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巴基斯坦是我国“一带一路”建设沿线的重要国家之一,新时期传统药物资源的传播与开发是“一带一路”战略的重要组成部分。巴基斯坦传统药物资源丰富、需求量大,是巴基斯坦传统医药体系中的重要组成部分。然而,由于传统药Wnt-C59纯度物资源分散,缺少系统性收集整理,药物品种混淆现象严重,从而影响了用药安全和传统药物的进出口贸易。因此,亟需对巴基斯坦传统药物进行系统性整理与信息化管理,并建立一套标准、可操作的传统药物基原鉴定方法。为此,本研究通过文献调研及信息检索整理,主要以Hamdard药典第三部分内容为主,对巴基斯坦常用传统药物基原信息和遗传信息数据进行了汇总。在此基础上,采用二代测序和生物信息学技术,运用Getorganelle、SPAdes和CPGAVAS2软件,对该数据库中17个物种的叶绿体全基因组序列及注释数据进行了补充,并对这些物种的叶绿体基因组数据进行了比较基因组学分析。最终,本研究基于web服务器典型架构LAMP模式(Linux、Apache、My SQL、PHP)搭建了巴基斯坦常用传统药物基因组数据库TPMGD,该数据库的存储数据将有助于促进传统药物贸易,寻找新的药物来源,以及加强传统医药文化的交流。主要研究内容和结果如下:(1)该数据库可通过网址http://www.tpmgd.com/公开、免费访问。其中包括“Home”(网站首页)、“Medicinal Species”(物种列表)、“Species Identifications”(物种鉴定)、“BLAST+”(比对工具)、信息搜索等5个条目。用户可根据需要搜索和浏览相应物种介绍信息、DNA条形码和cp-G数据,并使用cp-G、DNA条形码数据进行数据库比对,以完成分子鉴定。此外,用户还可以使用“BLAST+”工具对蛋白质数据或核酸数据进行基因序列比对分析。目前,该数据库收录了128个药用物种的基本简介、1个动物物种的141条COI序列和1条线粒体基因组序列、92个植物物种的1396条ITS2序列、83个植物的1074条psb A-trn H序列以及81个物种的199条叶绿体基因组序列。(2)本研究对15个物种的cp-G进行了测序、组装、注释,分析结果如下:(1)大多数物种的叶绿体基因组大小和结构十分保守,基因组大小上在127,677 bp～163,784 bp之间,基因组结构为四分体结构,但草木犀Melilotus officinalis(L.)Pall.由于IR区的丢失而使得全叶绿体基因组大小只有120 kb左右,基因结构为环状结构;(2)GC含量在33.63%～39.19%之间,总基因数在108～130个之间,昂天莲Abroma augustum(L.)L.f.总基因个数最多(130个),草木犀M.offiAcute care medicinecinalis总基因个数最少(108个);(3)散在长重复序列片段普遍存在于30～39 bp之间,F和P重复类型丰度均高于R和C类型;(4)SSR数量以马蛋果Gynocardia odorata R.Br.(138个)最多,云木香Aucklandia costus Falc.(40个)和过江藤Phyla nodiflora(L.)E.L.Greene(40个)最少,大多数物种的SSR重复类型主要以单核苷酸A/T序列为主;(5)密码子使用偏好性分析显示,27个密码子使用频繁,2个密码子无偏好性,35个密码子使用频率较低。(3)本研究采集了刺果甘草和云南甘草的新鲜叶片,对其进行了叶绿体基因组测序、组装和注释,并与巴中同属正品甘草(甘草、光果甘草、胀果甘草、三叶甘草)的叶绿体基因组序列特征进行了研究:(1)六个甘草属物种的叶绿体基因组结构呈环状结构,基因组大小上在127,362 bp～128,148 bp之间,GC含量在34.22%～34.25%之间,包含108个共有基因,包括74个蛋白质编码基因,4个r RNA基因,30个t RNA基因;(2)重复序列中,F和P类型丰度均高于R和C类型,片段普遍存在30～39 bp长度,SSRs总个数在88～93个范围内;(3)密码子偏好性分析结果显示,30个密码子存在偏好性,32个密码子偏好性较低,2个密码子无偏好性;(4)全局比对分析结果显示,trn