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目的 回顾性分析苏州地区幽门螺杆菌抗体分型在体检人群中的流行病学特征。方法 选取2018年1—12月苏州市上海交通大学医学院苏州九龙医院的6 588名健康体检人群的临床资料，采用免疫印迹法定性检测人血清中多种幽门螺杆菌（helicobacter pylori, HPselleck Bucladesine）IgG抗体，包括细胞毒素相关蛋白A(CagA)、空泡毒素相关蛋白A(VacA)、尿素酶亚单位A(UreA)和尿素酶亚单位B(UreB)，观察体检人群幽门螺杆菌抗体分布情况。结果 不同性别体检人群幽门螺杆菌感染率比较，差influence of mass media异无统计学意义（P>0.05）。Ⅰ型Hp抗体阳性率（29.6%）高于Ⅱ型Hp抗体阳性率（26.7%）。女性Ⅰ型Hp抗体阳性率显著高于男性，差异有统计学意义（χ~2=4.857,P=0.028）。不同性别Ⅱ型Hp抗体阳性率比较，差异无统计学意义（P>0.05）。31～40岁之间男性体检人群幽门螺杆菌抗体分型分布阳性率（Ⅰ型26.12%，Ⅱ型26.95%）与同年龄女性体检人群（Ⅰ型30.23%，Ⅱ型24.23%）比较，差异有统计学意义（χ~2=4.207,P=0.040）;41～50岁之间男性体检人群幽门螺杆菌抗体分型分布阳性率（Ⅰ型28.89%，Ⅱ型28.41%）与同年龄女性体检人群（Ⅰ型35.AZD1152-HQPA10%，Ⅱ型24.20%）比较，差异有统计学意义（χ~2=7.531,P=0.006）。结论 苏州地区体检人群幽门螺杆菌抗体阳性率较高，达56.30%，但不同性别之间无差异性；31～40岁与41～50岁两个年龄段之间女性Ⅰ型Hp抗体阳性率高于男性，Ⅱ型Hp抗体阳性率低于男性。

目的：观察右归丸对肾阳虚慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulselleckchem Dolutegravirmonary disease， COPD）大鼠肺组织瘦素（Leptin）/酪氨酸激酶2（Januskinase2， JAK2）/重组人信号转导与转录激活因子3（signal transducer and activator of transcription 3， STAT3）信号通路的影响。方法：采用第1天、第14天时气管滴注脂多糖，并连续烟熏6周，期间隔3天肌注氢化可的松，复制40只肾阳虚COPD模型SD大鼠，随机分为模型组，右归丸高剂量（11.70g·kg~(-1)）、右归丸中剂量组（5.85g·kg~(-1)）、右归丸低剂量（2.Right-sided infective endocarditis93g·kg~(-1)）和氨茶碱组（0.054g·kg~(-1)），另设8只空白组SD大鼠。造模完成后，给予各组大鼠相应药物灌胃，连续给药28d，末次给药后，取材。肺功能分析仪评估大鼠肺功能，酶联免疫法检测肺泡灌洗液白介素-17A（interleukin-17A， IL-17A）、白细胞介素-6（interleukin-6， IL-6）、肿瘤坏死因子-α（tumornecrosisfactor-α， TNF-α）含量，苏木素-伊红染色观察肺组织病理变化，马松三色染色观察肺组织支气管周围蓝色胶原纤维沉积并计算肺部炎症积分，免疫荧光观察支气管Ⅰ型胶原蛋白（collagenTypeⅠ， ColⅠ）和α平滑肌肌动蛋白（alpha-smoothmuscleactin， α-SMA）蛋白含量，蛋白免疫印迹法检测肺组织Leptin、IL-17A、JAK2和STAT3蛋白含量，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-timePCR）检测肺组织Leptin、IL-17A、JAK2、STAT3mRNA含量。