE151180),选取变化倍数[|log2Fold Change(FC)|>1]和adj.P.Val<0.05的miRNA进行交集。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-100-5p在PTC细胞系(TPC-1和B-CPAP)和人正常甲状腺细胞系(Nthy-ori 3-1)中的表达趋势。合成miR-1selleck SB20358000-5p相关的模拟物(mimics-100-5p)、抑制剂(inhibitor-100-5p)以及对应的对照组(mimics-NC和inhibitor-NC)。分别转染PTC细胞系，通过Edu实验、平板克隆实验、划痕愈合实验、Transwell实验深入研究miR-100-5p对PTC细胞的影响。通过蛋白印迹实验检测转染mimics-100-5p、inhibitor-100-5p及对应NC组MMP-9和EMT相关标志蛋白的表达趋势。结果:三个miRNA微阵列数据库共同交集于miR-100-5p。与人正常甲状腺细胞系Nthy-ori 3-1相比，miR-100-5p在PTC细胞系中低表达。qRT-PCR验证转染成功。Edu实验、平板克隆实验显示过表达miR-100-5p细胞的增殖速率明显降低，而敲低miR-100-5p后结果与之相反。划痕愈合实验和Transwell实验显示过表达miR-100-5p的TPC-1细胞的迁移和侵袭能力受限，而敲低miR-100-5p的结果与之相反。蛋白印记实验显示过表达miR-100-5p后MMP-9、VIM蛋白表达趋势明显降低，而E-cad蛋白表达上升，敲低miR-100-5p可以逆转过表达miR-100-5p的结果。结论:miR-100-5p负调控PTC细胞的增殖、迁移和侵袭。failing bioprosthesis此外，miR-100-5p还参与介导PTC的上皮间质转化进程。

目的 探讨基于应用扩展显示视野重建(Display Field of View,DFOV)的CCTA数据对房颤合并Bioactive Cryptides冠心病患者肺静脉一体化成像的可行性研究。方法 前瞻性收集100例拟行CCTA及肺静脉成像的房颤合并冠心病患者并随机分为观察组和对照组，每组50例，观察组进行轴向冠状动脉CT血管(CCTA)以评估冠状动脉，然后应用DFOV生成三维图像以显示肺静脉解剖及开口；对照组采集CCTA数据，然后进行肺静脉成像扫描。以5级评分评价两组主观图像质量，比较两组的辐射剂量、造影剂用量、图像主观评分以及左心房及肺静脉开口处的CT值、信噪比(SNR)及对比信噪比(CNR)。结果 两组被试性别、年龄、体重指数(BMI)、肺静脉图像主观评分均无统计学差异；试验组组的辐射剂量及造影剂用量均低于对照组(P<0.001),差异有统计学意义；试验组左心房及四个肺静脉开口处SNR、CNR均高于对照组(P<0.001)。结论 Y-27632对于房颤合并冠心病患者Tezacaftor细胞培养应用扩展显示视野重建(DFOV)的CCTA数据可一站式进行冠状动脉及肺静脉成像，而且能够有效降低患者的造影剂用量及辐射剂量。

【目的】对肥厚型心肌病(Hypertrophic cardiomyopathy,HCM)患者利用代谢组学分析识别心肌纤维化血浆代谢物,利用心血管磁共振(Cardiovascular magnetic resonance,CMR)中T1 mapping技术及定量评估心肌纤维化,探索两electronic immunization registers者在肥厚型心肌病明确诊断和评估预后的价值。【方法】纳入2021年6月至2022年10月于昆明医科大学第一附属医院就诊的30例HCM患者(实验组)及30例心脏室壁厚度正常的高血压患者(对照组),收集所有实验组及对照组患者血浆、临床资料及CMR资料,包括延迟强化扫描(Late gadolinium enhancement,LGE)和T1 mapping序列,图像于后处理工作站分析处理,得出心脏相关参数,根据美国心脏协会心肌17节段分法,测量各段心肌的增强前T1值、增强后T1值及心肌细胞外容积分数(Extracellular volume fraction,ECV)。对所有患者进行前瞻性随访。