L-UAA-trn T-UGU、trn Q-UUG-psb K、trn G-GCC-psb Z、psb D-trn T-GGU、pet N-trn CGCA等基因间区为高变异区域;(5)核苷酸多样性(Pi)分析结果显示,发现6个高度可变的区域(trn F-GAA-trn L-UAA、trn L-UAA-trn T-UGU、trn C-GCA-rpo B、acc D-psa I、ycf1和ndh A);(6)CDS-ML和cp-G-ML系统发育树显示,两棵树的拓扑结构基本一致,每个节点具有很高的自展支持率,甘草属的物种在进化的关系上可以分为四支(Clade I-IV)。此外,ML分析表明,位于CladeⅢ的刺果甘草G.pallidiflora和云南甘草G.yunnanensis与位于第二支CladeⅡ的巴CCRG 81045细胞培养中两国4种正品甘草(三叶甘草G.triphylla、光果甘草G.glabra、胀果甘草G.inflata、甘草G.uralensis)物种互为姊妹关系。基于六个潜在标记物片段构建的ML系统发育树显示,trn F-GAA-trn L-UAA、ycf1和ndh A片段可能是鉴定六种甘草(刺果甘草、云南甘草、甘草、胀果甘草、光果甘草和三叶甘草)的潜在分子标记。本研究首次公布了15个物种的叶绿体基因组数据,并对甘草属的叶绿体基因组进行了分析,建立了首个专门收录巴基斯坦传统药物的基因组数据库,该数据库是一个集物种描述、功能主治信息查询、遗传信息存储、分子鉴定等多功能为一体的专项数据库。不仅为巴基斯坦常用传统药物的信息查询提供了便利,还为传统药物的用药安全、分子鉴定以及资源保护奠定了科学基础。

目的:观察甘草酸(GA)对缺氧H9c2细胞炎症、氧化应激的影响，并探DS-3201讨其潜在作用机制。方法:将正常培养的H9c2细胞设置为对照组，缺氧培养H9c2细胞设置为缺氧组；GA、GA+N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)处理的缺氧H9c2细胞设置为缺氧+GA组、缺氧+GA+NAC组；将生理盐水、双蒸水+GA处理的缺氧H9c2细胞设置为缺氧+生理盐水组、缺氧+GA+双蒸水组。采用细胞计数试剂盒(CCK8)、5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)染色法测定细胞增殖；酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)SB203580作用-6、IL-1β、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD);免疫荧光法检测细胞活性氧(ROS);实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测细胞NOD样受体蛋白3(NLPR3)mRNA表达。结果:与对照组比较，缺氧组H9c2细胞存活率、EdU阳性率均降低，细胞上清TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA含量及ROS、NLRP3 mRNA水平均升高，SOD含量降低(P<0.05);与缺氧+生理盐水组比较，缺氧+GA组H9c2细胞存活率、EdU阳性率均升高，细胞上清TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA含量及ROS、NLRP3 mRNA水平均降低，SOD含aquatic antibiotic solution量升高(P<0.05)。与缺氧+GA+双蒸水组比较，缺氧+GA+NAC组H9c2细胞ROS、NLRP3及TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA降低，SOD含量升高(P<0.05)。结论:GA可减轻缺氧诱导H9c2细胞的炎症、氧化应激反应，其机制与抑制ROS依赖性NLRP3炎性通路有关。

