基于HIF-1α/VEGFA信号通路探讨柴胡桂枝汤对三阴性乳腺癌细胞的影响

目的:基于缺氧selleck LBH589诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子A(VEGFA)信号通路探讨柴胡桂枝汤对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞的影响。方法:建立三阴性乳腺癌移植瘤模型,随机分为模型组,卡培他滨组(0.2mg·kg~(-1)),柴胡桂枝汤低、中、高剂量组(10.62,21.23,42.46g·kg~(-1)),每组10只,干预21d。给药结束后,酶联免疫吸附High Medication Regimen Complexity Index测定法(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肿瘤组织中HIF-1α mRNA表达情况;免疫组化法(IHC)检测肿瘤组织中HIF-1α、TNF-α、VEGFA的表达水平及CD34染色检测肿瘤内血管生成情况并计算微血管密度(MVD);蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肿瘤组织中HIF-1α、VEGFA、表皮生长因子受体(EGFR)蛋白的表达。结果:与模型组比较,卡培他滨组、柴胡桂枝汤低、中、高剂量组TNF-α水平显著降低(P<0.IDN-655601),HIF-1α mRNA显著降低(P<0.01),HIF-1α、TNF-α、VEGFA和CD34阳性细胞表达及MVD降低(P<0.05,P<0.01),HIF-1α、VEGFA、EGFR蛋白水平显著降低(P<0.01);与卡培他滨组比较,柴胡桂枝汤中、高剂量组TNF-α水平显著降低(P<0.01),各给药组HIF-1α mRNA显著降低(P<0.01),柴胡桂枝汤中、高剂量组HIF-1α、TNF-α和VEGFA阳性细胞表达显著降低(P<0.01),各给药组CD34表达及MVD显著降低(P<0.01),HIF-1α、VEGFA、EGFR蛋白水平均降低(P<0.05,P<0.01)。结论:柴胡桂枝汤可能通过调控HIF-1α/ VEGFA信号通路,抑制三阴性乳腺癌细胞血管生成,从而发挥抗肿瘤作用。