结果：与空白组比较，模型组肺功能降低（P<0.01），肺泡灌洗液中IL-6、IL-17A、TNF-α含量升高（P<0.01）、肺组织炎症评分、气道上皮下胶原纤维沉积和ColI、α-SMA蛋白升高（P<0.01），肺组织Leptin、IL-17A、JAK2和STAT3蛋白及mRNA水平均升高（P<0.01），JAK2、STAT3蛋白磷酸化程度增强（P<0.01），均有统计学意义；与模型组比较，右归丸高、中剂量组大鼠肺功能升高，肺泡灌洗液中IL-6、IL-17A、TNF-α含量降低，炎症评分降低，胶原纤维沉积减轻，ColI、α–SMA蛋白降低，Leptin、JAK2、STAT3、IL-17A蛋白降低，JAK2、STAT3磷酸化程度减弱，Leptin、JAK2、STAT3、IL-17AmRNA表达降低（P<0.05，P<0.01），均有统计学意义；与氨茶碱组比较，左归丸高剂量组IL-17A、TNFα降低，左归丸中、低剂量组IL-17A升高，左归丸低剂量组TNF-α升高，右归丸高、中剂量组肺组织支气管周围胶原纤维沉积显著性降低，右归丸高、中剂量组组织支气管周围ColI、α–SMA蛋白降低上述指标均有统计学意义，右归丸高、中剂量炎症评分降低，右归丸高、中剂量组大鼠肺组织Leptin、JAK2、STAT3、IL-17A蛋白及mRNA均降低，但无统计学意义。更多结论右归丸能抑制IL-17A改善COPD大鼠炎性反应及胶原沉积来阻止气道重塑，其机制可能与抑制Leptin/JAK2/STAT3信号通路相关。

本试验旨在研究饲粮中添加迷迭香提取物和纳豆芽孢杆菌对肉仔鸡生长性能、肉品质、抗氧化能nonprescription antibiotic dispensing力和免疫功能以及肠道菌群的影响。通过探索迷迭香和纳豆芽孢杆菌与肉鸡生理特性、肠道菌群之间的关系,为迷迭香和纳豆芽孢杆菌在家禽饲料中的应用提供依据。本试验选用360只体重相近的1日龄科宝(Cobb)肉鸡,随机分为4组,每组6个重复,每个重复15只鸡。对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组分别在基础饲粮中添加200 mg/kg迷香、300 mg/kg纳豆芽孢杆菌和200 mg/kg迷迭香+300 mg/kg纳豆芽孢杆菌。在21日龄和42日龄采集样品。试验由三部分组成。第一部分,迷迭香和纳豆芽孢杆菌对肉仔鸡生长性能和肉品质的影响。结果表明:(1)1～42 d,试验Ⅰ、Ⅱ组平均日增(ADG)与其余各组相比显著升高(P<0.05)。试验Ⅰ、Ⅲ组42日龄体重显著升高(P<0.05)。(2)各试验组b﹡值显著低于对照组,试验Ⅱ组为各组最低(P<0.05)。与对照组相比,试验Ⅲ组蒸煮损失显著降低(P<0.05)。与对照组相比,试验组剪切力显著降低(P<0.05)。迷迭香和纳豆芽孢杆菌均能提高生长性能,改善肉品质。第二部分,迷迭香和纳豆芽孢杆菌对肉仔鸡抗氧化能力和免疫功能的影响。结果表明:与对照组相比,(1)21日龄,试验Ⅲ组谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性显著升高31.50%(P<0.05)。试验Ⅲ组丙二醛(MDA)含量较对照组显著降低16.58%(P<0.05),又显著低于试验Ⅰ、Ⅱ组(P<0.05)。42日龄,试验Ⅲ组GSH-PX活性显著升高(P<0.05),MDA显著降低(P<0.05),与试验Ⅰ组相比显著降低(P<0.05);(2)21日龄,各试验组Ig A显著升高(P<0.05)。各试验组Ig M显著升高,高于对照组(P<0.05),试验Ⅱ、Ⅲ组www.selleck.cn/products/ag-221-enasidenib又显著高于试验Ⅰ组(P<0.05)。42 d日龄,各试验组Ig A含量显著升高(P<0.05),试验Ⅲ组又显著高于试验Ⅰ组(P<0.05)。各试验组Ig含量显著高于对照组(P<0.05),试验Ⅲ组又显著高于试验Ⅰ组(P<0.05);(3)21日龄,试验Ⅲ组s Ig A含量则显著升高(P<0.05)。试验Ⅱ组IL-6较其余各组显著下降(P<0.05)。试验Ⅰ组TNF-α含量较其余各组显著降低(P<0.05)。42日龄,试验Ⅱ组IL-1β含量显著降低(P<0.05)。结果表明,迷迭香和纳豆芽孢杆菌单独或联合添加显著提高肉鸡免疫功能、抗氧化能力。第三部分,迷迭香和纳豆芽孢杆菌对肉仔鸡盲肠微生物的影响。结果表明:进一步分析迷迭香和纳豆芽孢杆菌对肉仔鸡肠道微生物组成的影响,结果表明:(1)Alpha和Beta多样性分析,试验Ⅰ组显著增加Shannon指数(P<0.05),试验Ⅰ组显著降低simpson指数(P<0.05)。根据Bray-Curtis样品间距离算法分析表明对照组和处理组盲肠菌群多样性存在显著差异,同组微生物具有明显聚类selleckchem。(2)盲肠微生物区系组间差异分析:在门水平方面,厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidota)、放线菌门(Actinobaceteriota)和弯曲杆菌门(Campilobacterota)等其它菌门组成,拟杆菌门在组间差异显著,试验Ⅰ组和试验Ⅲ组相对丰度降低(P<0.05)。