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目的 探讨麻杏苇茎汤联合阿奇霉素对肺炎患儿氧化应激水平的影响。方法 选取2022年1月—2023年1月期间海南省中医院收治的支原体肺炎患儿94例作为研究https://www.selleck.cn/products/byl719.html对象，按随机数字表法分为对照组和观察组，每组各47例。对照组给予阿奇霉素治疗，观察组在对照组基础上联合麻杏苇茎汤治疗。治疗2周后，观察比较两组患儿临床疗效、不良反应发生情况，治疗前后中医症状积分、氧化应激指标[超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)、髓过氧化物酶(Myeloperoxidase, MPO)、丙二醛(Malondialdehyde, MDA)]水平、炎症因子[干扰素-γ(Interferon-γ,INF-γ)、超敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein, hs-CRP)、降钙素原(Procalcitonin, PCT)]水平。结果 治疗后观察组总有效率91.49%(43/47)高于对照组7Stress biology6.60%(36/47),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患儿中医症状积分均较治疗前降低，差异有统计学意义(P<0.05);且观察组低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患儿SOD水平较治疗前升高，MPO、MDA水平均较治疗前降低，差异有统计学意义(P<0.05);且观察组SOD水平高于对照组，MPO、MDA水平低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患儿INF-γ水平较治疗前升高，hs-CRP、PCT水平均较治疗前降低，差异有统计学意义(P<0.05);且观察组INF-γ水平高于对照组，hs-CRP、PCT水平低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。治疗期间，观察组不良反应总发生率14.89%(7/47)明显高于对照组6.38%(3/47),差异无统计学意义(P>0.05)。结论 麻杏苇茎汤联合阿奇霉素对肺炎患儿购买BLZ945有较好疗效，可明显改善临床症状，减轻其氧化应激及炎症水平，同时安全性较高。

梨火疫病作为一种危害性强、爆发速度快的检疫性细菌病害,已导致新疆部分地区的梨、苹果等水果产业损失严重。花期是防治该病害最适宜的时期,化学防治是目前阻断其扩展的最有效途径之一。随着农用链霉素、叶枯唑等传统细菌性杀菌剂被停用,铜制剂在梨树花期使用易产生药害,春雷霉素成为防治梨火疫病的主要药剂之一。春雷霉素易光解导致有效利用率低,影响了其在生产中大规模使用。本研究以春雷霉素(KSM)为模式农药,以沸石咪唑骨架材料为载体,制备了p H智能响应性春雷霉素复合纳米材料,并应用于花期防治梨火疫病。主要研究结果如下:(1)利用室温搅拌合成法使Zn~(2+)与4-甲基咪唑-5-甲醛上的N原子发生配位反应合成沸石咪唑骨架材料(ZIF-93),通过ZIF-93上的醛基与KSM的氨基共价偶联生成希夫碱键,使KSM成功接枝到ZIF-93纳米粒子表面上,制备出KSM@ZIF-93纳米材料。通过SEM、FTIR、XRD、TGA、Zeta电位分析和粒径分析等方法和手段对制备的KSM@ZIF-93纳米Deep neck infection材料的结构进行表征和分析,结果表明含氨基的春雷霉素通过希夫碱反应成功接枝到ZIF-93纳米粒子表面上,新型纳米缓释剂金属骨架完整,具有良好的稳定性,粒径大小约为(63.93±11.19)nm,春雷霉素负载率为2.5%。(2)为了了解KSM@ZIF-93纳米材料的缓释性能,进行了控释动力学行为研究和光稳定性特性研究。控释动力学行为研究表明,KSM@ZIF-93纳米材料表现出不同的p HLEE011响应性能,KSM@ZIF-93纳米材料中KSM的累积释放率与p H呈负相关,表明KSM@ZIF-93纳米材料具有良好的酸响应释放效应。光稳定性特性研究表明,KSM@ZIF-93纳米材料比KSM具有更优异的光稳定性,在紫外光下的降解效率比KSM更低,表明KSM@ZIF-93纳米材料可以降低紫外光辐射对KSM的降解作用,增强了KSM的光稳定性,这为延长KSM在自然环境中的药效提供了可能。(3)探究了KSM@ZIF-93纳米材料防控梨火疫病效果。室内抑菌试验结果表明,PD-0332991体外KSM@ZIF-93纳米材料在200 mg/L时可完全抑制梨火疫病菌的生长,其抑菌活性显著高于ZIF-93和KSM;田间药效试验表明,当施药浓度为200 mg/L时,KSM@ZIF-93纳米材料对梨火疫病害的防治效果为(75.19±3.63)%,显著高于ZIF-93[(57.06±0.94)%]和KSM[(63.70±1.96)%]的防治效果;花粉萌发试验表明,KSM@ZIF-93纳米材料在200 mg/L时对梨花粉萌发无影响,表明KSM@ZIF-93在200 mg/L浓度下也能够应用于花期防治梨火疫病,这对于花期防治梨火疫病害具有重要意义。综上所述,KSM@ZIF-93具有完整的金属骨架结构,良好的分散性和稳定性,能够有效降低紫外辐射对KSM的降解率;具有优异的p H响应性能,能够同时释放KSM和Zn~(2+)达到协同抗菌作用;同时,良好的植物安全性为花期用药提供了可能,对花期防治梨火疫病具有重要的意义。

