目的:1,3-β-葡聚糖是真菌细胞壁的主要组成成分,占真菌细胞壁的50%以上。因此利用1,3-β-葡聚糖诱导的肺部炎症模型来进行真菌暴露引起的过敏性肺炎的研究。自噬是一种高度保守的细胞内降解和能量循环机制,有助于维持细胞稳态。小檗碱是一种从中草药黄连等植物中分离出来的异喹啉生物selleckchem MC3碱,具有广泛的药理特性,可用于治疗多种疾病,如炎症等。同时,小檗碱作为一种自噬调节剂,可通过介导自噬影响疾病发生发展,从而达到缓解疾病的目的。综上,在以上假设的基础上,本研究利用1,3-β-葡聚糖建立肺部炎症模型,在此基础上给予小檗碱处理,探究小檗碱能否通过介导自噬进而对1,3-β-葡聚糖所诱导的肺部炎症发挥积极作用。方法:Riverscape genetics本研究选取健康雄性C57BL/6小鼠,按体重随机分为4组,通过腹腔注射戊巴比妥钠麻醉所有小鼠。实验组小鼠采用非暴露气管灌注50μl 1,3-β-葡聚糖悬浊液建立肺部炎症模型;同时,给与对照组小鼠50μl无菌生理盐水。建立模型1天后开始腹腔注射小檗碱悬浊液,小檗碱注射频次分别为一天一次和两天一次。并于模型建立3天和28天后进行杀鼠取材,收集肺组织和肺泡灌洗液。吉姆萨染色计数肺泡灌洗液炎性细胞数量。HE染色、Masson染色观察肺组织病理改变情况。Realtime PCR、ELISA检测肺组织和肺泡灌洗液炎性细胞因子表达和分泌水平。LDH试剂盒检测肺组织乳酸脱氢酶分泌水平。透射电镜检测肺组织自噬小体数量。Western Blot检测肺组织自噬相关蛋白表达水平。免疫荧光染色观察肺组织自噬相关蛋白表达以及定位情况。结果:1、1,3-β-葡聚糖可诱导小鼠肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中炎性细胞增多,小檗碱处理后减少BALF中炎性细胞数量。2、1,3-β-葡聚糖可诱导小鼠肺组织产生炎性相关病理改变,如炎性细胞积聚等,小檗碱处理后,小鼠肺组织炎性相关病理改变程度减轻。3、1,3-β-葡聚糖可诱导小鼠肺组织产生蓝色胶原,小檗碱处理后,小鼠肺组织胶原沉积水平减轻。4、1,3-β-葡聚糖可诱导小鼠肺组织中炎性细胞因子的基因表达水平增加,小檗碱处理后,小鼠肺组织炎性细胞因子基因表达水平降低。5selleck合成、1,3-β-葡聚糖可诱导小鼠肺组织中炎性细胞因子的分泌增加,小檗碱处理后,小鼠肺组织炎性细胞因子分泌减少。6、1,3-β-葡聚糖可诱导肺组织乳酸脱氢酶分泌增加,小檗碱处理后肺组织乳酸脱氢酶分泌减少。7、小檗碱可减少1,3-β-葡聚糖诱导的肺组织自噬小体的数量。8、小檗碱可显著降低1,3-β-葡聚糖诱导的自噬相关蛋白LC3、P62的表达水平,同时可增加LAMP1的表达水平。9、1,3-β-葡聚糖可引起自噬小体和溶酶体的融合障碍,小檗碱逆转了由1,3-β-葡聚糖引起的这一现象。结论:1、小檗碱能够抑制1,3-β-葡聚糖诱导的肺部炎症的进展;2、小檗碱能够通过介导自噬进而对1,3-β-葡聚糖所致肺部炎症发挥抑制作用。