试验Ⅲ组弯曲杆菌门相对丰度显著低于其他组(P<0.05)。在属水平方面,对照组和试验组肉仔鸡盲肠菌群由粪杆菌属(Faecalibacterium)、另枝菌属(Alistipes)、拟杆菌属(Bacteroides)、未分类f＿norank＿o＿梭菌目＿UCG-014(norank＿f＿norank＿o＿Clostridia-UCG-014)等其它菌属组成,试验Ⅱ组另枝菌属显著高于其它组(P<0.05)。试验Ⅲ组粪杆菌属(Faecalibacterium)丰度显著高于对照组及试验Ⅰ、Ⅱ组,试验Ⅲ组瘤胃菌属(Ruminococcus＿torques＿group)丰度显著低于对照组及试验Ⅰ、Ⅱ组(P<0.05)由此可见,饲粮中添加迷迭香和纳豆芽孢杆菌可提高肉仔鸡的抗氧化能力和免疫功能,降低有害菌的丰度,增加有益菌的比例,改善肠道菌群组成。

目的 从卵巢颗粒细胞凋亡与自噬相互作用的角度，探讨活血消异方对子宫内膜异位症大鼠卵泡发育的影响及作用机制。方法 将动情周期正常的48只SD大鼠分为空白组、假手术组各10只，剩余的分为供体组(n=5)和受体组(n=23)用于造模，造模成功后的20只大鼠又分为模型组、活血消异方组各10只。活血消异方组予活血消异方汤剂2 ml灌胃，空白组、假手术组、模型medicine review组均予蒸馏水2 ml灌胃，各组连续灌胃15 d后，检测大鼠血清活性氧(ROS)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)水平。取各组大鼠的卵巢组织行HE染色，光镜下观察各级卵泡形态并计数；免疫组化染色定位颗粒细胞，并比较凋亡相关因子Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达；TUNEL染色观察LXH254 IC50颗粒细胞凋亡情况并计算凋亡率；蛋白免疫印迹法获悉更多(Western blot)检测卵巢组织中凋亡及自噬相关蛋白p-JNK、Bax、Bcl-2、Caspase-3、Beclin-1、LC3Ⅱ的表达；电镜观察各组大鼠卵巢颗粒细胞自噬体形态，并计算自噬体胞质面积比。结果 (1)与空白组、假手术组比较，模型组血清ROS含量显著升高，T-SOD、CAT水平显著降低(P<0.05);与模型组比较，活血消异方组血清ROS含量显著降低，T-SOD、CAT水平显著升高(P<0.05)。(2)与空白组、假手术组比较，模型组次级卵泡数目显著下降(P<0.05),卵巢颗粒细胞凋亡率显著升高(P<0.001);与模型组比较，活血消异方组次级卵泡数目显著升高(P<0.05),凋亡率显著降低(P<0.001)。(3)与空白组、假手术组比较，模型组卵巢颗粒细胞中Bax、Caspase-3蛋白表达显著升高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.001);与模型组比较，活血消异方组卵巢颗粒细胞中Bax、Caspase-3蛋白表达显著降低(P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著升高(P<0.001)。(4)与空白组、假手术组比较，模型组卵巢组织中p-JNK、Bax、Caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.05),Bcl-2、Beclin-1、LC3Ⅱ蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与模型组比较，活血消异方组卵巢组织中p-JNK、Bax、Caspase-3蛋白表达水平显著降低(P<0.05),Bcl-2、Beclin-1、LC3Ⅱ蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。(5)电镜下观察卵巢颗粒细胞中自噬体结果显示，4组间自噬体胞质面积比的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 活血消异方可能通过ROS-JNK信号通路，改善子宫内膜异位症大鼠氧化应激状态，减少卵巢颗粒细胞凋亡，启动颗粒细胞保护性自噬，改善子宫内膜异位症大鼠卵泡发育。