生物钟是一种内源性机制,使机体能够预测日常环境的变化,从而协调各种生理活动和行为节律,有利于个体更好的生存。生物节律对动物免疫反应以及生长发育繁殖具有重要影响。生物钟分子机制主要依赖于一 个细胞自主调控的转录/翻译反馈环路。该环路中CLOCK可与BMAL1在核中形成异二聚体,激活在其启动子和增强子区域含有E/E’-box元件的靶基因负调控因子如周期(Per)和隐花素(Cry)基因家族的转录。Per和Cry蛋白形成另一种异二聚体,然后转移到核中,并与CCCRG 81045使用方法LOCK:BMAL1复合物相互作用以抑制其转录激活,从而形成反馈环路。本研究利用CRISPR-Cas9技术成功构建clock1a纯合突变(clack1a-/-)斑马鱼品系,并与标记中性粒细胞的绿色荧光蛋白Tg(lyz:EGFP)品系斑马鱼杂交并获得带有绿色荧光蛋白标记中性粒细胞的clock1a纯合突变体。通过酶切鉴定、基因测序及qRT-PCR检测鉴定clock1a突变的有效性。在构建clock1a-/-斑马鱼的基础OIT oral immunotherapy上进一步研究了clockla-/-斑马鱼www.selleck.cn/products/liproxstatin-1的生长发育及行为活动状态和生理状态,发现clock1a-/-并未对斑马鱼幼鱼生长发育及形态产生显著影响;在对正常光周期和持续黑暗条件下斑马鱼幼鱼的昼夜行为节律的监测发现,clock1a-/-斑马鱼正常光周期下运动速率降低,持续黑暗条件下昼夜节律性运动消失;在研究clock1a-/-斑马鱼幼鱼下游钟基因表达水平的检测中发现,bmal1b、perIb、per2、cry1ba基因表达水平在正常光暗和持续黑暗条件下均发生显著改变。以上结果均表明clock1a-/-使斑马鱼失去了昼夜节律性。在此基础上我们进一步研究了clock1a-/-斑马鱼昼夜节律消失后对中性粒细胞迁移和细胞因子表达水平的影响。结果表明,在白天和夜晚,clock1a-/-均可以显著增加中性粒细胞向炎症部位的迁移,并且在该过程中,clock1a-/-促进细胞因子表达水平升高,与中性粒细胞迁移趋势相一致。以上结果说明,生物钟基因clock1a可调控中性粒细胞的迁移和细胞因子表达水平从而影响免疫应答反应。本研究我们利用CRISPR-Cas9技术成功构建生物钟基因clock1a纯合突变(clock1a-/-)斑马鱼品系,并且证明clock1a可调节中性粒细胞的迁移从而调控免疫反应,可以进一步认识生物钟在免疫反应过程中的角色,可以加深对该领域的认识,同时为动物机体生物钟紊乱相关疾病的治疗以及生物钟在家禽畜牧免疫抗病的研究提供理论参考。

目的 探究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对阿霉素诱导下的心肌细胞铁死亡的影响及其保护机制。方法 体外培养大鼠H9C2心肌细胞，将H9C2心肌细胞分为4组：control组、DOX组、EGCG+DOX组、EGCG+DOX+ML385组进行对应的药物处理。DCFH-DA探针法检测活性氧(ROS);试剂盒检测线粒体膜电位(MMP)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、铁离子(Fe~(2+));Western blot检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、核因子E2相关因子2(NRF2)、膜铁转HIV phylogenetics运蛋白1(FPN1)、血红素氧合酶1(HO-1)的蛋白表达。结果 EGCG降低阿霉素损伤的细胞中ROS、MDA、Fe~(2+)含量，升高SOD、GSH含量(P<0.01),增加MMP中红/绿色荧光的平均光密度值(P<0.05),GPX4、Nrf2、FPN1、HO-1蛋白含量发生显著的上升(P<0.01)。ML385可逆转EGCG的作用。结论 EGCG可以改善AG-221溶解度阿霉素诱导的心肌细胞损伤，其机制可能与调控NRF2及其下游因子，抑制细胞MG132铁死亡有关。

