慢病毒介导的AQP8稳定表达对子宫颈癌SiHa细胞迁移能力的影响

<正>水通道蛋白(aquaporins,AQP)是一个疏水的、小而完整的膜蛋白家族,广泛表达于动植物体内,相对分bio metal-organic frameworks (bioMOFs)子质量约为30 000,迄今为止,哺乳动物体内共发现有13个AQP成员(AQP0~12)。研究提示,AQP作为一个关键因素直接参与CB-839 IC50人类恶性肿瘤的发生过程,与正常人绒毛滋养层细胞相比,AQP8在绒毛膜癌(绒癌)细胞系JAR细胞中表达异常上调,可能是导致绒癌发生的原因之一。肿瘤细胞的迁移是肿瘤浸润和转移的关键步骤。目前已报道至少有12种肿瘤细胞在人或鼠体内表达AQP。本研究使用红色荧光蛋白(RFP)标记的重组慢病毒载体将AQP8转染入宫颈癌细胞系SiHa细胞,建立稳定表达AQP8的SiHa细胞系,探讨AQP8对SiHa细胞体外迁移能力的影响。一、材料与方法1.材料来源:慢病毒载体pLVX-IRES-tdTomato-RFP为美国Clontech公司产品;含3个包装质粒PLp1、PLP2、pLP/VSVG的慢病毒包装selleck化学系统、脂质体lipofectamine 2000为美国Invitrogen公司产品;JM109感受态细胞为北京全式金生物技术有限公司产品;限制性内切酶EcoR I、BamH I、XhoⅠ及T_4 DNA连接酶均购自美国NEB公司;大规模质粒抽提试剂