MS-DG环路依赖的PDGF-BB信号对慢性应激诱导的小鼠抑郁样行为的调节作用

目的 血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)是血小板衍生生长因子家族成员之一,可刺激血管平滑肌细胞增殖和迁移,在血管生成中起重要作用,但在中枢神经系统中的作用尚不清楚。本研究采用确认细节慢性社会挫败应激建立小鼠抑郁症模型,研究海马齿状回区PDGF-BB对抑郁样行为的作用及其机制。方法 采用化学遗传学结合行为学实验研究MS-DG环路对慢性社会挫败应激模型小鼠抑郁样行为的影响;应用分子生物学技术、免疫荧光成像检测MS-DG环路依赖的PDGF-BB对DG脑区神经发生的影响。结果 (1)化学遗传学抑制MS-DG神经投射增加DG脑区PDGF-BB表达,并产生抗抑郁作用,而激活MS-DG神经投射产生相反的作用。(2)抑制MS~(GABA+)-DG神经投射激活海马DG区生长抑素阳性中间神经元,促进PDGF-BB表达。(3)海马DG区过表达PDGProteomics ToolsF-BB改善慢性社会挫败应激诱导的小鼠抑郁样行为,而海马DG区注射PDGF-BB中和抗体阻断抑制MS-DG神经投射介导的抗抑郁作用。(4)海马齿状回区注射PDGF-BB重组蛋白逆转慢性社会挫败应激诱导的海马神经发生损伤和新生神经元树突形态异常。(5)特异性沉默神经干细胞PDGF-β受体导致海马神经发生受损,并增加小鼠对应激的易感性。结论 抑制小鼠MS~(GABA+IACS-010759试剂)-DG神经投射促进DG区生长抑素阳性中间神经元释放PDGF-BB,通过激活神经干细胞PDGF-β受体,进而逆转慢性应激所致成年海马神经发生损伤,缓解小鼠抑郁样行为。

近红外荧光探针的构建及其在生化分析中的应用

与传统荧光探针相比,近红外(NIR)荧光探针因其对活细胞的损伤较小,组织穿透性较好以及背景自体荧光的干扰最小在体内外追踪分子过程方面具有独特的优势。毫无疑问,近红外荧光探针将为化学家和生物学家提供更多机会来进行研究,从而在分子水平上更好地了解生物过程。本文构建了三种近红外荧光探针用于生物此网站体内小分子物质的检测以及细胞器的追踪定位,具体内容如下:(1)活性氧(ROS)在各种信号转导和病理过程中发挥关键作用,对人类生命至关重要。在此,本节提出一种p H敏感型荧光探针,该探针分别在酸性条件下对过氧亚硝酸根(ONOO~-),中性条件下对次氯酸根(Cl O~-)和碱性条件下对单线态氧(~1O_2)具有良好的选择性,适合在各种p H环境下中识别各种ROS。并且该探针已被证明在细胞水平上是可行的,显示了外源性和内源性ROS精确的近红外比率荧光成像。(2)类风湿关节炎(RA)是一种以侵蚀性关节炎为特征的自身免疫性疾病。ONOO~-是ROS的重要成员,广泛selleck化学存在于生物体内,参与多种生理过程。有研究表明ONOO~-直接参与RA患者的组织损伤。在此,本节提出了一种双响应近红外受体Lyso-Cy,能够可视化p H值和ONOO~-。p H依赖光谱(p Ka=5.81)和溶酶体靶向基团使得Lyso-Cy在溶酶体有近红外发射指示。进而对溶酶体内的ONOO~-表现出良好的比率计量模式。此外,这种双响应受体也适用于患有关节炎的小鼠模型,以比率曲线作为反应,显示出在早期RA诊断和临床治疗监测中的潜在应用。(3)脂滴(LDs)与内质网(ER)的关系比其他细胞器更为密切。LDs起源于ER,内质网含有中性脂质合成所需的大多数酶。LDs-ER相互作用的缺陷会导致严重的疾病,包括脂肪营养不良和神经系统疾病。因此,可视化分析LDs和ER之间的相互作用对于阐明和揭示生物学和病理学中的潜在机制至关重要。在此,本章节探究了一种能够同时显示LDs和ER两种细胞器的双色近红外荧光探针Cy-Rh。Cy-Rh通过可逆环化反应可以在红色和NIR之间切换发射颜色,且发射颜色与含水量有关。在细胞内,LDs的核心是高度疏水的,几乎不含水,而ER膜是松散的含有较高比例的水。因此,探针可以实现在红色和NIRmedical journal荧光分别标记ER和LDs。

