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目的 探讨老年高血压伴糖耐量减低(IGT)患者胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)对血压变异率(BPV)及血压昼夜节律的影响。方法 选取2020年10月—2021年9月于青岛市妇女儿童医院就诊的老年高血压伴IGT患者106例，以HOMA-IR的第50百分位数(P_(50))为分界线，将受试者分为高IR组和低IR组(各53例),对比两组一般情况、血糖相关指标、HOMA-IR以及动态血压监测结果，并分析Hwww.selleck.cn/products/epz-6438.htmlOMA-IR与BPV的相关性。结果高IR组患者空腹胰岛素、HOMA-IR显著高于低IR组(t=-10.905、-13.416E7080核磁,P<0.05);高IR组患者昼间、夜间、24 h收缩压标准差，以及昼间、夜间、24 h收缩压变异系数均高于低IR组(t=-4.180～-2.356,P<0.05);高MK-1775 NMRIR组患者异常血压昼夜节律构成比高于低IR组(χ~2=4.330,P<0.05);相关性分析显示，所有患者HOMA-IR与昼间、夜间、24 h收缩压标准差，昼间、夜间、24 h收缩压变异系数均呈正相关(r=0.202～0.328,P<0.05)。结论老年高血压伴IGT患者HOMA-IR与BPV增高存在相关性，胰岛素抵抗可能是老年高血压伴IGT患者BPV及血压昼夜节律紊乱的危险因素。

目的探讨不可逆电穿孔(IRE)在体内外模型中对结肠癌细胞生长抑制的作用机制及有效性。方法对不同分化程度的结肠癌细胞株HCT116、SW480、SW620、LoVo进行电击处理, 通过二乙酸荧光素(FDA)-碘化丙锭(PI)双色荧光染色实验检测细胞活性, 膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡, 蛋白质印迹法(Western blot)检测凋亡标志蛋白表达;构建HCT116细胞裸鼠异种移植瘤模型, 通过裸鼠体重、肿瘤生长曲线、瘤重对比观察体内抗结肠癌效果。采用非配对t检验。结果 PARP抑制剂FDA-PI荧光实验显示, 随着场强增大, SW480、HCT116均表现为细胞总量、活细胞数减少, 死细胞数增多。流式双染实验显示, 随着场强增大, 凋亡细胞比例逐渐增多, 多数为早期凋亡。Western blot结果为电击后多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶降解产物(cleaved-PARP)和半胱氨酸蛋白酶3, 7, 8, 9裂解物(cleaved-Caspase 3, 7, 8, 9)蛋白水平升高。IRE组与ControlE7080配制组裸鼠体重分别为(27.81±0.81)、(27.64±0.83) g(t=0.583, P0.05);IRE组与Control组肿瘤体积分别为(212.00±98.85)、(4 381.75±910.20) mm3(t=7.713, P0.001);IRE组EPZ-6438溶解度与Control组第15天瘤重分别为(79.93±15.41)、(1 500.97±848.51) mg(t=2.900, P0.05)。结论 IRE能有效抑制结肠癌细胞生长。

目的：探讨名医论治冠心病的用药规律，为临床用药提供PD0325901溶解度借鉴。方法：整理《高血压冠心病单方验方大全》中名医论治冠心病的有效经验方，将复方录入Excel2010建立数据库，采用古今医案云平台（V2.3）进行单味中药的频次分析、中药属性频次分析、关联规则以及聚类分析，采用SPSS Statistics25.0进行因子分析。结果：共纳入554首经验方，冠心病通用方以丹参、川芎、党参、黄芪、甘草、当归、赤芍、茯苓、瓜蒌、桂枝、红花、郁金、麦冬、五味子、薤白为高频药物。除此之外，心绞痛方和心肌梗塞方高频Alpelisib临床试验药物还包含半夏、三七、延胡索。三类方药性均以温为主，其次为平、微寒；药BMN 673分子量味均以甘、苦、辛为主。归经均以心经为核心，与肝、肺、脾经密切相关。功效以活血化瘀为主，辅以通经止痛。三类方关联规则各获得8个核心药对，如川芎-丹参、瓜蒌-薤白、黄芪-党参等。因子分析从冠心病方和心肌梗塞方药物中各提取了6个因子，从心绞痛方药物中提取了5个因子。聚类分析将三类方药物各分为4个组合，共奏活血化瘀、益气养阴、燥湿祛痰之效。结论：本项数据挖掘共获得生脉散、瓜蒌薤白半夏汤、枳实薤白桂枝汤、活血养心组合等方剂，可将冠心病方、心绞痛方、心肌梗塞方的治法概括为祛痰化瘀，益气养阴。

