核磷素1通过激活上皮-间质转化信号通路促进胆管癌细胞增殖、迁移和侵袭能力

目的 本研究期望探索核磷素(NPM1)基因对胆管癌细胞系Huh28和RBE的细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并探讨NPM1影响胆管癌的作用机制。方法 采用瞬时转染将包含NPM1基因的过表达重组Substandard medicine质粒转染胆管癌细胞系Huh28和RBE以过表达NPM1,采用小干扰RNA(siRNA)瞬时转染Huh28和RBE以敲低NPM1,并使用Western印迹实验检测其中NPM1蛋白的表达水平,以验证过表达和敲低NPM1的效果。采用CCK-8法和Transwell法分别检测细胞增殖和迁移能力;采用实时定量PCR(qRT-PCR)及Western印迹实验,检测上皮-间质转化(selleck HPLCEMT)过程中相关分子的mRNA及蛋白表达水平,包括Cwww.selleck.cn/products/cx-5461DH1、CDH2、CTNNB1和VIM;采用Log-rank检验比较NPM1高、低表达组胆管癌患者的生存期差异。结果 敲低NPM1可抑制Huh28和RBE细胞的增殖、迁移及侵袭能力,而过表达NPM1则促进Huh28和RBE细胞的增殖、迁移及侵袭能力。过表达NPM1促进Huh28和RBE细胞的EMT过程,而敲低NPM1则抑制Huh28和RBE细胞的EMT过程。NPM1在胆管癌组织中上调表达,NPM1的表达水平与胆管癌患者的生存期无相关性。结论 NPM1通过激活EMT信号通路促进胆管癌细胞系的增殖、迁移和侵袭能力,在胆管癌的发生发展中可能发挥癌基因的功能。