miR-590通过靶向STAT3增强NK细胞对膀胱癌的免疫功能

目的:在膀胱癌患者外周血自然杀伤(NK)细胞中探究微小RNA(miRNA)-590的表达及其对NK细胞免疫功能的调控机制。方法:收集31例膀胱癌患者(Tumor组)和相同例数健康体检者(Normal组)的外周血为研究对象,使用NK细胞分离试剂盒从两组患者外周血单个核细胞中分离原代NK细胞。qRT-PCR实验检测miR-590和信号转导和转录激活因子3(STAT3)在原代NK细胞中的表达;Pearson相关系数分析膀胱癌患者NK细胞中miR-590与STAT3 mRNA表达的相关性;采用生物信息学技术分析miR-590与STAT3的靶向结合位点,双荧光素酶基因报告实验进行检测;将miR-590的模拟物(miR-590 mimics)、miR-590的抑制剂(miR-590 inhibitor)及阴性对照miR-NC转染入人NK细胞系NK-92中,并应用白介素-2(IL-2)活化细胞。按处理方式的不同将NK-92细胞分为:Control组、IL-2组、IL-2+miR-NC组、IL-2+miR-590 mimics组和IL-2+miR-590 inhibitor组。ELISA检测各Colforsin体外组细胞上清液中干扰素γ(IFN-γ)和肿瘤细胞坏死因子-α(TNF-α)的含量,细胞毒性实验检测各组NK-92细胞对膀胱癌细胞系T24细胞的杀伤效应;为探究STAT3在miR-590介导的NK细胞免疫功能中的作用,将NK-92细胞又分为IL-2+miR-590 mimic+pcDNA-NC组和IL-2+miR-590 mimic+pcDNA-STAT3组。再次使用ELISA和细胞毒性实验进行检测各组NK-92细胞对IFN-γ和TNF-α的分泌以及对T24细胞的杀伤作用。结果:与Normal组相比,miR-590在Tumor组中的表达明显降低(P<0.05),而STAT3表达升高(P<0.05),且两者在膀胱癌患者NK细胞中表达呈负相关(r=-0.641,P<0.05);生物信息学分析结果显示,STAT3的3'UTR区具有miR-590识别的序列区,双荧光素酶基因报告实验结果表明miR-590可靶向抑制STAT3的表达。与Control组相比,IL-2组、IL-2+miR-NC组、IL-2+miR-590 mimics组和IL-2+miR-590 inhibitor组中NK-92对IFN-γ、TNF-α分泌水平和对T24细胞杀伤效应均明显升高(P<0.05);与IL-2组相比natural bioactive compound,IL-2+miR-590 mimics中NK-92对IFN-γ、TNF-α分泌水平和对T24细胞杀伤效应明显升高(P<0.05),IL-2+miR-590 inhibitor组中明显降低(P<0.05),IL-2+miR-NC组无明显变化(P>0.05)。此外,与IL-2+miR-NC组相比,IL-2+miR-590 mimics组和IL-2+miR-590 mimics+pcDNA-NC组中NK-92分泌IFN-γ、TNF-α水平和对T24细胞的杀伤效应均明显升高(P<0.05),IL-2+miR-590 mimTofacitinib化学结构ics+pcDNA-STAT3组无明显变化(P>0.05);与IL-2+miR-590 mimics组相比,IL-2+miR-590 mimics+pcDNA-STAT3组中NK-92分泌IFN-γ、TNF-α水平和对T24细胞的杀伤效应均明显降低(P<0.05),IL-2+miR-590 mimics+pcDNA-NC组无明显变化(P>0.05)。结论:miR-590在膀胱癌外周血NK细胞中表达降低,上调其表达可通过靶向抑制STAT3来增强了NK细胞对肿瘤细胞免疫毒性作用。