基于NCBI数据库公开的茶树“舒茶早”(Camellia sinensis var. ‘Shuchawww.selleck.cn/products/gdc-0068zao’)全基因组序列，通过MISA在线分析工具挖掘SSR位点，并使用Primer 3.0软件批量开发设计引物，随机挑选引物检测有效性，采用荧光标记毛细管电PLX5622泳技术验证筛选多态性较高的引物。结果表明，茶树全基Malaria infection因组中共挖掘659 053个SSR位点，相对丰度212个/Mb。二核苷酸重复类型数量最多(469 096个， 占比71.18%)、长度最长(8 725 988 bp， 占比61.34%)、出现频率最高(151.06个/Mbp)、密度最大(2 809.97 bp/Mbp)，三核苷酸重复类型数量(99 716个， 占比15.13%)、长度(2 801 472 bp，占比19.69%)、出现频率(32.11个/Mbp)、密度(902.14 bp/Mbp)均次之。6个串联重复的SSR基序类型最多(146 844个，占比22.28%)，7个串联重复的SSR基序类型数量次之(87 136个， 占比13.22%)。从200对随机引物中筛选出137对引物可以扩增成功，其中82对可能存在多态性，使用8个茶树栽培品种进行筛选验证，其中22对引物具有多态性，其等位基因数(Na)、有效等位基因数量(Ne)、香农遗传多样性信息指数(I)、观测杂合度(Ho)、期望杂合度(He)、固定指数(F)、多态性信息含量(PIC)平均值分别为5.091、3.387、1.347、0.591、0.675、0.122、0.634，筛选出的引物中有20对高度多态性信息引物(PIC＞0.5)、2对中度多态性信息引物(0.4＜PIC＜0.5)，引物多态性丰富。通过茶树全基因组序列批量开发多态性SSR标记引物，可为茶树种质资源分子鉴定、品种权保护及辅助育种提供技术参考。

目的:由于C5AR1靶点在肿瘤的发生发展中具有促进作用,因此阻断C5AR1成为治疗肿瘤的新策略,导致C5AR1靶点药在不断发展中。为了降低C5AR1靶点药的开发成本,加快C5AR1靶点药的开发进程,开发一种用于验证人C5AR1靶点药的临床前验证用人源selleck Liproxstatin-1化小鼠模型迫在眉睫。本研究首先对构建的C5AR1人源化(hC5AR1)小鼠进行验证,然后为了构建一个C5a高表达适合肿瘤生长的环境,对C5/C5AR1人源化(hC5/hC5AR1)小鼠和高表达人源C5蛋白的小鼠结肠癌MC38细胞系(hC5 MC38)进行验证,最后由于免疫检查点抑制剂和C5AR1靶点药可以同时提高T细胞效应,抑制肿瘤生长,对PD-1/PD-L1/C5AR1人源化(hPD-1/hPD-L1/hC5AR1)小鼠和高表达人源PD-L1蛋白的MC38细胞系(hPD-L1 MC38)进行分析。同时依次将细胞系接种到人源化小鼠上,构建肿瘤模型,给予C5AR1抗体药,分析其药效,判断是否可以用来验证用于人的C5AR1靶点药的有效性和安全性。方法:1.C5a/C5AR1表达情况的分析:取培养的小鼠结肠癌细胞系(MC38细胞系)以及在C57BL/6野生型小鼠上接种MC38细胞系后,长到约100mm~3的肿瘤组织,使用流式细胞术检测肿瘤组织和MC38细胞系中鼠源C5AR1蛋白的表达;收集MC38细胞培养液上清和肿瘤组织匀浆液上清,使用ELISA检测补体C5a蛋白的表达。2.hC5AR1小鼠的分析。(1)hC5AR1小鼠的基因编辑策略:在野生型C57BL/6小鼠中,将小鼠的C5ar1基因替换为人的C5AR1基因。(2)C5AR1 m RNA的表达:取hC5AR1小鼠的骨髓,提取总RNA,进行反转录,选择合适的引物进行扩增。(3)C5AR1蛋白的表达:取hC5AR1小鼠的骨髓,采用流式细胞术,使用抗人的C5AR1抗体,分析人源C5AR1蛋白的表达。(4)免疫细胞分型实验:取hC5AR1小鼠的脾脏、外周血、淋巴结,采用流式细胞术,使用带有荧光标记的物种特异性抗体,分析T/B细胞、NK细胞、树突状细胞(DCs)、单核/巨噬细胞以及T细胞亚群CD4+T细胞、CD8+T细胞、Treg细胞的比例与野生鼠之间的差异。(5)肿瘤模型的构建与药效分析:将MC38细胞系接种到hC5AR1小鼠上,构建结肠癌动物模型,接种前一天进行分组并给药,每周两次称体重并且测量肿瘤体积观察肿瘤生长趋势,分析药效。3.hC5/hC5AR1小鼠的分析。(1)hC5/hC5AR1小鼠和hC5 MC38细胞系的基因编辑策略:在野生型C57BL/6小鼠中,将鼠源的C5基因替换为人源的C5基因,构建C5人源化(hC5)小鼠,然后将其与hC5AR1小鼠相互交配,获得hC5/hC5AR1小鼠;将MC38细胞系中鼠源的C5基因替换为人源的C5基因,构建hC5 MC38细胞系。