共轭亚油酸对肉牛肌内前脂肪细胞增殖与分化的影响

前脂肪细胞广泛存在于牛肉的肌纤维中,同时,在肌束间也分布有大量前脂肪细胞,其增殖以及分化水平在牛肉大理石花纹的MLN8237 molecular weight形成过程中影响较大,可直接影响牛肉品质。本研究旨在探究共轭亚油酸(conjugated linoleic acid, CLA)对鲁西黄牛(Bos taurus)肌内前脂肪细胞增殖与分化的影响,通过构建体外细胞模型,设计0、50、100和150μmol/L CLA处理培养于基础培养基中的肉牛肌内前脂肪细胞4 d,研究CLA对肉牛肌内前脂肪细胞增殖的影响。流式细胞术分析显示,与对照组相比,100μmol/L CLA显著增加了S期细胞比例(P<0.05,增幅1.6selleckchem JQ13倍),减少了G0/G1期细胞比例(P<0.05,降幅9.2%),其余处理组差异不显著(P>0.05),表明100μmol/L CLA显著促进肉牛肌内前脂肪细胞的增殖(P<0.05)。不同剂量的CLA处理培养细胞6 d,细胞内脂肪含量测定和qRT-PCR分析表明,100和150μmol/L CLA显著增加了肌内前脂肪细胞胞质内脂肪含量(P<0.05);其中,50、100和150μmol/L CLA可使得过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisogenetic generalized epilepsiesme proliferator-activated receptor γ, PPARγ)、增强子结合蛋白(CCAAT/enhancer binding protein α, C/EBPα)的表达显著提升(P<0.05),其中,100μmol/L CLA处理组同对照组相比,PPARγ基因的表达水平升高幅度约3倍,C/EBPα基因的表达水平升高幅度约2倍。设计CLA (100μmol/L)、胰岛素(10μg/mL)和地塞米松(0.25μg/mL) 4种组合的分化培养基诱导培养细胞6 d,CLA、胰岛素和地塞米松同时加入培养基时,处理细胞的胞质中脂肪含量显著增加,而当分别去除地塞米松、胰岛素或CLA后,细胞质中脂肪的含量分别下降了74%、68%和31%。以上结果表明,CLA可有效促进肉牛肌内前脂肪细胞增殖,诱导细胞胞质内脂滴的生成,且能升高PPARγ和C/EBPα基因的表达水平,从而刺激肉牛肌内前脂肪细胞的分化。本研究为优良肉质地方黄牛培育及营养调控肉牛肌内脂肪沉积提供理论基础。