2.1 胶质瘤组织中 TＲIM29 蛋白表达与临床特征的关系
TＲIM29 蛋白阳性表达主要定位于胶质瘤及正常脑组织的细胞质中。TＲIM29 在胶质瘤组织中多以强阳性表达，而在正常脑组织中阳性表达较少，多以阴性或弱阳性为主( 图 1) 。Spearman 相关分析结果显示，胶质瘤组织中 TＲIM29 的表达与胶质瘤 WHO 分级呈正相关( r = 0． 535，P ＜ 0． 05 ) ，与年龄、性别无明显相关性( 表 2) 。
A: TＲIM29 在正常脑组织中阴性表达; B: TＲIM29 在胶质瘤细胞中阳性表达
图 1 TＲIM29 在正常脑组织和Selleck R428胶质瘤组织中的表达
( S-P × 200)表 2 TＲIM29 在 56 例胶质瘤标本中的表达及临床病理参数

2． 2 TＲIM29 在胶质母细胞瘤组织及细胞中高表达
因 TＲIM29 的表达与 WHO 分级呈显著正相关，故选取胶质母细胞瘤( Ⅳ级) 组织及其细胞株作为研究对象。Western blot 检测结果显示，相较于癌旁组织及正常组织，TＲIM29 在胶质母细胞瘤组织中的蛋白表达量显著增高( P ＜ 0． 05，图 2) ，同时，TＲIM29 在胶质母细胞瘤细胞株 U-87 MG 中的蛋白表达明显高于其他细胞株，故选择 U-87 MG 细胞用作后续研究。A: TＲIM29 在胶质母细胞瘤组织( 1) 、癌旁组织( 2) 及正常组织( 3) 中的表达; B: TＲIM29 在胶质瘤细胞株中的表达
1: A172; 2: LN-22selleck化学9; 3: U-87 MG; 4: U-118 MG
图 2 胶质瘤细胞、组织及正常组织中 TＲIM29 的蛋白表达

2． 3 在高表达 TＲIM29 的胶质母细胞瘤细胞 U-87 MG 中敲低 TＲIM29
U-87 MG 细胞具有恶性程度高，低分化，生长稳定高的特点。通过对各组 U-87 MG 细胞进行 Western blot 检测，发现 shTＲIM29 组细胞中 TＲIM29 的蛋白表达明显低于空白对照组以及 shScramble 组( P ＜ 0． 05，图 3) 。这说明癌细胞 TＲIM29 基因已被成功敲低。

TＲIM29 表达量
临床病理特征 例数 低表达 高表达 P 值
年龄 0． 063
＞ 40 岁 36 14 22
≤40 岁 20 13 7
性别 0． 455
女性 22 12 10
男性 34 15 19 1: 空白对照组; 2: shScramble 组; 3: shTＲIM29 组
WHO 分级 ＜ 0． 001 A: Western blot 检测结果; B: TＲIM29 蛋白相对表达量
a: P ＜ 0． 05，与空白对照组、shScramble 组比较
图 3 Western blot 检测各组胶质母细胞瘤细胞 U-87 MG 中
TＲIM29 蛋白的表达

2． 4 敲低 TＲIM29 对 U-87 MG 细胞增殖的影响
通过绘制 MTT 生长曲线，发现敲低 TＲIM29 后，明显抑制了 U-87 MG 细胞的增殖能力( P ＜ 0． 05，图 4A) 。同时，肿瘤克隆形成实验也发现，shTＲIM29 组细胞形成的克隆数为( 106 ± 5 ) ，shScramble 组及空白对照组细胞的克隆数分别为( 259 ± 6 ) 、( 266 ± 5 ) ，实验组的克隆数明显低于 shScramble 组及空白对照组 ( P ＜ 0． 05，图 4B) 。这表明 TＲIM29 对 U-87 MG 细胞的增殖起促进作用。

