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【目的】粪肠球菌是一种古老的微生物,是人和动物的消化道内的常见菌群,偶尔定植于口腔和阴道中,属于机会致病菌。但随着粪肠球菌的致病性逐年上升,由粪肠球菌导致的病例也在逐年增加,特别是粪肠球菌导致脑膜炎的病例出现,无疑是给人类及动物的健康带来了严重的威胁。目前在已研究的细菌性脑膜炎病例中,毒力因子在引起炎症、破坏血脑屏障通透性等方面发挥重要作用,但粪肠球菌破坏脑组织结构,引起脑膜炎、脑炎的机制尚不清楚。本研究通过构建致脑膜炎粪肠球菌全基因组随机展示文库,筛选出粪肠球菌突破血脑屏障过程中发挥作用的毒力因子,为日后研究粪肠球菌引发脑膜炎、脑炎的致病机制奠定基础。【方法】(1)建立血脑屏获悉更多障模型,观察不同粪肠球菌对血脑屏障通透性的影响。(2)构建Fasciotomy wound infections致脑膜炎粪肠球菌的全基因组噬菌体随机展示文库。(3)基于噬菌体展示文库,对突破血脑屏障过程中相关毒力因子筛选。【结果】(1)成功分离小鼠原代内微血管内皮细胞和原代星形胶质细胞,以Transwell细胞培养模型为基础,构建体外血脑屏障模型,并以4 h渗透试验、荧光素钠穿透试验、辣根过氧化物酶渗透性试验对血脑屏障模型的通透性进行验证,双层细胞血脑屏障模型具有更低的通透性。选择不同粪肠球菌与血脑屏障模型作用后,XJ6株粪肠球菌能显著引起屏障通透性发生改变。(2)以不同破碎条件对DNA进行破碎,在50%功率,破碎2s,间隔10s的条件下,可将DNA破碎为300～3000的片段,与质粒连接后电转入感受态大肠杆菌,以M13噬菌体基于噬菌体展示技术,构建了粪肠球菌全基因组噬菌体随机展示文库,文库容量为2.7×10~4。(3)选择噬菌体展示筛选方法中的体外细胞筛选法,以血脑屏障模型中脑微血管selleckchem内皮细胞和星形胶质细胞作为靶细胞经过噬菌体随机展示文库与小鼠体外血脑屏障模型相互作用,通过多次筛选、洗脱、富集,共得到69个阳性噬菌体克隆,挑取阳性克隆进行扩大培养,测序后进行比对,共得到7个粪肠球菌基因,分别为透明质酸酶,溶血素,胶原粘附蛋白,表面锚定蛋白,明胶酶样蛋白酶,RNA聚合酶,表面蛋白。

新型冠状病毒肺炎AZD6738溶解度(Corona Virus Disease 2019, COVID-19)疫情大流行引起全球对此重大突发公共卫生事件的高度关注。新型冠状病毒(SARS-CoV-2)经过多次突变,出现传染速度加快、免疫逃逸、隐匿性传播等特性,令防控形势至今仍异常严峻。对患者的早发现、早隔离仍然是目前最有效的防控措施。因此,迫切需要快速、高灵敏的检测手段来甄别此病毒,GSI-IX体内以便及早识别感染者。本文简要介绍了SARS-CoV-2的一般特征,并conventional cytogenetic technique针对核酸、抗体、抗原及病原体作为检测靶标的不同检测手段及最新进展进行分类概述;对一些光学、电学、磁学以及可视化的新型纳米传感器在SARS-CoV-2检测技术上的应用进行了分析。鉴于纳米技术的应用在提高检测灵敏度、特异性以及准确率上具有优势,本文详细介绍了新型纳米传感器在SARS-CoV-2检测中的研究进展,包括表面增强拉曼基生物传感器、电化学生物传感器、磁纳米生物传感器以及比色生物传感器等,并探讨了纳米材料在新型生物传感器构建中的作用和挑战,为纳米材料研究人员开发各种类型的冠状病毒传感技术提供思路。