肠道是断奶仔猪发生应激反应的核心器官,各种饲养环境的应激条件都会造成仔猪肠道发生炎性损伤。而饲养环境中的许多细菌和病毒是仔猪发生肠rickettsial infections道炎症损伤和腹泻的重要因素,其中产肠毒素型大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)是主要的病因之一。牛磺酸具有抗炎、抗菌、抗氧化、以及提高动物免疫力等丰富的生物学功能,可以有效保护断奶仔猪肠道健康。本试验通过在饲粮中添加牛磺酸来研究其对ETEC所致断奶仔猪肠道炎症的作用,为牛磺酸在预防此网站仔猪肠道炎症和保护仔猪肠道健康提供理论依据。试验选用36头28±3日龄、体重相近的“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪。分为4个组,每组3个重复,每个重复3头猪。牛磺酸组(T)和牛磺酸预防组(MT)在饲粮中添加0.3%的牛磺酸;对照组(C)和模型组(M)正常饲喂。预饲期3天后进行正式试验(21天),在正式试验的第8-10天M和MT组连续灌服10 m L菌液浓度为10~9CFU/m L的ETEC,C和T组灌服等量的无菌液体培养基。研究结果如下:(1)ETEC生长活性:0.3%的牛磺酸可抑制ETEC的生长速度,且缩短细菌对数生长期,使细菌更快进入稳定期。(2)仔猪生长性能:与C组相比,M组中ADFI和ADG显著降低(P<0.05),F/G显著升高(P<0.05);与M组相比,MT组中ADFI和ADG显著升高(P<0.05),F/G显著降低(P<0.05)。(3)仔猪空肠形态学:与C组相比,M组的绒毛出现破损、断裂,结构不完整,而MT组与M组相比,其破损结构明显改善,层次和隐窝等结构较为完整。与C组相比,M组的VL和VL/CD显著降低(P<0.05),CD显著升高(P<0.05);与M组相比,MT组的VL和VL/CD显著升高(P<0.05),CD显著降低(P<0.05)。(4)血清生化指标:与C组相比,M组仔猪血清中的IL-6和IL-1β含量显著提高(P<0.05),IL-10的含量显著降低(P<0.05);与M组相比,MT组中IL-6和IL-1β含量显著降低(P<0.05),IL-10的含量显著升高(P<0.0Dinaciclib浓度5)。(5)ETEC毒力因子:与C组相比,M组中ST和F4(K88)的含量均显著升高(P<0.05),与MT组相比,MT组中ST和F4(K88)的含量均显著降低(P<0.05)。(6)空肠组织炎性因子m RNA水平:与C组相比,M组IL-6、IL-1β的m RNA水平显著升高(P<0.05),IL-10的m RNA水平显著降低(P<0.05);与M组相比,MT组IL-6、IL-1β的m RNA水平显著降低(P<0.05),IL-10 m RNA的水平又显著升高(P<0.05)。(7)TLR4/NF-κB通路:与C组相比,M组TLR4、My D88、NF-κB p65的m RNA水平和蛋白表达量均显著升高(P<0.05),与M组相比,MT组中TLR4、My D88、NF-κB p65的m RNA水平和蛋白表达量均显著降低(P<0.05)。(8)EMT相关因子m RNA水平:与C组相比,M组中E-cadherin m RNA的水平显著降低(P<0.05),而β-catenin和Snail、Twist、Smad的m RNA水平显著升高(P<0.05);与M组相比,MT组中E-cadherin的m RNA的水平又显著升高(P<0.05),β-catenin和Snail、Twist、Smad的m RNA的水平显著降低(P<0.05)。(9)肠道机械屏障基因m RNA水平:与C组相比,M组中Claudin、Occludin和ZO-1m RNA的水平显著降低(P<0.05);而MT组中Claudin、Occludin和ZO-1 m RNA的水平显著升高(P<0.05)。综上所述,ETEC可激活TLR4/NF-κB信号通路,促进肠道炎性因子的释放,并诱导肠道发生上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT),进而促进ETEC对仔猪小肠的粘附,破坏肠道屏障的完整性,加剧仔猪肠道炎症。而在饲粮中添加0.3%的牛磺酸可通过影响TLR4/NF-κB通路的关键因子来调控EMT的发生,进而缓解肠道炎性损伤,加强肠道屏障功能,维护断奶仔猪肠道健康。

幽门螺杆菌（helicobacter pylori,Hp）感Liproxstatin-1染会导致多种消化道疾病，胃癌患者中感染率达90%，给临床带来巨大的困扰，既往将关注点更多地放在抗生素、益生菌、铋剂等角度出发调整治疗方案，但根除幽门螺杆菌的疗效仍有下降趋势。目前，抑酸制剂的选择也将是临床寻找新方案的Adenovirus infection突破点，抑酸制剂为抗生素杀菌提供合适的酸碱度环境，并可以降低药物最低抑菌浓度（MIC），在灭菌过程中至关重要。因此，从抑酸药物角度出发，可能成为临床根除幽门螺杆菌的新的突破点，在根除率较高的同时，减少患者的不良反应，增强患者的依从性及降低患者的经济负担。本文从药物因素（抑酸制剂、抗生素、铋剂）对根除幽门螺杆菌的影响进行综述，重点概述新型抑酸制剂钾离子竞争性阻滞剂（P-CABs）可以克服质子泵抑制剂（PPIBaricitinib分子量）局限性的特点，并探讨其可行的方案，旨在为临床治疗提供新的思路。

伤口处细菌感染严重威胁着人类健康,成为临床面临的重大挑战。抗生素的滥用导致细菌产生耐药性,开发针对细菌感染的新型抗菌物质具有重要意义。碳量子点(CQD)是粒径小于10 nm的碳粒子,具有优异的生物相容性,研究表明以一些药物为原料制备出的碳量子点,仍表现出优异的抗菌活性且能有效避免耐药菌的产生,在提高细菌感染性疾病治疗效率方面具有潜在Gefitinib-based PROTAC 3化学结构的应用价值。本课题以化学-物理双交联法构建一种基于碳量子点掺杂的具有促进伤口愈合功能的双网络水凝胶,用于感染伤口的治疗。本研究以硫酸卡那霉素为原料通过水热法制备硫酸卡那霉素碳量子点(CQDKN),由CQDKN、重组胶原蛋白(HLC)及氧化葡聚糖(ODex)通过席夫碱反应形成水凝胶的第一层网络,由聚乙烯醇(PVA)通过反复冷冻-解冻法形成水凝胶的第二层网络,从而制备出CQDKN双网络水凝胶。对CQDKN双网络水凝胶的理化性能、体外生物相容性、抗菌性及促伤口愈合性能进行表征及评价。具体结果如下:(1)CQDKN的制备及表征:通过透射电子显微镜、X射线粉末衍射仪、马尔文粒度仪、紫外分光光度计及荧光分光光度计对CQDKN进行表征。结果显示:通过水热法成功制备出了具有荧光性能的CQDKN。(2)CQDKN双网络水凝胶的制备及表征:制备不同碳量子点含量的CQDKN双网络水凝胶,探究碳量子点含量对水凝胶的孔隙结构、溶胀率、保水性能的影响。结果显示:CQDKN的含量越高,CQDKN双网络水凝胶的孔隙越小,溶胀率越小,保水性能越好。(3)CQDKN双网络水凝胶的体外生物学性能评估:通过血液相容性实验、活/死细胞染色实验、细胞划痕实验、细胞毒性实验探究了水凝胶的细胞相容性;结果显示:CQDKN双网络水凝胶血液相容性良好,无细胞毒性并且可以促进细胞的增殖与迁移。(4)CQDKN双网络水凝胶的抗菌性能评估:通过对硫酸卡那霉素及CQDKN进行最小抑菌浓度(MIC)测试探究了二者对细菌的抗耐药性;通过细菌共培养实验探究CQDKN双网络水凝胶resolved HBV infection的抑菌性能。结果显示:与硫酸卡那霉素相比,CQDKN不易使细菌产生耐药性并且CQDKN双网络水凝胶对大肠杆菌(E.coli)及金黄色葡萄球菌(S.aureus)均具有一定的抑菌效果。(5VE-822 NMR)CQDKN双网络水凝胶促感染伤口愈合性能评估:建立大鼠感染伤口模型,通过革兰氏染色实验、苏木精-伊红染色实验、Masson染色、免疫组化实验和免疫荧光实验评价CQDKN双网络水凝胶的促伤口愈合性能。结果显示:CQDKN双网络水凝胶可减少伤口炎症,促进胶原沉积,加速感染伤口愈合。综上所述,该CQDKN双网络水凝胶不仅具有抗菌和抗耐药性,并且其生物相容性良好可促进感染型伤口愈合,在伤口敷料领域具有广阔的应用前景。