目的 分析胃癌高发地区慢性萎缩性胃炎（CAG）病人血清幽门螺杆菌（Hp）抗体分型情况以及癌变风险的差异。方法纳入2019年12月至2021年1月合肥市第二人民医院就诊的168例CAG病人作为研究对象，采用蛋白质印迹法检测血清Hp抗体分型（Cag A、Vac V、Ure），分为Ⅰ型IDN-6556纯度Hp组、Ⅱ型Hp组和阴性组；酶联免疫吸附测定（ELISA）检测胃黏膜功能[胃蛋白酶原（PG）Ⅰ、PGⅡ、胃蛋白酶原比值（PRG）、胃泌素17(G17)]，采用“改良ABC法”进行癌变风险分层，参考“木村-竹本”分类法对萎缩范围分级，根据萎缩部位和程度确认细节进行OLGA分期。结果 168例CAG病人中Ⅰ型Hp组83例，Ⅱ型Hp组39例，Hp阴性46例；单纯胃窦萎缩病人，I型Hp病人G17低于Ⅱ型和Hp阴性组[3.61(2.57,5.04)pmol/L比5.85(3.91,7.32)pmol/L,6.01(4.55,8.39)pmol/L,P<0.05]；胃窦+胃体萎缩病人，I型Hp病人PGⅠ[82.66(61.00,101.28)μg/L比100.27(66.59,124.28)μg/L,98.04(70.22,121.43)μg/L]、PRG[8.55(7.16,11.02)比10.13(8.94,12.31),10.71(9.08,13.16)]低于Ⅱ型和Hp阴性组（P<0.05）；三组“改良ABC”癌变风险分层差异有统计学意义（P<0.05），其中Ⅰ型Hp病人高危层占比最高，达33.74%；三组“木村-竹本”分类法“C型”和“O型”的比例差异无统计学意义[18.72%(15/83)比23.07%(9/39),13.04%(6/46),P>0.05]；三组OLGA分期差异有统计学意义（P<0.05）,I型Hp病人Ⅲ期和Ⅳ期共19例，占比最高（22.89%），但三组间对比显示acute oncology，I型和Ⅱ型Hp病人间OLGA分组差异无统计学意义（P>0.017）,I型Hp病人OLGA高危组占比高于Hp阴性病人（P<0.017）。结论 胃癌高发地区CAG病人以Ⅰ型Hp感染多见，不同分型Hp感染的CAG病人PG、PGR、G17水平存在差异，Ⅰ型Hp感染的CAG病人癌变风险相对较高。

目的 探讨左沙丁胺醇和沙丁胺醇分别联合异丙托溴铵和倍氯米松用于急性加重期慢性阻塞性肺疾病（AECOPD）患者的安全性、有效性差异。方法 采用随机对照、单中心、前瞻性研究方法，选取2022年1月1日—2022年12月31日在合肥PF-03084014市第二人民医院呼吸内科就诊的100例AECOPD住院患者作为研究对象，利用PASS 26.0软件随机分为对照组（n=50）和试验组（n=50）。对照组使用沙丁胺醇、异丙托溴铵和倍氯米松雾化吸入治疗，试验组使用左沙丁胺醇、异丙托溴铵和倍氯米松雾化吸入治疗，比较两组患者治疗前后临床相关指标变化以及不良反应发生情况。结果 试验组治疗总有效率（95.65%）高于对照组（84.00%），差异有统计学意义（P<0.05）。治疗前两组24 h痰液体积、血气分析指标[动脉血氧分压（paO_2）、动脉血二氧化碳分压（paCO_2）、动脉血氧饱和度（SaO_2）]、肺功能指标[第1秒呼气量（FEV1）、用力肺活量（FVC）、1秒率（FEV1/FVC）]、血清炎症因子指标[超敏C反应蛋白（hs-CRP）、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、氧化应激反应指标[丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）]比较，差异无统计学意义（P>0.05）；治疗后，两组24 h痰液体积、pa(CO_2)、慢阻肺急性加重识别工具（CERT）评分、MDA、hs-CRP、IL-8、TNF-α均较本组治疗前下降，pa(O_2)、FEV_1、FVC、FEV_1/FVC、GSH-Px、SOD较本组治疗点击此处前显著升高，差异均有统计学意义（P<0.05）。治疗后，试验组各项指标改善情况均较对照组明显（P<0.05）。在治疗过程中，对照组耐受良好，未出现明显不良反应。试验组发生头痛2例、皮疹和腹泻各1例，两组不良反应发生率相比较，差异有统计学差异（P<0.05）。结论 hepatic venography加入左沙丁胺醇的三联药物方案用于治疗AECOPD患者的临床疗效比沙丁胺醇三联方案更好，但不良反应发生率更高，临床应用需关注其安全性。

