阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease AD)因1906年德国医生Alosi Alzheimer描述此病而命名,是一种与机体衰老相关的神经系统退行性变的疾病,是痴呆最常见类型。年龄与发病率呈线性相关。女性发病率高于男性。阿尔茨海默症的共同临床表现特征:异常的精神行为、记忆丧失、思维混乱、思考和沟通障碍。随着医疗保障体系的健全,人类寿命的延长,全球老龄化问题越发突出,近期流行病学调查显示,AD发病率有逐年升高趋势,已成为继心脑血管、肿瘤后的第四大杀手,严重危害着老年人的心身健康,对家庭、社会造成严重的影响,显然,AD已经成为公认的医疗卫生问题和全球亟待解决的问题之一。考虑AD发病机制由多因素共同参与,且氧化应激和炎症反应已被证明有助于Aβ42诱导的神经毒性。过度的氧化应激反应通过核因子κB(NF-κB)通路等多种信号通路开启炎症反应,从而对神经系统的损伤进一步加剧。近期炎性细胞因子学说越来受到大家的关注,不少动物实验证实在AD患者的神经退行性变是脑内炎症免疫反应异常激活细胞损伤和死亡。为进一步明确AD炎症反应与认知功能的相关性,了解AD发病机制中细胞损伤的相关机制,同时更深一步探索我国中医药在AD治疗中的价值。本研究以临床结合实验的方式,从以下两方面进行相关探讨,第一部分炎性细胞因子与阿尔茨海默病认知功能的相关性研究。第二部分Maackiain通过启动PKC-Nrf2通路预防淀粉样蛋白诱导的细胞损伤,进一步明确细胞损伤的机制。第一部分炎性细胞因子与阿尔茨海默病认知功能的相关性研究目的:探讨老年阿尔茨海默病(AD)患者中炎性细胞因子与认知功能的相关性。方法:选取2020年2月-2022年12月我院98例AD患者,并收集受试者的一般资料;根据简易精神状态量表(Mini-mental state examination MMSE)、临床痴呆评定量表(Clinical dementia rating scale,CDR)将AD病人进行分组,其中39例的轻度认知功能障碍组、32例的中度认知功能障碍组、27例的重度认知功能障碍组,同时选取同期体检的健康志愿者90名为对照组。收集血清:采用免疫荧光法进行检测IL-1β(Interleukin-1β)、IL-6(Interleukin-6)、TNF-α(Tumor necrosis factor-α)、IFN-γ(interferon-γ)的水平;比较四项炎性细胞因子水平的差异;Ras抑制剂以纳入患者为研究对象,分析炎性细胞因子在AD中MMSE评分的相关性,以AD组为研究对象,分析患者炎性细胞因子水平与AD痴呆认知的相关性。结果:1.对于98例AD患者外周炎性细胞因子的研究发现,炎性细胞因子在AD患者中的表达明显高于健康对照组,P<0.05,差异具有统计学意义。提示炎性细胞因子参与到了AD的发生发展过程中。2.在AD中IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平等均明显高于正常健康对照组,但与MMSE评分无相关性,考虑炎性细胞因子与疾病的严重程度无相关性,P>0.05,无统计学意义。3.将外周炎性细胞因子作为AD诊断及判定痴呆严重程度的生物标志物并不合适。结论:炎性细胞因子水平较健康对照组升高,与整体人群的认知功能相关,但与AD患者VX-765体外的痴呆严重度无明显相关性。第二部分Maackiain通过启动PKC-Nrf2通路预防淀粉样蛋白诱导的细胞损伤目的:淀粉样蛋白β肽(Aβ)通过氧化应激和炎症反应诱导神经毒性。大量淀粉样蛋白β(Aβ),特别是Aβ42的脑沉积促进了阿尔茨海默病(AD)的发展。Maackiain又称马卡因是一种源自苦参的化合物,具有抗氧化、抗骨质疏松、抗肿瘤和免疫调节作用。Maackiain是否可以减少由Aβ积累引起的神经毒性仍不清楚。方法:通过细胞培养、si RNA转染、蛋白质印迹分析、DCFH-DA测定、线粒体膜电位测定(ΔΨm)、SOD活性和MDA水平测量等方法进行分析,对测量数据均以平均值±标准差的检测方法检测。组间比较采用方差分析和q检验的方法,进行综合统计分析。结果:本研究发现在PC12细胞中Maackiain下调Aβ42诱导的细胞损伤和细胞凋亡。Maackiain可防止Aβ42刺激诱导的氧化应激产生,并减少Aβ42引起的PC12细胞线粒体膜电位损伤。Maackiain增加超氧化物歧化酶活性并降低由Aβ42诱导的丙二醛含量。机制研究表明Maackiain增加核内Nrf2表达,RNA干扰导致的Nrf2沉默削弱了Maackiain对Aβ暴露的保护作用。此外,蛋白激酶C的特异性拮抗剂Calphostin C减弱了Maackiain对Nrf2核转位的促进作用。此外,cmedical terminologiesalphostin C减弱了Maackiain在PC12细胞中的抗氧化和抗炎能力。结论:Maackiain通过PKC信号通路促进Nrf2激活,从而防止PC12细胞受到Aβ诱导的氧化应激和细胞损伤,表明Maackiain是一种潜在的AD治疗药物。