目的:免疫性血小板减少症(Immune thrombocytopenia,ITP)是一种常见的出血性疾病,本病属于获得性自身免疫病,在规范应用常规治疗后,仍有一些难治性病例,其生命安全及生活质量会受到严重影响。因此,深入探究ITP的发病机制,积极寻找新的治疗靶点,对于提高ITP患儿的生活质量十分重要。目前针对ITP发病机制的研究主要集中在由于体液免疫或细胞免疫异常引起的血小板过度破坏。现已有研究表明细胞自噬影响血小板的生成,但针对自噬导致ITP患儿巨核细胞生成血小板障碍的研究较少。本研究初步探究ITP中巨核细胞自噬相关蛋白的表达水平,并探讨ITP中巨核细胞自噬水平和临床因素相关性,为ITP的治疗提供新的视角。方法:1.收集25名诊断为ITP且除外其他疾病的患儿,对照组为于本院诊断为缺铁性贫血且除外其他疾病、血小板计数正常的10例儿童患者(血小板正常的缺铁性贫血患儿的发病机制主要为铁缺乏导致血红蛋白生成减少,属于营养性贫血,该过程不涉及巨核细胞系发育异常及免疫紊乱)。对照组年龄及性别与ITP患儿相匹配,采集骨髓液并进行涂片。2.应用免疫组织化学染色对骨髓涂片染色,由2名肿瘤血液检验室医生镜检,统计全片巨核细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ、p62阳性表达率,取平均数,计数差异超过3%者重新镜检,同时拍照。3.运用SPSS26.0及Graph Pad分析ITP患儿与对照组巨核细胞自噬相关蛋白的表达差异,同时收集ITP患儿临床资料,分析自噬相关蛋白表达与临床相关因素(年龄、疾病分期、出血程度、血小板计数、CD_4~+、CD_8~+、CD_4~+/CD_8~+、CD_3~+、CD_(19)~+、CD_(56)~+NK、总淋巴细胞计数、血沉、补体C3、补体C4、CRP、Ig G、Ig A、Ig M等)的相关性,同时根据ITP患儿血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa特异性抗体是否阳性将其分为血小板抗体阳性组和血小板抗体阴性组并对其巨核细胞自噬相hepatopulmonary syndrome关蛋白阳性表达率进行差异性检验。结果:1.为明确ITP患儿骨髓中巨核细胞自噬相关蛋白表达水平,采用免疫组织化学染色技术检测ITP患者骨髓涂片中LC3Ⅱ、p62表达情况。结果显示:与对照组相比,ITP患儿骨髓涂片中巨核细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ、p62阳性率均显著高于对照组,且差异具有显著性(ITP组LC3Ⅱ31.0±13.1%,对照组LC3Ⅱ12.0±3.9%;ITP组p62 34.0±16.7%,对照组p62 13.0±2.0%,P<0.001)。2.对连续正态分布的临床资料采用Pearson双变量相关分析的方法,有序变量等非正态分布临床资料采用Spearman双变量相关分析的方法进行统计分析ITP患儿自噬相关蛋白表达阳性率与临床资料的相关关系。结果显示:(1)ITP患儿骨髓涂片中巨核细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ阳性表达率与ITP患儿的疾病临床分期呈强正相关关系(r=0.742,P<0.001);与Ig A呈中等程度正相关关系(r=0.520,P<0.05);与ITP患儿CD_4~+(r=-0.679,P<0.001)、CD_4~+/CD_8~+(r=-0.735,P<0.001)、CD_3~+细胞(r=-0.629,P<0.01)及总淋巴细胞计数(r=-0.596,P<0.01)呈负相关关系,与CD_8~+、CD_(19)~+、CD_(56)~+、补体C3、C4、年龄、CRP、血沉、出血程度、血小板计数均无相关性。(2)p62阳性表达率与ITP患儿的疾病临床分期呈正相关关系(r=0.522,P<0.05);与Ig A呈中等程度正相关关系(r=0.433,P<0.05);与ITP患儿CD_4~+(r=-0.614,P<0.01)、CD_4~+/CDselleckchem Lapatinib_8~+(r=-0.560,P<0.01)、CD_3~+细胞(r=-0.543,P<0.05)及总淋巴细胞计数(r=-LGX818价格0.510,P<0.05)呈负相关关系,与CD_8~+、CD_(19)~+、CD_(56)~+、补体C3、C4、年龄、CRP、血沉、出血程度、血小板计数均无相关性。3.采用独立样本t检验对ITP患儿血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa特异性抗体阳性组和血小板膜抗体GPⅡb/Ⅲa阴性组自噬相关蛋白阳性表达率进行差异性检验,结果表明ITP患儿血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa特异性抗体阳性组与阴性组自噬相关蛋白LC3Ⅱ、p62阳性表达率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:1.ITP患儿巨核细胞与缺铁性贫血患儿巨核细胞均存在自噬的发生。2.与正常发育的巨核细胞相比,ITP患儿骨髓涂片中巨核细胞自噬表达水平异常,存在自噬起始被异常激活并且过程被异常阻滞。3.随着病程延长,ITP患儿巨核细胞自噬水平异常程度增加。4.自噬可能参与了ITP患儿细胞免疫及体液免疫紊乱的发病机制,自噬异常与细胞免疫及体液免疫紊乱相关。5.血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa特异性抗体阳性ITP患儿与抗体阴性ITP患儿巨核细胞自噬水平无显著性差异。