目的 探讨miR-2Lorlatinib半抑制浓度6a-5p通过调控环腺苷酸反应元件结合蛋白1(cAMP response element binding protein 1,CREB1)对脂肪来源MSCs(adipose-derived MSCs,ADSCs)成骨分化的调控作用及其作用机制。方法 取4只3～4周龄雌性C57BL/6小鼠脂肪组织，采用消化分离法分离培养细胞并传代。经细胞形态学观察以及流式细胞仪检测鉴定其为ADSCs后，取第3代细胞行成骨分化诱导。于诱导培养0、3、7、14 d行茜素红染色观察细胞钙沉积，ALP活性检测，实时荧光定量PCR检测miR-26a-5p和CREB1 mRNA表达，Western breast pathologyblot检测CREB1蛋白及其磷酸化（phospho-CREB1,p-CREB1）水平以及p-CREB1/CREB1。经starBase数据库预测miR-26a-5p和CREB1存在靶向结合位点后，取HEK-293T细胞行双荧光素酶报告基因实验验证靶向关系（以培养48 h后荧光素酶活性表示）。最后将miR-26a-p inhibitor（实验组）及对应阴性对照（对照组）转染至ADSCs中，成骨诱导培养7、14 d同上法行茜素GSK2118436临床试验红染色观察、ALP活性检测以及Western blot检测[CREB1、p-CREB1、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨钙素（osteocalcin,OCN）]。结果 经鉴定分离培养细胞为ADSCs。随成骨诱导培养时间延长，ADSCs钙化结节增多、ALP活性增加（P<0.05）；细胞中miR-26a-5p相对表达量逐渐降低，而CREB1 mRNA及蛋白相对表达量、p-CREB1蛋白相对表达量升高，其中7、14 d与0 d差异有统计学意义（P<0.05）;p-CREB1/CREB1各时间点间差异均无统计学意义（P>0.05）。通过starBase数据库预测发现miR-26a-5p和CREB1具有靶向结合序列，双荧光素酶报告基因实验显示过表达miR-26a-5p可明显抑制CREB1野生型荧光素酶活性（P<0.05）。成骨诱导7、14 d，与对照组相比，实验组细胞钙化结节数量、ALP活性以及CREB1、p-CREB1、OCN、RUNX2蛋白相对表达量均增加，差异均有统计学意义（P<0.05）；两组p-CREB1/CREB1差异无统计学意义（P>0.05）。结论 通过敲降miR-26a-5p上调CREB1及其磷酸化水平，能促进ADSCs成骨分化。