目的重型颅脑创伤(TraumaticBioelectronic medicine brain injAdezmapimodury,TBI)后继发性脑损伤是导致残疾和死亡的重要原因,其核心病理机制尚不明确,严重限制了有效治疗手段的研发和应用。最新研究显示,免疫炎症和凝血反应在胚胎发育过程中具有共同的起源,二者的核心通路紧密相连,被统称为免疫血栓反应(Immunothrombosis,IT)。异常的IT反应可能引发一系列继发性损害,如过度炎症反应、凝血功能障碍以及全身性病理改变等。然而,TBI后IT的具体作用机制仍未明晰。中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)是一种由激活的中性粒细胞释放的网状DNA结构,具有强烈的促炎、促凝血和诱导内皮细胞功能障碍的作用,是免疫血栓反应中的关键介质。TBI后,由于脑内微循环障碍和血脑屏障的破坏,为免疫血栓反应的发生提供了有利条件。然而,NETs在此过程中所扮演的具体角色及其机制仍有待深入研究。方法 (1)采用电控皮质冲击装置制备小鼠重度TBICH-223191细胞培养模型,通过腹腔注射肽基精氨酸脱亚胺酶4(Peptidyl arginine deiminase 4,PAD4)抑制剂Clamidine,研究它们在TBI后颅内免疫血栓形成中的作用。(2)通过定位注射重组PAD4腺病毒,诱导小鼠颅内中性粒细胞过表达PAD4,探索NETs在TBI后颅内免疫血栓中的功能。(3)使用mNSS评分、转棒疲劳仪测试、圆筒实验和转角实验评估小鼠接受药物治疗后的神经功能恢复情况。(4)通过EB渗漏、免疫荧光染色、IgG渗漏实验、核磁共振成像和激光散斑成像,观察药物治疗对小鼠脑微循环、脑水肿和血脑屏障恢复的影响。结果 (1)对TBI小鼠进行PAD4抑制剂Cl-amidine治疗能显著改善神经功能、修复血脑屏障、减轻脑水肿和缓解脑微循环障碍。(2)通过给予TBI小鼠PAD4抑制剂治疗能有效改善颅内免疫炎症反应和微血栓形成。(3)通过腺病毒过表达皮层PAD4促进了TBI后脑内NETs形成并加重了颅内免疫血栓反应。结论 (1)TBI后脑水肿半暗带区域中性粒细胞聚集以及其释放的NETs参与微血栓形成,初步揭示了TBI后颅内免疫血栓反应的潜在机制。(2)TBI后抑制NETs能有效改善神经功能、血脑屏障破坏、脑水肿和微循环障碍,表明NETs作为临床TBI潜在的治疗靶点。