【背景】如何有效防治植物病害、实现农作物安全生产、保护农业生态环境，是农业可持续发展中亟待解决的问题之一。【目的】开展放线菌S5-1在植物病害生物防治中的应用潜能和代谢活性物质研究，可为植物病害的生物防治提供有效菌源，具有重要的实践意义。【方法】采用平板对峙法和发酵液制备带药平板法检测抑菌活性；通过形态和生PLX5622 MW理生化特征及16S rRNA基因序列分析确定分类地位；利用单因素试验和正交试验优化发酵工艺条件、测评发酵粗提物抑菌活性。【结果】菌株S5-1对10种植物病原菌具有较强的抑菌活性，S5-1被鉴定为毒三素链霉菌（Streptomyces toxytricini），在发酵培养基为TSB、初始pH值6.5、寻找更多250 mL三角瓶中装液量100 mL、接种量10%、28℃、发酵6 d的发酵液抑菌效价最高。发酵粗提物能分别有效抑制烟草疫霉和灰霉菌的菌丝生长、medically ill孢子萌发，以及对烟草叶片、圣女果果实的侵染，粗提物适宜pH值为6.0-7.0，超过37℃易失活，-20℃储存30 d、紫外光处理不超过7 h的条件下仍能保持稳定的抑菌活性。【结论】对菌株S5-1的开发利用将有助于植物病害的绿色防控，为拮抗放线菌的生防应用提供优良菌株资源的同时，为新型抑菌活性药物的研究和应用提供实验基础。