目的本研究通过动物实验观察Treg/Th17细胞分化及其相关因子Foxp3、RORγT等的变化以探讨续苓健骨方对OP的免疫调节机制。方法健康雌性SPF级Sprague-Dawley(SD)大鼠,6月龄,24只,随机分成假手术组、骨质疏松模型组、续苓健骨方组,每组8只,构建去卵巢大鼠模型,造模一个月后,按照人鼠剂量换算6.25倍,每日1ml/100g连续灌胃给药16周,结束后采集大鼠腹主动脉血液、脾脏、胸腺及骨组织,检测大鼠胫骨骨密度,HE染色观察病理变化,计算脾脏、胸腺指数,检测血常规,ELISA检测血清中IL-10、TGF-β、IL-6、IL-17含量,RT-PCR、Westen-Blot检测骨组织中OPG、RANKL、Foxp3、RORγt的m RNA和蛋白表达,流式细胞术检测Th17、Treg细胞数量,采用SPSS24.0、ImaSAHA细胞培养ge J、Graph Pad Prism 8、Flow Jo10.8.1等软件对各数据进行统计分析。结果(1)双能X线:模型组较于假手术组骨密度降低(P<0.05),续苓健骨方组较于模型组骨密度显著升高(P<0.05)。(2)HE染色:与Sham组相比,OVX组骨小梁数量明显减少且欠完整,稀疏且未连接成网状,大部分断裂,出现大量纤维组织,髓腔内含有大量空泡状脂肪细胞。XL组较OVX组骨小梁数目增多,结构明显改善,形似Sham组,白色脂肪细胞减少。(4)ELISA:与假手术组相比,骨质疏松模型组的IL-17和IL-6血清含量显著增多(P<0.05或0.01),IL-10、TGF-β血清含量减少;与骨质疏松模型组相比,续苓健骨方组的IL-17和IL-6血清含量显著降低(P<0.05或0.01),续苓健骨方组的IL-10、TGF-β血清含量增加。(5)RT-PCR:与假手术组比较,骨质疏松模型组的Foxp3、OPG m RNA表达降低(P<0.05或0.01),OVX组的RORγT、RANKL m RNA表达升高(P<0.05或0.01);与骨质疏松模型组比较,续苓健骨方组的Foxp3、OPG m RNA表达升高(P<0.05或0.01),RORγT m RNA表达降低(P<0.05或0.01);RANKL m RNA有表达降低的趋势。(6)Wstern-STM2457体外Blot:与假手术组比较,骨质疏松模型组的Foxp3、OPG蛋白表达降低,OVX组的RORγT、RANKL蛋白表达升高(P<0.05或0.01);与骨质疏松模型组比较,续苓健骨方组的Foxp3、OPG蛋白表达升高,RORγT、RANKL蛋白表达降低(P<0.05或0.01)。(7)流式细胞术:与假手术组比较,OVX组的Treg细胞数量减少,OVX组的Th17细胞数量增多;与OVX组比较,续苓健骨方组的Treg细胞数量增多(P<0.05),Th17细胞数Immunoassay Stabilizers量减少。结论续苓健骨方可调节免疫细胞Treg、Th17亚群分化及其相关因子,进而调控OPG/RANKL通路、抑制破骨细胞分化,提高大鼠骨密度,该作用是续苓健骨方治疗OP的机制之一。