为探讨刚地弓形虫Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ型ROP16蛋白与NKRF互作对A549细胞凋亡、周期及增殖的影响。本研究通过构建过表达Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型ROP16蛋白和空载体对照组的慢病毒感染A549细胞，并通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western-blot对Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ型RCP-456773价格OP16的表达进行验证。利用免疫共沉淀与液相色谱-质谱联用技术获取同ROP16可能发生互作的蛋白，并利用Venn图、Score分值、Intensity分值筛选出评分较高的互作蛋白NKRF进行验证。设计并合成NKRF-siRNA，分别转染至过表达Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ型ROP16细胞，并利用CCK-8法检测各组细胞增殖情况，利用RT-qPCR和Western-blot分别对凋亡相关蛋白及细胞周期相关蛋白的mRNA和蛋白表达水平进行检测。此次试验成功构建了Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ型ROP16过表达A549稳转细胞株。利用IP-MS及CO-IP技术筛选并验证ROP16互作蛋白NKRF。筛选并构建NKRF沉默的过表达各型ROP16蛋白A549细胞。在过表达Ⅰ型、Ⅲ型ROP16的A549细胞中，促凋亡蛋白Bax表达水平上调，抑凋亡蛋白BCL-2、Caspase-9、p53表达水平明显下调；细胞周期抑制蛋白p21表达明显上调，而G1/S期相关蛋白CDK6和CyclinD1蛋白表达明显下调，提示Ⅰ、Ⅲ型ROP16蛋白会引起细胞凋亡和周期停滞，而在沉默NKRF组中，过表plant ecological epigenetics达Ⅰ型、Ⅲ型ROP16蛋白的A549细胞中Ⅰ型、Ⅲ型selleck激酶抑制剂ROP16蛋白的促凋亡作用减弱，细胞周期无明显停滞，与Ⅱ型ROP16蛋白之间没有统计学差异。综上所述得出弓形虫Ⅰ、Ⅲ型ROP16蛋白通过与NKRF互作，诱导A549细胞凋亡、细胞周期阻滞并抑制A549细胞增殖。