对采集的血样采用基于超高效液相色谱(Ultra Performance Liquid Chromatography,UHPLC)与高分辨质谱联用,即液质联用(LC-MS/MS)技术对样本进行代谢组学分析,对患者血浆代谢物进行多元统计分析,包括主成分分析(Principal component analysis,PCA)、偏最小二乘法判别分析(Partial Least Squares Discrimination Analysis,PLS-DA)等,揭示不同组别的代谢模式差异。利用层次聚类(Hierarchical C寻找更多lustering Alg,HCA)和代谢物相关性分析,揭示样本之间及代谢物和代谢物之间的关系及主要的代谢通路。通过COX单因素、多因素回归分析代谢物及CMR参数,探讨其与HCM终点事件发生的关系。最后联合Kaplan-Meier生存分析,探讨HCM终点事件影响因子对该疾病的预后价值。【结果】纳入实验组、对照组各30例,人群平均年龄分别为58±12、59±12岁,男女比均为1.3。在实验组中,BNP水平、超敏C反应蛋白水平、NYHA的分级、室间隔厚度、左房内径、二尖瓣瓣叶收缩期前向运动发生率均高于对照组,差异有统计学意义。两组60个样本共鉴定到正离子模式代谢物626个,负离子模式代谢物393个。有84个正离子模式代谢物差异显著,其中77个代谢物上调,7个代谢物下调;有48个负离子模式代谢物差异显著,其中44个代谢物上调,4个代谢物下调。其中咖啡酸乙酯(Ethyl caffeate),十五烷酸(Pentadecanoic Acid)、N-乳酰基苯丙氨酸(N-lactoyl-phenylalanine)、牛磺酸(Taurocholic acid,TC)和甘胆酸(Glycocholic acid,GCA)等代谢物的差异较为显著。初级胆汁酸合成途径(Primary bile acid biosynthesis,map00120)、胆固醇代谢途径(Cholesterol metabolism,map04979)是差异代谢物的显著富集途径。TC和GCA在上述代谢途径中重复富集Fulvestrant半抑制浓度。两组根据美国心脏协会心肌17节段分法,各将心脏分为480个节段,实验组肥厚段心肌137段(28.84%),非肥厚段心肌343段(71.16%),其中间隔壁肥厚最常见,共103段(75.2%)。实验组整体心肌增强前T1值及ECV值均高于对照组(增强前T1值:t=10.933,P<0.001,ECV值:t=9.564,P<0.001)。实验组组内对比肥厚段心肌增强前T1值及ECV均高于非肥厚段(t=11.538,P<0.001,t=12.408,P<0.001)。根据左室流出道是否梗阻或二尖瓣前叶是否前向运动(SAM征)将实验组分为梗阻型13例(43.3%)、非梗阻型17例(56.7%)。梗阻与非梗阻心肌增强前T1值及ECV值均高于对照组(增强前T1值:t=11.541,P<0.001,ECV值:t=6.564,P<0.001)。梗阻患者肥厚段、非肥厚段心肌增强前T1值、增强后T1值和ECV均高于非梗阻患者(肥厚段增强前T1值:t=2.515,P=0.013;增强后T1值:t=4.958,P<0.001;ECV:t=2.649,P=0.009;非肥厚段增强前T1值:t=3.469,P=0.001;增强后T1值:t=4.625,P<0.001;ECV值:t=2.735,P<0.001)。梗阻患者组内肥厚段心肌增强前T1值、ECV高于非肥厚段(增强前T1值t=7.433,P<0.001,ECV t=7.158,P=0.012);非梗阻患者组内肥厚段心肌增强前T1值、增强后T1值、ECV高于非肥厚段(增强前T1值t=10.132,P<0.001,增强后T1值t=2.184,P=0.030,ECV t=13.518,P<0.001)。根据LGE存在与否将实验组分为LGE阳性组及LGE阴性组。HCM患者LGE阳性与LGE阴性肥厚段心肌增强前T1值及ECV值均高于对照组(增强前T1值:t=6.759,P<0.001,ECV值:t=9.374,P<0.001;增强前T1值:t=7.735,P<0.001,ECV值:t=11.374,P<0.001)。LGE阳性肥厚段心肌增强前T1值、增强后T1值和ECV均高于阴性组(增强前T1值:t=5.921,P<0.001;增强后T1值:t=2.984,p=0.003;ECV:t=7.032,P<0.001);LGE阳性非肥厚段心肌增强前T1值、ECV均高于阴性组(增强前T1值:t=2.945,P=0.003;ECV:t=12.373,P<0.001)。