黄芪多糖对鸡巨噬细胞HD11的免疫调节作用研究

调节巨噬细胞的活化是增强畜禽免疫力的有效方法。黄芪多糖(APS)作为epigenetic reader免疫增强剂,在临床被广泛应用,但有关其对家禽巨噬细胞的调节作用机制鲜有报道。本研究用APS诱导鸡巨噬细胞Hselleck PanobinostatD11 12 h,评价其对HD11细胞的免疫调节作用。通过CCK-8法检测细胞增殖活力;用台盼蓝检测细胞的活率;采用Griess试剂法检测细胞中NO含量;采用RT-PCR法检测细胞中细胞因子、TLRs和NF-κB p65的mRNA表达水平。结果表明,25~400μg/mL APS对鸡巨噬细胞HD11无毒性作用,能显著促进细胞增殖(P<0.05),且APS组(除400μg/mL)与LPS组无显著性差异(P>0.05)。CCK-8检测显示,50~200μg/mL APS能显著提高细胞中NO含量(P<0.05)及炎性因子IL-8和IL-10转录水平(P<0.05),且呈一定的剂量依赖性,200μg/mL APS还能显著提高炎性因子IL-1β和IL-6转录水平(P<0.05),但均对TNF-α无显著性影响(P>0.05)。此外,50~200μg/mL APS对TLRselleck NVP-TNKS6562基因表达有显著的抑制作用(P<0.05),100~200μg/mL APS对TLR4基因表达有显著的抑制作用(P<0.05),表明TLR2对APS更敏感,但200μg/mL APS能提高NF-κB p65的转录水平(P<0.05)。这些结果表明黄芪多糖作为一种免疫调节剂对鸡巨噬细胞有免疫增强作用,并表现出不同的剂量依赖效应。

托法替尼缓释体系的制备及其在类风湿性关节炎治疗中的性能研究

类风湿性关节炎(RA)的发病机制与环境、性激素、遗传等多种因素有关,影响着全球0.5%-1%的人口,而且存在一定的年龄、性别、种族、地域等差异。RA病程长,临床上以缓解或控制RA疾病活动度、减轻患者痛苦和控制病程为药物治疗的目标。持续频繁的药物治疗不仅会造成严重的肝脏负担,还会存在严重的毒副作用及药物耐受性,降低患者的依从性。JAK-STAT通路承担着多种炎性细胞因子和趋化因子的信号传导。托法替尼(TF)作为首个获批的治疗RA的JAK抑制剂,通过抑制JAK-STAT通路,减少炎症反应,改善RA病情,尽可能避免造成不可逆的关节损伤,提高患者的生活质量,但存在半衰期短、长期频繁用药毒副作用大等问题。药物缓释体系可提供长期有效的治疗效果,可通过减少给药次数,降低药物毒副作用,在治疗RA这类慢性病中具有很好的应用前景。丝素蛋白因其良好的生物相容性、良好的机械性能和降解性等优势,在药物负载以及缓释方面存在很大优势。聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)缓释微球是最常用到的药物缓释体系,因其生物降解性、低药物毒性、降解产物无毒无害,也已广泛用于医疗应用。综上所述,本研究开发设计了两种不同的药物缓释体系——丝素蛋白凝胶和PLGA微粒。具体内容如下:(1)丝素蛋白-油酸钠-托法替尼(SF-OA-TF)凝胶的制备及其在RA中的性能研究。本实验以油酸钠作为胶凝剂,丝素蛋白(SF)为药物载体制备得到平均粒径在1222 nm、粒径分布较窄、具有一定载药量和长期缓释效果(超过13天)的SF-OA-TF凝胶。体外细胞实验证明SF-OA-TF凝胶可通过细胞摄取的方式进入RAW264.7细胞且表现出较低的细胞毒性;可以浓度依赖性方式有效抑制在诱导因子存在时的细胞迁移及IL-6、IL-1β、TNF-α这三种炎性因子的表达。本实验通过测量小鼠体重变化、关节肿胀程度,结合关节评分、炎性因子检测等评估皮下注射给药的SF-OA-TF凝胶对胶原诱导型关节炎(CIA)小鼠模型的治疗效果,结果表明TF组和SF-OA-TF组小鼠情况有显著改善,且SF-OA-TF组治疗效果较原料药更明显,其长效缓释的特性对改善RA的临床治疗有着良好的应用前景。(2)超重力纳米沉淀法制备聚乳酸-羟基乙酸-托法替尼纳米Medical officer缓释颗粒(NanoTF-PLGA)及其在RA中的性能研究。我们使用超重力纳米沉淀技术成功制备了NanoTF-PLGA,并通过体内点击此处外实验验证其对RA的治疗效果。结果表明,制备的NanoTF-PLGA具有较小的平均粒径(603.8 nm)、更均匀的形状、较高的载药量(7.64%)以及长期缓释效果(超过14天)。体外实验证明NanoTF-PLGA可通过细胞摄取的方式进入RAW264.7细胞且表现出良好的细胞毒性;可显著抑制RAW264.7细胞迁移,同时以剂量依赖性抑制IL-6、IL-1β、TNF-α这三种炎性因子的表达。我们通过测量小鼠体重变化、关节肿胀程度,结合关节评分、炎性因子检测等评估NanoTF-PLGA对CIA模型小鼠的治疗效果,结果显示皮下注射给药的TF组和NanoTF-PLGA组可显著缓解小鼠关节软骨损伤,减少关节腔周围炎性细胞浸润,而且,NanoTF-PLGA组效果更显著。综上所述,使用超重PF-6463922试剂力纳米沉淀技术制备的、皮下注射给药的NanoTF-PLGA具有良好的治疗效果,同时该制备方法操作简单、成本较低、无工业化放大效应,在治疗RA方面具有巨大的应用潜力。