酵母水解物对克氏原螯虾生长性能、免疫功能及肠道菌群的影响

克氏原螯虾在中国淡水经济虾类养殖中占有极重要的地位。目前高密度集约化养殖中克氏原螯虾的营养需求基本依靠投喂人工饲料来满足,如果饲料配制不合理,必然会对虾的生长发育和非特异性免疫等方面带来不利影响,多种致病菌会引起螯虾大规模发病。现阶段缺乏对克氏原螯虾疾病的治疗措施,坚持以预防为主。主要通过加强日常管理,营养调控等手段来预防疾病的发生。因此,寻求优质的功能性饲料添加剂对维持水产动物的生长发育和正常的生理功能十分重要。酵母水解物是以新鲜酿酒酵母为原料,经一系列复杂工艺制备而成的新型优质饲料添加剂,可以促进动物生长发育、增强机体消化和抗氧化能力、提高免疫力和维护生物肠道健康等。酵母水解物在养殖领域已有广泛的运用,但对克氏原螯虾的研究却未见报道。因此,本试验拟在研究不同浓度酵母水解物对克氏原螯虾生长性能、消化能力、抗氧化能力、非特异性免疫力及肠道菌群的影响。本研究选取300尾平均体重为(6.43±0.55)g的健康幼虾,随机分为5组,每组3个重复,养殖密度为20尾/缸。基础饲料中酵母水解物添加量分别为0(对照组)、0.50%、1.00%、2.00%和4.00%,试验期8周。试验结束后检测螯虾生长指标、消化、抗氧化和免疫酶等指标,分析酵母水解物对幼虾存活、生长、抗氧化防御系统、非特异性免疫及肠道菌群反应的影响。旨在完善克氏原螯虾的饲料配制和健康养殖,为现代养殖业及饲料添加剂的使用提供科学依据,同时为酵母水解物在提高克氏原螯虾生长、消化、抗氧化和非特异性免疫的影响方面提供理论基础。本试验结果如下:1.饲料中添加1.00%-4.00%酵母水解物对克氏原螯虾生长指标影响显著(P<0.05),其中2.00%酵母水解物添加组螯虾存活率、末体重、末体长和肝胰腺指数最高,饲料中添加1.00%酵母水解物螯虾增重率和特定生长率最高。饲料中添加1.00%酵母水解物全虾粗蛋白质含量显著高于其他组(P<0.05),2.00%酵母水解物添加组显著提高克氏原螯虾肌肉粗蛋白质和粗脂肪含量(P<0.05)。与对照组相比,饲料中添加酵母水解物可以显著提高克氏原螯虾胃组织和肝胰腺消化酶活性(P<0.05),2.00%酵母水解物添加组螯虾胃组织和肝胰腺淀粉酶和蛋白酶活性最高,1.00selleckchem%酵母水解物添加组螯虾胃组织和肝胰腺脂肪酶活性最高。2.与对照组相比,随着饲料中酵母水解物含量的增加,克氏原螯虾肠道褶皱明显增多,分布有序。2.00%酵母水解物添加组螯虾肠道皱襞的长度和宽度最大(P<0.05)、皱襞增多、肠腔空隙减小,以改善肠道形态结构,促进肠道生长发育;0.50%-2.00%酵母水解物添加组肠腔内细胞排列紧密,结缔组织数量众多,致密性高于对照组。2.00%和4.00%酵母水解物添加组雌虾卵母细胞内卵黄颗粒增多,外围滤泡细胞增多。3.饲料中添加酵母水解物后,克氏原螯虾抗氧化性能及非特异性免疫均显著提高(P<0.05)。2.00%酵母水解物添加组克氏原螯虾血清中总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)含量显著高于对照组(P<0.05),血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性显著低于对照组(P<0.05)。