目的:口腔癌是发生在头颈部的一种常见的恶性肿瘤,传统的治疗方法并不能有效的降低其死亡率、减少术后复发率,本研究旨在探讨毛兰素(Erianin)对口腔癌细胞生长、迁移及侵袭的影响,并进一步探索其潜在的机制,为口腔癌的治疗提供新的思路和前景药物。方法:CCK-8实验、细胞克隆实验、细胞划痕实验和Transwell实验用于检测不同浓度Erianin对口腔癌KB细胞的增殖、迁移和侵袭的影响。荧光探针用于检测活human medicine细胞内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)和铁离子的变化。此外测定了细胞内丙二醛(Malondialdehyde,MDA)和谷胱甘肽(Glutathione,GSH)的水平。免疫印迹法检测不同浓度Erianin及铁抑素-1(Ferrostatin-1,Fer-1)处理后细胞内铁死亡相关蛋白 NF-E2 相关因子 2(NF-E2-related factor 2,Nrf2)、铁蛋白重链 1(Ferritin heavy chain 1,FTH1)、血红素加氧酶1(Heme oxygenase 1,HO-1)及谷胱甘肽过氧BI 10773供应商化物酶4(Glutathione peroxidase 4,GPX4)的表达。结果:1.CCK-8及细胞克隆实验显示:Erianin以浓度依赖的方式抑制KB细胞的增殖(P<0.001),与对照组相比较,KB细胞的菌落数量显著减少(P<0.001),说明Erianin抑制了 口腔癌KB细胞的增殖。2.细胞迁移和侵袭实验结果显示:与对照组相比,不同浓度的Erianin处理24小时后,KB细胞的迁移减少(P<0.05),并且,Erianin显著抑制KB细胞的侵袭(P<0.001),表明Erianin抑制了 口腔癌KB细胞的侵袭及迁移。3.细胞内GSH、MDA的含量及ROS和铁离子水平的检测结果显示:Erianin处理的KB细胞内GSH水平显著降低(P<0.001),MDA水平显著升高(P<0.001)。采用荧光探针检测KB细胞中ROS含量,发现Erianin显著增加了 ROS水平且呈剂量依赖(P<0.001)。此外,KB细胞内观察到Fe2+荧光强度显著升高,并且其荧光强度含量随Erinain浓度的增加而增强。提示Erianin对口腔癌KB细胞的抑制作用可能与铁死亡相关。4.Fer-1和Erianin联合应用的结果表明:采用Fer-1和Erianin联合孵育KB细胞,Fer-1逆转了 Erianin造成的细胞损伤(P<0.001)。此外,经Fer-1处理后,Erianin诱导的细胞内MDA、ROS和GSH含量变化明显逆转(P<0.01),说明Erianin诱导口腔癌KB细胞发生铁死亡。5.免疫印迹法检测给予Erianin后细胞内铁死亡相关蛋白的含量变化:结果显示KB细胞中 Nrf2(P=0.001)、GPX4(P=0.027)、HO-1(P=0.017)、FTH1(P=0.031)的表达下调。当Fer-1和Erianin联合处理后逆转了细胞内Nrf2(P=0.006)、HO-1(P=0.035)和GPX4(P=0.049)的表达水平,表明Erianin通过Nrf2/HO-1/GPX4途径诱导KB细胞发生铁死亡。结论:1.Erianin抑制口腔癌细胞的增殖、迁移和Crizotinib抑制剂侵袭。2.Erianin可能通过抑制Nrf2/HO-1/GPX4通路诱导口腔癌细胞发生铁死亡从而发挥抗肿瘤作用。