大豆黄素通过巨噬细胞移动抑制因子抑制肝癌细胞增殖

[目的]探讨大豆黄素(Glycitein)通过巨噬细胞移动抑制因子(migration inhibitory factor,MIF)抑制肝癌细胞增殖的机制。[方方法]采用生物信息学分析大豆黄素作用靶点,并分析该靶点在Baf-A1肝癌组织中表达及其与临床不良表型之间的关系。将肝癌细胞(HepG2和HepB3)分成正常组、Glycitein组(Glycitein处理)和Glycitein+MIF组(转染MIF并用Glycitein处理)。采用不同浓度Glycitein干预,以细胞增殖实验检测细胞活力;细胞克隆实验检测Glycitein对细胞生长能力的影响;细胞周期实验检测Glycitein对细胞周期的影响;细胞凋亡实验检测Glycitein对细胞凋亡的影响;裸鼠移植瘤实验检测Glycitein体内抑制细胞增殖;免疫组化检测增殖细胞抗原Ki67;免疫印迹法检测细胞MIF以及凋亡相关蛋白表达。[结果] MIF是Glycitein作用靶点,在肝癌组织中高表达,且与肝癌临床不良表型有关。Glycitein作用后,能够抑制肝癌细胞增殖和细胞周期进程,并诱导细胞凋亡。裸鼠移植瘤实验显示,Glycitein作用裸鼠后,明显抑制移植瘤体积点击此处和质量增长。Glycitein组细胞Ki67相对表达量明显低于正常组(P<0.05)。Glycitein能够呈浓度和时间依赖性地抑制肝癌细胞MIF蛋白表达。与Glycitein+MIF-NC组比较,Glycitein+MIF组细胞增殖、克隆增高,而G0/G1期细胞比例减低,凋亡细胞数量减少(P<0.05)。与Glycitein+MIF-NC组比较,T cell immunoglobulin domain and mucin-3Glycitein+MIF组细胞B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)、细胞周期蛋白依赖性激酶2(cyclin-dependent kinases 2,CDK2)、细胞周期蛋白B1(cyclin B1,CCNB1)和Ki67蛋白表达增高(P<0.05),Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 related X,Bax)蛋白表达减低(P<0.05)。[结论] Glycitein通过靶向调控MIF蛋白表达,抑制肝癌细胞增殖,阻滞细胞周期,促进细胞凋亡。