饲料中添加酵母水解物克氏原螯虾抗氧化能力显著高于对照组(P<0.05),2.00%酵母水解物添加组肝胰腺过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和总抗氧化能力(T-AOC)最高,1.00%酵母水解物添加组肝胰腺谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性最高,2.00%酵母水解物添加组肝胰腺丙二醛(MDA)含量最低。与对照组相比,0.50%-4.00%酵母水解物添加组螯虾肝胰腺碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)和溶菌酶(LZM)活性均显著提高(P<0.05),2.00%酵母水解物添加组AKP和ACP活性最高,1.00%酵母水解物添加组LZM活性最高。4.酵母水解物可以改善克氏原螯虾肠道菌群结构。利用16s r DNA高通量测序,对Control组和2.00%酵母水解物添加组克氏原螯虾肠道进行微生物结构组成和功能分析。结果表明,测序覆盖率均超过99.95%,酵母水解物组螯虾肠道微生物丰富度指数和多样性指数无显著性差异(P>0.05),但肠道菌群组成改变。两组螯虾肠道菌群门水平上前6位优势菌门均为变形菌门(Proteobacteria)、软壁菌门(Tenericutes)、厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、放线菌门(Actinobacteria)和TM7门(TM7),但所占比例不同。与control组相比,酵母水解物组相变形菌门丰度减少,厚壁菌门和拟杆菌门丰度增多。Control组优势菌属为棍状厌氧菌属(competitive electrochemical immunosensorAnaerorhabdus,10.60%)、气单胞菌属(Aeromonas,8.55%)、Dysgonomonas(6.20%)、希瓦氏菌属(Shewanella,1.66%)、假单胞菌属(Pseudomonas,1.50%)、红杆菌属(Rhodobacter,1.10%)。酵母水解物组优势菌属为棍状厌氧菌属(Anaerorhabdus,14.90%)、拟杆菌属(Bacteroides,12.36%)、希瓦氏菌属(Shewanella,5.76%)、Dysgonomonas(5.04%)、红杆菌属(Rhodobacter,4.92%)、不动杆购买STM2457菌属(Acinetobacter,4.18%)。通过KEGG功能通路丰度图可知差异基因相对丰度主要富集于糖代谢(Carbohydrate metabolism)、氨基酸代谢(Amino acid metabolism)、辅助因子和维生素的代谢(Metabolism of cofactors and vitamins)和萜类化合物和聚酮的代谢(Metabolism of terpenoids and polyketones)等4个代谢途径。综上所述,饲料中添加2.00%酵母水解物显著提高克氏原螯虾的生长性能和消化酶活性。当酵母水解物添加量为1.00%-2.0%时,螯虾的抗氧化能力得到提高。2.00%酵母水解物显著改善螯虾的免疫状况,优化肠道菌群结构。建议克氏原螯虾幼虾饲料中酵母水解物添加量为2.00%。