目的:周细胞是覆盖脑毛细血管和小静脉的壁细胞,在阿尔茨海默症、帕金森、肌萎缩侧索硬化症等神经退行性疾病中发挥着重要作用,主要表现为周细胞丢失导致血脑屏障受损,从而激活炎症信号,影响邻近的神经血管单元,最终导致神经退变。阐明成年和老年阶段脑内影响周细胞功能的分子机制,提升周细胞的覆盖率和维持血脑屏障的完整性,可以为相关神经退行性疾病的治疗提供新的靶点。YAP(Yes-associated protein)是一种转录辅激活因子,表达于多种神经细胞,可以通过调控血管功能参与神经退行性疾病的发生发展过程。本研究证实周细胞YAP基因缺失介导的机械应力异常改变血管结构,从而导致血脑屏障受损的病理机制,并初步解释了周细胞上特异性敲除YAP基因而引发的年龄依赖性认知缺陷的原因。第一部分 周细胞YAP基因敲除导致成年小鼠出现学习记忆障碍方法:(1)构建成年慢性社交隔离病理模型,运用免疫荧光染色检测YAP基因在成年慢性社交隔离模型小鼠海马区的表达水平。(2)通过免疫荧光染色检测YAP基因在成年小鼠海马周细胞的表达情况,以及原代周细胞和周细胞系上的表达情况。(3)利用YAP~(fl/fl)小鼠和PDGFRβ-Cre ERT2工具小鼠杂交获得周细胞特异性敲除YAP基因的成年小鼠模型,通过免疫染色实验检测YAP在周细胞上的敲除效率的变化。(4)利用学习记忆相关行为学(水迷宫、新物体、新位置、三箱社交等)和运动能力相关行为学(转棒、爬杆、旷场等)及情绪相关行为学(高架十字迷宫等)检测小鼠周细胞上特异性敲除YAP基因后不同阶段(3月龄、10月龄)的行为学表型。结果:(1)YAP在成年社交隔离模型小鼠海马表达下调。通过对2月龄C57BL/6J小鼠进行为其2周的慢性社交隔离,构建社交记忆障碍的病理模型。免疫荧光染色结果表明YAP基因在成年社交隔离模型小鼠的海马表达明显下调。(2)YAP在成年小鼠海马周细胞中广泛表达。通过对成年时期C57BL/6J小鼠海马进行YAP基因和周细胞的免疫荧光共染,结果表明YAP基因在成年小鼠海马与周细胞标记物PDGFRβ存在共定位。体外利用周细胞系也同样验证YAP基因和周细胞标记物NG2、PDGFRβ、α-SMA存在共定位。同时提取2月龄原代周细胞,进行内皮细胞,周细胞和星形胶质细胞标记物免疫染色确定周细胞纯化率,并利用周细胞标记物PDGFRβ和YAP共染,观察YAP和成年原代周细胞存在共定位。(3)构建成年阶段周细胞YAP基因敲除小鼠模型。构建成年阶段周细胞敲除YAP基因的小鼠模型,在2月龄阶段腹腔注射他莫昔芬,稳定诱导一个月,通过免疫荧光染色检测周细胞上YAP基因表达情况分析其敲除效率。结果显示YAP基因的荧光强度和荧光密度出现下降,提示成年时期周细胞上特异性敲除YAP基因小鼠的成功构建。(4)成年阶段周细胞YAP基因敲除小鼠出现学习记忆障碍。行为学结果表明,3月龄和10月龄周细胞YAP基因敲除小鼠(Conditional knock out,cKO)在新物体识别实验中,适应阶段cKO小鼠和对照组小鼠偏好指数相近,表明小鼠无特定偏向;在检测阶段cKO小鼠出现了识别指数的下降,提示cKO小鼠存在工作记忆障碍。同样新位置识别中,适应阶段cKO小鼠和对照组小鼠偏好指数相近;但检测阶段cKO小鼠出现了识别指数的下降,提示cKO小鼠存在空间记忆障碍。在水迷宫实验中,训练阶段,cKO小鼠和对照组小鼠的运动速度相一致,表明两组小鼠运动能力相似,但cKO小鼠的逃避潜伏期相比较对照组更长;同时测试阶段cKO小鼠对于逃生平台的穿越次数、停留时间、逃生平台所在象限的穿越次数、停留时间相比较对照组都出现了下降,这些结果提示cKO小鼠存在长期的空间记忆障碍。另外在三箱社交实验中,适应阶段两组小鼠表现对陌生小鼠的偏好,保持正常社交能力;但在检测阶段中,cKO小鼠对于陌生小鼠的接触相比较对照组更少,表明cKO小鼠也存在社交记忆障碍。除此之外,我cKO和对照组小鼠的运动能力和焦虑情绪无差异。这些结果提示,周细胞上的YAP基因对于学习记忆具有重要作用。第二部分 周细胞YAP基因敲除对小鼠海马血脑屏障结构和通透性的影响方法:(1)通过对cKO小鼠和对照组小鼠进行三箱社交实验激活海马区神经元,运用免疫荧光检测cFos在海马区中神经细胞激活情况。(2)检测不同年龄阶段(3月龄、10月龄、22月龄)的周细胞YAP基因敲除小鼠海马的周细胞覆盖率,运用免疫荧光染色检测周细胞标记物PDGFRβ在内皮细胞标记物CD31上的覆盖面积。(3)分析成年阶段和老年阶段的周细胞YAP基因敲除小鼠海马的脑血管结构,运用免疫荧光染色检测周细胞标记物PDGFRβ和内皮细胞标记物CD31微血管结构的直径丰度、血管折叠曲折、血管断裂、血管长度和血管分支。