目的 对妊娠糖尿病（gestational diabetes mellitus,GDM）孕妇肠道菌群的丰度以及多样性进行评估分析，判断其与发病之间的关联，判断肠道菌群与病因之间的关联。方法 随机选取19例孕24～28周的GDM患者作为实验组，19例健康孕妇作为对照组。对所有受试者粪便标本中的肠道分离获得的肠道细菌16S rRNA基因的V4区分别进行高通量的测序和生物信息学分析。结果 两组研究对象肠道菌群的丰富度以及多样性大致相同。实验组厚壁菌门以及放线菌门的含量均明显少于对照组(χ~2=729.902,P<0.001;χ~2=26.880,P<0.001)，而拟杆菌门以及变形菌门的含量高于对照组(χ~2=428.233, P<0.001;χ~2=545.707, P<0.001)，实验组拟杆菌属、瘤胃球菌属、双歧杆菌属及乳酸杆菌属的含量均少于对照组(χ~2=171.939, P <0.001;χ~2=2Liproxstatin-1分子式27.997, P<0.001;χ~2=26.926, P<0.001;χ~2=140.868, P <0.001)，另外，实验组普氏菌属、埃希氏菌属、梭状芽胞杆菌属含量高于对照组(χ~2=250741.608, P<0.001;Glaucoma medicationsχ~2=576.128, P<0.001;χ~2=6.945, PPF-02341066溶解度=0.080)。结论 GDM孕妇与健康孕妇之间，肠道菌群的丰度以及多样性大致相同，但是肠道菌群特异性又较大区别，GDM孕妇粪便中的放线菌门以及厚壁菌门比较少，而变形菌门和拟杆菌门量较多。

目的：分析妊娠期孕妇孕前体重指数(BMI)及孕期增重对母儿围产结局的影响。方法：选取GDM孕妇199例进行回顾性分析，并根据孕前BMI分为三组，比较组间孕妇的一般临床资料、孕晚期HbA1c水平、孕期增重、分娩孕周、剖宫产率、妊娠期高血压疾病、胎膜早破、产后出血、胎儿窘迫、新生儿窒息、新生儿体重、大于胎龄儿、小于胎龄儿及新生儿NICU入住率等。依据2009年IOM发布的孕期增重推荐评估孕期增重情况。结果：超重及肥胖孕妇41例占20.60%;三组孕妇年龄、晚孕期HbA1c比较，差异有统计学意义(P<0.05),超重及肥胖Ⅲ组孕晚期HbA1c明显高于正常体重Ⅱ组，差获悉更多异有统计学意义(P<0.05)。不同孕前BMI妊娠期糖尿病孕妇孕期增重比较差异有统计学意义(P<0.01)。孕期增重不足者的比例随孕前BMI的升高呈下降趋PF-03084014半抑制浓度势，而增重过度者的比例随孕前BMI的升高呈升高趋势。三组孕妇妊娠期高血压疾病、产后出血、新生儿体重及大于胎龄儿发生率比较，差异有统计学意义(P<0.05);超重及肥胖Ⅲ组妊娠期高血压疾病、产后出血发生率及新生儿体重、大于胎龄儿均明显高于正常体重Ⅱ组及低体重Ⅰ组，正常体重Ⅱ组产后出血、新生儿体重及大于胎龄儿发生率显著高于低体重Ⅰ组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：孕前体质指数与孕期体重增WPB biogenesis长已成为影响妊娠期糖尿病孕妇妊娠结局的重要因素。