半蒴苣苔属的质体基因组比较和系统发育研究

苦苣苔科半蒴苣苔属(Hemiboea C.B.Clarke),作为以我国喀斯特地区为分布和分化中心的代表类群之一,自2005年以来,陆续发表了15种2变种。由于先前使用的分子标记包含的信息位点有限,未能解决该属在芒毛苣苔族的系统位置和属内亲缘关系。本研究拟利用高通量二代测序技术对半蒴苣苔属物种48个个体(包括37种4变种)进行质体基因组测序、组装与注释,并且结合已公布的芒毛苣苔族19个物种的质体基因组,进行半蒴苣苔属和芒毛苣苔族的质体基因组比较和系统发育研究,探讨以下问题:(1)半蒴苣苔属质体基因组结构和进化动态;(2)半蒴苣苔属系统发育关系;(3)芒毛苣苔族质体基因组结构和进化动态、系统发育关系及潜在的分子标记。本研究不仅有助于理解半蒴苣苔属植物质体基因组的演化历史,解决半蒴苣苔属系统学问题,同时也能够为喀斯特地区的植物资源保护和利用提供理论基础。主要研究结果如下:(1)半蒴苣苔属质体基因组结构和进化动态半蒴苣苔属质体基因组大小在152,412-153,793 bp之间,GC含量为37.5-37.7%,呈典型的四分体结构。在每个物种中均注释到132个功能基因和1个假基因,其中蛋白质编码基因87个,t RNA基因37个以及r RNA基因8个;共线性分析结果表明该属质体基因组的结构高度保守,IR/Smolecular mediatorC边界未发现明显的扩张和收缩;核苷酸多样性结果显示非编码区的变异高于编码区,SC区的变异高于IR区,筛选出的12个高变区可以作为半蒴苣苔属植物研究的潜在分子标记,但其有效性仍有待进一步验证。(2)半蒴苣苔属的系统发育关系基于质体基因组数据的四套不同数据集(整个质体基因组序列、去掉一个IR区的质体基因组序列、80个蛋白编码基因和所有的非编码区Liproxstatin-1 IC50),分别利用最大似然法和贝叶斯法构建了迄今为止取样最全且分辨率高的半蒴苣苔属系统发育树。结果均支持:半蒴苣苔属是一个单系类群,包括7个分支,其中最基部类群为齿叶半蒴苣苔,小苞半蒴苣苔为次基部类群,剩下的分支内部种间关系也得到了很好的辨别。一些广布种呈现出分化,具体表现在:半蒴苣苔复合群不同个体位于不同分支;华南半蒴苣苔复合群中原变种和变种卷瓣半蒴苣苔之Pidnarulex使用方法间的关系不清楚;纤细半蒴苣苔与变种毛苞半蒴苣苔未聚在一起;水泡叶(疏脉半蒴苣苔)未与原变种贵州半蒴苣苔聚在一支,可能存在隐存种。(3)芒毛苣苔族质体基因组结构和进化动态、系统发育关系及潜在分子标记芒毛苣苔族质体基因组大小在152,373-156,614 bp之间,GC含量为37.2-37.7%,呈典型的四分体结构。每个物种中功能基因和假基因的数目与半蒴苣苔属完全一致;共线性分析、IR/SC边界扩张收缩分析均表明该族质体基因组高度保守;氨基酸的密码子偏好性RSCU值相似,均有30种偏好密码子;芒毛苣苔族质体基因组共鉴定585个简单重复序列、614个串联重复序列和837个散在重复序列。基于质体基因组数据的四套不同数据集(整个质体基因组序列、80个蛋白编码基因、10个高变蛋白编码基因和10个高变的非编码区),分别利用最大似然法和贝叶斯法构建芒毛苣苔族的系统发育树。结果表明:芒毛苣苔族内四个亚族及长蒴苣苔亚族中4个属均被强烈支持为单系。其中半蒴苣苔属与马铃苣苔属、报春苣苔属和石山苣苔属分别互为姐妹群。本研究在10个高变的蛋白编码基因基础上,结合苦苣苔科其他类群关于高变区的研究,提出ndhF、rps15和ycf1可作为该族核心的分子标记,其他区域(mat K、rps19、rpl32、rpl22、rps3、ndhD和clpP)也可以作为该族潜在的分子标记。