(2)C5、C5AR1 m RNA的表达:取hC5/hC5AR1小鼠的肺组织,提取总RNA,进行反转录,分别选择合适的引物进行扩增。(3)C5、C5AR1、C5a蛋白的表达:取hC5/hC5AR1小鼠的骨髓,采用流式细胞术,使用抗人的C5AR1抗体,分析人源C5AR1蛋白的表达;取hC5/hC5AR1小鼠的血清,使用ELISA试剂盒分析C5、C5a蛋白的表达;取hC5 MC38细胞的培养上清液,使用ELISA试剂盒分析人源C5蛋白的表达。(4)免疫细胞分型实验:取hC5/hC5AR1小鼠的脾脏、外周血、淋巴结进行分析,方法同hC5AR1小鼠。(5)肿瘤模型的构建与药效分析:将hC5 MC38细胞系接种到hC5/hC5AR1小鼠上,构建结肠癌动物模型,待肿瘤体积达到100-150 mm~3时进行分组给药,每周两次称体重并测量肿瘤体积,分析药效。4.hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠的分析。(1)hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠和hPD-L1 MC38细胞系的基因编辑策略:在野生型C57BL/6小鼠中,将鼠源的PD-1基因替换为人源的PD-1基因,构建PD-1人源化(hPD-1)小鼠,将鼠源的PD-L1基因替换为人源的PD-L1基因,构建PD-L1人源化(hPD-L1)小鼠,将两种小鼠相互交配,获得PD-1/PD-L1人源化(hPD-1/hPD-L1)小鼠,最后将hC5AR1小鼠与hPD-1/hPD-L1小鼠交配,获得hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠;将MC38细胞系中鼠源的PD-L1基因替换为人源的PD-L1基因,构建hPD-L1 MC38细胞系。(2)PD-1、PD-L1、C5AR1蛋白的表达:取hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠的骨髓,采用流式细胞术,使用抗人的C5AR1抗体,分析人源C5AR1蛋白的表达;取经过抗鼠的CD3抗体刺激24 h后的hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠的脾脏,采用流式细胞术,使用抗人的PD-1、PD-L1抗体,分析人源PD-1、PD-L1蛋白的表达;取hPD-L1 MC38细胞,采用流式细胞术,使用抗人的PD-L1抗体,分析人源PD-L1蛋白的表达。(3)免疫细胞分型实验:取hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠的脾脏、外周血和淋巴结,方法同hC5/hC5AR1小鼠。(4)抗体结合实验、肿瘤模型的构建与药效分析:通过流式细胞术分析内部合成的阳性药Avdoralimab与hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠的结合能力;将hPD-L1 MC38细胞系接种到hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠上,构建结肠癌动物模型,其他方法同hC5/hC5AR1小鼠。结果:1.C5a/C5AR1表达情况的分析:C5a在肿瘤组织匀浆液上清中表达,C5AR1在肿瘤组织中的CD45+的细胞中表达,说明C5AR1在肿瘤组织微环境中的免疫细胞中表达,而不是肿瘤细胞。2.hC5CCRG 81045试剂AR1小鼠的分析。(1)hC5AR1小鼠通过基因型鉴定确认获得基因编辑成功的阳性鼠。(2)hC5AR1小鼠只表达人C5AR1的m RNA,不表达小鼠C5AR1的m RNA。(3)hC5AR1小鼠只表达人C5AR1蛋白,不表达小鼠C5AR1蛋白。(4)以野生鼠作为对照,hC5AR1小鼠中脾脏、淋巴结、外周血中的T/B细胞、NK细胞、树突状细胞(DCs)、单核/巨噬细胞以及T细胞亚群CD4+T细胞、CStudents medicalD8+T细胞、Treg细胞的比例与野生鼠无显著性差异。