海参自古以来深受人们喜爱,被奉为“海八珍”之首,海参的加工以传统加工产品和简便化加工产品为主,精深加工产品仍然匮乏,不能满足市场多元化的需求,发酵海参产品仍处于空白阶段。本研究采用响应面法优化了纳豆芽孢杆菌发酵鲜刺参的工艺条件,并提取发酵前后的刺参多糖,对其结构、抗氧化活性及消化酵解特性进行了对比,以期为开发新型发酵海参产品提供理论依据。其主要研究结果如下:在单因素的基础上,以蛋白酶活性为检测指标,采用响应面法对纳豆菌发酵刺参的各个工艺条件进行优化。通过Plackett-BurErastin使用方法man实验获得对蛋白酶活性有显著影响的主要因素,采用中心组合实验建立回归模型获得主要因素的最佳工艺条件:刺参添加量、葡萄糖添加量和接种量分别为3.5%、7.5 g/L和4%;在最佳条件下进行发酵medical consumables,蛋白酶活性达到535.12 U/m L,与预测值522.56 U/m L无显著差异,说明模型具有可靠性。采用氯化十六烷基吡啶(CPC)法提取发酵前后刺参多糖,发酵前后刺参多糖的组成成分无显著差异,总糖含量分别为51.91%和49.09%;采用高效液相色谱法分析发酵前后刺参多糖的单糖组成,结果表明二者均由甘露糖、氨基葡萄糖、葡萄糖醛酸、氨基半乳糖、葡萄糖、半乳糖和岩藻糖组成,质量百分比分别为5.82:6.52:4.53:10.13:5.93:6.10:60.99和5.47:4.67:4.95:9.71:1.38:4.81:69.01;高效凝胶排阻色谱测定发酵前后刺参多糖的相对分子质量分别为1.07×10~(-6)和1.16×10~(-6);傅里叶变换红外光谱结果表明,发酵前后刺参多糖均含有岩藻糖、乙酰氨基以及硫酸基等取代基;差示扫描量热分析结果说明,发酵刺参多糖热稳定性降低。测定发酵前后刺参多糖的抗氧化活性,发酵刺参多糖的ABTS~+自由基清除能力高于刺参多糖,但DPPH自由基清除能力和羟自由基清除能力低于刺参多糖,两种多糖均没有铁还原能力。通过体外模拟口腔-胃部-小肠消化,研究发酵前后刺参多糖的消化过程,在模拟口腔消化MS-275过程中,两种多糖相对分子质量和还原糖含量均没有变化,消化终点也没有游离单糖产生,说明发酵前后刺参多糖无法被唾液消化;在模拟胃部消化过程中,两种多糖相对分子质量没有变化,但是还原糖含量增加,消化终点检测出少量游离的葡萄糖醛酸,说明胃液无法消化发酵前后刺参多糖,但能使葡萄糖醛酸水解;在模拟小肠消化过程中,两种多糖相对分子质量变小,还原糖含量没有变化,消化终点也没有游离单糖产生,说明发酵前后刺参多糖能够被小肠部分降解。通过体外模拟实验研究肠道微生物对两种多糖的酵解特性,在酵解终点两种多糖的相对分子质量和总糖含量均降低,说明发酵前后刺参多糖能够被肠道微生物利用。采用16S r DNA扩增子测序研究两种多糖对肠道微生物的影响,发酵前后刺参多糖没有改变肠道微生物群的物种丰度和均匀性,但能改变肠道微生物群的组成。

目的 以网络药理学和分子对接验证为基础，探讨消渴肾安汤治疗糖尿病肾病(DKD)的作用及其机制。方法 通过网络药理学分析消渴肾安汤及其主要成分治疗DKD潜在靶点和作用机制。首先预测消渴肾安汤的潜在活性成分及相应的靶点信息，通过TCMSP、BATMAN-TCM平台和文献补充的潜在目标，DKD数据来源于OMIM、DisGeNET和GeneCard等数据库。将消渴肾安汤和DKD之间的靶PD-0332991点进行匹配，通过Metascape分析蛋白相互作用(PPI)并作对应MCODE分析，通过分子对接实验验证主要靶点并预测作用机制。结果 共得到149种潜在生物活性物质和76个共同靶点KD025化学结构，富集结果显示自噬信号通路与消渴肾安汤的治疗效果相关。黄芩苷被认为是消渴肾安汤中的生物活性成分，排名前10通路中所得关联性最高的两个生物学靶点RAF1、BCL-2作为HIV- infected验证靶标，经分子对接后发现，黄芩苷和RAF1、BCL-2具有良好的结合效果，故RAF1、BCL-2可能是黄芩苷发挥作用的重要靶标。结论 消渴肾安汤治疗DKD作用机制与黄芩苷密切相关，可能通过作用于RAF1、BCL-2这两个靶标影响后续生物学通路的激活，从而抑制DKD进展。