负载TLR7/8激动剂的金属有机框架纳米颗粒诱导细胞焦亡和增强抗肿瘤免疫治疗

癌症一直都是当今困扰医学界的一大难题,尤其是乳腺癌,其已经超越肺癌成为世界上发病率最高的癌症。目前传统的手术、化疗和放疗的方法很难根除病灶,使得术后极易出现复发的风险。随着科技的发展,很多新的治疗手段已经开始应用,如化学动力学治疗、光动力治疗、光热治疗,基因治疗和免疫治疗等。化学动力学是指可以通过芬顿或类芬顿反应在肿瘤弱酸性条件下产生活性氧(ROS)的原位治疗方法。基于化学动力学疗法(CDT)在肿瘤组织中产生的ROS可以被用于NLRP3的激活,并释放活化的caspase-1诱导细胞焦亡。细胞焦亡作为一种与免疫相关的新型程序性死亡方式(PCD),可以释放肿瘤相关抗原和损伤相关分子(DAMPs),诱导免疫原性细胞死亡(ICD),促进DC细胞成熟,启动抗肿瘤免疫反应,进而抑制肿瘤的生长。但是细胞焦亡作为一种促炎细胞死亡方式,随着IL-1β的激活数量的增加,会放大炎症反应,形成肿瘤炎性微环境,这为肿瘤生长提供了适宜的微环境,会导致肿瘤的增值、侵袭、转移、血管生成以及免疫逃逸。R848作为一种TLR7/8激动剂,除具有免疫刺激功能外,还可通过“化敌为友”调节免疫抑制细胞,重塑免疫抑制肿瘤微环境。通过将细胞焦亡与免疫佐剂R848结合,负载的R848一方面可以协同增强DC细胞的成熟,另一方面可以下调免疫抑制细胞改善免疫抑制微环境,两者ATM/ATR抑制剂联用不仅可以增强抗肿瘤效果,还可以同时引发强烈的先天和适应性抗肿瘤免疫作用来放大对肿瘤细胞的杀伤作用,导致肿瘤细胞的消除。基于此,我们设计了一种酸反应性金属有机框架纳米药物递送系统FeMn@R@H,一种已证实的抗肿瘤免疫调节剂R848被FeMn纳米金属有机骨架负载,形成FeMn@R纳米颗粒,FeMn@R通过交联与HA结合形成FeMn@R@H纳米颗粒,其为粒径190.8 nm的均匀菱形负电荷结构,在体外具有良好稳定性。此外,其在肿瘤酸性环境下可以响应性的产生ROS。以4T1乳腺癌细胞为模型,进行了细胞毒性和功能性研究。实验结果表明,FeMn@R@H的内吞过程Advanced medical care是时间依赖性的,在细胞内可以通过化学动力学诱导ROS的产生,激活NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡,导致细胞发生肿胀破裂和细胞内容物的释放(LDH),同时释放DAMPs诱导ICD效应对肿瘤细胞产生强大的杀伤作用。随后,在Balb/c小鼠上构建4T1乳腺癌模型,研究FeMn@R@H的体内抗肿瘤活性和抗肿瘤免疫效果。结果表明,FeMn@R@H可有效到达肿瘤Galunisertib分子量部位并且可以在荷瘤小鼠体内实现有效的肿瘤杀伤。此外,体内ICD效应研究和免疫学分析证实FeMn@R@H可以通过焦亡和抗肿瘤免疫治疗结合促进DC成熟,将免疫抑制细胞骨髓源性抑制细胞(MDSCs)和巨噬细胞(TAM)极化,降低免疫抑制细胞(MDSCs和M2巨噬细胞)的频率,增强免疫应答,促进抑瘤效果。