2． 5 TＲIM29 促进 U-87 MG 细胞的迁移能力
采用 Transwell 迁移实验检测敲低 TＲIM29 对 U-87 MG 的迁移能力的影响( 图 5) ，shTＲIM29 组细胞穿膜数为( 91 ± 8) ，明显低于 shScramble 组( 295 ± 12)及空白对照组细胞( 298 ± 14 ) ( P ＜ 0． 05 ) 。这提示 TＲIM29 可促进 U-87 MG 的迁移，敲低 TＲIM29 后，肿瘤细胞的迁移能力明显减弱。

2． 6 TＲIM29 敲低可抑制裸鼠皮下移植瘤的生长
裸鼠皮下成瘤实验结果显示，接种空白对照组及 shScramble 组细胞的裸鼠，约 10 d 形成明显可见的肿瘤结节，而接种 shTＲIM29 组细胞的裸鼠在 15 d左右才形成较为明显的肿瘤结节。通过绘制皮下瘤体体积的生长曲线，发现 shTＲIM29 组皮下瘤体的体积显著小于空白对照组及 shScramble 组( P ＜ 0． 05 ) ;且 shScramble 组及空白对照组之间差异无统计学意义( 图 6A、B) 。为进一步验证敲低 TＲIM29 对胶质母细胞瘤增殖的影响，对取出的皮下瘤体组织进行免疫组化检测 Ki67 的表达水平，发现 shTＲIM29 组皮下瘤体组织中 Ki67 表达明显降低( 图 6C) 。这提示shTＲIM29 组的增殖水平低于空白对照组与 shScramble 组。Selleckchem LY2835219

2． 7 敲低 TＲIM29 对 AKT 通路蛋白表达的影响
Western blot 检测结果显示，shTＲIM29 组细胞 AKT 通路中 p-AKT 蛋白表达相较空白对照组与shScramble 组细胞蛋白表达明显下调( 图 7) 。这说明抑制 TＲIM29 后胶质母细胞瘤细胞 U-87 MG 生物学行为的改变，可能通过 AKT 信号通路。