目的:研究金骨莲胶囊对人三阴性乳腺癌(TNBC)细胞MDA-MB-231增殖的影响,探讨金骨莲胶囊对TNBC的治疗作用机制。方法:利用超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS/MS)技术,对金骨莲胶囊的成分进行分析鉴定。通过用噻唑蓝(MTT)比色法观察金骨莲胶囊(0.125,0.25,0.5,1,2 g·L~(-1))对人乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖抑制作用。采用HEnasidenib说明书oechst33258染色检测金骨莲胶囊处理MDA-MB-231细胞24 h后的细胞核凋亡形态学的变化。采用流式细胞仪检测金骨莲胶囊不同质量浓度和作用时间对MDA-MB-231细胞凋亡及周期分布情况。通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP),原癌基因蛋白(c-Myc),细胞周期蛋白B1(cyclin B1)和磷酸化胞外信号调节激酶(p-ERK)的蛋白表达水平。结果:该研究利用UPLC-MS/MS技术鉴定了金骨莲selleckchem SB203580胶囊提取物中113个化合物成分。MTT比色法显示,与空白组比较,金骨莲胶囊组(0.125,0.25,0.5,1,2 g·L~(-1))细胞抑制率显著增加(P<0.01),半数抑制浓度(IC50)为(0.13±0.02)g·L~(-1);流式细胞术结果显示,与空白组比较,金骨莲胶囊组(1 g·L~(-1))细胞凋亡率显著升高(P<0.01),金骨莲胶囊组(0.5,1 g·L~(-1))细胞处于S期的数量明显增加(P<0.05,P<0.01);Western blot结果显示,与空白组比较,金骨莲胶囊组(0.genetic clinic efficiency5,1 g·L~(-1))细胞中的PARP,c-Myc,cyclin B1蛋白表达水平显著降低(P<0.01),金骨莲胶囊组(1 g·L~(-1))p-ERK蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论:金骨莲胶囊可抑制MDA-MB-231细胞增殖,使细胞周期阻滞于S期,并诱导其凋亡,其机制可能与其抑制MDA-MB-231细胞MAPK信号通路有关。

目的 探讨体重指数（body mass index,BMI）对胶质母细胞瘤患者生存预后的预测价值。方法 回顾性分析AZD1152-HQPA体内2019年1月至2020年8月首都医科大学附属北京天坛医院收治的72例胶质母细胞瘤患者的临床资料。分析患者的临床特征以及预后不良的影响因素。根据BMI不同将患者分为正常组（18.5kg/m~2≤BMI<24.0kg/m~2,38例）、超重组（24.0kg/m~2≤BMI<30.0kg/m~2,26例）和肥胖组（BMI≥30.0kg/m~2,8例），比较分析不同BMI组患者的总生存期。结果 本研究中男女比例为1:1.4，异柠檬酸脱氢酶（isocitrate dehydrogenase,IDH）突变率为19.4%,6-氧-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（6-methyiguanine-DNA methyltransferase,MGMT）启动子甲基化比例为59.7%,36.1%的患者超重，11.1%的患者肥胖，70.8%(51/72)的患者死亡。单因素分析结果显示，年龄、卡氏功能状态（Karnofsky performance status,KPS）评分、BMI、IDH、MGMT和手术切除方式均与患者预后不良显著相关（P<0.05）。多因素分析结果显示，年龄≥45岁、KPS评分<60分、BMI≥24.0kg/m~2、IDH突变、MGMT启动子甲基化和完全切除为患者预后不良的独立危险因素（P<0.05）,BMI≥24.0kg/m~mediating role2为独立保护因素（P<0.05）。对数秩检验分析结果显示，超重组和肥胖组患者的总生存期均显著长于正常组（P<0.05）；超重组和肥胖组患者的总生存期比较差异无显著性（P>0.05）。结论 BMI≥24.0kg/m~2是胶质母细胞瘤患者预后不良Berzosertib的独立保护因素，且超重或肥胖胶质母细胞瘤患者的生存期明显长于正常体重患者。