LGE阳性患者肥厚段心肌增强前T1值、ECV均高于非肥厚段(增强前T1值:t=7.906,P<0.001;ECV:t=2.537,P=0.012);LGE阴性患者肥厚段心肌ECV高于非肥厚段(t=2.347,P=0.020);同时还发现,LGE阴性非肥厚段ECV高于对照组(t=1.578,P=0.039)。BNP水平、LVEF、心肌质量指数对HCM患者的主要终点事件和次要终点事件均有独立预测意义(P<0.05),CRP水平,是否使用利尿剂,LVESD只对主要终点事件有独立预测意义(P<0.05),LAD只对次要终点事件有意义(P<0.05)。在Kaplan-Meier生存分析中,随着BNP、CRP、LVESD、心肌质量指数和ECV的增加,主要终点事件的发生率显著升高(P<0.05)。随着LVEF减少,主要终点事件的发生率显著升高(P<0.05)。【结论】HCM患者体内咖啡酸乙酯,十五烷酸、N-乳酰基苯丙氨酸、TC和GCA等代谢物可作为新型生物标志物行进一步研究。TC和GCA在初级胆汁酸合成途径和胆固醇代谢途径重复富集,或可成为调节肥厚型心肌病疾病进程的新靶点。利用CMR的T1 mapping技术和ECV可以定量评估HCM患者心肌纤维化,以ECV诊断效能较高。BNP水平、CRP水平、LVEF、LVDSE、心肌质量指数和ECV可作为评估HCM患者主要终点事件的危险因素,影响疾病预后。

光动力学疗法(PDT)和化学动力学疗法(CDT)等活性氧(ROS)介导的癌症协同疗法能够对癌细胞进行有效地杀伤,近年来受到了极大的关注。纳米材料因其独特的表面结构和良好的药物负载能力,为癌症的精准诊断和治疗提供了有力途径,已经成为Needle aspiration biopsy提高ROS介导的癌症协同疗法的关键材料。碳点(CDs)作为一种新型的纳米材料,因其良好的水溶性和生物相容性以及易于制备和修饰等优点,不仅能够提高药物的负载能力,还可以实现特定肿瘤部位的药物释放,从而提高治疗效果。因此,本文将蛋白药物BSA-Cys-DOX与CDs相结合,制备了一种具有p H/GSH双响应、荧光/核磁双模成像的新型纳米诊疗剂Mn@CDs-BCD用于肿瘤化学动力学/光动力/化疗协同治疗。本文以光敏剂卟啉为碳源,通过一步水热法制备了一种锰掺杂的新型碳点(Mn@CDs)。以牛血清白蛋白(BSA)为载体,通过化学键连接谷胱甘肽(GSH)响应性小分子胱氨(Cys)和化疗药物阿霉素(DOX),制备了蛋白药物BSA-Cys-DOX。最后,将Mn@CDs与BSA-Cys-DOX通过静电相互作用组装成多功能纳米诊疗剂Mn@CDs-BCD。透射电镜(TEM)结果表明Mn@CDs和Mn@CDs-BCD的粒径分别为5.0±0.7 nm和100.0±12.6 nm,且具有良好的分散性。通过傅里叶红外光谱(FT-IR)和紫外可见光谱(UV-Vis)确定了DOX的成功偶连及载药率(52.3±3.6%)。荧光光谱表明在510 nm激发下,Mn@CDs-BCD发出强烈的红色荧光(645 nm)。此外,由于顺磁性Mn~(2+)的掺杂,使制备的Mn@CDs-BCD显示出优异的纵向驰豫率(r_1=4.07 m M~(-1)s~(-1)),为肿瘤部位的核磁成像提供Cobimetinib生产商了可能。通过体外实验探索了Mn@CDs-BCD的肿瘤微环境(TME)响应特性。药物释放实验结果表明,在p H=5.5和10 m M GSH条件下,24 h后药物释放率达81.6%。溶解氧实验表明,在5%H_2O_2条件下,Mn@CDs-BCD可以有效的提高溶液中氧气含量水平(9 mg m L~(-1))。体外实验表明,Mn@CDs-BCD可以通过类Fenton反应分解H_2O_2生成·OH和O_2,同时Mn@CDs-BCD在光照条件下可以有效的产生~1O_2,通过多种生成ROS的途径达到协同治疗的目的,从而增强肿瘤的治疗效果。通过细胞实验研究了纳米诊疗剂Mn@CDs-BCD的细胞摄取、细胞毒性以及对肿瘤细胞的杀伤效果。SCH727965配制在与4T1细胞共同孵育4h后,可以观察到细胞内有明亮的红色荧光,表明Mn@CDs-BCD可以快速有效的被细胞摄取。细胞毒性实验表明Mn@CDs-BCD实验组在无光照条件下,对正常L929细胞无明显的细胞毒性,细胞存活率在93%以上;而在光照条件下,可以对4T1癌细胞进行有效的杀伤,细胞存活率仅为36%。此外,使用DCFH-DA探针对细胞内ROS水平进行了研究,在635 nm光照条件下,观察到与Mn@CDs-BCD孵育的4T1细胞发出了强烈的绿色荧光,表明Mn@CDs-BCD可以有效的产生ROS,从而杀伤肿瘤细胞。综上所述,纳米诊疗剂Mn@CDs-BCD具有良好的化学动力学/光动力/化疗协同治疗效果,同时具有荧光成像和MR成像的潜力,为研究新型纳米诊疗剂并实现肿瘤诊疗一体化提供了思路。

