精氨酸双糖苷对黑色素瘤B16细胞的作用及其机制

为观察了精氨酸双糖苷(Arginyl-Fructosyl-Glucose,AFG)抑制黑色素瘤B16细胞的增殖及诱导凋亡作用,并初步探讨其Bcl-2、Caspase-3、Bax信号通路的作用机制。培养黑色素瘤B16细胞。配制1、2.5、5、10、25、50、75、100μmol/L的精氨酸双糖苷作用于黑色素瘤B16细胞,48h后利用CKK8法检测精氨酸双糖苷对B16细胞增殖影响;采用LDH检测给药后细胞LDH表达水平;用Hoechst 33258荧光染色法观察精氨酸双糖苷对B16细胞凋亡形态的影响;采用RT-PCR和Western Bl点击此处ot法分析精氨酸双糖苷对B16细胞Bcl-2、Caspase-3、Bax mRNA和蛋白表达的影响。结果表明:随着给药浓度的增大和培养时间的增加,精氨酸双糖苷对B16细胞的抑制率增加,48h后抑制率达到平台期。50、75Designer medecines、100μmol/L浓度的精氨酸双糖苷抑制效果最佳,B16细胞存活率显著降低(P<ICI 46474体内实验剂量0.05,P<0.01),可明显观察到B16细胞凋亡;RT-PCR和Western Blot试验发现精氨酸双糖苷75、100μmol/L组B16细胞Bcl-2 mRNA和蛋白水平明显减少(P<0.01),Bax和Caspase-3 mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.01)。精氨酸双糖苷可抑制黑色素瘤B16细胞增殖,诱导其凋亡,其机制可能与上调Bcl-2、Caspase-3,下调Bax有关。