目的:研究表明,珍珠粉具有抗炎、抗氧化、促进伤口愈合及皮肤美白的功能。目前大多数研究仍基于使用珍珠或珍珠粉、水溶性基质(WSM)、酸溶性基质(ASM)或酸不溶基质(AIM)的混合物化合物作为实验材料来研究其生物学特性,而其发挥生物学功能的物质基础至今仍不清楚。本研究首先对珍珠粉提取物的抗紫外线及美白功能进行探究。其次,采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定了珍珠粉的蛋白质组成,对其生物矿化和包括伤口愈合、成骨性、抗氧化性、神经调节作用、皮肤美白作用、抗炎和抗凋亡作用以及其他免疫调节作用在内的多种药用功能进行了分析。最后,对补体控制蛋白结构域CCP进行功能探究。方法:(1)制备珍珠粉总提取物和蛋白提取物,加入于经紫外线照射过的A375细胞中,分别采用MTT法测定细胞增殖活性,多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,Na OH裂解法测定黑素合成含量。(2)采用LC-MS/MS分别检测了淡水无核珍珠粉的基质蛋白,并对照珍珠囊的转录组数据库进行鉴定。(3)经分析选定多肽CCP作用于人A375黑素瘤细胞,采用MTT法测DNA Methyltransferas抑制剂定细胞增殖活性,酶联免疫吸附法(ELISA)测定人补体成分3和4(C3和C4)浓度的变化。结果:(1)在紫外线照射下,A375细胞内酪氨酸酶活性和黑色素含量均显著上升(P<0.05);而珍珠粉总提取物能够增加A375细胞酪氨酸酶的活性(P<0.05),但不影响细胞内黑色素的含量;珍珠粉蛋白提取物不改变细胞酪氨酸酶的活性,却能抑制细胞内黑色素的产生(P<0.05),这说明珍珠粉总提取物能够保护A375黑色瘤细胞免受紫外线的伤害,其蛋白提取物在紫外线作用下还具有美白作用。(2)在珍珠蛋白质组学中共鉴定了190个蛋白质,并按其潜在的生物矿化功medicinal mushrooms能分为8类,包括细胞外基质(ECMs)或ECM结合蛋白、Ca CO_3晶体调节蛋白、生物矿化相关的酶、分泌此网站性糖结合蛋白、异质性免疫调节蛋白、二价阳离子结合蛋白、细胞骨架蛋白、核蛋白以及代谢相关蛋白,一组未定性的或假设的蛋白质。珍珠基质蛋白的组成和蛋白质序列中碳酸酐酶、血管性血友病因子A型(VWA)、酪氨酸酶和几丁质结合2(Cht BD2)等高频保守结构域的组成表明珍珠生物矿化模式的“几丁质-丝素蛋白凝胶蛋白-酸性大分子”模型。同时,91种珍珠基质蛋白按其潜在的药用功能被分为7类,包括伤口愈合、成骨性、抗氧化性、神经调节作用、皮肤美白作用、抗炎和抗凋亡作用以及其他免疫调节作用。(3)多肽CCP对A375细胞的增殖活性无显著影响(P>0.05),但能增加A375细胞内人C3和C4的浓度(P<0.05),说明多肽CCP对细胞补体系统有一定影响,可成为治疗免疫系统疾病的靶向药物。结论:经蛋白质组学分析,发现珍珠粉的有机质中有许多不同生物功能的蛋白质。进一步对其功能域的研究和细胞试验,在细胞水平上表明珍珠粉有抗紫外线和美白的功效以及能增强人体免疫功能,可为珍珠粉的药用开发提供基础资料和依据。