(4)检测不同年龄阶段(3月龄、10月龄、22月龄)的周细胞YAP基因敲除小鼠海马的血脑屏障通透性,运用外源性葡聚糖示追踪和内源性纤维蛋白等手段进行免疫荧光染色检测内皮细胞周围不同分子量的外渗情况。(5)对不同年龄阶段(3月龄、10月龄、22月龄)的周细胞YAP基因敲除小鼠在海马进行内血管内皮屏障功能和旁转运功能检测,运用AQP4、ZO-1、Cluadin-5同内皮细胞标记物CD31/Glut1共染,观察血管内皮上旁转运蛋白和紧密连接蛋白的表达情况。结果:(1)周细胞YAP基因敲除降低小鼠海马区神经活性。对成年10月龄周细胞YAP基因敲除小鼠进行三箱社交实验后的海马区c Fos检测,免疫荧光染色结果表明cKO小鼠在海马区的c Fos数量和对照组相比,明显减少。同时我们具体对海马内不同区域的CA1(短期记忆)、CA2(社交记忆)、CA3(空间记忆)、DG(记忆形成)进行分析,结果表明,cKO小鼠表现出海马不同区域的c Fos激活细胞的减少。这提示我们cKO所表现出的c Fos减少和不同学习记忆相关的行为学表型相一致。(2)周细胞YAP基因敲除导致小鼠海马周细胞覆盖statistical analysis (medical)率减低。通过对3月龄、10月龄、22月龄不同年龄阶段的cKO小鼠进行内皮细胞和周细胞的免疫荧光染色,结果表明周细胞YAP基因敲除小鼠较对照组小鼠在不同年龄段造成周细胞覆盖率下降约60%,并且周细胞的面积都出现了下降,但是在3月龄阶段和22月龄阶段cKO小鼠并没有表现出内皮细胞面积的变化,只在成年中期10月龄cKO小鼠出现了内皮面积变化,这提示周细胞YAP基因敲除导致周细胞覆盖率下降,从而继发性影响到周细胞面积和内皮细胞面积。(3)周细胞YAP基因敲除导致小鼠海马血管结构异常。通过对成年3月龄和老年22月龄的cKO小鼠进行内皮细胞和周细胞的免疫荧光染色。结果表明,成年早期3月龄和老年22月龄cKO小鼠表现出周细胞和内皮细胞直径的变宽,并且出现了血管曲折层叠和周细胞的明显断裂现象。提示周细胞YAP基因敲除会导致血管结构异常。(4)周细胞YAP基因敲除导致小鼠海马血脑屏障通透性增加。通过对3月龄、10月龄、22月龄的cKO小鼠进行BBB功能检测,通过外源性和内源性示追踪观察内皮血管周围不同分子量外渗情况。结果表明,对于大分子量150KDa左右的鼠源Ig G,10月龄和22月龄出现了明显的lg G免疫蛋白的沉积。对于中分子量70KDa左右的内源性毒性纤维蛋白和白蛋白,3月龄、10月龄和22月龄cKO小鼠血管内皮周围出现了明显的Albumin和Fibrinogen的沉积。而对于小分子量4KDa左右的外源性葡聚糖注射,检测到3月龄cKO小鼠血管内皮周围出现了明显的FITC信号沉积。结果提示细胞YAP基因敲除导致血脑屏障功能障碍,并且以年龄依赖性方式导致外渗严重。(5)周细胞YAP基因敲除导致小鼠海马血管内皮屏障和旁转运功能减退。通过对3月龄、10月龄、22月龄的cKO小鼠通过内皮屏障的紧密连接蛋白ZO-1和Claudin-5以及内皮和星形胶质细胞之间旁转运蛋白AQP4进行免疫荧光染色检测。结果表明,在3、10、22月龄不同阶段,周细胞YAP基因敲除导致小鼠海马出现血管内皮屏障和旁转运功能相关蛋白含量下降。第三部分 周细胞YAP基因敲除对小鼠海马血管炎症和神经炎症的影响方法:运用免疫荧光染色检测3月龄、10月龄和22月龄的周细胞YAP基因敲除小鼠中内皮细胞标记物CD31、Glut1同小胶质细胞标记物Iba1和星形胶质细胞标记物GFAP的表达情况,观察血脑屏障功能异常造成的血管炎症和神经炎症的水平。结果:(1)周细胞YAP基因敲除导致小鼠海马血管性炎症。通过免疫荧光检测海马血管内皮上覆盖的炎症信号标记物GFAP和Iba1,结果表明,3月龄、10月龄和22月龄阶段cKO小鼠海马GFAP~+和Iba1~+细胞密度在内皮细胞面积上出现了明显的增多。提示周细胞YAP基因敲除导致微血管内皮屏障和内皮细胞紧密连接受到破坏,红细胞渗出,白细胞浸润脑实质,引发血管性炎症。(2)老年阶段周细胞YAP基因敲除导致小鼠海马以年龄依赖性方式引起神经炎症,并且验证神经炎症迟发于血管性炎症。通过免疫荧光实验检测海马炎症细胞标记物GFAP和Iba1的细胞密度,结果表明,成年3月龄MEK抑制剂、10月龄阶段cKO小鼠海马Iba1~+细胞密度出现增加,但是GFAP~+细胞密度没有变化。