老年抑郁症的识别

背景:老年抑郁症是指抑郁症患者的年龄在60岁及以上,主要表现为持久和显著的情绪低落,是老年群体中一种常见的精神障碍,会对老年人的生活质量产生严重影响。随着我国社会人口老龄化进程的加快,老年抑郁症的患者越来越多,老年人群抑郁症疾病负担加重的问题会更加突出。老年抑郁症的发病容易被衰老或与衰老相关疾病掩盖,导致老年抑郁症的诊断比年轻抑郁患者更加困难,因此尽早而准确的筛查诊断对于老年抑郁症的预防和治疗具有重要意义。眼球追踪技术是一种非侵入性和便捷的眼球运动记录方法,近年来的研究表明,眼球运动指标可作为感知运动加工过程和大脑高级认知功能的行为测量指标,特征性眼动可作为精神疾病患者抑制功能异常的生物学标志。眼球追踪技术已经越来越多地被用于研究抑郁症的注意加工特征,抑郁症患者存在特征性眼球运动模式被广泛报道,但目前的抑郁症眼动研究主要集中于年轻抑郁症患者。目的:采集老年抑郁症患者和健康老年人在执行注视点稳定性任务、眼跳任务和自由观看任务时的眼动数据,分析老年抑郁症患者biologically active building block与健康老年人在简单眼动任务中的眼动特征,为建构可应用于辅助筛查老年抑郁症患者的眼动指标和辅助老年抑郁症患者的临床客观诊断提供实证依据。方法:收集就诊于江西省精神病院心理科符合国际疾病分类第10版(international classification of diseases-10,ICD-10)抑郁发作诊断标准的老年抑郁症患者和社区健康老年人各16例为研究对象,采用Tobii Pro Spectrum眼动仪收集被试的眼动数据,比较老年抑郁症患者和健康老年人在注视点稳定性任务、眼跳任务和自由观看任务中的眼动特征差异。采用17项汉密尔顿抑郁量表(Hamilton depression scale,HAMD)、14项汉密尔顿焦虑量表(Hamilton Anxiety Scale,HAMA)评估两组老年被试的抑郁、焦虑情况,采用简易精神状态检查表(Mini-Mental State Examination,MMSE)评估精神状态,并对量表分数与眼动指标进行相关分析,探究抑郁症严重程度与眼动指标差异的相关性。结果:(1)在注视点稳定任务中,老年抑郁患者组在干扰条件下,眼跳次数显著多于健康老年组(t=2.158,P<0.05);(2)在眼跳任务寻找更多中,老年抑郁症患者的朝向眼跳方向正确率显著低于健康老年人(t=-2.38,P<0.05),老年抑郁症患者的反向眼跳正确率显著低于健康老年人(t=-2.32,P<0.05);(3)在自由观看任务中,情绪面孔类型与组别的交互作用不显著(P>0.05),注视次数、眼跳次数、平均瞳孔直径的组别主效应显著(P<0.05),老年抑郁症患者对情绪面孔图片的注视次数均显著少于健康老年人老年人(F=4.98,P<0.05),眼跳次数均显著多于健康老年人(F=4.84,P<0.05),平均瞳孔直径均显著大selleck Ceralasertib于健康老年人(F=17.40,P<0.0001);(4)注视稳定性任务干扰条件下眼跳次数与HAMD量表得分呈显著的正相关关系(r=0.52,P=0.005);(5)朝向眼跳方向正确率、反向眼跳正确率与HAMD量表得分呈显著的负相关关系(r=-0.42,p=0.02;r=-0.38,P=0.04);(6)愉快情绪面孔的首次注视持续时间(r=-0.38,P=0.03)、愉快情绪面孔的眼跳次数(r=-0.37,P=0.04)、愉快情绪面孔(r=-0.41,P=0.01)及悲伤情绪面孔(r=-0.37,P=0.03)的注视次数与HAMD量表得分呈显著的负相关,悲伤情绪面孔的首次注视时间与HAMD量表得分呈显著正相关关系(r=0.41,P=0.02),平均瞳孔直径指标与HAMD量表得分呈显著的正相关(r=0.6,P≤0.001)。结论:老年抑郁症患者在注视点稳定任务、朝向眼跳与反向眼跳、自由观看简单眼动任务中呈现特征性眼动模式,并且眼动指标差异与老年抑郁症的严重程度相关,说明眼动指标可有助于区分老年抑郁症与健康老年人,对于老年抑郁症的临床诊断具有应用价值。

