红景天苷对HepG2细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响

目的:红景天苷是从著名的中草药红景天的根茎部中提取得到的,是红景天中含量最高的天然活性化合物。本实验旨在研究红景天苷对人源性肝癌细胞(HepG2细胞)增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法:选取未作任何处理的HepG2细胞作为空白组,以终浓度为0 μmol·L~(-1)、20 μmol·L~(-1)、40 μmol·L~(-1)和80 μmol·L~(-1)红景天苷处理的HepG2细胞作为实验组。采用多功能细胞分析仪测定红景天苷对HepG2细胞增殖的影响,划痕实验测定红景天苷对HepG2细胞迁移能力的影响,Transwell小室实验测定红景天苷对HepG2细胞侵袭能力的影响,倒置显微镜观察红景天苷对HepG2细胞形态的影响,透射电镜观察红景天苷对HepG2细胞中线粒体的影响,流式细胞术分析红景Incidental genetic findings天苷对HepG2细胞凋亡及周期分布的影响,荧光定量PCR(q-PCR)技术测定红景天苷对HepG2细胞相关凋亡基因的影响,蛋白免疫印迹技术测定红景天苷对HepG2细胞相关迁移、侵袭及凋亡蛋白的影响。结果:与空白组比较,红景天苷(20, 40, 80 μmol·L~(-1))组的细胞指数均明显下降,且呈时间和剂量依赖性(P<0.05);与空白组比较,红景天苷(20, 40, 80 μmol·L~(-1))组的愈合面积均明显增加,且呈时间和剂量依赖性(P<0.05);与空白组比较,红景天苷(20, 80 μmol·L~(-1))组中能够穿过Matrigel基质胶的HepG2细胞数量呈剂量依赖性减少(P<0.05);与空白组比较,红景天苷(20, 40, 80 μmol·L~(-1))组的总凋亡率呈剂量依赖性升高,且阻滞细胞于G2/M期(P<0.05);与空白组相比,红景天苷(20, 80 μmol·L~(-1))组中上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)表达呈剂量依赖性升高(P<0.05),神经钙黏附蛋白(N-cadherin)表达CH-223191说明书呈剂量依赖性降低(P<0.05)。与空白组相比,红景天苷(20, 40, 80 Staurosporine配制μmol·L~(-1))组中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)基因的mRNA表达、BCL-2相关X蛋白(Bax)、Caspase-3蛋白及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-9蛋白(Caspase-9)表达均呈剂量依赖性升高(P<0.05),肌动蛋白结合蛋白(Girdin)及家族B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)表达均呈剂量依赖性降低(P<0.05)。结论:红景天苷对HepG2细胞的增殖、迁移及侵袭均具有抑制作用,且通过线粒体途径诱导HepG2细胞凋亡。表明红景天苷可作为一种潜在的肝癌化疗候选药物。