而在老年阶段22月龄cKO小鼠Iba1~+和GFAP~+细胞密度都出现增加。提示成年时期周细胞YAP基因敲除会导致轻微的神经炎症,并且神经炎症是迟发于血管性炎症的。随着衰老进程,周细胞YAP基因敲除在老年阶段表现出严重的神经炎症。第四部分 周细胞YAP基因敲除对小鼠海马少突胶质细胞谱系细胞和髓鞘蛋白的影响方法:运用免疫荧光染色检测3月龄、10月龄和22月龄的周细胞YAP基因敲除小鼠海马组织的Olig2~+PDGFRα~+细胞,观察少突胶质细胞祖细胞的增殖能力;CC1~+和ASPA~+免疫荧光染色检测少突胶质细胞成熟分化能力;MBP~+NF200~+免疫共染检测髓鞘蛋白更新和再生。同时利用Western Blot手段探究海马MBP、MAG髓鞘相关蛋白表达。结果:(1)周细胞YAP基因敲除导致小鼠海马少突胶质细胞祖细胞的增殖能力下降。通过免疫荧光检测海马少突胶质细胞祖细胞标记物Olig2~+PDGFRα~+双阳性细胞,结果表明,3月龄、10月龄和22月龄阶段cKO小鼠海马均出现了少突胶质细胞祖细胞密度减少,提示周细胞YAP基因敲除会影响少突胶质细胞祖细胞增殖能力。(2)周细胞YAP基因敲除导致小鼠海马少突胶质细胞成熟迟缓。通过免疫荧光检测海马少突胶质细胞标记物CC1~+和ASPA~+阳性细胞,结果表明,3月龄、10月龄和22月龄阶段cKO小鼠海马均出现了少突胶质细胞密度减少,提示周细胞YAP基因敲除会影响少突胶质细胞祖细胞成熟分化能力。(3)周细胞YAP基因敲除导致小鼠海马髓鞘更新和再生能力下降。通过免疫荧光检测海马髓鞘蛋白标记物MBP~+NF200~+,结果表明,3月龄、10月龄和22月龄阶段cKO小鼠海马均出现了髓鞘蛋白表达下降,并且通过Western Blot检测海马髓鞘相关蛋白MBP、MAG,结果进一步证明cKO小鼠海马出现了髓鞘蛋白表达下降。提示周细胞YAP基因敲除会影响少突胶质细胞祖细胞成熟分化能力。第五部分 周细胞YAP基因敲除对小鼠海马神经元及轴突的影响方法:通过对3月龄、10月龄和22月龄的周细胞YAP基因敲除小鼠进行NF200~+免疫荧光染色检测轴突变性情况;Neu N~+免疫荧光染色检测神经元变化。结果:(1)周细胞YAP基因敲除导致小鼠海马出现神经退变。通过免疫荧光检测海马神经元标记物Neu N~+细胞,结果表明,3月龄阶段cKO小鼠海马和对照组的神经元密度没有变化。但10月龄和22月龄阶段cKO小鼠海马相比较对照组,神经元密度明显降低,提示随着衰老进程,周细胞YAP基因敲除会影响到神经元密度,从而导致神经退变。(2)周细胞YAP基因敲除导致小鼠海马出现轴突变性。通过免疫荧光检测海马神经丝标记物NF200~+,结果表明,3月龄、10月龄阶段cKO小鼠海马并未出现差异变化,但22月龄阶段cKO小鼠海马相比较对照组出现了NF200荧光强度下调。提示周细胞YAP基因敲除使小鼠以年龄依赖性方式影响海马的轴突变性。结论:(1)YAP基因在成年小鼠海马的周细胞中广泛表达。周细胞YAP基因敲除会导致成年小鼠出现学习记忆功能障碍。(2)周细胞YAP基因敲除导致小鼠海马周细胞覆盖率,血管收缩功能以及血脑屏障通透性呈现年龄依赖性下降。(3)周细胞YAP基因敲除LXH254溶解度造成血脑屏障渗漏而引发血管性炎症和神经炎症。(4)周细胞YAP基因敲除诱发的神经血管炎症导致少突胶质细胞谱系细胞更新迟缓和髓鞘再生受损。(5)周细胞YAP基因敲除影响髓鞘变化,造成神经元受损和轴突变性,引发神经退变。据此,本研究利用周细胞特异性小鼠模型,通过多种检测手段,分别从脑内血管结构功能和邻近神经血管单元的响应变化来分析YAP介导周细胞对血管性疾病的协同保护作用及机制。

目的 探究超声引导下经皮肝脏组织穿刺活检在早期肝癌中的诊断价值。方法 选取我院接受诊治的经影像学检查无法确诊的存在肝内占位病变患者80例，均对其开展超声引导下的穿刺活检，并以手术病理结果为金标准，评估超声引导下经皮肝脏组织穿刺活检在早期肝癌诊断中的应用价值。结果 80例患者穿刺176次全部成功，确诊率达到97.50%，无合并症发生。绝大多数患者穿刺后仅出现肝区轻微胀痛感，有4endodontic infections例患者因术后疼痛明显采取肌注强痛定治疗，而后疼痛感消失；80例患者开展病理VE-822使用方法检查后发现，原发性肝细胞癌40例（50.00%），毛细胆管癌4例（5.00%），转移癌5例（6.25%），肝硬化结节8例（10.00%），肝炎性结节6例（7.50%），局灶性脂肪肝9例（11.25%），肝脓肿5例（6.25%），肝结核3例（3.75%）；经穿刺活检取样后实施检测，80例患者中有78例同PD0325901研究购买病理学检测结果一致，符合率达到97.50%，余2例1例为毛细胆管癌诊断为转移癌，1例为肝血管瘤诊断为肝硬化结节。超声引导下穿刺检测的诊断准确率与病理学检测准确率不存在统计学差异（P>0.05）。结论 超声引导下经皮肝脏组织穿刺活检能够较好的对早期肝癌实施诊断，诊断准确率及安全性均较高，建议开展临床推广应用。