背景:帕金森病(Parkinson’s Disease,PD)是常见的神经退行性疾病,多巴胺能神经元的慢性进行性丧失是其主要病理特征,且在黑质致密部中表现最为明显,临床上表现主要为震颤、肌强直等运动症状。现阶段研究认为,诱导PD发生的一个重要因素是氧化应激。其中,活性氧水平异常、抗氧化酶活性失衡等因素可导致神经元功能障碍和凋亡。因此,减轻氧化应激的干预措施可能会抑制多巴胺能神经元的退化并减缓PD的进程。目前临床上使用西药对PD的治疗存在着明显的局限性,而我国传统医学中经历长时间应用和推广的中药,具有巨大开发价值,是寻找和应用更有效防治PD药物的宝库。其中,木豆叶作为传统草药,其抗氧化、抗炎等药理活性已在民间广泛使用中得到验证,此外木豆叶总提取物还具有神经保护作用。目前有关木豆叶黄酮类化合物的研究较为缺乏,基于“肾脑同治”的思想,深入探究木豆叶黄酮类化合物,以寻找治疗PD的潜在药物。根据课题组前期的研究,球松素是生物类黄酮化合物,作为木豆叶的活性成分之一,其具有潜在的神经保护作用,然而,目前有关球松素在6-OHDA诱导的PD的药理作用和具体作用机制尚不明确,需要进一步研究。目的:本论文以经典的神经毒剂6-OHDA作为PD模型的诱导剂,通过斑马鱼和人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的PD模型对球松素的神经保护作用进行验证。随后进一步探索球松素在抗氧化方面保护神经元的潜在作用机制。方法:给予6-OHDA(250μM)诱导斑马鱼建立体内PD模型,通过酪氨酸羟化酶免疫荧光染色和行为学测试,验证球松素的神经保护作用,同时给予30μM Nomifensine处理作阳性对照;给予50μM的6-OHDA诱导具有多巴胺能神经元的SH-SY5Y细胞建立体外PD模型,给予不同浓度球松素(0,0.1,1,5,25,100,200μM)处理,通过RT-q PCR和Western Blot检测SH-SY5Y细胞凋亡信号通路中Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP以及Nrf2/ARE信号通路中Nrf2、HO-1、NQO1的表达水平,通过MTT法和LDH释放检测评估细胞的相对活性和毒性,通过荧光染色检测ROS、线粒体膜电位、Elexacaftor小鼠细胞早期凋亡率和Nrf2核易位情况,通过双荧光素酶报告实验检测ARE启动子的活性,通过ELISA检测DNA片段化,通过试剂盒检测细胞内MDA、GSH、GSSG、NAD~+、NADH、SOD和GSH-Px的水平;通过si RNA对SH-SY5Y细胞进行Nrf2基因沉默,通过Western Blot检测Nrf2-si RNA的沉默效率,通过检测Nrf2-KO SH-SY5Y细胞的ROS水平、细胞活力、LDH释放水平、细胞早期凋亡率、线粒体膜电位明确Nrf2的关键性神经保护作用,通过Western Blot检测AKT/ERK蛋白激酶抑制剂对Nrf2核内表达水平的影响,以及磷酸化和总AKT/ERK蛋白的表达tick endosymbionts水平,通过双荧光素酶报告实验检测ARE启动子的活性明确AKT/ERK蛋白激酶的影响,通过检测ROS水平、细胞活力和细胞早期凋亡率明确AKT和ERK的关键作用。结果:给予6-OHDA处理的斑马鱼,其TH阳性细胞数量和密度明显减少,其运动能力受损,平均游动距离显著下降,给予球松素或阳性对照药AM-2282Nomifensine干预后,斑马鱼的TH阳性细胞数量显著增加,运动能力显著恢复,平均移动距离显著增加。给予6-OHDA处理的SH-SY5Y细胞,其细胞相对活力显著下降,LDH释放量显著增加,早期凋亡率显著增加,线粒体膜电位显著下降,DNA片段化增加,促凋亡蛋白Bax、Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP表达水平显著增加,抗凋亡Bcl-2蛋白水平显著下降,ROS和MDA水平显著增加,GSH/GSSG比值、NAD~+/NADH比值、GSH-Px和SOD酶活性显著下降,给予球松素干预则逆转了上述结果,此外还显著增加了Nrf2的核易位和ARE启动子活性,以及显著增加了HO-1和NQO1的蛋白和m RNA表达水平。