(5)hC5AR1小鼠的肿瘤模型构建成功,但没有明显的药效。3.hC5/hC5AR1小鼠的分析。(1)hC5/hC5AR1小鼠和hC5 MC38细胞系通过基因型鉴定确认获得基因编辑成功的阳性鼠和阳性克隆。(2)hC5/hC5AR1小鼠只表达人源C5、C5AR1的m RNA,不表达鼠源C5、C5AR1的m RNA。(3)hC5/hC5AR1小鼠只表达人源的C5、C5a、C5AR1蛋白,不表达鼠源的C5、C5a、C5AR1蛋白;在hC5 MC38细胞系的培养上清中检测到人源C5蛋白。(4)以野生鼠作对照,hC5/hC5AR1小鼠中脾脏、淋巴结、外周血中的各免疫细胞比例与野生鼠无显著性差异。(5)hC5/hC5AR1小鼠的肿瘤模型构建成功,但没有药效。4.hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠的分析。(1)hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠和hPD-L1 MC38细胞系通过基因型鉴定确认获得基因编辑成功的阳性鼠和阳性克隆。(2)hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠只表达人源的PD-1、PD-L1、C5AR1蛋白,不表达鼠源的PD-1、PD-L1、C5AR1蛋白;在hPD-L1 MC38细胞系中也检测到人源的PD-L1蛋白。(3)以野生鼠作对照,hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠中脾脏、淋巴结、外周血中的各免疫细胞比例与野生鼠无显著性差异。(4)抗人C5AR1抗体药Avdoralimab只与hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠特异性结合,不与野生鼠结合。hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠的肿瘤模型构建成功,与单药相比,联合使用抗人PD-1抗体和抗人C5AR1抗体能更有效地抑制肿瘤的生长。结论:对基因型已经鉴定成功的hC5AR1小鼠、hC5/hC5AR1小鼠、hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠以及hC5 MC38细胞系、hPD-L1 MC38细胞系进行分析,发现这三种人源化小鼠以及这两种细胞系都构建成功。以这三种人源化小鼠和人源化细胞系为基础,构建肿瘤模型,结果显示:抗人C5AR1抗体单药无论在hC5AR1小鼠肿瘤模型还是在hC5/hC5AR1小鼠肿瘤模型中都没有获得药物有效性的数据;但联合使用抗人PD-1抗体和抗人C5AR1抗体在hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠肿瘤模型中获得了药物有效性的数据,证明药物联用能有效抑制肿瘤的生长,hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠可以作为C5AR1靶点药的临床前药效验证模型,对加速C5AR1靶点药的开发进程有一定的意义。

目的:开发一种含有噬菌体裂解酶LysP53的漱口水，并在体外评价其抗菌活性、细胞毒性和稳定性。方法:体外克隆、表达和纯化噬菌体裂解酶LysP53并制备成漱口水。通过杀菌活性测定、结晶紫染色试验、扫描电子显微镜等评价LysP53漱口水的杀菌效果，细胞计数试剂盒-8试验(CCK-8)对其安全性进行体外评估，不同温度条件下对LysP53活性的影响评价其稳定性。结果:8μmol/L LysP53漱口水对主要diABZI STING agonist致龋菌变形链球菌、远缘链球菌、内氏放线菌有杀菌效果(P<0.05),而对常见共生菌口链球菌、轻链球菌、血链球菌抗菌活性较差(P>0.05)。在已形成的生物膜中应用LysP53漱口水，可使生物膜结构崩解，并有效减少活菌数量(P<0.05)。CCK-8显示各组之间细胞活性无统计学差异(P>0.05),LysP53漱口水分别储存于4、37、43、60、95℃1 h后的杀菌效率无差异，且仍显示出优良的杀Reproductive Biology菌活性。结论:LysP53漱口水表现出良好的抗菌、特异性、稳定性和生物相容性，作为常规口腔卫生措施，在预防龋齿https://www.selleck.cn/products/forskolin.html方面具有巨大的潜力。

