淀粉样蛋白沉积疾病是由特定多肽或蛋白质聚集形成高度稳定的、具有细胞毒性的淀粉样蛋白纤维化沉淀所引起的。淀粉样肽β(Amyloidβ,Aβ)被认为是引起阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的致病蛋白。人胱抑素C(Viruses infectionHuman cystatin C,HCC)是一种广泛存在于人体的体液和组织液中的半胱氨酸蛋白酶抑制剂,可以抑制细胞外半胱氨酸蛋白酶活性。HCC可与可溶性的Aβ结合,研究发现HCC与Aβ的原纤维共定位于AD病人的脑部病灶组织,提示它具有一定的神经保护作用。组织蛋白酶B(Cathepsin B,Cat B)是一种半胱氨酸蛋白酶,在人脑购买Empagliflozin部主要存在于胶质细胞的溶酶体中。Aβ含量的增加可以刺激胶质细胞释放Cat B,对Aβ进行调节,但其在中枢神经系统中的淀粉样肽前体蛋白(Amyloid Precursor Protein,APP)处理和Aβ代谢中的作用仍有待确定。本研究拟通过研究细胞内双过表达HCC与Aβ,了解细胞内Aβ聚集对HCC表达情况的敏感性。运用分子动力学方法阐述三个蛋白质相互作用模式和动态过程,预测三者之间的相互作用关系,最终阐明HCC-Cat B轴对Aβ成纤维的影响机理。利用毕赤酵母可作为表达外源蛋白的“细胞工厂”这一特性,我们首先构建了三组毕赤酵母重组菌株:过表达HCC的酵母菌株,过表达Aβ以及双过表达HCC和Aβ的酵母菌株。通过分别诱PD0325901溶解度导不同菌株表达目的蛋白,观察和分析蛋白表达情况,我们发现HCC在酵母细胞外被大量分泌表达,细胞内仍存留有少量蛋白;其次,酵母细胞外并没有检测到Aβ的分泌表达,但其在细胞内有少量驻留,提高分子伴侣表达可以提高Aβ的表达量,Aβ大量以单体形式驻留在细胞内,推测这是由于淀粉样蛋白在表达量提高时会因为分子伴侣的作用,在细胞内大量驻留。最后,运用分子对接方法模拟解析三个蛋白质相互作用关系,确定三者之间的相互作用过程。本研究的意义在于通过了解HCC,Cat B,Aβ三者间相互作用的情况探寻HCC可能在AD早期发挥作用,而Cat B会在AD后期发挥作用的理论依据,为AD的早期预防和治疗奠定基础。