通过si RNA沉默细胞Nrf2的表达,成功构建Nrf2-KO SH-SY5Y细胞,给予6-OHDA处理后,其细胞相对存活率和线粒体膜电位显著下降,早期凋亡率、LDH释放量和ROS水平显著增加,而复加以球松素处理并未改善情况,球松素的保护作用被取消。球松素对给予AKT/ERK蛋白激酶抑制剂处理后的SH-SY5Y细胞没有神经保护作用,表现为,细胞活力下降,ROS水平增高,细胞早期凋亡率增加,Nrf2未发生核易位,ARE启动子未被激活。Western Blot的结果则表明6-OHDA降低了正常SH-SY5Y细胞磷酸化AKT和ERK的正常水平,而给予球松素干预可逆转该作用。结论:球松素改善6-OHDA诱导的斑马鱼多巴胺能神经元丢失和运动功能障碍;球松素减轻6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞氧化应激和细胞凋亡,该作用通过激活Nrf2/ARE信号通路实现;AKT/ERK蛋白激酶参与球松素调控Nrf2信号分子的激活。

目的:免疫性血小板减少症(Immune thrombocytopenia,ITP)是一种常见的出血性疾病,本病属于获得性自身免疫病,在规范应用常规治疗后,仍有一些难治性病例,其生命安全及生活质量会受到严重影响。因此,深入探究ITP的发病机制,积极寻找新的治疗靶点,对于提高ITP患儿的生活质量十分重要。目前针对ITP发病机制的研究主要集中在由于体液免疫或细胞免疫异常引起的血小板过度破坏。现已有研究表明细胞自噬影响血小板的生成,但针对自噬导致ITP患儿巨核细胞生成血小板障碍的研究较少。本研究初步探究ITP中巨核细胞自噬相关蛋白的表达水平,并探讨ITP中巨核细胞自噬水平和临床因素相关性,为ITP的治疗提供新的视角。方法:1.收集25名诊断为ITP且除外其他疾病的患儿,对照组为于本院诊断为缺铁性贫血且除外其他疾病、血小板计数正常的10例儿童患者(血小板正常的缺铁性贫血患儿的发病机制主要为铁缺乏导致血红蛋白生成减少,属于营养性贫血,该过程不涉及巨核细胞系发育异常及免疫紊乱)。对照组年龄及性别与ITP患儿相匹配,采集骨髓液并进行涂片。2.应用免疫组织化学染色对骨髓涂片染色,由2名肿瘤血液检验室医生镜检,统计全片巨核细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ、p62阳性表达率,取平均数,计数差异超过3%者重新镜检,同时拍照。3.运用SPSS26.0及Graph Pad分析ITP患儿与对照组巨核细胞自噬相关蛋白的表达差异,同时收集ITP患儿临床资料,分析自噬相关蛋白表达与临床相关因素(年龄、疾病分期、出血程度、血小板计数、CD_4~+、CD_8~+、CD_4~+/CD_8~+、CD_3~+、CD_(19)~+、CD_(56)~+NK、总淋巴细胞计数、血沉、补体C3、补体C4、CRP、Ig G、Ig A、Ig M等)的相关性,同时根据ITP患儿血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa特异性抗体是否阳性将其分为血小板抗体阳性组和血小板抗体阴性组并对其巨核细胞自噬相hepatopulmonary syndrome关蛋白阳性表达率进行差异性检验。结果:1.为明确ITP患儿骨髓中巨核细胞自噬相关蛋白表达水平,采用免疫组织化学染色技术检测ITP患者骨髓涂片中LC3Ⅱ、p62表达情况。结果显示:与对照组相比,ITP患儿骨髓涂片中巨核细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ、p62阳性率均显著高于对照组,且差异具有显著性(ITP组LC3Ⅱ31.0±13.1%,对照组LC3Ⅱ12.0±3.9%;ITP组p62 34.0±16.7%,对照组p62 13.0±2.0%,P<0.001)。2.对连续正态分布的临床资料采用Pearson双变量相关分析的方法,有序变量等非正态分布临床资料采用Spearman双变量相关分析的方法进行统计分析ITP患儿自噬相关蛋白表达阳性率与临床资料的相关关系。