1． 1 主要试剂
人胶质瘤细胞系( U-118 MG、U-87 MG、LN-229、A-172) 购自美国 ATCC 细胞库( American Type Culture Collection) ，DAB 检测试剂盒购自万类生物。胎牛血清、DMEM 细胞培养基、胰蛋白酶、LipofectamineTM2000 ( Invitrogen) ，总蛋白提取试剂盒( 碧云天) ，MTT 试剂盒 ( Sigma ) ，Transwell 小 室 ( Millipore ) ，鼠 抗 人 TＲIM29、α-tubulin、p-AKT 及 AKT 一抗( Cell Signaling Technology) ，鼠抗人 Ki67 一抗( BD Biosciences) ，辣根过氧化物酶标记的山羊抗小鼠二抗( Life) ，对照组 ( shScramble) 病毒及 TＲIM29 干扰病毒( shTＲIM29) 由上海吉玛基因公司构建，
1． 2 临床资料MK-1775 IC50
选取 2007 年 1 月至 2012 年 9 月陆军军医大学第三附属医院神经外科手术切除的胶质瘤组织标本 56 例。所选病例术前均未行放化疗，术后病理组织学检查证实为胶质瘤。包括男性 34 例，女性 20 例; 年龄31 ～ 67( 45． 3 ± 9． 3) 岁，其中≤ 40 岁20 例，＞ 40 岁 36 例。据WHO 分级，Ⅰ ～ Ⅱ期26 例，Ⅲ期17 例，Ⅳ期13 例，见表 2。同时另取由高血压所导致的脑出血行正常脑组织切除减压患者标本 16 例为对照组。并于术中收集脑胶质母细胞瘤组织、癌旁组织及正常脑组织( 对照) 各 4 例用以 TＲIM29 蛋白表达检测。
1． 3 方法
1． 3． 1 免疫组化 采用 DAB 检测试剂盒检测 TＲIM29 和 Ki67 的表达情况。结果判定标准: 根据阳性细胞所占视野面积百分比评分为 1 ( ＜ 10% ) ， 2( 10% ～ 50% ) ，3( ＞ 50% ～ 75% ) 和 4 ( ＞ 75% ) 。染色强度分为无显色为 0 分，淡黄色为 1 分，黄色为2 分，棕黄色为 3 分。染色指数为两者计分相乘，0 ～ 1 分: “－ ”; 2 ～ 3 分: “ + ”; 4 ～ 6 分: “ + + ”; ＞ 6 分: “ +++ ”。 ＞ 4 判定为高表达，≤4 判定为低表达。
1． 3． 2 细胞培养 胶质瘤细胞株 U-118 MG、U-87 MG、LN-229、A-172 培养于恒定 37 ℃ ，5% CO2 浓度的细胞培养箱。细胞每 2 天更换 1 次培养基，对数生长期传代。
1． 3． 3 慢病毒感染 U-87 MG 细胞 取对数期生长良好的 U-87 MG 细胞，以每孔 5 × 104 细胞数接种于12 孔板。并将其分为空白对照组、shScramble 组( 阴性对照组) 及 shTＲIM29 组( 实验组) 。于 37 ℃ 、5% CO2的培养箱中培养 24 h，待细胞密度达到约 40% 时，将 shScrambRapamycinle 及 shTＲIM29 慢病毒以感染复数值 3 分别感染对照组与实验组细胞。24 h 后，更换培养液并加入 3 μg / mL 嘌呤霉素筛选获得感染成功的阳性细胞，待细胞生长状态稳定后，改用含低浓度嘌呤霉素的 培养基维持培养，经扩大培养后即可获得稳定敲低的 各组细胞株。
1． 3． 4 蛋白质提取以及 Western blot 检测 应用总蛋白提取试剂盒提取各细胞及组织总蛋白，利用 BCA 法检测蛋白质浓度。通过 10% 的 SDS-PAGE 凝胶电泳各组蛋白质，并转膜至 PVDF 膜，以 5% 脱脂牛奶室温封闭 2 h。再加入1∶ 1 000 鼠抗人TＲIM29 抗体及鼠抗人 1 ∶ 1 000 α-tubulin 抗体，4 ℃ 中孵育过夜。次日 TBST 洗膜3 次，每次5 min，室温下以1∶ 10 000 辣根过氧化物酶标记的山羊抗小鼠二抗孵育 2 h，TBST 洗涤

3 次，每次 5 min，利用 ECL 化学发光液显影。
1． 3． 5 MTT 细胞增殖实验 利用 MTT 实验检测 TＲIM29 对 U-87 MG 细胞增殖的影响。细胞分为空白对照组、shScramble 组( 阴性对照组) 及 shTＲIM29 组 ( 实验组) ，将各组 U-87 MG 细胞接种于 96 孔板内，分别于 0、1、2、3、4、5 d 每孔中加入 5 mg / mL 的 MTT 试剂 10 μL，避光于 37 ℃孵育 4 h，吸去上清，加入 200 μL DMSO，室温震荡 10 min 后，于波长 560 nm 处测定光密度值［D( 560) ］。
1． 3． 6 肿瘤细胞克隆形成实验 1． 2% Softagar 配制: 称取 1． 2 g 软琼脂，定容至 100 mL，经高压处理后置于60 ℃ 留存。底层胶: 将500 μL 2 × DMEM 培养和等体积的 1 × DMEM 培养基混匀后平铺于 6 孔板，等待冷却待用。上层胶: 取 5 mL 离心管，加入 2 mL 1 × DMEM 培养基，然后将各组细胞消化计数，按空白对照组、shScramble 组( 阴性对照组) 及 shTＲIM29 组( 实验组) 每组 1 000 个细胞加入离心管中进行悬浮; 再准备另外一只离心管，向其中分别加入 1． 5 mL 2 × DMEM 和等体积的 1． 2% Softagar，充分混匀后吸取 2 mL 于以上培养基充分混匀。最后向孔中加入 1． 5 mL混合液作为上层胶，每组重复 3 次，待胶充分凝固后放于 37 ℃ 培养箱中进行培养。14 ～ 21 d 后，用 MTT 染色 30 min 进行拍照检测。GDC-0068
1． 3． 7 Transwell 实验检测细胞的迁移能力 分别取对数生长期的空白对照组、shScramble 组( 阴性对照组) 及 shTＲIM29 组( 实验组) U-87 MG 细胞。经消化、离心后，用新鲜培养基重悬并进行细胞计数，以 1 × 105 / 孔接种于小室的上室，改用 1% 的培养基进行饥饿培养，下室加入含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基， 孵箱培养后，取出小室进行用多聚甲醛固定 15 min， PBS 洗涤 3 次 × 5 min，结晶紫染色 20 min，PBS 洗涤 3 次 × 5 min，干燥后置于显微镜下观察并计数。
1． 3． 8 裸鼠体内成瘤实验 选取 3 ～ 4 周龄，由西南大学家蚕基因生物学国家重点实验室提供的雌性裸鼠进行实验。取对数生长期的空白对照组、shScramble组( 阴性对照组) 及 shTＲIM29 组( 实验组) U87-MG 细胞，以 PBS 调整细胞数为 4 × 105 个/ mL，取 0． 1 mL 细胞悬液注射于小鼠前肢背部皮下，共 18 只，每组 6 只。之后每隔 5 d 观测裸鼠皮下肿瘤生长情况，并以游标卡尺测量肿瘤体积。在第 30 天时，通过颈椎脱臼法处死各组小鼠，并拍照测量肿瘤体积( 长径× 短径2 × 0． 5) 。