背景糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)是糖尿病主要的微血管并发症之一,是导致终末期肾脏病(end stage renal disease,ESRD)的重要原因,这将造成沉重的家庭和社会负担。因此,积极探索DKD发生与发展的机制,制定有效的防治策略,是当前医学界所面临的重大挑战。足细胞是位于肾小球基底膜(glomerular basement membrane,GBM)外侧的一种终末分化脏层上皮细胞,在蛋白质滤过以及GBM成分更新等方面发挥举足轻重的作用。当足细胞受损时,足突出现广泛收缩、融合和减少,肾小球滤过屏障完整性遭到破坏并引发蛋白尿;而蛋白尿又进一步加重足细胞结构和功能异常,加速肾小球硬化。线粒体是维持细胞正常功能不可或缺的细胞器。而肾小球足细胞作为终末分化细胞,需要大量能量以维持其生物学功能。研究表明,线粒体功能障碍是DKD进展中的关键环节,是足细胞损伤的早期事件,但目前关于DKD足细胞线粒体功能障碍的具体机制尚未阐明。同时,越来越多的流行病学和临床前证据显示,DKD过程中趋化因子、粘附分子、促炎细胞因子及转录因子等相关炎症分子大量聚积,最终可导致肾小球硬化、肾小管萎缩和肾脏纤维化。值得注意的是,炎症反应与线粒体功能息息相关,线粒体不仅可以介导炎症反应,也可直接作用于炎症介质。然而,DKD期间足细胞线粒体损伤和炎症反应的具体机制仍不清楚,有待于深入研究予以揭示。长链非编码RNA(long non-coding RNAs,lncRNAs)是一组最小长度为200个核苷酸的转录本,且无法被翻译成蛋白质。现已知lncRNAs可以通过多种方式发挥生物学功能,包括顺式或反式调控转录、组织细胞核结构域以及直接调控蛋白质或RNA分子等。其中,长链非编码RNA浆细胞瘤变异易位1(plasmacytoma variant translocation 1,PVT1)位于人类染色体 8q24.21 区域。近年来多项研究发现,PVT1可通过降低肾脏滤过功能,导致肾脏疾病进展和肾功能衰竭;且PVT1与DKD显著相关,可增加DKD患者进展至ESRD的机率。上述研究提示,PVT1可能在DKD的发生发展中起重要作用,但具体机制有待进一步研究。因此,本研究以足细胞线粒体功能障碍和炎症反应为靶点,以临床病人生物样本、人足细胞系及足细胞特异性基因敲除小鼠为研究对象,观察PVT1及其靶向蛋白在DKD足细胞线粒体损伤和激活炎症反应中的核心作用,这将为阐明DKD发病机制提供新的视点。第一部分:PVT1参与DKD足细胞线粒体损伤及炎症反应目的:1、明确PVT1在DKD患者血浆及肾脏组织中的表达改变,以及PVT1表达量与DKD患者病程进展的相关性。2、明确PVT1在DKD小鼠肾脏组织中的表达改变。3、明确DKD小鼠发生足细胞线粒体功能紊乱及炎症反应。4、探讨调控PVT1对高糖环境下足细胞线粒体损伤及炎症反应的影响。方法:1、检测DKD患者生物样本中PVT1的表达以及炎症因子水平本研究共纳入47例DKD患者及25例健康成年人:①收集入组人群性别、年龄等基本资料及血糖、血脂、肾功能等生化指标;②收集入组人群的血浆及肾脏组织生物样本,real-time PCR检测血浆及肾脏组织中PVT1的表达丰度;③RNA 荧光原位杂交技术(RNA fluorescence in situ hybridization,RNA-FISH)联合免疫荧光技术检测PVT1在人肾脏肾小球中的定位及表达;④Spearman’s相关系数分析PVT1表达量与DKD患者的血肌酐(serum creatinine,Scr)和尿白蛋白肌酐比值(albumin/creatinine ratio,ACR)的相关性;⑤酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测 DKD 患者及健康对照组血浆中炎症因子的水平。2、构建DKD小鼠模型,检测小鼠肾脏组织中PVT1的表达随机将小鼠分为STZ组与CTL组,进行后续实验:①STZ组采用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)注射法构建DKD小鼠模型,腹腔注射无菌柠檬酸缓冲液作为对照组(control,CTL);②DKDselleck HPLC模型构建成功后6W、8W、12W和20 W处死小鼠并取肾脏组织,real-time PCR检测小鼠肾脏组织中PVT1的表达丰度;②20 W时,RNA-FISH联合免疫荧光技术检测PVT1在小鼠肾小球中的定位及表达。3、检测DKD小鼠肾脏损伤DKD模型构建成功后20 W:①PAS及Masson染色观察肾小球病变情况;②透射电镜观察肾小球形态学改变。4、检测DKD小鼠线粒体损伤及炎症反应DKD模型构建成功后20 W:①透射电镜观察肾小球足细胞线粒体形态学改变;②提取小鼠原代足细胞,线粒体耗氧率(O2consumptionrate,OCR)实验检测小鼠原代足细胞的线粒体功能;③real-time PCR检测小鼠肾脏组织中线粒体编码基因和氧化磷酸化(oxidative phosphorylation,OXPHOS)基因以及炎症因子水平。5、调控PVT1对高糖环境下足细胞线粒体损伤及炎症反应的影响培养人足细胞系:①足细胞特异性PVT1 ASO载体构建、转染及敲低效率鉴定后,将细胞分为低糖组(low glucose,LG)、高糖组(high glucose,HG)、HG+PVT1 ASO组以及HG+NC组;②RNA-FISH检测PVT1在上述四组足细胞中的定位及表达情况;②OCR实验检测上述四组足细胞的线粒体功能;③MitoSOX荧光染料检测上述四组足细胞线粒体活性氧(mitochondrial reactive oxygen species,mtROS)水平;④real-time PCR检测上述四组足细胞中炎症因子水平。