目的 探讨原阿片碱对脂多糖（LPS）诱导的肠上皮细胞炎症、凋亡和氧化应激的影响。方法 通过四甲基偶氮唑蓝（MTT）实验筛选出5μg/ml的LPS处理NCM460细胞，同时加入不同浓度的原阿片碱（0microbiota assessment、5、10、20μM）刺激细胞24 h。通过MTT法和流式细胞术检测NCM460细胞活力和凋亡率。通过Western blot免疫印迹法检测各处理组中凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达水平。通过ELISA检测炎症因子肿瘤坏死因子IDN-6556化学结构-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的表达水平。通过ELISA检测抗氧化酶超氧化物歧化酶（SODPLX4032小鼠）、丙二醛（MDA）、总抗氧化能力（T-AOC）和髓过氧化物酶（MPO）的表达水平以及通过流式细胞术检测活性氧（ROS）表达水平，明确原阿片碱对NCM460细胞氧化应激反应的影响。结果 5μg/ml的LPS组的NCM460细胞活力低于阴性对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。LPS+原阿片碱组NCM460细胞活力、Bcl-2蛋白高于LPS组，且呈剂量依赖性，差异有统计学意义（P<0.05）。LPS+原阿片碱组NCM460细胞的凋亡率、Bax蛋白、TNF-α、IL-1β和IL-6、氧化应激分子SOD、MDA、T-AOC、MPO和ROS的表达水平低于LPS组，且呈剂量依赖性，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 原阿片碱可通过降低细胞凋亡、炎症反应及氧化应激反应改善LPS诱导的肠上皮细胞炎性损伤。

目的:检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因在糖尿病肾病组与糖尿病组血浆中的m RNA表达水平、基因表达量。旨在探讨HIF-1α在2型糖尿病肾脏疾病患者体内基因表达的临床意义。方法:本研究采用病例-对照研究方法,选取我院内分泌科2022年1月-2022年6月确诊Glucagon Receptor抑制剂为2型糖尿病患者116例。按照《糖尿病肾脏疾病临床诊疗中国指南(2021年版)》,分为病例组(糖尿病肾病组)49例和对照组(糖尿病组)67例。分别收集一般资料及各项生化指标。采用定量逆转录聚合酶链反应(Quantitative Real Time Polymerase Chain Reaction)法及Western Blot法分别检测两组血浆HIF-1αm RNA表达水平及基因表达量。应用SPSS26.0对数据进行统计学分析,比较两组间是否存在差异,明确HIF-1α基因表达与糖尿病肾脏疾病是否具有相关性。统计学方法分析患者血浆HIF-1α的表达水平与患者病程、血脂、糖化血红蛋白(Hb A1c)、血肌酐(SCr)、肾小球滤过率(e GFR)、尿白蛋白/肌酐比值(UACR)等临床指标的相关性。结果:(1)糖尿病肾病组HIF-1αm RNA表达水平(1.04±0.10)明显高于糖尿病组(1.51±0.23,P<0.001);(2)糖尿病肾病组HIF-1α基因表达量(1.49±0.34)明显高于Barasertib溶解度糖尿病组(1.03±0.12,P<0.001);(3)通过评估HIFTransiliac bone biopsy-1α基因表达水平与一般临床资料特征之间的关系,我们研究发现HIF-1α表达与Hb A1c(r=0.234,P<0.05)、SCr(r=0.265,P<0.05)、UACR(r=0.372,P<0.05)呈正相关,与e GFR呈负相关(r=-0.247,P<0.05)。结论:糖尿病肾病组血清中HIF-1α表达水平高,这提示HIF-1α基因表达参与糖尿病肾病的发生发展,具体机制有待进一步研究。