基于直接注射-多级质谱全扫描技术的人血红蛋白快速肽图分析

利用液相色谱–串联质谱法(LC-MS/MS)进行肽图分析,已经成为单克隆抗体等蛋白类药物质量控制的主要手段。然而,LC-MS/MS分析具有费时、费溶剂、成本高JNJ-42756493试剂等缺点。本研究以人血红蛋白(Human hemoglbioelectric signalingobin,Hb)为例,考察利用直接注射–多级质谱全扫描技术(DI-MS/MS~(ALL))进行肽图分析的可行性。Hb经胰蛋白酶水解后,多肽样品通过流动注射泵直接注入QTOF-MS离子源,采用MS/MS~(ALL)记录MS~(1)谱图以及每个单位质荷比窗口(1 Da)的MS~(2)谱图信息,所获得的质谱信息与Skyline软件给出的21个理论肽段质谱信息进行匹配,初步指认了20个肽段。常规的LC-MS/MS肽图分析检测出了所有21个理论肽段。DI-MK-1775溶解度MS/MS~(ALL)的MS~(1)图谱与LC-MS/MS的平均MS~(1)图谱相近,主要为各肽段带电荷数1~4的准分子离子信号,以双电荷为主,而MS~(2)图谱均以y~(+)离子为主。因此,DI-MS/MS~(ALL)分析蛋白肽图的能力与LC-MS/MS相似,并且具有分析通量高、溶剂用量少及成本低等优点,可作为快速分析肽图的有效工具,从而实现蛋白类药物的高通量分析。