结果:1、DKD患者生物样本中PVT1的表达以及炎症因子水平临床资料显示,DKD患者与对照组人群无年龄、性别差异,且两组在总胆固醇(total cholesterol)和低密度脂蛋白(LDL-c)方面无统计学差异。DKD患者的糖化血红蛋白(HbA1c)、ACR、Scr、尿素氮(BUN)以及甘油三酯(triglycerides)水平均高于对照组,eGFR水平则较对照组明显下降,差异具有统计学意义。与对照组相比,PVT1在DKD患者血浆及肾脏组织中的表达显著升高。且PVT1表达量与DKD患者Scr水平呈正相关(R=0.318,p=0.029),与患者ACR值亦呈正相关(R=0.535,p<0.01),差异具有统计学意义。此外,ELISA实验显示与对照组相比,DKD患者血浆中TNF-α的水平显著增加。2、PVT1在DKD患者及小鼠肾小球中的定位RNA-FISH联合免疫荧光显示,PVT1与肾小球足细胞特异性标志蛋白podocin存在共定位,提示PVT1主要在DKD患者及小鼠肾小球足细胞中表达,且在胞浆及胞核内均有分布。与对照组相比,DKD患者及小鼠肾小球足细胞蛋白podocin荧光强度明显下降,伴随PVT1荧光强度显著增加。3、PVT1在DKD小鼠肾脏组织中的表达动物实验中,real-time PCR实验显示DKD建模成功后6 W,CTL小鼠和STZ小鼠肾脏组织中PVT1的表达水平无显著差异,而随着病情进展,8 W后STZ小鼠肾脏组织中PVT1表达量显著增加。4、DKD小鼠发生肾脏损伤动物实验中,PAS染色显示DKD建模成功后20 W,与CTL组相比,STZ组肾小球区域明显存在基质扩张、系膜增生和动脉毛细血管狭窄。Masson染色显示STZ小鼠肾小球中存在明显的炎性细胞浸润和轻度胶原纤维化。透射电镜显示与CTL组相比,STZ小鼠足细胞足突发生广泛减少、收缩和融合,伴有明显的GBM增厚。5、DKD小鼠发生足细胞线粒体损伤及炎症反应动物实验中,透射电镜显示DKD建模成功后20 W,与CTL组相比,STZ组肾小球足细胞线粒体结构发生改变,表现为线粒体肿胀、碎裂及空泡化,线粒体嵴模糊甚至消失等。OCR实验显示与CTL小鼠相比,STZ小鼠原代足细胞的线粒体功能受损,表现为基础呼吸、最大呼吸以及备用呼吸能力均下降,ATP生成减少。Real-time PCR显示与CTL组相比,STZ小鼠肾皮质中线粒体编码基因和 OXPHOS 基因(mt-Col、mt-Rnr2、mt-Nd6、mt-Cytb、Cox4、Uqcrc2、Ndufb8和 Sdhb)以及线粒体转录因子 A(mitochondrialtranscriptionfactor A,Tfam)转录水平显著降低,STZ小鼠肾皮质中炎性细胞因子Il-6、Tnf-α和Cxcl10的表达明显增加。6、调控PVT1对高糖环境下足细胞线粒体损伤及炎症反应的影响细胞实验显示,PVT1在足细胞胞浆及胞核中均有分布,且与LG相比,HG组足细胞中PVT1表达量明显增加。OCR实验显示HG组足细胞线粒体功能受损,表现为基础呼吸、最大呼吸以及备用呼吸能力均下降,伴随ATP合成明显减少和mtROS产出增加。Real-time PCR显示高糖刺激下足细胞中Il-6、Tnf-α和Cxcl10的水平明显增加。转染PVT1 ASO载体特异性敲低其表达后,上述现象均得到明显逆转。结论:1、PVT1在DKD患者血浆及肾脏组织中的表达升高,其表达丰度与DKD患者病Biomass estimation程进展具有相关性。2、PVT1在DKD小鼠肾脏组织中表达升高。3、DKD小鼠疾病进展中伴随有足细胞线粒体功能紊乱及炎症反应的发生。4、抑制PVT1的表达可改善高糖环境下足细胞线粒体损伤及炎症反应。第二部分:PVT1调控TRIM56参与高糖环境下足细胞线粒体损伤及炎症反应的分子机制目的:1、探究高糖条件下PVT1表达量升高的分子机制。2、阐明足细胞发生线粒体损伤及炎症反应的核心环节。3、探究PVT1靶向下游蛋白TRIM56参与高糖环境下足细胞线粒体损伤及炎症反应的分子机制。4、阐明TRIM56调控AMPKα泛素化介导足细胞线粒体损伤及炎症反应的机制。5、探究TRIM56直接调控高糖环境下足细胞炎症反应的机制。方法:1、探究高糖条件下PVT1表达量升高的分子机制培养人足细胞系:①将细胞分为LG组和HG组,甲基化RNA免疫共沉淀(methylated RNAimmunoprecipitation,MeRIP)实验检测高糖刺激前后 PVT1 的m6A甲基化水平;②RNA-pull down实验联合Western blot实验检测与PVT1结合的蛋白;③足细胞特异性ALKBH5 siRNA(si-ALKBH5)和ALKBH5 over-expression(oe-ALKBH5)载体构建、转染及效率鉴定,real-time PCR 检测转染以上载体后足细胞PVT1表达量的改变;④将足细胞分为LG组、HG组、HG+PVT1 ASO组以及HG+NC组,使用α-鹅膏蕈碱抑制足细胞RNA生物合成,检测不同处理条件下PVT1的稳定性;⑤双荧光素酶报告基因实验检测PVT1的转录活性;⑥确定PVT1甲基化区域,构建野生型(wild type,WT)及甲基化位点突变型(mutanttype,MUT)PVT1荧光素酶报告基因质粒,进一步检测PVT1的m6A甲基化水平。2、探究高糖环境下足细胞发生线粒体损伤及炎症反应的核心环节培养人足细胞系,将细胞分为LG组、HG组、HG+PVT1 ASO组以及HG+NC组:①Western blot检测足细胞线粒体OXPHOS相关分子;②应用抗双链DNA(double-stranded DNA,dsDNA)抗体与抗Tom 20(线粒体外膜标志物)抗体进行免疫荧光共染,检测线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)的定位及表达;③real-time PCR检测足细胞胞浆mtDNA水平;④Western blot检测足细胞cGAS-STING信号通路蛋白。3、探究PVT1靶向下游蛋白TRIM56介导足细胞线粒体损伤及炎症反应的分子机制培养人足细胞系:①RNA-pull down实验联合质谱分析以及Western blot实验检测与PVT1结合的蛋白;②将细胞分为LG组、HG组、HG+PVT1 ASO组以及HG+NC组,Western blot实验检测TRIM56表达量的改变;③足细胞特异性PVT1过表达载体(oe-PVT1)载体构建、转染及效率鉴定后,Western blot实验检测TRIM56表达量的改变;④将细胞分为LG组与oe-PVT1组,使用蛋白抑制剂放线菌酮(cycloheximide,CHX)处理足细胞,Western blot实验检测PVT1过表达后对TRIM56稳定性的影响;⑤截短实验探究PVT1与下游靶蛋白TRIM56的具体结合位点;⑥足细胞特异性TRIM56 siRNA(si-TRIM56)载体构建、转染及敲低效率鉴定后,将细胞分为LG组、HG组、HG+si-TRIM56组以及HG+NC组,OCR实验检测各组足细胞线粒体功能;⑦real-time PCR检测上述四组足细胞胞浆中mtDNA的表达量。