hepato-pancreatic biliary surgery目的 探讨采用固定野和旋转调强放疗技术联合有无均整器模式在鼻咽癌放疗中保护海马和不限制海马剂量计划的剂量学差异。方法 选取山东省肿瘤医院15例2021-03-25-2021-11-15接受放射治疗的鼻咽癌患者，于患者CT图像上分别采用有均整器(FF)的固定野调强(IMRT)、无均整器(FFF)的IMRT、FF的旋转调强(VMAT)和FFF的VMAT模式制定4种放疗计划，分别命名为IMRT、IMRT-FFF、VMAT、VMAT-FFF。在满足临床要求的前提下，再设计4种放疗计划，增加海马作为危及器官进行优化，分别命名为SCH772984小鼠IMRT-H、I-FFF-H、VMAT-H、V-FFF-H。通过剂量体积直方图(DVH)统计靶区和危及器官的剂量。比较不限制海马剂量和保护海马的4种技术的剂量学差异。结果 8种计划均能满足临床要求。不限制海马剂量4组计划比较：对于计划鼻咽原发病灶及咽后淋巴结照射靶体积(PGTV),VMAT计划适形指数为0.85(0.05),优于VMAT-FFF计划的0.83(0.06),P=0.016;IMRT-FFF计划的D_2和均匀性指数分别为74.08(0.42)和4.35(0.76),均大于IMRT计划的73.75(0.32)和3.89(0.88),P值分别为<0.001和0.001;IMRT计划的靶区覆盖度为71.11(0.55),分别优于IMRT-FFF的71.02(0.40)和VMAT计划的70.80(0.68),P值分别为0.011和0.001。对于计划高危靶区(PTV),VMAT和VMAT-FFF计划的适形度分别为0.87(0.03)和0.85(0.02),优于IMRT和IMRT-FFF计划的0.83(0.02)和0.83(0.03),均P<0.001;IMRT-FFF计划的D_2和均匀性指数分别为73.52(0.30)和21.43(0.46),高于IMRT计划的73.37(0.15)和21.02(0.51),P值分别为0.001和0.048;IMRT和IMRT-FFF计划的靶区覆盖度分别为60.73(0.17)和60.62(0.35),优于VMATPCI-32765采购和VMAT-FFF计划的60.20(0.55)和60.28(0.50),P值分别为<0.001和0.005。对于计划低危靶区(PTV-L),4组计划的适形度差异无统计学意义，P>0.05;VMAT和VMAT-FFF计划的D_2为57.84(0.44)和57.93(0.54),均匀性指数分别为7.98(1.27)和8.25(1.34),大于IMRT计划的56.90(0.48)和4.47(0.83)以及IMRT-FFF计划的56.84(0.52)和4.47(1.18),均P<0.001;IMRT和IMRT-FFF计划的靶区覆盖度分别为54.60(0.38)和54.42(0.32),优于VMAT和VMAT-FFF计划的53.51(0.37)和53.35(0.45),均P<0.001。对于危及器官，IMRT-FFF和VMAT-FFF计划的左右侧晶体最大剂量低于IMRT和VMAT计划，P值分别为0.002和0.001;与IMRT-FFF计划相比，VMAT-FFF计划能降低右侧腮腺的平均剂量[25.88(0.63)、25.57(0.46),P=0.001]、右侧海马的平均剂量[11.05(8.74)、10.11(6.24),P=0.001]、D_(100)[3.35(2.00)、2.76(2.34),P=0.011)]、D_(40)[9.33(8.91)、8.38(7.24),P=0.003]。与不限制海马剂量的计划相比，保护海马计划中海马最大剂量、平均剂量、D_(40)降低，均P<0.001。结论 鼻咽癌患者保护海马与不限制海马剂量计划的靶区剂量均满足临床要求。与不限制海马剂量的计划相比，保护海马的放疗计划降低了海马的最大剂量、平均剂量和D_(40)。VMAT和VMAT-FFF计划质量相当，VMAT计划较IMRT计划对保护海马以及其他危及器官有一定剂量学优势。

目的 探讨将二甲双胍或达格列净予以早期Blood and Tissue Products糖尿病肾病患者和临床疗效及对相关实验室指标水平的影响。方法 选取2020年5月至2021年8月淄博市博山区中医院收治的82例早期糖尿病肾病患者。以随机数字表法分为对照组和观察组，各41例。对照组患者接受常规治疗联合二甲双胍治疗，观察组患者接受常规治selleck化学疗联合达格列净治疗。比较两组患者治疗后临床PF-03084014体内实验剂量疗效，治疗前及治疗3个月后血糖水平、肾功能指标及血清胱抑素C(Cys C)、同型半胱氨酸（Hcy）、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）水平。结果 对比不同组别（对照组及观察组）临床总有效率可知，组间存在显著差异，即观察组明显更高（P<0.05）；治疗3个月后与治疗前比，两组患者血清空腹血糖（FBG）、血清餐后2h血糖水平（2hPBG）、血糖化血红蛋白（HbA1c）、尿α1微球蛋白（α1-MG）、血肌酐（Cr）、尿蛋白排泄率（UAER）、尿白蛋白/肌酐比值（ACR）、血清Cys C、血清Hcy、血清NGAL水平均降低，且与对照组相比，观察组患者上述指标水平更低（均P<0.05）。结论 在早期糖尿病肾病治疗中，将达格列净予以患者能够能有效缓解病情，使其血糖水平得到改善，调节肾功能，取得较为理想的治疗效果。