三叶鬼针草聚炔类同分异构体对胃癌HGC-27细胞侵袭转移的活性及作用机制研究

背景:胃癌由于缺乏早期临床症状,约80%的患者初诊时已进入晚期状态,且通常伴有淋Novel PHA biosynthesis巴结甚至远处器官转移,严重限制患者的预后和生存。因此,寻找安全有效的抑制胃癌细胞转移的候选药物至关重要。目的:课题组前期从三叶鬼针草(Bidens pilosa L.)95%乙醇提取物石油醚部位分得两个聚炔类同分异构体(E)-7-苯基-2-烯-4,6-二炔-1-庚醇(PolD-Lin-MC3-DMA半抑制浓度yacetylene 1)与(Z)-7-苯基-2-烯-4,6-二炔-1-庚醇(Polyacetylene 2)。现拟考察该对同分异构体在其非细胞毒浓度下的抗HGC-27细胞侵袭转移活性,并探究其可能的作用机制,为聚炔类化合物抗肿瘤侵袭转移的活性机制做出理论补充,为将其开发高效低毒的胃癌侵袭转移抑制剂提供理论依据。方法:采用MTT法、克隆形成实验检测Polyacetylene 1与2的细胞毒性并确定非细胞毒浓度;采用细胞粘附基质实验、划痕实验、Transwell迁移/侵袭实验检测非细胞毒浓度下Polyacetylene 1与2对HGC-27细胞体外粘附基质能力、迁移及侵袭能力的影响;采用间接免疫荧光检测非细胞毒浓度Polyacetylene 1对HGC-27细胞EMT相关蛋白表达、以及对β-catenin和YAP/TAZ核转移的影响;采用蛋白质免疫印迹实验检测非细胞毒浓度Polyacetylene 1对HGC-27细胞EMT相关蛋白、Wnt/β-catenin与Hippo/YAP信号通路相关蛋白表达的影响。结果:Polyacetylene 1在人胃癌HGC-27细胞中最敏感,IC_(50)值为52.83μM(48 h)。克隆形成实验及MTT实验结果显示Polyacetylene 1与2在其非细胞毒浓度(25、12.5、6.2Entinostat作用5μM)下对HGC-27细胞活力及单个细胞增殖能力无明显影响。细胞粘附基质实验、划痕实验、Transwell迁移/侵袭实验结果共同显示非细胞毒浓度Polyacetylene 1与2显著抑制HGC-27细胞粘附基质能力、迁移及侵袭能力,并呈剂量依赖性。此外,间接免疫荧光结果显示Polyacetylene 1显著增加HGC-27细胞E-cadherin荧光强度,减弱Vimentin荧光强度,以及细胞核内β-catenin与YAP/TAZ荧光强度;Western Blot结果显示Polyacetylene 1显著增加E-cadherin表达水平,降低Vimentin、Snail、MMP2、MMP9表达水平,逆转EMT过程;Polyacetylene 1抑制β-catenin核转移,同时降低β-catenin、p-β-catenin、GSK3β、p-GSK3β、c-Myc、ICAM-1、VCAM-1、MMP7、MMP14蛋白表达,阻断Wnt/β-catenin通路;Polyacetylene 1抑制YAP/TAZ核转移,同时降低MST1、p-MST1、YAP、p-YAP、LAST1、YAP/TAZ、MAPK、p-MAPK、Cyr61、Cox2、Sox2蛋白表达,阻断Hippo/YAP通路。结论:Polyacetylene 1与2在其非细胞毒性浓度下显著抑制人胃癌HGC-27细胞迁移侵袭。Polyacetylene 1可逆转HGC-27细胞EMT过程,靶向抑制β-catenin及YAP/TAZ的核累积与活化,促进其降解,继而阻断Wnt/β-catenin与Hippo/YAP信号通路,抑制靶蛋白表达,抑制HGC-27细胞侵袭转移。

植物对雨污交替生物滤池土壤环境及氮赋存形态的影响

近年来,雨水生物滤池作为典型的城市雨洪管理措施被广泛应用于解决城市径流污染,植物作CX-5461小鼠为生物滤池BLZ945抑制剂不可或缺的元素,其作用至关重要。本研究使用雨水和污水交替进水的模式,对比不同植物对滤池环境因子及氮磷污染物去除的影响,并分析植物对滤池土壤各Medical nurse practitioners氮形态含量时空分布的影响;此外,研究植物导致的滤池土壤酶活性变化以及微生物群落差异;最后分析了种植不同植物的滤池微生物优势菌群与环境因子、污染物去除效率、氮赋存形态等相关性,主要结论如下:(1)植物对滤池pH、含水率、电导率(EC)影响较大,滤池整体pH呈弱酸性,长期运行会使pH下降,黄菖蒲滤池pH最低,无植物滤池pH在6.5以上。不同滤池底层含水率都大于表层含水率,夏秋季变化更接近,美人蕉滤池差值最大,黄菖蒲滤池最接近。相反地,除无植物滤池外所有滤池表层EC都明显大于底层EC,夏秋季变化稳定,美人蕉滤池表底层EC均值差值最大,鸢尾滤池最小。(2)对比不同植物对滤池脱氮除磷性能的季节性影响可以发现夏秋季更有利于种植植物的生物滤池脱氮除磷。植物有效提高了滤池的脱氮除磷效率,美人蕉滤池TN、NH_4~+-N和NO_3~–N的平均去除效率最高,分别达到70.80%、79.49%和82.75%,无植物滤池效率最低且最不稳定。植物主要参与滤池氮循环,对于磷污染去除的促进效果不明显。种植不同植物的生物滤池土壤各形态氮含量中下层偏高,并随滤池运行时间的增加而逐渐升高。无植物滤池的绝对优势形态是碳酸盐结合态氮(CN),且各氮形态占比受季节影响最小。在夏秋季,CN成为其余四种植物滤池的优势形态,而离子交换态氮(IEN),铁锰氧化态(IMON)只会在春冬季成为优势形态,残留态氮(RN)是鸢尾和黄菖蒲滤池增量最大的氮形态。(3)随着时间的增加,不同植物滤池的酶活性先升高后下降,夏秋季活性明显高于春冬季,且滤池中下层活性普遍高于表层。相比较,鸢尾滤池总酸度和蔗糖酶活性最高,可以达到10.69 cmol/kg和59.43 mg/g·24 h,美人蕉滤池拥有最高的脲酶活性和硝酸还原酶活性,可以达到0.8541 mg/g·24 h和0.5377 mg/g·24h,无植物滤池酶活性是五种滤池中最低的。对于不同植物的生物滤池而言,长期运行都会增加土壤微生物群落丰度和多样性,美人蕉滤池有着最高的微生物丰度,ACE达到2043。在门水平上,变形菌门(Proteobateria)是五种生物滤池的绝对优势菌群,黄菖蒲仅约41%,其余滤池都高于50%。此外,微生物优势菌群与环境因子的相关性差异明显,优势菌群对滤池脱氮除磷效率和土壤氮形态的转化也有不同的影响。