4、探讨TRIM56调控足细胞线粒体损伤及炎症反应的分子机制培养人足细胞系:①查阅BioGRID、IntAct和STRING等数据库,寻找与TRIM56互作的蛋白;②免疫共沉淀(Immunoprecipitation,IP)实验检测TRIM56与AMPKα的相互结合;③将细胞分为LG组、HG组、HG+PVT1 ASO组以及HG+NC 组,邻位连接技术(proximity ligation assay,PLA)检测 HG 及 PVT1 对TRIM56与AMPKα结合的影响;④足细胞转染si-TRIM56或过表达载体(oe-TRIM56)后,检测TRIM56对AMPKα的泛素化影响;⑤应用AMPKα抑制剂-compound C后,MitoTracker荧光染料检测线粒体形态学改变;⑥real-time PCR检测应用compound C后足细胞胞浆中mtDNA的水平;⑦Western blot实验检测应用compound C后足细胞线粒体OXPHOS相关分子以及cGAS-STING通路蛋白的表达情况;⑧使用AMPKα激动剂-AICAR后,将细胞分为LG组、HG组及HG+AICAR组,real-time PCR检测各组足细胞炎症因子水平。5、阐明TRIM56在高糖环境诱导足细胞炎症中的直接作用培养人足细胞系:①将细胞分为LG组和HG组,免疫荧光检测TRIM56与STING蛋白的定位及表达;②IP实验检测TRIM56与STING的相互作用以及TRIM56对STING蛋白泛素化的影响;③突变STING K150位点后检测STING蛋白泛素化水平和二聚体形成;④real-time PCR检测突变STING K150位点后高糖刺激对足细胞炎症因子IL-6水平的影响;⑤IP实验检测TRIM56对STING和下游效应分子TBK1结合的作用。结果:1、ALKBH5介导PVT1发生m6A去甲基化高糖条件下,足细胞PVT1与去甲基酶ALKBH5结合,在ALKBH5的作用下,PVT1发生m6A去甲基化且稳定性增加,而PVT1在转录水平未发生明显改变。高糖诱导PVT1高表达,使用si-ALKBH5载体转染足细胞后,PVT1表达量显著下降,oe-ALKBH5载体则可使PVT1表达量显著增加。此外,si-ALKBH5载体转染足细胞可明显降低PVT1野生型(WT)荧光素酶报告基因质粒的荧光强度,但不影响PVT1突变型(MUT)荧光素酶报告基因质粒的荧光强度。2、高糖刺激下足细胞线粒体受损释放mtDNA激活cGAS-STING通路Western blot实验显示与LG组相比,HG组足细胞中OXPHOS相关分子(CⅤ-ATP5A、CⅢ-UQCRC2、CⅣ-MTCO1、CⅡ-SDHB和CⅠ-NDUFB8)和TFAM分子蛋白水平显著降低,Bax水平显著升高。应用抗dsDNA抗体与抗Tom20抗体进行免疫荧光共染,结果显示高糖刺激下,足细胞线粒体外膜完整性遭到破坏,胞浆中dsDNA丰度显著升高,伴cGAS-STING通路(cGAS、STING、p-TBK1和p-p65)被激活。转染PVT1 ASO载体敲低其表达后,上述现象均得到明显逆转。3、PVT1与TRIM56相互结合RNA-pulldown实验证实PVT1与TRIM56蛋白存在相互结合关系。Western blot实验显示高糖条件下足细胞中TRIM56表达显著升高,特异性敲低PVT1后TRIM56表达下降,过表达PVT1后TRIM56表达增加。并且过表达PVT1可减缓TRIM56蛋白的降解速度,增加其稳定性。根据工具数据库预测分析,将PVT1基因分成三段截短序列分别进行富集蛋白分析,PVT1基因的649-1218 bp区域为结合TRIM56发挥功能的主要功能区段。4、抑制TRIM56对足细胞线粒体损伤及cGAS-STING通路的影响与LG组相比,HG组足细胞线粒体功能受损,表现为基础呼吸、最大呼吸以及备用呼吸能力降低,ATP生成减少,伴胞浆中mtDNA表达显著增加。同时,Western blot实验显示高糖条件下足细胞中cGAS-STING炎症通路被激活,通路相关蛋白cGAS、STING、p-TBK1和p-p65表达量明显增加。转染si-TRIM56载体特异性敲低其表达后,上述现象均得到明显逆转。5、TRIM56调控AMPKα泛素化修饰IP和PLA实验证实足细胞中TRIM56与AMPKα相互结合,与LG组相比,高糖刺激显著增强了 TRIM56与AMPKα的内源性结合,并且使用PVT1 ASO后,二者的结合水平明显下降。与LG组相比,高糖刺激下足细胞AMPKα发生泛素化修饰,过表达TRIM56后,AMPKα的泛素化水平显著增加。6、抑制AMPKα对足细胞线粒体结构和功能的作用Western blot实验显示应用AMPKα抑制剂compound C后,足细胞线粒体OXPHOS 相关分子(CⅤ-ATP5A、CⅢ-UQCRC2、CⅣ-MTCO1、CⅡ-SDHB和CⅠ-NDUFB8)、TFAM及PGC-1α蛋白水平显著降低,Bax和Drpl表达显著增加。MitoTracker染色显示高糖条件下线粒体分裂增加、融合减少,伴胞浆mtDNA的水平显著增加。7、抑制AMPKα对足细胞cGAS-STING通路及炎症反应的影响Westernblot 实验显示应用 AMPKα 抑制剂 compound C 后,cGAS-STING 炎症通路(cGAS、STING、p-TBK1 及 p-p65)被激活。Real-time PCR 显示与 HG组相比,AMPKα激动剂AICAR的使用可明显降低足细胞炎性细胞因子11-6、Tnf-α和Cxcl10的水平。8、TRIM56调控STING的泛素化直接参与足细胞炎症反应免疫荧光共染显示足细胞中TRIM56与STING相互结合,与LG组相比,高糖刺激显著增强了 TRIM56与STING的内源性结合。且高糖条件下STING K150位点的泛素化修饰介导STING二聚体形成,最终影响炎症因子IL-6的释放。同时,TRIM56的存在强化了 STING与下游效应分子TBK1的结合,并导致STING发生磷酸化。