背景:恶性肿瘤作为一类容易复发、难以治愈的疾病,严重威胁人类的健康。如今治疗方式发展多样,但外科手术仍在综合治疗中占据重要地位。出于手术后患者全身情况较脆弱,需间隔恢复期后使用全身治疗手段的考量,产生了一段治疗的空白期,反而使得残存的肿瘤细胞得到喘息的机会,此时则需要一种合适的策略填补肿瘤治疗空白,达到持续治疗的目的。以透明质酸钠及壳聚糖的衍生物为基质制备的可负载抗肿瘤活性成分的止血多糖基水凝胶体系为肿瘤根治手术术中使用,有望成为实现原位发挥缓释抗肿瘤药物及即时创面止血的功能,解决临床困境的可靠途径。目的:generalized intermediate为了应对不可降解材料在体内植入应用引起的不良反应,以及止血材料功能比较单一的缺陷,本文构建了一种负载抗肿瘤活性成分的止血透明质酸及壳聚糖衍生物为基质的水凝胶,用于乳腺癌等恶性肿瘤术中的局部抗肿瘤治疗及填补不规则的创面出血,以期研NSC 119875发多位一体的生物可降解材料,填补临床应用空缺。方法:水凝胶是一种具有与天然细胞外基质(ECM)相似物理结构的3D交联亲水聚合物,在医药材料领域(例如药物的递送)引起了全世界的关注。我们以生物相容性良好的透明质酸钠和壳聚糖为原料,经由Michael加成反应,我们制备出了具有活性胺基的N-羧乙基壳聚糖(CEC),并利用Na IO_4改性,将HA转化为具有活性醛基的A-HA。在温和的生理条件下,通过席夫碱反应,将CEC和A-HA溶液混合,制备出N-羧乙基壳聚糖复合醛基化透明质酸(CEC/A-HA)水凝胶。并对该多糖基水凝胶的理化特性、细胞毒性、血液毒性、生物安全性、体内外抑制肿瘤细胞生长增殖的能力、体内止血性能进行了实验评价。提出了该体系既可在术中即时用于不规则伤口的止血,也能留存植入体内缓释药物,杀灭可能残余的肿瘤细胞,减少复发转移风GSK126细胞培养险。结果:1、通过Michael加成,高碘酸钠氧化等改性方法成功制备CEC/A-HA水凝胶,并利用多种方法评估,其体内外降解时间、溶胀比、含水量、孔隙形态、孔径等方面均符合止血及载药缓释的体内可降解载体条件;2、将CEC/A-HA水凝胶材料及其组分,与Rat-1大鼠成纤维细胞细胞共培养并使用CCK8法、死/活荧光染色法分别观察72h,来评价材料的细胞毒性,结果显示:细胞表现出良好的增殖率及旺盛的生长特性;在SD大鼠背部皮下,以注射的方式植入CEC/A-HA水凝胶材料,在6个月观察期内实验动物均未表现出明显的急、亚急性和慢性毒性。本研究制备的水凝胶材料通过体内、外实验的评价,均体现出其优良的生物安全特性,这是能在临床体内使用的重要前提;3、体内、外实验均证实,相比游离5-FU,CEC/A-HA&5-FU达到了更强抑制肿瘤细胞生长增殖的效果。在体外,将负载了5-氟尿嘧啶的CEC/A-HA水凝胶与MDA-MB-231乳腺癌细胞共培养,结果显示其能够缓释5-FU药物成分至共培养体系中,显著抑制了MDA-MB-231乳腺癌细胞的增殖;在体内,先构建小鼠4T1原位乳腺癌模型。在瘤周注射CEC/A-HA&5-FU水凝胶,观察肿瘤体积变化,实验组肿瘤生长的增幅放缓,增强了药物的体内抗肿瘤效果;4、我们构建了SD大鼠肝脏表面出血模型和断尾出血模型,并使用本研究制备的CEC/A-HA水凝胶进行止血实验,结果显示,实验组展现出其自适应填补肝脏裂口创面的特性,通过止血时间及出血量的指标评价,明确了本材料的止血性能。