帕罗西汀联合九味镇心颗粒治疗心脾两虚抑郁症的效果

目的:分析对心脾两虚抑郁症患者临床用药中使用帕罗西汀联合九味medial superior temporal镇心颗粒的治疗效果。方法:选取北京市朝阳区第三医院2020年8月至2022年8月收治的72例心脾两虚抑郁症患者,采用随机数字表法分Ipatasertib溶解度为对照组和观察组,各36例。对照组单一服用帕罗西汀治疗,观察组使用帕罗西汀联合九味镇心颗粒治疗,比较两组患者治疗前后的匹茨堡睡眠质量指数量表(PSQI)评分、贝克抑郁量表(BDI)评分、生活质量及用药不良反应。结果:治疗后,两组患者PSQI评分均降低,且观察组PSQI评分低于对照组,差异具有统计学意义(P <0.05);治疗后,两组患者BDI评分均降低,且EPZ-6438小鼠观察组BDI评分均低于对照组,差异具有统计学意义(P <0.05);治疗后,观察组患者生活质量评分高于对照组,不良反应发生率低于对照组,差异具有统计学意义(P <0.05)。结论:心脾两虚抑郁症患者采用帕罗西汀联合九味镇心颗粒进行治疗,提升患者睡眠质量和生活质量,且联合用药并不增加治疗过程中的不良反应。

两种膀胱准备方式在膀胱癌磁共振成像及术前鉴别肿瘤肌层浸润效能中的探索研究

目的:探讨两种膀胱准备方法对膀胱癌磁共振成像(MRI)的图像质量及术前鉴别膀胱癌肌层浸润诊断效能的影响。方法:76例膀胱癌患者行术前磁共振检查,分为A组和B组,分别行两种不同的膀胱准备方PCI-32765采购式,对比两种方法在高分辨率T2WI上图像质量有无差别,并结合弥Medicare prescription drug plans散加权成像(DWI)及动态增强成像(DCE)序列,判断两组病例磁共振图像对判断膀胱癌病灶肌层浸润情况的诊断效能有无确认细节影响。结果:两位阅片者之间一致性良好,A组(禁食4~6 h后于检查前排空膀胱并通过导尿管向膀胱内灌注约100 mL生理盐水后半小时内进行检查),与B组(检查前2 h排空膀胱内尿液后禁食禁水)相比,前者具有更优的膀胱充盈度评分;在诊断效能上,A组病例诊断肌层浸润性膀胱癌的敏感性及准确度均高于B组,但其差异无统计学意义。结论:检查前通过导尿管向膀胱内灌注适当容量(本研究为100 mL)生理盐水可作为一种辅助膀胱准备方法,帮助膀胱癌患者的膀胱适度充盈,以提高磁共振图像质量,进而提高膀胱磁共振诊断效能。