结论:1、高糖条件下,ALKBH5介导的PVT1 m6A去甲基化稳定PVT1的表达。2、高糖导致的足细胞线粒体损伤释放mtDNA进入胞浆激活cGAS-STING信号通路是引发炎症反应的核心环节。3、高糖条件下,PVT1通过抑制TRIM56蛋白降解进而增强AMPKα的泛素化修饰,导致足细胞线粒体生物合成及分裂融合异常,引发炎症反应。4、TRIM56通过调控STING的泛素化修饰直接参与足细胞炎症反应。第三部分:足细胞靶向抑制PVT1改善DKD小鼠线粒体损伤及炎症反应目的:1、探究足细胞靶向抑制PVT1对小鼠生长发育的影响。2、阐明足细胞靶向抑制PVT1对DKD小鼠肾脏损伤的影响。3、明确足细胞靶向抑制PVT1可以减轻DKD小鼠线粒体损伤及炎症反应。方法:1、构建足细胞靶向抑制PVT1小鼠构建足细胞靶向抑制 PVT1 小鼠(Nphsep2-Cr+/Pvt1+/+,Nhs2-Cre+/Pvt1fox/fox),RNA-FISH联合免疫荧光技术检测PVT1在小鼠肾小球中的敲除效率。2、DKD小鼠模型构建采用STZ注射法进一步构建DKD小鼠疾病模型(STZ-Cre+/Pvt1+/+,STZ-Cre+/Pvt1flox/flox),或腹腔注射无菌柠檬酸缓冲液作为对照组(CTL-Cre+/Pvt1+/+,CTL-Cre+/Pvt1fox/flox),造模成功后4 W至20 W检测小鼠体重、血压、血糖、ACR等指标。3、足细胞靶向抑制PVT1对DKD小鼠肾脏损伤的影响DKD小鼠模型构建成功后20 W处死小鼠并取肾脏组织:①PAS及Masson染色观察肾小球病变情况;②组织免疫荧光检测足细胞标志蛋白synaptopodin和WT-1的表达;③透射电镜观察小鼠肾小球足细胞形态学改变。4、足细胞靶向抑制PVT1对DKD小鼠线粒体损伤及炎症反应的作用DKD小鼠模型构建成功后20 W处死小鼠并取肾脏组织:①提取并培养小鼠原代足细胞,OCR实验检测小鼠原代足细胞的线粒体功能;②Western blot实验检测小鼠原代足细胞中线粒体OXPHOS相关分子;③real-time PCR检测小鼠原代足细胞胞浆中mtDNA的表达量;④real-time PCR检测小鼠肾皮质中炎症因子水平。结果:1、足细胞靶向抑制PVT1对小鼠生长发育的影响各观察时间段内,CTL-Cre+/Pvt1+/+组及CTL-Cre+/Pvt1flox/flox组体重无显著差别,自6 W起STZ-Cre+/Pvt1+/+组分别较CTL-Cre+/Pvt1+/+组显著下降,且4 W、6W、8W 及 12W 时 STZ-Cre+/Pvt1flox/flox组较 STZ-Cre+/Pvt1+/+组体重有所上升,但无统计学差异,20W时STZ-Cre+/Pvt1flox/flox组较STZ-Cre+/Pvt1+/+组体重显著上升。各观察时间段内,CTL-Cre+/Pvt1+/+组及CTL-Cre+/Pvt1flox/flox组小鼠血糖无显著差别,STZ-Cre+/Pvt1+/+组分别较CTL-Cre+/Pvt1+/+组显著增加,STZ-Cre+/Pvt1flox/flox组较STZ-Cre+/Pvt1+/+外组血糖无显著差别。各观察时间段内,CTL-Cre+/Pvt1+/+组及CTL-Cre+/Pvt1flox/flox组小鼠ACR无显著差别,自8 W后STZ-Cre+/Pvt1+/+组分别较CTL-Cre+/Pvt1+/+组显著增加,且自8W后STZ-Cre+/Pvt1flox/fox组较STZ-Cre+/Pvt1+/+组ACR 水平明显下降。各观察时间段内,四组小鼠血压水平无显著差异。2、足细胞靶向抑制PVT1对DKD小鼠肾脏损伤的影响DKD小鼠建模成功后20 W,PAS和Masson染色提示与CTL-Cre+/Pvt1+/+组相比,STZ-Cre+/Pvt1+/+组肾小球区域存在基质扩张、系膜增生、炎性细胞浸润和胶原纤维化的现象,而STZ-Cre+/Pvt1flox/flox组较STZ-Cre+/Pvt1+/+组肾小球损伤明显改善。组织免疫荧光显示PVT1敲除后,足细胞特异性标志蛋白synaptopodin和WT-1的表达回升。透射电镜显示与CTL-Cre+/Pvt1+/+组相比,STZ-Cre+/Pvt1+/+组肾小球足细胞足突广泛融合,GBM明显增厚,PVT1敲除后肾小球形态损伤减轻。3、足细胞靶向抑制PVT1对DKD小鼠线粒体损伤作用DKD小鼠建模成功后20 W,OCR实验显示与CTL-Cre+/Pvt1+/+组相比,STZ-Cre+/Pvt1+/+小鼠原代足细胞的线粒体功能受损,足细胞靶向抑制PVT1可明显改善线粒体最大呼吸和ATP生成,但基础呼吸和备用呼吸能力未有明显变化。Western blot 实验显示 STZ-Cre+/Pvt1flox/flox 组较 STZ-Cre+/Pvt1+/+组小鼠原代足细胞 OXPHOS 相关分子(CⅤ-ATP5A、CⅢ-UQCRC2、CⅣ-MTCO1、CⅡ-SDHB和CⅠ-NDUFB8)和TFAM分子蛋白水平显著增加,Bax和Drp1表达下降,并伴随足细胞胞浆中mtDNA含量下降。4、足细胞靶向抑制PVT1对DKD小鼠炎症反应的影响DKD 小鼠建模成功后 20 W,real-time PCR 显示 STZ-Cre+/Pvt1flox/flox组较STZ-Cre+/Pvt1+/+组小鼠肾皮质中炎性细胞因子11-6、Tnf-α和Cxcl10的表达显著降低。结论:1、足细胞特异性PVT1敲除小鼠构建成功。2、足细胞靶向抑制PVT1改善DKD小鼠体重下降并降低DKD小鼠蛋白尿水平。3、足细胞靶向抑制PVT1缓解DKD小鼠肾小球损伤。4、足细胞靶向抑制PVT1减轻DKD小鼠线粒体损伤及炎症反应。第四部分:足细胞靶向抑制TRIM56改善DKD小鼠线粒体损伤及炎症反应目的:1、探究足细胞靶向抑制TRIM56对小鼠生长发育的影响。2、阐明足细胞靶向抑制TRIM56对DKD小鼠肾脏损伤的影响。3、明确足细胞靶向抑制TRIM56可以减轻DKD小鼠线粒体损伤及炎症反应。4、明确TRIM56靶向AMPKα介导DKD小鼠肾脏损伤和炎症反应。方法:1、构建足细胞靶向抑制TRIM5小鼠构建足细胞靶向抑制TRIM56小鼠(Nphs2-Cre+/Trim56+/+,Nphs2-Cre+/Trim56flox/flox),免疫荧光技术和Western blot实验检测TRIM56在小鼠肾小球中的敲除效率。2、DKD小鼠模型构建采用STZ注射法进一步构建DKD小鼠疾病模型(STZ-Cre+/Trim56+/+,STZ-Cre+/Trim56flox/flox),或腹腔注射无菌柠檬酸缓冲液作为对照组(CTL-Cre+/Trim56+/+,CTL-Cre+/Trim56flox/flox),造模成功后4W 至 20 W 检测小鼠体重、血压、血糖、ACR等指标。