维生素K2在骨代谢及线粒体损伤修复中的作用研究

骨质疏松症(Osteoporosis,OP)是一种全身性骨代谢疾病,临床表现为骨微结构恶化、骨密度下降、骨骼脆性增加和易发生骨折,严重影响了个人生活质量。骨重塑稳态失衡是OP重要的发病机制之一。selleck合成骨重塑过程主要由破骨细virus infection胞介导的骨吸收和成骨细胞介导的骨形成组成,骨吸收增加或骨形成减少都会导致骨重塑的稳态平衡被破坏,进而诱发骨质增生或OP。维生素K2具有抑制骨吸收和促进骨形成的功效,已被临床用于预防和治疗OP,但其在骨代谢中的作用较为复杂,尤其是不同侧链长度维生素K2(MK4和MK7)的功效差异及其作用机理尚不明确。此外,线粒体作为细胞的能量代谢中心,其功能障碍对OP的发生和发展有促进作用。维生素K2作为线粒体氧化呼吸链上的电子传递载体,具有抗氧化活性,但其抗氧化应激所致线粒体功能障碍的作用机理尚不清晰。为了更好地将维生素K2应用于OP的治疗中,本论文开展了维生素K2在骨代谢及线粒体损伤修复中的作用及机制研究,主要内容和结果如下:1.开展了不同侧链长度维生素K2(MK4和MK7)在骨代谢中的作用研究。通过构建成骨细胞和破骨细胞分化模型,发现MK4和MK7均能促进成骨细胞分化和抑制破骨细胞分化,但它们的作用功效存在一定差异:MK4比MK7具有更强的抑制破骨细胞分化的能力,而MK7促进成骨细胞分化的能力优于MK4。进一步在地塞米松(Dex)构建的OP大鼠模型中观察到:MK4和MK7均能增加骨小梁数目、厚度和骨密度,降低骨小梁分离度,抵御Dex诱导的骨损伤;但MK7主要促进骨形成,MK4主要抑制骨吸收。分别对MK4和MK7在骨代谢中的作用机理进行研究,发现:(1)转录组测序结果显示,IL-6在MK4抑制的破骨细胞分化中发挥重要作用。体内外实验结果表明,MK4显著抑制了 IL-6的表达,干扰了 RANK与TRAF6间的相互作用。表明MK4抑制破骨细胞分化的作用机制,可能是通过抑制IL-6的表达来减弱RANK与TRAF6间的相互作用,进而抑制NFATc1的表达;(2)MK7通过促进LC3AI向LC3ACell Cycle抑制剂Ⅱ的转化以及抑制p62的表达,增加了细胞自噬水平。且自噬抑制剂(3-MA)能够抑制MK7对成骨细胞分化和矿化的促进作用,表明MK7促进的骨形成对细胞自噬有很强的依赖性。转录组测序结果显示,MK7参与调控PI3K/AKT信号通路。体内外实验结果表明,MK7抑制了 AKT和mTOR蛋白的磷酸化水平,提示MK7对细胞自噬的促进作用可能与对mTOR信号传导的抑制有关。2.探究了 MK7修复线粒体损伤的作用机理。通过建立6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的线粒体损伤细胞模型,发现MK7可有效清除由6-OHDA诱导产生的活性氧(ROS),恢复线粒体膜电位,抑制细胞凋亡。进一步的机制研究发现,MK7可通过维持线粒体质量控制环的正常运行,实现对线粒体损伤的修复:一方面,MK7通过抑制6-OHDA引起的线粒体异常融合和分裂,促进了线粒体形态和数量的动态平衡;另一方面,MK7通过促进线粒体自噬和生物发生,加速了对损伤和功能失调线粒体的清除,维持了线粒体的稳定运转和能量供应。3.研究了真菌疏水蛋白(HGFI)对MK7性能的提升作用。利用HGFI修饰疏水性MK7,获得了亲水性HGFI-MK7纳米颗粒,揭示了 HGFI是以物理吸附的方式自组装在MK7纳米颗粒表面。并在体外细胞实验中发现,HGFI-MK7纳米颗粒可显著提高MC3T3-E1细胞的碱性磷酸酶活性以及骨保护素相对含量,强化了 MK7对成骨细胞分化的促进能力。

