芬太尼、吗啡等阿片类药物是临床常用的镇痛药,主要用于中、重度疼痛患者的治疗。然而,长期使用此类药物往往伴有便秘、呼吸抑制、成瘾和耐受等副作用的产生,严重限制了此类药物在临床上的使用。因此,开发低副作用或无副作用的新型镇痛药物具有重大的科学意义和潜在的临床应用价值。近年来,基于阿片药效团和NPFF药效团构建的多靶点镇痛化合物,在开发高效镇痛、低副作用的新型镇痛分子方面取得了重要的研究进展。DN-9是本课题组前期利用阿片和神经肽FF关键药效团构建的多靶点化合物。药理学实验结果表明,外周注射DN-9不能通过血脑屏障(BBB),体内容易被酶降解,镇痛作用时间为90 min,口服镇痛活性较弱。为了进一步提高DN-9的成药性,课题组采用酰胺键环化修饰策略获得了一系列多靶点类似物。研究发现,环化类似物可以同时作用于阿片和NPFF受体,且外周注射镇痛活性显著提高,产生更长效的镇痛作用。值得注意的是,c[D-Lys~2,Asp~5]DN-9具有口服镇痛活性。对c[D-Lys~2,Asp~5]DN-9进一步的研究发现,随着酰胺环大小从17依次缩小至14,类似物的镇痛活性也会逐渐降低,当酰胺键成环大小为17时,c[D-Lys~2,Asp~5]DN-9表现出最好的镇痛活性。因此,本课题以酰胺键修饰的c[D-Lys~2,Asp~5]DN-9(酰胺键成环为17)为化学模板分子,进一步通过引入非天然氨基酸D型鸟氨酸Oncology center(D-Orn),利用2位的D-Orn和5位的谷氨酸(Glu)酰胺键成环修饰而构建了其类似物OFP022(Tyr-c[D-Orn-Gly-N-Me-Phe-Glu]-Pro-Gln-Arg-Phe-NH_2),并对其进行化学合成,以及体内和体外的药理学活性鉴定。首先,采用cAMP体外功能实验评价了OFP022的药理学特性,实验结果表明,化合物OFP022可同时激活Mu-(MOR)、Delta-(DOR)、Kappa-(KOR)阿片受体,以及NPFF_1和NPFF_2受体。与母体DN-9相比,对KOR和NPFF_1受体的激动活性分别提高了13.6倍和22.7倍,而对MOR、DOR和NPFF_2受体的激动活性均稍有降低,即分别降低了2.1倍、2.7倍和1.8倍。因此,和母体相类似,OFP022是一种阿片和NPFF受体的多靶点激动剂。小鼠体内实验结果表明,在光热甩尾急性痛实验中,皮下注射和口服化合物OFP022可产生剂量依赖性镇痛作用。OFP022的镇痛ED_(50)值分别为0.017nmol/kg和0.14 nmol/kg。与c[D-Lys~2,Asp~5]DN-9相比,皮下注射和口服OFP022的镇痛ED_(50)分别提高了16.5倍和10倍,镇痛时间均可以达到240 min。此外,进一步的药理学结果表明,口服化合物OFP022在炎症痛和神经痛模型中均产生剂量依赖性镇痛作用,镇痛时间均超过180 min。最后,系统评价了口服OFP022是否能产生镇痛耐受、便秘和成瘾等阿片样副作用。在光热甩尾实验中,连续8天口服最高镇痛剂量的OFP022未出现镇痛耐受现象;在体内胃肠运动实验中,口服化合物OFP022会剂量依赖地抑制上消化道的运动,但在有效镇痛剂量范围下对小鼠胃肠运动无明显的影响。利用条件位置偏好性(CPP)实验、开放场实验和Ipatasertib生产商纳洛酮诱导的阿片戒断实验评价口服OFP022的心理和生理成瘾性,即在小鼠的开放场实验中,口服OFP022无明显的运动增强现象;在CPP实验中,小鼠口服化合物OFP022未出现条件位置偏爱性;在纳洛酮诱导的阿片戒断实验中,口服化合物OFP022未出现戒断症状。因此,在有效镇痛剂量下,口服OFP022未出现明显的镇痛耐受、便秘和成瘾等阿片样副作用。综上所述,OFP022是一种全新结构的酰胺键环化的DN-9类似物,具有阿片和NPFF受体的多靶点激动活性。与母体c[D-Lys~2,Asp~5]DN-9相比,皮下注射和口服OFP022能产生更强的镇痛活性。并且,OFP022也保留了母体c[D-Lys~2,Asp~5]DN-9的口服长效镇痛作用,同时无明显的镇痛耐受、便www.selleck.cn/products/lxh254秘和成瘾等阿片样副作用。因此,该研究进一步证实酰胺键环化策略能有效提高阿片/NPFF受体多靶点肽类分子的成药性,有望为长效、低副作用的镇痛肽类新药物研发提供新的思路。