3、探究足细胞靶向抑制TRIM5对DKD小鼠肾脏损伤的影响DKD小鼠建模成功后20 W处死小鼠并取肾脏组织:①PAS及Masson染色观察肾小球病变情况;②组织免疫荧光检测足细胞损伤标志蛋白synaptopodin和WT-1的表达;③透射电镜观察小鼠的肾小球足细胞形态学改变。4、探究足细胞靶向抑制TRIM5对DKD小鼠线粒体结构和功能的影响DKD小鼠建模成功后20W处死小鼠,提取并培养小鼠原代足细胞:①透射电镜观察原代足细胞线粒体形态学改变;②OCR实验检测小鼠原代足细胞的线粒体功能。5、明确TRIM56靶向AMPKα介导DKD小鼠肾脏损伤和炎症反应对Nphs2-Cre+/Trim56+/+和Nphs2-Cre+/Trim56flox/fox小鼠腹腔注射STZ构建DKD模型,造模成功后6W进行AICAR腹腔注射,剂量为每天0.5mg/g,持续14 W,对照组小鼠则腹腔注射PBS缓冲液。将小鼠分为STZ-Cre+/Trim56+/++AICAR 组、STZ-Cre+/Trim56+/++PBS 组、STZ-Cre+/Trim56flox/flox+AICAR 组以及 STZ-Cre+/Trim56flox/flox+PBS 组。AICAR 持续注射 14 W 后,将小鼠处死并取肾脏组织:①PAS及Masson染色观察肾小球病变情况;②组织免疫荧光检测足细胞损伤标志蛋白synaptopodin和WT-1的表达;③Wstern blot实验检测小鼠原代足细胞中cGAS-STING通路蛋白的表达。结果:1、足细胞靶向抑制TRIM56对小鼠生长发育的影响各观察时间段内,CTL-Cre+/Trim56+/+组及CTL-Cre+/Trim56flox/flox组体重无显著差别,自6 W后STZ-Cre+/Trim56+/+组分别较CTL-Cre+/Trim56+/+组显著下降,且自 6 W 后 STZ-Cre+/Trim56flox/flox组均较 STZ-Cre+/Trim56+/+组体重明显上升。各观察时间段内,CTL-Cre+/Trim56+/+组及 CTL-Cre+/Trim56flox/flox组小鼠血糖无显著差别,STZ-Cre+/Trim56+/+组分别较CTL-Cre+/Trim56+/+组显著增加,STZ-Cre+/Trim56flox/flox组较STZ-Cre+/Trim56+/+组血糖无显著差别。各观察时间段内,CTL-Cre+/Trim56+/+组及 CTL-Cre+/Tm56flox/flox组ACR 无显著差别,STZ-Cre+/Trim56+/+组分别较CTL-Cre+/Trim56+/+组显著增加,且自8W后STZ-Cre+/Trim56flox/flox组较 STZ-Cre+/Trim56+/+组 ACR 水平明显下降。2、足细胞靶向抑制TRIM56对DKD小鼠肾脏损伤的影响DKD小鼠建模成功后20W,PAS和Masson染色显示与CTL-Cre+/Trim56+/+组相比,STZ-Cre+/Trim56+/+组肾小球区域存在基质扩张、系膜增生、炎性细胞浸润和胶原纤维化的现象,而STZ-Cre+/Trim56flox/flox组较STZ-Cre+/Trim56+/+组肾小球损伤明显改善。组织免疫荧光显示TRIM56敲除后,足细胞特异性标志蛋白synaptopodin和WT-1的表达回升。透射电镜显示与CTL-Cre+/Trim56+/+组相比,STZ-Cre+/Trim56+/+组肾小球足细胞足突广泛融合,GBM明显增厚,而足细胞靶向抑制TRIM56可明显减轻肾小球足突融合。3、足细胞靶向抑制TRIM56对DKD小鼠线粒体结构和功能的作用DKD小鼠建模成功后20 W,透射电镜显示与CTL-Cre+/Trim56+/+组相比,STZ-Cre+/Trim56+/+组原代足细胞线粒体发生肿胀、碎裂和空泡化,线粒体嵴模糊甚至消失,足细胞靶向抑制TRIM56后线粒体形态破坏得到显著改善。OCR实验显示与CTL-Cre+/Trim56+/+组相比,STZ-Cre+/Trim56+/+小鼠原代足细胞的线粒体功能受损,足细胞靶向抑制TRIM56可明显改善线粒体功能,表现为基础呼吸和最大呼吸升高,ATP合成增加,但备用呼吸能力并无明显改变。4、TRIM56靶向AMPKα介导DKD小鼠肾脏损伤PAS 和 Masson 染色显示,STZ-Cre+/Trim56flox/flox与STZ-Cre+/Trim56+/+组小鼠注射AICAR后,肾小球损伤程度均较PBS组有明显改善,伴随足细胞特异性标志蛋白synaptopodin和WT-1的表达回升。5、TRIM56靶向AMPKα对DKD小鼠炎症反应的影响Western blot实验显示与PBS对照组相比,STZ-Cre+/Trim56+/+组与STZ-Cre+/Trim56flox/flox小鼠注射 AICAR 后,cGAS-STING 信号通路蛋白 cGAS、STING、p-TBK1及p-p65表达明显下降。结论:1、足细胞特异性TRIM56敲除小鼠构建成功。2、足细胞靶向抑制TRIM56改善DKD小鼠体重下降并降低DKD小鼠蛋白尿水平。3、足细胞靶向抑制TRIM56缓解DKD小鼠肾小SCH727965小鼠球损伤。4、足细胞靶向抑制TRIM56通过AMPKα介导DKD小鼠线粒体损伤和炎症反应。

目前,为缓解传统塑料降解带来的环境问题,淀粉基可降解包装材料的相关研究已成为国内外研究热点。本课题采用流延法制备了淀粉膜基质,在此基础上添加其他助剂以提升淀粉膜的性能,为日后淀粉基材料的应用研究提供理论参考。首先选用玉米淀粉(CS)为成膜基质,结合纳米TiO_2,通过超声分散采用流延法制备了可生物降解的淀粉/TiO_2纳米复合薄膜,研究了纳米TiO_2对薄膜拉伸性能selleck NMR、阻隔性能及抗菌活性的影响,采用扫描电子显微镜(SEM)、红外光谱仪(FTIR)和X射线衍射仪(XRD)对复合膜的微观形貌和结构进行了表征。结果表明,淀粉/TiO_2纳米复合膜中TiO_2与淀粉分子间存在缔合作用,含适量TiO_2的复合膜组分之间有良好的相容性,与淀粉膜相比,纳米复合膜的拉伸性能和水蒸气阻隔性能得到有效改善,含0.8%TiO_2(质量分数,下同)的纳米复合膜拉伸强度(TS)为7.54 MPa,比淀粉膜提高了53.9%,水蒸气透过系数(WVP)为5.50×10~(-5) g/(mm·d),较淀粉膜降低了23.5%,该复合膜同时表现出较好的紫外线隔离性能及抗菌活性。