光热疗法(PTT)作为一种有希望的治疗癌症的方法,受到了广泛关注,其副作用比常规放疗、化疗和手术切除的副作用小。化学动力学疗法(CDT)是一种新开发的癌症治疗方法,它通过芬顿/类芬顿反应杀死肿瘤细胞,将过氧化氢(H_2O_2)转化为有毒的羟基自由基(·OH)。故因此PTT和CDT协同治疗来实现更好的肿瘤治疗效果。随着纳米科学和纳米生物技术的发展,过去几十年来,癌症治疗取得了一些进展。而多金属氧酸盐(POM)目前作为纳米LY2835219体内实验剂量材料应用到生物医学中,具有很好wound disinfection的发展前景。因此,基于POM的纳米材料层出不穷。将光热治疗和化学动力学疗法相结合,二者协同治疗成为了新的发展前景。本论文首先合成了杂多蓝(HPB),再通过一锅法合成HPB@COF纳米粒子。利用有机共价骨架(COF)的席夫碱结构,在肿瘤部位分解,释放出HPB。再利用HPB的光热性能,使肿瘤细胞消融。又通过体内和体外的结果都表明,HPB@COF纳米粒子具有良好的肿瘤治疗效果,同时具有良好的p H响应性。这项研究提供了一种具有巨大潜力的PTT的新策略。其次,以碳化钨为原料合成钨基多酸,根据改良的Folin-Ciocalteu分析法合成新的多金属氧酸盐纳米材料WC-POM,使其同时具有CDT和PTT两种治疗效果。体外和体内实验证实WC-POMselleckchem FUT-175纳米颗粒具有低毒性、良好的生物相容性和高的肿瘤抑制效率。WC-POM的化学动力治疗和光热治疗协同治疗下提高了肿瘤抑制率。最后,基于POM具有氧化还原的特性,并促进ROS的产生杀死肿瘤细胞。同时为了提高治疗效率,以碳化钨为原料合成钨基多酸,具有化学动力治疗效果(CDT)。为了增强其治疗效果,引入载体聚多巴胺(PDA),最终合成多金属氧酸盐纳米材料(POM@PDA),利用POM的氧化还原性能与聚多巴胺的光热性能进行有效的治疗。这表明POM@PDA具有很好的CDT和PTT协同治疗的前景。

背景后路腰椎融合术后常伴有严重急性疼痛,诱发或加重不良情绪的发生,降低患者的依从性不利于术后康复锻炼,影响生活质量。由于艾司氯胺酮具有镇痛、改善情绪等作用,有研究认为围术期小剂量的艾司氯胺酮可通过改善患者的疼痛,减少术后阿片类药物使用量,降低相关不良反应,对情绪有积极作用,可改善患者术后恢复质量。但目前尚无研究探讨关于小剂量艾司氯胺酮对后路腰椎融合患者术后恢复质量的影响。目的本研究旨在探讨小剂量艾司氯胺酮对后路腰椎融合患者术后恢复质量影响。方法本研究是一项前瞻性、随机双盲对照试验,将56例择期行后路腰椎融合术的病人随机分为2组(每组28例):实验组(EK组)或对照组(C组)。实验组在麻醉诱导时注Medical ontologies射0.2mg/kg艾司氯胺酮后0.125mg/kg/h至缝合切口,术后使用患者自控静脉镇痛(patient controlled intravenous analgesia,PCIA):0.9mg/kg艾司氯胺酮+1.8ug/kg舒芬太尼+10mg托烷司琼=120ml;对照组诱导时、术中接受等量生理盐水,术后使用PCIA:1.8ug/kg舒芬太尼+10mg托烷司琼=120ml。主要指标为15项术后恢复质量(QoR-15)评分,最小临床差异(minimum clinically important difference,MCID)为8分,小于8分认为不具有临床差异;次要指标包括血流动力学、术中用药、静息和运动NRS疼痛评分、术后苏醒质量、术后舒芬太尼用量、补救镇痛例数、排气时间、下床时间、住院时间以及不良反应。结果最终将53例患者纳入分析,其中EK组27例,C组26例。比较两组患者的一般临床资料,差异均无统计学意义(P>0.05)。比较术后24h的QoR-15评分,EK组总分高于C组(111.04±6.89 vs 106.38±7.85,P=0.026),但不具有临床意义(MCID<8)。术后48h的QoR-15评分两组间差异无统计学意义(P>0.05)。EK组术后1h、4h静息时疼痛评分明显低于C组(P<0.05);两组术后8h、12h、24h、48h静息时和4h、8h、12h、24h、48h运动时疼痛评分差异无统计学意义(P>0.05)。麻醉诱导后-插管前两组间最低血压差异有统计学意义(P<0.05)。术中用药两组间差异无统计学意义(P>0.05)。拔管后10min,EK组镇静评分低于C组(P<0.05)。术后PACU内EK组补救镇痛例数低于C组(P<0.05),PACU内EK组舒芬太尼用量低于C组(P<0.05);术后48h内舒芬太尼总用量两组间差异无统计学意义(P>selleck IDN-65560.05),病房内补救镇痛例数两组间无统计学差异(P>0.05)。两组间术LBH589后排气时间、下床时间、住院时间以及不良反应差异无统计学意义(P>0.05)。结论小剂量艾司氯胺酮不能明显改善后路腰椎融合患者术后恢复质量。