叠氮基的光活性Pt(Ⅳ)前药trans,trans,trans-[Pt(N_3)_2(OH)_2(py)_2](1;py=吡啶)是该系列抗肿瘤前药中活性最好的,对耐药型肿瘤细胞也显示出较高活性。DNA是其潜在重要靶标,但其独特而复杂的光化学反应机制仍然不清。基于此,在前GW4869化学结构期本组研究基础之上,考虑到CpG序列在表观遗传生理中的重要作用,本论文拟应用电喷雾质谱(ESI-MS)对配合物1与CpG的光化学反应进行研究,并以CpG的甲基化(~(5m)CpG)和氧化(Cp~(ox)G)序列作为对比,通过表征光化学反应产物,研究其相互作用方式和氧化机理,探究表观遗传序列及相关修饰序列在该类四价铂前药活性中的作用,为叠氮基光活性四价铂前药的抗肿瘤机制提供化学信selleckchem CCRG 81045息。本论文的主要研究结果如下:(1)应用ESI-MS对比探究了配合物1与5′-CpG及5′-~(5m)CpG序列的光化学相互作用。质谱结果显示,配合物1能与5′-CpG/~(5m)CpG形成结构相同的单铂化、双铂化产物,且这些产物几乎不受甲基化的影响。进一步串联质谱分析显示两条序列与配合物1具有相似的结合位点,其中G-N7是主要铂化位点,C-N3/~(5m)C-N3和G-N1是铂化的次要位点,位点与铂结合的亲和顺序为:G-N7>C-N3/~(5m)C-N3>G-N1。C-N3/~(5m)C-N3位点和G-N7位点在形成铂配合物时出现明显竞争,在CpG和~(5m)CpG的结果中产生了独特的单铂化C/~(5m)C-Pt-G交联产物。但胞嘧啶的甲基化引发了不同的氧化模式,其邻位碱基G的氧化产物由CpG中的Gh和DGh转化为~(5m)CpG中的DIz和Iz。胞嘧啶自身则因甲基化导致配合物1诱导产生的氧化产物出现多种可能性而导致无法确定。(2)应用ESI-MS探究了配合物1与氧化CpG(5′-Cp~(ox)G)序列的光化学相互作用。质谱结果显示,氧化鸟嘌呤(~(ox)G)显著影响了配合物1的光化学反应机制,反应产物中的数量和丰度均较5′-CpG及5′-~(5m)CpG明显增多和增强,同porous medium时Cp~(ox)G的铂化产物几乎都发生了氧化,铂单元皆通过结合~(ox)G的氧化产物配位。~(ox)G主要被氧化为Gh,少量为DGh和Sp。另外,~(ox)G也显著影响了其邻位碱基C的氧化过程,导致碱基C产物单一且结构简单。还首次观察到了信号强度高的游离氧化产物Cp(Gh)和Cp(DGh),暗示了光活性Pt(Ⅳ)前药新的氧化机制。铂化产物中,除常见的[Pt(N_3)(py)_2]铂化产物,还发现了大量的[Pt(py)_2]铂化产物,并且[Pt(py)_2]形成了种类多样的交联产物,且皆伴随着碱基氧化的发生。通过对配合物1与5′-CpG/5′-~(5m)CpG/5′-Cp~(ox)G的对比研究,我们初步探究了甲基化和碱基氧化对CpG与配合物1的光化学反应的影响,获得了大量分子反应水平的作用机理,研究结果也证实了配合物1独特的底物/序列依赖性光化学反应机制,揭示了表观遗传序列CpG在该类光活性叠氮基四价铂抗肿瘤前药作用机理中的重要作用,也对进一步深入了解其抗肿瘤活性提供了重要化学信息。