其次以CS为基质,添加纳米TiO_2、洛神花茶提取物(RTE)采用流延法制备出四种不同形式的复合薄膜,测定了薄膜的基础性能,比如:力学性能、阻隔性能、抗菌抗氧化活性及p H响应色变力。通过SEM、XRD、FTIR对复合薄膜的微观结构和结构进行了表征。结果表明,CS/RTE/TiO_2复合膜各组分之间通过分子间作用力形成良好的相容性系统,相比于CS/TiO_2和CS/RTE膜,CS/RTE/TiO_2膜的力学性能和水蒸气阻隔性能得到进一步地提高、CS/RTE/TiO_2复合膜断裂伸长率(E%)为51.68%,与CS/TiO_2和CS/RTE膜相比分别增加了13.41%、29.11%,同比WVP为5.86×10~(-5) g/(mm·d)分别降低了12.5%、8.5%。另外,在抗菌性、抗氧化性及p H响应色变力方面,CS/RTE/TiO_2复合膜的表现较为突出。再次对薄膜制备工艺略做修改,以p H智能响应膜为研究对象。改变糊化温度、超声时间、以及增强剂(TiO_2)和增塑剂(甘油)的添加量,分析各个变量对薄膜的厚度、TS、E%以及WVP等性能的影响。研究结果表明,加入不同含量增强剂,膜的强度和耐水性均得到改善,与淀粉膜相比,薄膜的TS最高增加了7.34%、WVP最大降低了21%,但过量增强剂对膜的力学性能会产生负面影响;随着增塑剂用量加大,膜厚度和E%明显增加,因甘油的亲水性,添加过量的甘油会使膜TS和耐水性整体变差;糊化温度与膜厚度epigenetic stability和TS成正比,100℃时TS达最大11.03 MPa,但过高温度并不利于膜的E%和WVP,90℃时膜WVP达最低5.24×10~(-5)g.Liproxstatin-1 MWmm~(-1).d~(-1);超声处理时间延长,能够提高薄膜的TS和水蒸气阻隔性能,超声处理后的薄膜比淀粉膜TS可以增加129%-171%、WVP可以降低26.1%,但膜的柔韧性会变差。

溃疡性结肠炎（UC）是一种主要累及结肠和直肠的慢性炎症性肠病，以腹痛、血性腹泻和里急后重Stereolithography 3D bioprinting感为典型症状，病理机制尚未完全阐明。该病反复发作，严重影响患者生活质量，Belumosudil半抑制浓度而常用的治疗药物具有临床疗效欠佳、疗程长、不良反应多等局限，故亟需寻找新的治疗药物。过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）是一种配体依赖性核受体蛋白，在维持肠道稳态中发挥了重要作用，并与UC的发生发展密切相关。中医药治疗UC具有多靶点、不良反应小等优势，近年大量研究发现中医药可以通过调控核受体PPARγ发挥治疗UC的作用。结果表明PPARγ是中医药治疗UC的重要靶点，中医药多采用清热燥湿、行气活血化瘀、健脾温肾和攻补兼施之法干预PPARγ，一方面直接激活PPARγ，或通过介导核转录因子-κB（NF-κB）、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）、Toll样受体4（TLR4）等信号通路、调节辅助性T细胞Taurine浓度17（Th17）/调节性T细胞（Treg）平衡、促进巨噬细胞由促炎M1型向抗炎M2型极化等方式控制促炎因子与抗炎因子水平，从而抑制肠道炎症反应；另一方面通过调节肠道代谢，激活PPARγ，降低硝酸盐水平并维持局部缺氧状态，从而调节专性厌氧菌与兼性厌氧菌平衡，改善肠道微生态，最终起到防治UC的作用。该文将核受体PPARγ在UC中的作用及近5年中医药通过干预PPARγ治疗UC的研究进展进行梳理和总结，旨在为UC的治疗及新药研发提供思路。

以阿尔茨海默病（AlzheimeVorinostatr’s disease，AD）和帕金森病（Parkinson’s diseases，PD）为代表的神经退行性疾病主要特征是神经元进行性的不可逆丢失，导致不同程度的病理变化和认知功Genomics Tools能的丧失，目前仍无有效的治疗方法。随着全球老龄化问题的加重，神经退行性疾病的患病人数正在快速上升，已发展成为严重的全球公共卫生事件，迫切需要开发有效的治疗手段。Hippo信号通路是一种高度进化保守的途径，在细胞增殖、分化、发育以及凋亡等生物过程中发挥重要作用，并与miRNA互相作用产生广泛的生物效应，在多种疾病的发生中互相串扰。但在神经退行性疾病中对Hippo信号通路与miRhttps://www.selleck.cn/products/cobimetinib-gdc-0973-rg7420.htmlNA的探讨相对缺乏。本文通过梳理Hippo信号通路以及相关miRNA在AD与PD中的作用机制，探讨其内在联系，以期拓展神经退行性疾病的治疗视野，为神经退行性疾病的防治提供新的思路和视角。

目的:探究铝碳酸镁联合三联疗法治疗幽门螺杆菌(HP)阳性消化性溃疡(PU)对HP根除率及Treg/Th17平衡的影响。方法:选取147例HP阳性PU患者，根据随机数字表法将其分为两组，对照组73例，治疗组74例。对照组采用三联疗法治疗，治疗组采用铝碳酸镁联合三联疗法治疗。观察两组患者的HP清除率、复发率、调节性Tmonoclonal immunoglobulin细胞(Treg)、辅助性T细胞(Th17)、Treg/Th17、白介素17(IL-17)、白介素25(IL-25)、α-防御素、转化生长因子β_1(TGF-β_1)、胃肠激素及不良反应的发生情况。结果:治疗后6、12个月治疗组的HP清除率分别为68.92%和89.19%,显著高于对照组的46.58%和68.49%(均P<0.05),治疗组的复发率分别为14.86%和4.05%,显著低于对照组的32.88%和17.81%(均P<0.05);治疗后，两组Treg、Treg/Th17、α-防御素以及生长抑素(SS)水平均高于治疗前，且治疗组上述各指标水平均显著高于对照组(均P<0.05);两组Th17、IL-17、IL-25、TGF-β_1、胃泌素(GAS)及GDC-0973临床试验胃动素(MTL)水平均低于治疗前，且治疗组上述各指标水平显著低于对照组(均P<0.05);治疗组与对照的不良反应发生率分别为9.18%、11.34%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:铝碳酸镁联https://www.selleck.cn/products/PD-0325901.html合三联疗法治疗HP阳性PU患者可有效提高HP根除率，调节患者胃肠激素及Treg/Th17平衡，且安全性高。