结果显示:(1)ITP患儿骨髓涂片中巨核细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ阳性表达率与ITP患儿的疾病临床分期呈强正相关关系(r=0.742,P<0.001);与Ig A呈中等程度正相关关系(r=0.520,P<0.05);与ITP患儿CD_4~+(r=-0.679,P<0.001)、CD_4~+/CD_8~+(r=-0.735,P<0.001)、CD_3~+细胞(r=-0.629,P<0.01)及总淋巴细胞计数(r=-0.596,P<0.01)呈负相关关系,与CD_8~+、CD_(19)~+、CD_(56)~+、补体C3、C4、年龄、CRP、血沉、出血程度、血小板计数均无相关性。(2)p62阳性表达率与ITP患儿的疾病临床分期呈正相关关系(r=0.522,P<0.05);与Ig A呈中等程度正相关关系(r=0.433,P<0.05);与ITP患儿CD_4~+(r=-0.614,P<0.01)、CD_4~+/CDselleckchem Lapatinib_8~+(r=-0.560,P<0.01)、CD_3~+细胞(r=-0.543,P<0.05)及总淋巴细胞计数(r=-LGX818价格0.510,P<0.05)呈负相关关系,与CD_8~+、CD_(19)~+、CD_(56)~+、补体C3、C4、年龄、CRP、血沉、出血程度、血小板计数均无相关性。3.采用独立样本t检验对ITP患儿血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa特异性抗体阳性组和血小板膜抗体GPⅡb/Ⅲa阴性组自噬相关蛋白阳性表达率进行差异性检验,结果表明ITP患儿血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa特异性抗体阳性组与阴性组自噬相关蛋白LC3Ⅱ、p62阳性表达率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:1.ITP患儿巨核细胞与缺铁性贫血患儿巨核细胞均存在自噬的发生。2.与正常发育的巨核细胞相比,ITP患儿骨髓涂片中巨核细胞自噬表达水平异常,存在自噬起始被异常激活并且过程被异常阻滞。3.随着病程延长,ITP患儿巨核细胞自噬水平异常程度增加。4.自噬可能参与了ITP患儿细胞免疫及体液免疫紊乱的发病机制,自噬异常与细胞免疫及体液免疫紊乱相关。5.血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa特异性抗体阳性ITP患儿与抗体阴性ITP患儿巨核细胞自噬水平无显著性差异。

目的 探讨体外使用三叶青总黄酮(TFTH)对膀胱conservation biocontrol癌细胞增殖、凋亡的影响及其对信号转导与转录激活因子(STAT)3信号通路的作用机制。方法 对人膀胱癌BIU-87细胞进行体外培养，将不同浓度TFTH加入培养基对BIU-87细胞进行培养，通过细胞对数试剂盒(CCK)-8试验分别检测不同浓度TFTH(0、20、50、100μg/ml)组作用24、48 h后对细胞增殖的影响；流式细胞技术分析不同浓度TFTH作用24、48 h后对细胞凋亡率的影响；Wwww.selleck.cn/products/mk-4827estern印迹检测不同浓度TFTH对Janus蛋白酪氨酸激酶(JAK)2、STAT3、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X基因(Bax)、血管内皮生长因子(VEGF)和转化生长因子(TGF)-β1蛋白表达的影响。结果 CCK-8检测结果显示，不同浓度TFTH处理BIU-87细胞24或48 h后，对癌细胞增殖均有抑制作用(P<0.01);细胞凋亡检测结果显示，不同浓度TFTH处理BIU-87细胞24或48 h后，均有诱导癌细胞凋亡作用(P<0.01),且TFTH对细胞增殖或凋亡呈剂量时间依赖性；Western印迹结果显示，不同浓度TFTH处理后的SAG分子式BIU-87细胞，其JAK2、STAT3、VEGF和TGF-β1蛋白表达均明显降低，Bax蛋白表达明显升高，且呈剂量依赖性(P<0.05)。结论 TFTH可通过体外抑制膀胱癌BIU-87细胞JAK2/STAT3信号通路表达，使JAK2、STAT3、TGF-β1、VEGF蛋白表达减少，Bax蛋白表达增加，从而抑制膀胱癌BIU-87细胞增殖和诱导细胞凋亡。