G-四链体对非洲猪瘟病毒E165R基因的表达调控研究

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引发的猪急性传染病,具有传播速度快、致死率极高和防控困难的特点,给我国养猪业造成巨大经济损失,被列为一类疫病。但是目前针对该病尚缺乏有效的疫苗和药物。ASFV是一种双链DNA虫媒病毒,编码60种以上的结构蛋白和100余种非结构蛋白。其中非结构蛋白E165R具有三磷酸脱氧尿苷酶(d UTPase)功能,在病毒复制中提供能量,对ASFV复制具有重要作用。G-四链体(G4)是一种由富含鸟嘌呤碱基的DNA或RNA形成的特殊核酸二级结构,该结构普遍存在于真核生物、原核生物以及病毒基因组上,在DNA复制、基因转录和蛋白表达等方面发挥着重要调控作用。越来越多的研究报道G4结构调控病毒复制,成为潜在的抗病毒靶点。本研究通过生物信息学分析发现E165R基因的蛋白编码区(CDS)存在一段富含鸟嘌呤的序列,预测能够形成G4结构。为了在实验上验证G4结构形成,本论文首先合成E165R基因富含G序列及其突变序列E165R-G4和E165R-G4M并采用丙烯酰胺凝胶电泳和CD鉴定G4结构形成。结果显示,在含有尿素的变性胶中G4和G4M有相同的迁移率,而在非变性胶中G4因为形成结构更加紧凑有着更快的迁移率。CD实验结果显示,含K~+的G4在240 nm处存在负峰,在260 nm存Ischemic hepatitis在正峰,这是平行型G4结构的典型现象,含K~+的G4因为有阳性离子存在结构更加稳定从PCI-32765而现象更明显。为进一步验证结构形成利用G4特异性小分子稳定剂NMM进行荧光分析实验,结果显示,在K~+存购买diABZI STING agonist在下的G4结构其NMM的荧光更强,Li~+存在的G4和G4M荧光信号相对更弱。这些结果说明E165R基因的G4结构能在体外形成。本论文接下来研究G4稳定剂PDS和TMPyP4是否能结合并稳定G4结构。将DNA与不同浓度稳定剂结合进行荧光能量共振转移(FRET)实验,结果表明随着稳定剂的增加,打开G4结构所需的能量越来越高,这说明PDS和TMPyP4能够提高G4结构的热稳定性。Taq酶延伸阻滞实验结果表明,PDS和TMPyP4稳定G4结构阻碍了Taq酶在DNA模板上延伸。本论文接下来研究E165R基因形成的G4结构的生物学功能。借助G4结构抗体BG4通过免疫荧光实验证实E165R-G4能在细胞内形成G4结构。通过将G4和G4M序列分别插入GFP蛋白起始密码子后面构建G4-WT-GFP和G4-MUT-GFP质粒。流式细胞术和细胞荧光检测结果表明PDS和TMPyP4抑制了GFP蛋白的表达。接着为了研究G4对E165R基因表达的影响,在E165R基因后插入FLAG标签构建了E165R-FLAG质粒。WB和RT-q PCR实验结果表明E165R蛋白受G4结构影响被抑制但m RNA水平没有变化,这表明G4稳定剂不影响蛋白的转录。接着本论文合成了E165R-G4的RNA序列,CD和NMM荧光开启实验证实该序列能够形成稳定的平行型RNA G4结构。上述结果表明ASFV E165R基因能够形成RNA G4结构,并且G4稳定剂PDS和TMPyP4能够通过该结构调控E165R基因的表达。本论文发现E165R基因的富含G序列能够在体外及细胞内形成G4结构,G4稳定剂PDS和TMPyP4能够结合并且稳定G4结构。进一步研究发现G4稳定剂通过影响转录后阶段调控E165R基因表达。该发现阐明了G4结构对E165R基因表达的调控机制,为防控ASFV提供了新思路。

青海草原毛虫转录组分析及SSR位点开发

青海草原毛虫(Gynaephoraqinghaiensis )是青藏高原牧区重要的害虫之一。本研究采用IlluminaHiVorinostat浓度SeqTM2000高通量测序平台对青海草原毛虫成虫和4龄幼虫进行转录组测序,在此基础上筛选其微卫星(Singlesequencereperts,SSR)位点并挖掘微卫星引物。本研究共获得633Talazoparib IC5035条unigenes,有12 597个微卫星位点分布于9 851条unigenes中。通过KOG,GO注释和KEGG通路数据库分析发现,unigenes注释主要集中于一般功能预测、细胞进程和碳水化合物代谢过程。SSR重复类型主要为单核苷酸和二核苷Integrative Aspects of Cell Biology酸重复,(A/T)_(n)是单核苷酸重复中最主要的基元类型,占总SSR位点的71.37%,(AC/GT)_(n)为二核苷酸重复的优势基元,占总SSR位点数的6.06%,且SSR数量随重复次数增加而降低,重复次数类型随基元序列长度增长而减少。利用Primer 3软件设计出2714对青海草原毛虫SSR引物,随机挑出25对引物进行PCR验证,有11对引物扩增出目的DNA片段。本研究基于转录组数据成功筛选出青海草原毛虫微卫星位点,为进一步研究其种群遗传学和发生动态提供数据支撑。