1.4 统计学分析
采用 SPSS 19． 0 统计软件进行数据分析，每项实验至少重复 3 次，计量资料以 x珋± s 表示，两组间比较采用 t 检验; 相关性分析采用 Spearman 相关分析。检验水准: α = 0． 05。

胶质母细胞瘤为常见的原发性颅脑肿瘤，以疗效差、预后不良为主要特点，其平均中位生存期仅为 14 个月［1 － 3］。目前已知遗传、细菌感染、环境影响以及其他多种因素均会参与胶质母细胞BMN 673瘤的发生进程，然而其内在的分子机制仍然所知甚少［4］。因此，进一步探索胶质母细胞瘤的发病机制、进而发展新的治疗手段就显得尤为重要。TＲIM29 基因又被称作ATDC 基因，属于 TＲIM 家族的一员( 该家族成员超过 70 多种) ［5］。研究表明， TＲIM 家族在参与调控诸多细胞进程( 如细胞生长、分化、发生发育、凋亡及炎症等) 中发挥重要作用［6 － 9］。近年来，TＲIM 家族对肿瘤的调控越发受到关注。作为 TＲIM 家族的一员，TＲIM29 在诸多肿瘤中发挥着Navitoclax促癌作用。通过对 TＲIM29 表达的检测，发现在膀胱癌、胃癌、肺癌以及胰腺癌中，TＲIM29 的高表达与肿瘤的恶性程度及肿瘤患者的不良预后呈正相关［10 － 11］。目前 TＲIM29 在颅内肿瘤中的表达尚不明确，其对胶质母细胞瘤生物学行为的调控及相关作用机制更不清楚。因此，本实验将对 TＲIM29 在胶质瘤中的表达进行检测，并分析其与临床特征的相关性，同时探究TＲIM29 对胶质母细胞瘤细胞增殖及迁移的影响，并探索可能的分子作用机制。Panobinostat生产商