玉米成花素基因ZCN8启动子编辑研究

玉米是全球重要的粮食作物之一,它起源于墨西哥南部由大刍草驯化而来,是一种对光周期敏感的作物。玉米光周期作为玉米生育期中一个重要的性状,对其进行针对性调控已成为玉米性状改良中的一大plant synthetic biology热点。在先前的研究中,已经表明玉米开花受多种基因和元件共同调控,是一种非常复杂的反应机制,并且在这些基因中—ZCN8是一种已被证明的参与玉米花期调控途径中的重要基因,并且有研究结果证明在ZCN8基因的启动子区域存在着调控早花的关联位点,这为本实验提供了思路。本实验在ZCN8基因的启动子区域设计了12个靶点进行基因编GSKJ4体外辑,旨在筛选出对玉米开花最有影响的编辑位点。同时对本研究使用的多荧光共混合农杆菌介导遗传转化效率进行评估,测评多载体转化实施的可行性。本研究获得的结果如下:1.多荧光标记的多个基因编辑载体混合转化的方案更多能够通过减少遗传转化次数,获得更多的转化体和更为丰富的基因编辑类型。2.通过启动子编辑实现对ZCN8基因的微调来精准调控开花是可行且有效的,通过启动子编辑获得了两个晚花的基因型。3.在六倍体小麦中影响花期的Sp1光敏元件在调控ZCN8表达量中起到了重要的作用,推测为与开花相关的重要元件。4.赤霉素合成的相关元件的缺失会在长日照条件下严重影响植株的株高。

曲霉菌Aspergillus salwaensis致脊柱感染1例

报道1例Aspergillus salwaensis致脊柱感染及实验室检测。采集2020年6月17日承德医学院附属医院收治的1例脊柱感染患者的炎性肉芽、坏死组织标本进行镜检、培养,对分离得到的菌株进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ion确认细节ization time-of-flight mass spectrometry, MALDI-TOF-MS)鉴定、Tissue Slides分子鉴定及体外抗真菌药敏试验。患者女,62岁,临床表现以无明显诱因反复胸背部疼痛为主,初步诊断脊柱感染,左氧氟沙星治疗7 d效果不佳,行胸椎PF-6463922体内实验剂量后路病灶清除术治疗,组织标本镜下可见真菌菌丝,分离到的菌株无典型结构,经MALDI-TOFMS多次鉴定均无结果,氟康唑治疗7 d后病情好转,胸背部疼痛较术前减轻,予出院,门诊随诊。后通过内转录间隔区(internal transcribed spacer, ITS)序列分析确定该菌为Aspergillus salwaensis,立即与临床医生沟通,联系患者将抗真菌药物更换为伏立康唑,术后1年随访患者自觉恢复良好,术区无疼痛,脊柱活动正常。对于无明显诱因的腰背部疼痛且常规抗生素治疗效果不佳的患者应考虑到脊柱真菌感染的可能。直接涂片报告镜检结果对临床抗菌药物的选择有重要意义。对于此类罕见的丝状真菌,菌落形态和镜下形态均不太典型、质谱鉴定不出结果时,采用ITS序列分析等分子生物学方法有助于尽早鉴定出真菌种类,提高鉴定速度。

微波真空冷冻干燥对酸菜风味的影响

该文采用微波真空冷冻干燥技术对酸菜进行加工,研究了不同微波功率和真空度对酸菜中呈味物质(有机酸、5′-核苷酸和游离氨基酸)的影响,并分析了酸菜的滋味活性值和等鲜浓度值。结果表明,经干PF-03084014体外燥后有机酸和5′-核苷酸含量增加,提高微波功率和真空度均可以使2种物质含量增加;干燥加工导致酸菜中游离氨基酸含量降低,但在酸菜游离氨基酸中占主要成分的酸味氨基酸含量增加,而苦味氨基酸和甜味氨基酸含量降低,干燥使酸菜的特VX-765 IC50征性风味更加明显;酸菜的滋味活性值和等鲜浓度值经干燥处理后均显著增高,且酸菜的等鲜浓度值随着微波功率的升高呈现先升高后降低的趋势,而Immune receptor随着真空度的升高则不断升高,结果表明在较高的真空度条件下对酸菜进行微波真空冷冻干燥对酸菜的鲜味有积极影响。该研究对解决酸菜质量不稳定以及贮运消耗较大等问题有积极帮助,并提升了酸菜的附加值,扩大了酸菜的应用范围。