目的 观察 TＲIM29 基因在胶质瘤组织中的表达及其与临床病理特征的关系，探讨其对胶质母细胞瘤细胞 U-87 MG 增殖与迁移的影响以及可能的作用机制。方法 采用免疫组织化学法检测 56 例胶质瘤组织和正常脑组织中 TＲIM29 蛋白的表达，分析胶质瘤组织中 TＲIM29 蛋白表达与临床病理特征的关系。Western blot 检测胶质母细胞瘤组织、癌旁组织及正常组织中 TＲIM29 蛋白的表达，同时检测其在不同胶质瘤细胞株( A172、LN-229、U-87 MG、U-118 MG) 中的表达。利用 ＲNA 干扰技术处理高表达 TＲIM29 的胶质母细胞瘤细胞 U-87 MG，并分为空白对照组、shScramble 组( 阴性对照组) 及 shTＲIM29 组( 实验组) 。采用 MTT 实验、克隆形成实验和 Transwell 实验分别检购买Ipatasertib测敲低 TＲIM29 对胶质母细胞瘤细胞 U-87 MG 增殖和迁移能力的影响。进一步通过裸鼠成瘤实验检测敲低 TＲIM29 在体内对胶质母细胞瘤细胞 U-87 MG 增殖的影响。采用 Western blot 检测 TＲIM29 敲低后 AKT 通路蛋白的变化。结果 TＲIM29 在胶质瘤组织中较正常脑组织表达增加，且与患者 WHO 分级呈正相关( r = 0． 535， P ＜ 0． 05) 。Western blot 检测结果显示，与正常脑组织和癌旁组织相比，胶质母细胞瘤组织中 TＲIM29蛋白的表达明显上调( P ＜ 0． 05) 。TＲIM29 在胶质瘤细胞 A172、LN-229、U-87 MG、U-118 MG 中蛋白的表达分别为( 0． 27 ± 0． 02) 、( 0． 69 ± 0． 04) 、( 1． 24 ±Panobinostat使用方法 0． 08) 、( 0． 82 ± 0． 06) 。ＲNA 干扰处理后，shTＲIM29组U-87 MG 细胞TＲIM29 蛋白的表达量为( 0． 27 ± 0． 04) ，明显低于空白对照组和 shScramble 组［( 1． 64 ±0． 05) 、( 1． 51 ± 0． 05) ，P ＜ 0． 05］。点击此处同时，与空白对照组和 shScramble 组相比，shTＲIM29 组 U-87 MG 细胞的增殖、迁移能力明显下降( P ＜ 0． 05) 。在胶质母细胞瘤细胞 U-87 MG 中敲低 TＲIM29 后，p-AKT 蛋白表达明显降低( P ＜ 0． 05) 。结论 TＲIM29 在胶质瘤中高表达，与肿瘤的恶性程度呈正相关，可能通过 AKT 信号通路促进细胞的增殖及迁移。

<正>抗体-药物偶联物(antibody-drug cEPZ-6438配制onjugatLY2835219 molecular weighte,ADC)是由单克隆抗体与细胞毒性化学药物偶联而成,其通过单克隆抗体的靶向作用特异性地识别肿瘤细胞表面抗原,然后利用细胞本身具备的内吞作用使化学药物进入肿瘤细胞体内发生药力,从而达到杀死肿瘤细胞的目的。ADC具有肿瘤杀伤力大、药物安全性高、毒副作用小、治疗有效性强等特点,疗效远高于同靶标的普通单克隆抗体,是迄今为止国际上最先进的靶向性抗癌药物,代selleck HPLC表着单克隆抗体和小分子药物的研究前沿和发展新趋势。

基于传统卫气营血辨证理论，多数中医医家认为温病演变过程中的危重症发生在邪入血分时，并未意识到气分证阶段也可以发生危重症。结合新型冠状Navitoclax浓度病毒肺炎防治，提出“温病气分危重症”的新观点，结合“状态辨治”理论，详细阐述气分危确认细节重症的理论依据、病机演变规律以及防治方法，指出气分危重症的发生与肺气的生理功能严重失调密切相关。总结新型冠状病毒肺炎气分危重症的病机演变为：湿毒疫邪袭肺，宣肃失ABT-199说明书调，肺气虚损，气不行津，气不摄津，肺气将绝；治疗原则为宣肺开痹、补气摄津。

电子计算机断层扫描（CT）引导下经皮肺穿刺是获取肺部病变组织以确诊肺Alpelisib说明书癌的最有效的手段之一，规划科学合理的穿刺路径是避免穿刺并发症，减少患者痛苦及穿刺死亡率的重要环节。本文提出了一种基于多级约束的肺部穿刺路径规划方法：首先利用患者CT建立胸部数字化模型；然后在以肿瘤病灶为中心的理更多想球面上构造斐波那契网格采样，得到待选路径集合；最后根据临床穿刺准则提出了一种多级约束策略，并结合方向包围盒层次树（OBBTree）算法和GDC-0068体外帕累托（Pareto）优化算法，获取最优穿刺路径。模拟仿真实验结果证明了该算法的有效性，能够规避物理和生理障碍，可以作为医生选择穿刺路径的辅助手段。